2015高一期中考试题_百度文库
两大类热门资源免费畅读
续费一年阅读会员，立省24元！
2015高一期中考试题
上传于|0|0|暂无简介
阅读已结束，如果下载本文需要使用1下载券
想免费下载本文？
定制HR最喜欢的简历
下载文档到电脑，查找使用更方便
还剩2页未读，继续阅读
定制HR最喜欢的简历
你可能喜欢您所在位置： &
&nbsp&&nbsp&nbsp&&nbsp
[套卷]浙江省平阳中学学年高一12月月考化学试题.doc 7页
本文档一共被下载：
次 ,您可全文免费在线阅读后下载本文档。
下载提示
1.本站不保证该用户上传的文档完整性，不预览、不比对内容而直接下载产生的反悔问题本站不予受理。
2.该文档所得收入(下载+内容+预览三)归上传者、原创者。
3.登录后可充值，立即自动返金币，充值渠道很便利
需要金币：150 &&
[套卷]浙江省平阳中学学年高一12月月考化学试题.doc
你可能关注的文档：
··········
··········
浙江省平阳中学学年高一12月月考化学试题本试卷分为第I卷(选择题)和第II卷(非选择题)。考试时间90分，满分100分。所有试题的答案均填写在答题纸上，答案写在试卷上的无效相对原子质量：H：1C：12O：16Na：23Mg：24Al：27S：32Cl：35.5Br80K：39Ca：40Mn：55Ag：108Ba：137一、选择题（每小题只有一个正确答案，每题2分，共52分）1．下列广告用语在科学性上没有错误的是（）A、这种饮料中不含任何化学物质B、这种蒸馏水绝对纯净，其中不含任何微粒C、这种口服液含丰富的氮、磷、锌等微量元素D、没有水就没有生命2、下列关于电解质、非电解质的说法正确的是（）A．氯气溶于水得氯水，该溶液能导电，因此氯气是电解质B．CaCO3饱和溶液导电能力很弱，故CaCO3是弱电解质C．导电能力弱的溶液肯定是弱电解质的??液D．HF的水溶液中既有H+、F－，又有大量的HF分子，因此HF是弱电解质3、下列反应中，水既不是氧化剂，也不是还原剂，但反应是氧化还原反应的是（）A．Na2O＋H2O→2NaOHB．Cl2＋H2O→HCl＋HClOC．C＋H2O→CO＋H2D．2F2＋2H2O→4HF＋O24、下列物质的用途与其性质的对应关系错误的是（）　A．氯气用于自水消毒—次氯酸的强氧化性B．碘化银用于人工降雨—使空气中水蒸汽凝聚　C．氢氟酸腐蚀玻璃—强酸性D．溴化银用于照相术—光照分解5、现有三组溶液：①汽油和氯化钠溶液　②39%的乙醇溶液　③氯化钠和单质溴的水溶液，分离以上各混合液的正确方法依次是(　　)A．分液、蒸馏、萃取 B．萃取、蒸发、分液C．分液、萃取、蒸馏 D．蒸馏、萃取、分液6、印度洋海啸使受灾地区的饮用水受污染，一些地区出现人员腹泻。下列几个步骤能将河水转化为可饮用水，其合理顺序是（）①化学沉降(用明矾)②消毒杀菌③自然沉降④加热煮沸A．③②①④B．③①②④C．③①④②D．①③④②7、Cl和Cl－两种粒子中，不相同的是······················································（）①核内质子数②核外电子数③最外层电子数④核外电子层数A．①②B．②③C．③④D．②③④8．下列有关药品的保存说法错误的是()A．过氧化钠、漂白粉要密封保存B．钠保存在四氯化碳中C．液氯可以保存钢瓶中D．溴化银和碘化银保存在棕色瓶中9、下列离子方程式与所述事实相符且正确的是()A．漂白粉溶液在空气中失效：B．用浓盐酸与反应制取少量氯气：C、向溶液中通入过量制D．稀硫酸滴在铜片上：Cu＋2H＋→Cu2＋＋H2↑10、某无色溶液中滴入酚酞试液显红色，该溶液中可以大量共存的离子组是()()A．Mg2＋、Al3+、HCO3－、SO32－B．K＋、Ca2＋、MnO4－、Cl－C．Ba2＋、Na＋、AlO2－、NO3－D．NH4＋、Fe3＋、SO42－、SCN－11．下列与实验相关的叙述正确的是（）A．配制溶液时，若加水超过容量瓶刻度，应用胶头滴管将多余溶液吸出B.用激光笔验证淀粉溶液的丁达尔现象C.用稀硫酸洗涤并灼烧铂丝后，再进行焰色反应D.用洁净的玻璃棒蘸取碳酸钾溶液在酒精灯火焰上灼烧，可观察到明亮的紫色火焰12．将一小块钠投入盛有饱和NaOH溶液的烧杯中，不能观察的现象有···········（） A．溶液变浑浊
B．钠熔成小球四处游动 C．发出嘶嘶响声
D．水面上有大量白烟产生13、在H2SO3+2H2S→3H2O+3S反应中,被氧化与被还原元素的质量比为()A．11B．21C．.12D．3214、提纯含有少量硝酸钡杂质的硝酸钾溶液，可以使用的方法为（　　）A.加入过量碳酸钠溶液，过滤，除去沉淀，溶液中补加适量硝酸B.加入过量硫酸钾溶液，过滤，除去沉淀，溶液中补加适量硝酸C.加入过量硫酸钠溶液，过滤，除去沉淀，溶液中补加适量硝酸D.加入过量碳酸钾溶液，过滤，除去沉淀，溶液中补加适量硝酸15、两种金属混合粉末15g，与足量的盐酸反应恰好生成11.2L氢气（标准状况），符合上述情况的金属混合物为()A．Mg和AlB．Al和ZnC．Cu和ZnD．Mg和Ag16．现有一块金属钠露置于空气中一段时间，为检验该固体是否部分变质为碳酸钠，先将固体样品溶解于水得到溶液，并采取下列措施，其中可以实现实验目的的是 (　　)。 A．测所得溶液的pH B．取溶液少量，向其中滴入酚酞观察溶液是否变红 C．取溶液少量，向其中加入盐酸观察是否有气泡产生 D．取溶液少量，向其中加入CuSO4溶液，观察是否有沉淀产生17．下列叙述中正确的是 (　　)。A．向含有CaCO3沉淀的水中通入CO2至沉淀恰好溶解，再向溶液中加入NaHCO3饱和溶液又有CaCO3沉淀生成B．向Na2CO3溶液中加入含等物质的
正在加载中，请稍后...溶液的配制步骤
配制溶液的步骤
范文一：容量瓶配制溶液的全过程操作及注意事项一．用容量瓶配制溶液所用仪器：1、烧杯、容量瓶、玻璃棒、胶头滴管、托盘天平、分析天平、药匙（固体溶质使用）、移液管（液体溶质使用）2、容量瓶1.构造： 磨口、细颈、梨形平底2.特点： ① 容量瓶上注明温度和容积。② 容量瓶颈部有刻度线。3.使用范围：专门用来配制一定体积、一定物质的量浓度的溶液。4.注意事项：① 使用前先检漏。 ② 不可装热或冷的液体。③ 不能用来溶解固体物质或存放液体或进行化学反应。3、使用容量瓶六忌：一忌用容量瓶进行溶解（体积不准确），二忌直接往容量瓶倒液（会洒到外面）；三忌加水超过刻度线（浓度偏低）；四忌读数仰视或俯视（仰视浓度偏低，俯视浓度偏高）；五忌不洗涤玻璃棒和烧杯（浓度偏低）；六忌标准溶液存放于容量瓶（容量瓶是量器，不是容器）。二．用容量瓶配制溶液的步骤：全过程有计算，称量，溶解，冷却，转移，洗涤，定容，摇匀/装瓶八个步骤八字方针：计，量，溶，冷，转，洗，定，摇以0.1mol/LNaCO3溶液500ml为例说明溶液的配制过程1.计算：NaCO3物质的量＝0.1mol/L×0.5L＝0.05mol，由NaCO3摩尔质量106g/mol, 则NaCO3质量＝0.05mol×106g/mol=5.3g2.称量：用分析天平称量5.300g，注意托盘天平、分析天平的使用。3.溶解：在烧杯中用100ml蒸馏水使之完全溶解，并用玻璃棒搅拌（注意：应冷却，不可在容量瓶中溶解）4.转移，洗涤：把溶解好的溶液移入500ml容量瓶，，由于容量瓶瓶口较细，为避免溶液洒出，同时不要让溶液在刻度线上面沿瓶壁流下，用玻璃棒引流。为保证溶质尽可能全部转移到容量瓶中，应该用蒸馏水洗涤烧杯和玻璃棒二、三次，并将每次洗涤后的溶液都注入到容量瓶中。轻轻振荡容量瓶，使溶液充分混合。（用玻璃棒引流）5.定容：加水到接近刻度2-3厘米时，改用胶头滴管加蒸馏水到刻度，这个操作叫定容。。定容时要注意溶液凹液面的最低处和刻度线相切，眼睛视线与刻度线呈水平，不能俯视或仰视，否则都会造成误差6.摇匀：定容后的溶液浓度不均匀，要把容量瓶瓶塞塞紧，用食指顶住瓶塞，用另一只手的手指托住瓶底，把容量瓶倒转和摇动多次，使溶液混合均匀。这个操作叫做摇匀。7.贴上标签：把定容后的Na2CO3溶液摇匀。把配制好的溶液倒入试剂瓶中，盖上瓶塞，贴上标签。问题：在配制溶液的过程中哪些操作可能引起溶液浓度的误差？三．过程分析：B根据
，引起误差的原因就在“溶质nB”和“溶液体积V”是否准确，所以n￣V引起误差的可能有：一. 固体药品的称量与液体药品的量取是否准确。二. 溶于水放热或吸热的试剂，溶解后未冷却会引起溶液体积偏差，使所配溶液浓度出现误差。三. 溶液移入容量瓶时有少量溅出，所配溶液浓度偏低。四. 配制过程中，未用蒸馏水洗涤用过的烧杯和玻璃棒，所配制溶液浓度偏低。五. 定容时仰视读刻度，所得溶液浓度偏低，俯视则会偏高。所以配制的过程中要防止溶质的损失（如：称量、移液时引流、溶解后洗涤），防止溶液体积的偏大偏小（如：溶解后冷却、眼睛仰视、俯视）。四．主要注意事项：1. 容量瓶是刻度精密的玻璃仪器，不能用来溶解2. 溶解完溶质后溶液要放置冷却到常温再转移3. 溶解用烧杯和搅拌引流用玻璃棒都需要在转移后洗涤两三次4. 把小烧杯中的溶液往容量瓶中转移，由于容量瓶的瓶口较细，为避免溶液洒出，同时不要让溶液在刻度线上面沿瓶壁流下，用玻璃棒引流。5. 定容时要注意溶液凹液面的最低处和刻度线相切，眼睛视线与刻度线呈水平，不能俯视或仰视，否则都会造成误差，俯视使溶液体积偏小，使溶液浓度偏大。仰视使溶液体积偏大，使溶液浓度偏小。6. 定容一旦加入水过多，则配制过程失败，不能用吸管再将溶液从容量瓶中吸出到刻度。7. 摇匀后，发现液面低于刻线，不能再补加再补加蒸馏水，因为用胶头滴管加入蒸馏水定容到液面正好与刻线相切时，溶液体积恰好为容量瓶的标定容量。摇匀后，竖直容量瓶时会出现液面低于刻线，这是因为有极少量的液体沾在瓶塞或磨口处。所以摇匀以后不需要再补加蒸馏水，否则所配溶液浓度偏低。五．过程演示图： 用结晶水合物配制一定溶质的质量分数溶液时，要注意将结晶水的质量从溶质中减去，记下所需的蒸馏水的质量中。如果用液体溶质配制溶液，需先根据溶质的密度计算出一定质量的溶质的毫升数，再用量筒来量取溶质的体积，其他操作方法及顺序与固体溶质相同。
范文二：一．用容量瓶配制溶液所用仪器：1、烧杯、容量瓶、玻璃棒、胶头滴管、托盘天平、分析天平、药匙（固体溶质使用）、移液管（液体溶质使用）2、容量瓶1.构造： 磨口、细颈、梨形平底2.特点： ① 容量瓶上注明温度和容积。② 容量瓶颈部有刻度线。3.使用范围：专门用来配制一定体积、一定物质的量浓度的溶液。4.注意事项：① 使用前先检漏。 ② 不可装热或冷的液体。③ 不能用来溶解固体物质或存放液体或进行化学反应。3、使用容量瓶六忌：一忌用容量瓶进行溶解（体积不准确），二忌直接往容量瓶倒液（会洒到外面）；三忌加水超过刻度线（浓度偏低）；四忌读数仰视或俯视（仰视浓度偏低，俯视浓度偏高）；五忌不洗涤玻璃棒和烧杯（浓度偏低）；六忌标准溶液存放于容量瓶（容量瓶是量器，不是容器）。二．用容量瓶配制溶液的步骤：全过程有计算，称量，溶解，冷却，转移，洗涤，定容，摇匀/装瓶八个步骤 八字方针：计，量，溶，冷，转，洗，定，摇以0.1mol/LNaCO3溶液500ml为例说明溶液的配制过程1.计算：NaCO3物质的量＝0.1mol/L×0.5L＝0.05mol，由NaCO3摩尔质量106g/mol, 则NaCO3质量＝0.05mol×106g/mol=5.3g2.称量：用分析天平称量5.300g，注意托盘天平、分析天平的使用。3.溶解：在烧杯中用100ml蒸馏水使之完全溶解，并用玻璃棒搅拌（注意：应冷却，不可在容量瓶中溶解）4.转移，洗涤：把溶解好的溶液移入500ml容量瓶，，由于容量瓶瓶口较细，为避免溶液洒出，同时不要让溶液在刻度线上面沿瓶壁流下，用玻璃棒引流。为保证溶质尽可能全部转移到容量瓶中，应该用蒸馏水洗涤烧杯和玻璃棒二、三次，并将每次洗涤后的溶液都注入到容量瓶中。轻轻振荡容量瓶，使溶液充分混合。（用玻璃棒引流）5.定容：加水到接近刻度2-3厘米时，改用胶头滴管加蒸馏水到刻度，这个操作叫定容。。定容时要注意溶液凹液面的最低处和刻度线相切，眼睛视线与刻度线呈水平，不能俯视或仰视，否则都会造成误差6.摇匀：定容后的溶液浓度不均匀，要把容量瓶瓶塞塞紧，用食指顶住瓶塞，用另一只手的手指托住瓶底，把容量瓶倒转和摇动多次，使溶液混合均匀。这个操作叫做摇匀。7.贴上标签：把定容后的Na2CO3溶液摇匀。把配制好的溶液倒入试剂瓶中，盖上瓶塞，贴上标签。问题：在配制溶液的过程中哪些操作可能引起溶液浓度的误差？三．过程分析：根据
，引起误差的原因就在“溶质nB”和“溶液体积V”是否准确，所以引起误差的可能有：一. 固体药品的称量与液体药品的量取是否准确。二. 溶于水放热或吸热的试剂，溶解后未冷却会引起溶液体积偏差，使所配溶液浓度出现误差。 n V￣三. 溶液移入容量瓶时有少量溅出，所配溶液浓度偏低。四. 配制过程中，未用蒸馏水洗涤用过的烧杯和玻璃棒，所配制溶液浓度偏低。五. 定容时仰视读刻度，所得溶液浓度偏低，俯视则会偏高。所以配制的过程中要防止溶质的损失（如：称量、移液时引流、溶解后洗涤），防止溶液体积的偏大偏小（如：溶解后冷却、眼睛仰视、俯视）。四．主要注意事项：1.2.3.4. 容量瓶是刻度精密的玻璃仪器，不能用来溶解 溶解完溶质后溶液要放置冷却到常温再转移 溶解用烧杯和搅拌引流用玻璃棒都需要在转移后洗涤两三次 把小烧杯中的溶液往容量瓶中转移，由于容量瓶的瓶口较细，为避免溶液洒出，同时不要让溶液在刻度线上面沿瓶壁流下，用玻璃棒引流。5. 定容时要注意溶液凹液面的最低处和刻度线相切，眼睛视线与刻度线呈水平，不能俯视或仰视，否则都会造成误差，俯视使溶液体积偏小，使溶液浓度偏大。仰视使溶液体积偏大，使溶液浓度偏小。6. 定容一旦加入水过多，则配制过程失败，不能用吸管再将溶液从容量瓶中吸出到刻度。7. 摇匀后，发现液面低于刻线，不能再补加再补加蒸馏水，因为用胶头滴管加入蒸馏水定容到液面正好与刻线相切时，溶液体积恰好为容量瓶的标定容量。摇匀后，竖直容量瓶时会出现液面低于刻线，这是因为有极少量的液体沾在瓶塞或磨口处。所以摇匀以后不需要再补加蒸馏水，否则所配溶液浓度偏低。五．过程演示图： 用结晶水合物配制一定溶质的质量分数溶液时，要注意将结晶水的质量从溶质中减去，记下所需的蒸馏水的质量中。如果用液体溶质配制溶液，需先根据溶质的密度计算出一定质量的溶质的毫升数，再用量筒来量取溶质的体积，其他操作方法及顺序与固体溶质相同。
范文三：配制500ml,0.1mol/l碳酸钠溶液步骤及注意事项所需的仪器： 烧杯、容量瓶、玻璃棒、胶头滴管、分析天平、药匙、量筒步骤：第一步：计算：所需碳酸钠的质量=0.5*0.1*106=5.3克。第二步：称量：在天平上称量5.3克碳酸钠固体，并将它倒入小烧杯中。
第三步：溶解：在盛有碳酸钠固体的小烧杯中加入适量蒸馏水，用玻璃棒搅拌，使其溶解。第四步：移液：将溶液沿玻璃棒注入500ml容量瓶中。第五步：洗涤：用蒸馏水洗烧杯2—3次，并倒入容量瓶中。第六步：定容：倒水至刻度线1—2cm处改用胶头滴管滴到与凹液面平直。第七步：摇匀：盖好瓶塞，上下颠倒、摇匀。第八步：装瓶、贴签。误差分析：固体药品的称量与液体药品的量取是否准确；把溶液向容量瓶中转移，溶液洒了；未洗涤烧杯和玻璃棒；用待配液润洗了容量瓶；定容时水加多了或加少了；定容时未平视刻度线。仰视、俯视对溶液浓度有何影响？★俯视刻度线，实际加水量未到刻度线，使溶液的物质的量浓度增大；
★仰视刻度线，实际加水量超过刻度线，使溶液的物质的量浓度减小。三、容量瓶的使用六忌：★一忌用容量瓶进行溶解（体积不准确）★二忌直接往容量瓶倒液（洒到外面）★三忌加水超过刻度线（浓度偏低）★四忌读数仰视或俯视（仰视浓度偏低， 俯视浓度偏高）★五忌不洗涤玻璃棒和烧杯（浓度偏低）★六忌标准液存放于容量瓶（容量瓶是量器，不是容器）1 mol/L的氢氧化钠溶液250mL，完成下列步骤：①用天平称取氢氧化钠固体 克。②将称好的氢氧化钠固体放入烧杯中加少量蒸馏水将其溶解，待完全溶解后将溶液沿玻璃棒移入250mL的容量瓶中。③用少量蒸馏水冲洗2-3次，将冲洗液移入容量瓶中，在操作过程中不能损失点滴液体，否则会使溶液的浓度偏低。④向容量瓶内加水至刻度线1-2cm时，改用胶头滴管小心地加水至溶液凹液面与刻度线相切，若加水超过刻度线，会造成溶液浓度偏低应该重新配制。⑤最后盖好瓶盖，摇匀，将配好的溶液移入试剂瓶中贴好标签。 配制溶液步骤因配置的溶液不同而有所不同。现举两个例子：举例1：配置0.05mol/L，400mLNaOH溶液的步骤： 要准确配置氢氧化钠的浓度，则要用容量瓶定容的。实验室没有400毫升的容量瓶，则选用500毫升的容量瓶。1、计算需要氢氧化钠的质量0.5L*0.05mol/L*40.01=1.000克2、称1.000克氢氧化钠于烧杯中，加少量水溶解，然后倒入500毫升容量瓶里，分3次洗烧杯，将溶液全部倒入容量瓶里，最后用水稀释至刻度线。摇匀，即得到0.05mol/L的氢氧化钠溶液。 如果不需要很准确的话，可以直接用量筒量400毫升，称的时候只要称0.8克就可以了。 例二：配置1.5mol/l的稀硫酸200ml的步骤第一部计算：根据c1V1=c2V2,计算需要浓硫酸的体积第二步：量取，利用刻度吸管吸取需要浓硫酸的体积第三步：稀释，将浓硫酸转移到小烧杯中，加少量水稀释，第四步：转移，待溶液温度降低后，将烧杯中的硫酸转移到200ml容量瓶中
第五步，洗涤，洗涤小烧杯，和转移的时候用到的玻璃棒，至少三次，将洗涤的水一并转移到容量瓶中第六步：定容，加水定容到刻度线，在距离刻度线一厘米左右改用胶头滴管定容
第七步：摇匀，将溶液摇匀，如果液面下降也不可再加水定容第八步：将配得的溶液转移至试剂瓶中，贴好标签 实验室与配制质量分数为20%的稀硫酸500毫升,需质量分数为98%的浓硫酸和水各多少升？98%浓硫酸的密度为1.84克/毫升
20%硫酸的密度是1.14克/毫升c1=×98%/98=18.4mol/Lc2=×20%/98=2.33mol/L根据c1v1=c2v2需要浓硫酸体积v1=c2v2/c1=2.33×500/18.4=63.32毫升需要水的体积500×1.14-63.32/1.84/1=535.6毫升 市售盐酸密度1.19，质量分数36%-38%以37%计算：步骤：1、计算：假若需要2mol/L的硫酸100mL，则需37%浓硫酸16.6mL；计算过程如下：假设盐酸VmL: （0.1L*2mol/L*36.5g/mol）/37%=V/1.19V=16.59mL,考虑到量筒的精确度0.1mL，故取16.6mL即可。 2、量取：16.6mL浓硫酸；3、溶解，把16.6mL浓硫酸倒入已经加入蒸馏水的小烧杯中，用玻璃棒不断搅拌。3、转移：待溶液冷却后，将溶液沿玻璃棒倒入100毫升的容量瓶中。4、洗涤：再用少量蒸馏水洗涤烧杯和玻璃棒2-3次，并将全部洗液移入容量瓶中。5、定容：向容量瓶内加蒸馏水，当液面接近刻度线1-2厘米处时，改用滴管滴加蒸馏水到一面恰好与刻度线相切。6、摇匀：塞上瓶塞，反复颠倒容量瓶数次，使瓶内的溶液均匀，此时可以把溶液倒入到试剂瓶中贴标签保存。完成配制过程
范文四：一定质量分数溶液的配制步骤配制一定溶质的质量分数溶液时的所用溶质可以是固体物质，也可以是液体物质。如果是由固体溶质来配制，所需仪器有烧杯、量筒、托盘天平、玻璃棒。步骤是：①根据溶质的质量分数溶液的计算公式计算出配制一定质量溶液所需的固体溶质的用量及水的质量；②用托盘天平称取所需的固体的质量，将其倒入烧杯中；③根据水的密度近似为1g/cm3的性质，直接用量筒量取所需蒸馏水的量，注入盛有固体溶质的烧杯中；④用玻璃棒轻轻搅动使固体溶解；⑤将配得的溶液倒入试剂瓶中。贴上标签，备用。用结晶水合物配制一定溶质的质量分数溶液时，要注意将结晶水的质量从溶质中减去，记下所需的蒸馏水的质量中。如果用液体溶质配制溶液，需先根据溶质的密度计算出一定质量的溶质的毫升数，再用量筒来量取溶质的体积，其他操作方法及顺序与固体溶质相同。
范文五：一．用容量瓶配制溶液所用仪器：1、烧杯、容量瓶、玻璃棒、胶头滴管、托盘天平、分析天平、药匙（固体溶质使用）、移液管（液体溶质使用） 2、容量瓶2.1、.构造： 磨口、细颈、梨形平底2.2、特点： ① 容量瓶上注明温度和容积。② 容量瓶颈部有刻度线。2.3、使用范围：专门用来配制一定体积、一定物质的量浓度的溶液。2.4、注意事项：① 使用前先检漏。 ② 不可装热或冷的液体。③ 不能用来溶解固体物质或存放液体或进行化学反应。 3、使用容量瓶六忌：一忌用容量瓶进行溶解（体积不准确），二忌直接往容量瓶倒液（会洒到外面）；三忌加水超过刻度线（浓度偏低）；四忌读数仰视或俯视（仰视浓度偏低，俯视浓度偏高）；五忌不洗涤玻璃棒和烧杯（浓度偏低）；六忌标准溶液存放于容量瓶（容量瓶是量器，不是容器）。 二．用容量瓶配制溶液的步骤：全过程有计算，称量，溶解，冷却，转移，洗涤，定容，摇匀/装瓶八个步骤以0.1mol/LNaCO3溶液500ml为例说明溶液的配制过程 1.计算：NaCO3物质的量＝0.1mol/L×0.5L＝0.05mol，由NaCO3摩尔质量106g/mol, 则NaCO3质量＝0.05mol×106g/mol=5.3g 2.称量：用分析天平称量5.300g，注意托盘天平、分析天平的使用。 3.溶解：在烧杯中用100ml蒸馏水使之完全溶解，并用玻璃棒搅拌（注意：应冷却，不可在容量瓶中溶解）4.转移，洗涤：把溶解好的溶液移入500ml容量瓶，，由于容量瓶瓶口较细，为避免溶液洒出，同时不要让溶液在刻度线上面沿瓶壁流下，用玻璃棒引流。为保证溶质尽可能全部转移到容量瓶中，应该用蒸馏水洗涤烧杯和玻璃棒二、三次，并将每次洗涤后的溶液都注入到容量瓶中。轻轻振荡容量瓶，使溶液充分混合。（用玻璃棒引流） 5.定容：加水到接近刻度2-3厘米时，改用胶头滴管加蒸馏水到刻度，这个操作叫定容。。定容时要注意溶液凹液面的最低处和刻度线相切，眼睛视线与刻度线呈水平，不能俯视或仰视，否则都会造成误差6.摇匀：定容后的溶液浓度不均匀，要把容量瓶瓶塞塞紧，用食指顶住瓶塞，用另一只手的手指托住瓶底，把容量瓶倒转和摇动多次，使溶液混合均匀。这个操作叫做摇匀。 7.贴上标签：把定容后的Na2CO3溶液摇匀。把配制好的溶液倒入试剂瓶中，盖上瓶塞，贴上标签。问题：在配制溶液的过程中哪些操作可能引起溶液浓度的误差？ 三．过程分析：根据
，引起误差的原因就在“溶质nB”和“溶液体积V”是否准确，所以引起误差的可能有：一. 固体药品的称量与液体药品的量取是否准确。二. 溶于水放热或吸热的试剂，溶解后未冷却会引起溶液体积偏差，使所配溶液浓度出现误差。三. 溶液移入容量瓶时有少量溅出，所配溶液浓度偏低。四. 配制过程中，未用蒸馏水洗涤用过的烧杯和玻璃棒，所配制溶液浓度偏低。五. 定容时仰视读刻度，所得溶液浓度偏低，俯视则会偏高。所以配制的过程中要防止溶质的损失（如：称量、移液时引流、溶解后洗涤），防止溶液体积的偏大偏小（如：溶解后冷却、眼睛仰视、俯视）。n V￣四．主要注意事项：1.2.3.4. 容量瓶是刻度精密的玻璃仪器，不能用来溶解 溶解完溶质后溶液要放置冷却到常温再转移 溶解用烧杯和搅拌引流用玻璃棒都需要在转移后洗涤两三次 把小烧杯中的溶液往容量瓶中转移，由于容量瓶的瓶口较细，为避免溶液洒出，同时不要让溶液在刻度线上面沿瓶壁流下，用玻璃棒引流。5. 定容时要注意溶液凹液面的最低处和刻度线相切，眼睛视线与刻度线呈水平，不能俯视或仰视，否则都会造成误差，俯视使溶液体积偏小，使溶液浓度偏大。仰视使溶液体积偏大，使溶液浓度偏小。6. 定容一旦加入水过多，则配制过程失败，不能用吸管再将溶液从容量瓶中吸出到刻度。7. 摇匀后，发现液面低于刻线，不能再补加再补加蒸馏水，因为用胶头滴管加入蒸馏水定容到液面正好与刻线相切时，溶液体积恰好为容量瓶的标定容量。摇匀后，竖直容量瓶时会出现液面低于刻线，这是因为有极少量的液体沾在瓶塞或磨口处。所以摇匀以后不需要再补加蒸馏水，否则所配溶液浓度偏低。五．过程演示图： 用结晶水合物配制一定溶质的质量分数溶液时，要注意将结晶水的质量从溶质中减去，记下所需的蒸馏水的质量中。如果用液体溶质配制溶液，需先根据溶质的密度计算出一定质量的溶质的毫升数，再用量筒来量取溶质的体积，其他操作方法及顺序与固体溶质相同。
1．在容量瓶上无需有标记的是A．标线 B．温度 C．浓度 D．容量 2．某实验需要0.2 mol NaOH固体，用托盘天平称取固体时，天平读数（游码及砝码）将A．等于8.0g
B．等于8.00g C．大于8.0g D．等于0.2g －3．0.5L 1mol/L的FeCl3溶液与0.2L 1 mol/L的KCl溶液中，Cl浓度比为A．15∶2 B．1∶1 C．3∶1 D．1∶3 －34．相对分子质量为M的某物质在室温下的溶解度为S g，此时测得饱和溶液的密度为ρg·cm，则该饱和溶液的物质的量浓度是A．Mmol?L?1
10S?10S?mol?L?1
MB．1000S?mol?L?1 M(100?S)M(100?S)mol?L?1 1000S?3 C．D．5．将标准状况下的a L HCl（气）溶于1000g水中，得到的盐酸密度为b g/cm，则该盐酸的物质的量浓度是 amol/L
22.4abmol/L C．aA．abmol/L abmol/L D．aB．6．NA为阿伏加德罗常数，下列关于0.2mol/L K2SO4溶液的正确说法是+2－ A．500mL溶液中所含K、SO4总数为0.3NA+ B．500mL溶液中含有0.1NA个K离子 C．1L溶液中K离子浓度是0.2mol/L2－ D．2L溶液中SO4离子浓度是0.4mol/L 7．取100mL 0.3mol/L和300mL 0.25mol/L的硫酸注入500mL容量瓶中，加水稀释至刻度线，该混合溶液+中H的物质的量浓度是A．0.21mol/L B．0.42mol/L C．0.56mol/L D．0.26mol/L 3+2－8．某Al2(SO4)3溶液V mL中含a g Al，取出V/4 mL溶液稀释成4V mL后，SO4的物质的量浓度为－1－1 A．125/54V mol·L B．125a/36V mol·L－1－1
C．125a/18V mol·L D．125a/V mol·L 9．将2.4mol某金属投入1.8L 2mol/L的某酸溶液中，恰好完全反应，并产生7.2g氢气，则该金属和酸分别是A．二价金属，二元酸 B．二价金属，三元酸C．三价金属，二元酸 D．一价金属，一元酸 10．配制一定体积、一定物质的量浓度的溶液，实验结果产生偏低影响的是A．容量瓶中原有少量蒸馏水 B．溶解所用的烧杯未洗涤C．定容时仰视观察液面 D．定容时俯视观察液面 3+2－11．有K2SO4和Al2(SO4)3的混合溶液，已知其中Al的物质的量浓度为0.4mol/L，SO4的物质的量浓度为+0.7mol/L，则此溶液中K的物质的量浓度为A．0.1mol/L B．0.15mol/L C．0.2mol/L D．0.25mol/L 12．在100g浓度为18mol/L、密度为ρ的浓硫酸中加入一定量的水稀释成9mol/L的硫酸，则加入水的体积A．小于100mL3+B．等于100mL C．大于100mL D．等于100?mL 13．用密度为1.32g/cm的硫酸溶液逐滴滴入到BaCl2溶液中，直到沉淀恰好完全为止。已知所生成的溶液的质量等于原BaCl2溶液的质量，则H2SO4溶液的浓度为A．21.9% B．42.1% C．13.5mol/L D．5.67mol/L 14．质量为8.02g的铁片，放进1.0L 0.90mol/L的CuSO4溶液中，过一段时间取出洗净、干燥、称量，质量2+为8.66g。若认为溶液的体积没有变化，则Cu的浓度变为A．0.89mol/L B．0.82mol/L C．0.78mol/L D．0.6mol/L 15．将4gNaOH溶解在10mL水中，稀至1L后取出10mL，其物质的量浓度是A. 1mol/L
B. 0.1mol/L
C. 0.01mol/L
D. 10mol/L 16．用硫酸铜晶体配制500mL0.1mol/L的硫酸铜溶液，需要硫酸铜晶体的质量为A. 25g
D. 37.5g 17．实验室常用98%(ρ=1.84g/mL)的浓H2SO4配制1:4的稀H2SO4，此稀H2SO4的密度为1.23g/mL，其物质的量浓度为A. 4.6mol/L
B. 5.7mol/L
C. 3.88mol/L
D. 18.4mol/L+18．由Na2SO4和NaNO3组成的混合物88g溶于水配制成1L溶液，此溶液中Na的浓度为1.2mol/L，则原混合物中NaNO3的质量为A. 17g
范文六：ELISA试剂及溶液配制①包被液：0.05mol/L碳酸盐缓冲液(pH9.6)0.75g碳酸钠,1.46g碳酸氢钠,加去离子水定容至500ml。②0.02mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.4)0.2g磷酸二氢钾，2.90g磷酸氢二钠，8g氯化钠，加去离子水定容到1000ml。 ③抗体稀释液：0.02mol/L PBS(pH7.4)+0.2%BSA0.2gBSA加配好的0.02mol/L磷酸盐缓冲液溶解定量至100g。④封闭液：0.05mol/L碳酸盐缓冲液(pH9.6)+2.0%BSA2.0gBSA加配好的0.05mol/L碳酸盐缓冲液溶解定量至100g。⑤洗涤液：0.02mol/L PBS(pH7.4)+0.05%Tween-20将50ulTween-20溶入100ml0.02mol/L磷酸盐缓冲液中，震荡混匀。 ⑥显色液：TMB-过氧化氢尿素溶液A液(3，3’，5，5’-四甲基联苯胺，TMB):称取TMB20mg溶于10ml无水乙醇中，完全溶解后，加双蒸水至100ml。B液(0.1mol/L柠檬酸-0.2mol/L磷酸氢二钠缓冲液，pH5.0-5.4):称取Na2HPO4·12H2O14.34g，柠檬酸1.87g溶于180ml双蒸水，加0.75%过氧化氢尿素1.28ml，定容至200ml，调pH至5.0-5.4。将A液和B液按1：l混合后即成TMB-过氧化氢尿素应用液。⑦终止液：2mol/L H2SO4溶液10ml98%浓硫酸加入60ml双蒸水中，定容至100ml，室温保存。⑧酶标二抗：HRP标记的羊抗兔 IgG，应用时用抗体稀释液稀释3000倍。2.2.6 抗血清的分离采集血液后，去掉针头，缓慢注入已经灭菌的三角烧瓶中，待凝固后用灭菌滴管将血液沿边缘剥离，室温放置1小时，再放入4℃冰箱过夜(不能冰冻，否则产生溶血)，使血清充分析出。第二天取出后以4℃3000r/min离心30min，取上清，分装后-20℃保存备用。2.2.7 间接ELISA法检测家兔抗血清效价(1)抗原包被用包被液(0.05mol/L的碳酸盐缓冲液，pH9.6)把抗原稀释为0.01mg/ml，将稀释好的抗原液于每个酶标板孔中加入100μl。把酶标板置入湿盒内，于4℃包被过夜。(2)洗板弃去包被液，用洗涤液加满所有酶标孔，用纱布和卫生纸包住扣干。1次，末次将水扣干。(3)封闭在酶联板上每孔加入250μl封闭液(pH9.6， 0.05mol/L碳酸盐缓冲液含2.0%BSA)，将酶联板置于湿盒内，4℃孵育过夜。也可37℃孵育2h。(4)弃去封闭液，洗涤1次同上。(5)加一抗(家兔抗血清)将免疫小鼠抗血清10μl 加到990μl 的抗体稀释液中制成1:100的抗血清。(于1.5ml的EP管中操作)。给酶标板上A行的1号孔加100μl的1:100的血清。给酶标板上A行的2到12孔各加入抗体稀释液100 μl，然后给A组的第二孔加入100μl 1:100的抗血清，吹吸十次后吸取100μl的血清加到第三孔，再吹吸十次取100μl加到第四孔，依次加到第12孔，最后从第十二孔中吸出100μl舍弃。这样每孔均为100μl，经过11次二倍稀释，血清稀释度为1:204800。B、C行同上操作。给D行的前两个孔只加入100μl的抗体稀释液做为空白对照，3-4孔加入100μl稀释100倍的阴性血，5-6孔不加抗原，只用封闭液封闭，每孔加入100μl稀释100倍的抗血清作对照。加完后将酶连板放在湿盒内37℃孵育1h。(6)洗涤同上。(7)加酶标二抗各孔加入稀释倍数为1:3000的酶标二抗（羊抗兔）100μl，37℃湿盒内孵育1h。(8)洗涤同上(9)显色每孔各加A，B液50μl后将酶连板放入湿盒内避光3min左右，当阴性对照孔显蓝绿色时终止。终止时每孔加入50μl的2mol/L浓硫酸[32-34]。(10)检测终止后迅速用酶标仪测定酶连板各孔A405和A450的值。
范文七：7% PAGE变性胶的配制1、UREA
403.2g2、Formamide
382g3、40%丙烯酰胺
210ml4、5 x TBE
240ml取 500ml锥形瓶（放一磁转子），依次加入，磁转子搅拌，过滤，4℃。 10%过硫酸铵的配制过硫酸铵1g加水1ml 银染液的配制1、10% 乙酸
50 ml HAC+400ml ddH2O2、1.5%HNO3
500 ml 的浓HNO3加入500 ml水3、0.2%AgNO3
500 ml （1 g AgNO3加入500 ml ddH2O）4、3%Na2CO3500 ml0.075%甲醛（375 ml PAGE 加样缓冲液
Binding （25 ml）98%去离子甲酰胺
ddH2O10 nM EDTA（PH8.0）
20 ml 无水乙醇0.025% 溴酚兰
0.5 ml 冰乙酸70 μl Binding FISH 所用溶液的配制70% FA
35 ml20 x SSC
4 ml →终浓度为 2 x SSC
10 ml 着丝粒探针变性所用的60%FA60% FA
30ml20 x SSC
5ml →终浓度为 2 x SSCddH2O
15ml 20 x SSC
1000 mlNacl
175.3 g柠檬酸钠
88.2 gddH2O
800 ml10 M NaOH调至PH=7.0 加水1000 ml 10 x PBS
500 mlNacl
1 gNa2HPO4-12H2O
Na2HPO4-7H2O
10.85 gKH2PO4
1 g加水到500 ml 1 x Pepsin
x ： 0.01 N Hcl =0.5 ml ：1 ml75% 乙醇 （分装）
75μl （100% 乙醇）+ 25μl（ddH2O）25 ml
16 75% 乙醇 50 ml
ddH2O150 ml
100% 乙醇 0.075 mol / l
Kcl母液 ： Kcl分子量 ：74.55
M =74.55 mol /l100 ml H2O +11.2 g kcl→ 20 x工作液：10 ml母液 + 190 ml ddH2O 一次配制0.075mol/l
1.11825g （74.55g/mol）1.11825 / 74.55 = 0.015 molddH2O
200 ml 1 % 多聚甲醛多聚甲醛
100 ml（注：多聚甲醛难溶，要放在50-60℃的水浴锅里溶解）4 x SSC /0.05% Tween20配制 . 一1 M Tris-HCl (pH7.4，7.6，8.0)组份浓度 1 M Tris-HCl配制量 1L配制方法 1.称量121.1 g Tris置于l L烧杯中。2.加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。3.按下表加入浓HCl量调节所需要的pH值。pH值
约70 ml7.6
约60 ml8.0
约42ml4.将溶液定容至1 L。5.高温高压灭菌后，室温保存。注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高l℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。二 1 0×TE Buffer (pH7.4, 7.6，8.0)组份浓度 100 mM Tris-HCl，10 mM EDTA配制量 1 L配制方法 1.量取下列溶液，置于l L烧杯中。1 M Tris-HCl Buffer(pH7.4，7.6，8.0)
100 ml500 mM EDTA(pH8.0)
20 ml2.向烧杯中加入约800 ml的去离子水，均匀混合。3.将溶液定容至1 L后，高温高压灭菌。4.室温保存。三3 M醋酸钠(pH5.2)组份浓度 3 M醋酸钠配制量 100 ml配制方法 1.称量40.8 g NaOAco3H2O置于100~200 ml烧杯中，加入约40 ml的去离子水搅拌溶解。2.加入冰醋酸调节pH值至5.2。3.加去离子水将溶液定容至100 ml。4.高温高压灭菌后，室温保存。
1×TE缓冲液(10mmol/L, pH7.5. Tris-HCl, 1mmol/L EDTA)称取0.12g Tris，加适量蒸馏水溶解，用1mol/L盐酸调至pH8.0并定容至100mL，加入0.037gEDTA·Na2·2H2O，高压灭菌20min. 2 M醋酸钠(pH5.2)组份浓度 3 M醋酸钠配制量 100 ml配制方法 1.称量27.2 g NaOAco3H2O置于100~200 ml烧杯中，加入约40 ml的去离子水搅拌溶解。2.加入冰醋酸调节pH值至5.2。3.加去离子水将溶液定容至100 ml。4.高温高压灭菌后，室温保存。
范文八：溶液的配制1、0.01mol/L硝酸银溶液的配制：称取1.6987g固体硝酸银，溶于蒸馏水中，稀释至1000ml，摇匀，存于棕色瓶中。2、5%铬酸钾指示剂溶液的配制：称取5g铬酸钾固体溶于蒸馏水中稀释至100ml，摇匀。 3、0.01mol/L氯化钠标准溶液的配制：称取0.5844g氯化钠固体溶于新煮沸并冷却的蒸馏水中，并稀释至100ml，摇匀，存于棕色瓶中。4、硝酸银溶液的标定：用移液管移取25.00ml NaCl基准溶液（0.01mol/L）于250ml锥形瓶中，加入25ml水和1 ml K2CrO4指示剂（5g/100ml），在不断摇动下用AgNO3标准滴定溶液滴定，直至溶液呈砖红色即为终点。
AgNO3标准滴定溶液的浓度按下式计算：
0.01?25.00C=
范文九：溶液的配制 一、教学目标1．知识与技：使学生掌握配制物质的量浓度的方法。2．过程与方法：通过活动与探究，掌握物质的量浓度的计算及配制，并通过练习加以巩固 3．情感态度与价值观：培养观察及思考能力，激发学习化学的兴趣。二、药品仪器：氯化钠、量筒、容量瓶、胶头滴管、玻璃棒、烧杯 三、实验步骤1.计算：n=m/M , c=n/v ,p=m/v2.称量或量取：固体试剂用分析天平或电子天平称量，液体试剂用量筒。 使用容量瓶需检漏。3.溶解：将称好的固体放入烧杯，用适量（20~30mL）蒸馏水溶解。4.冷却：待溶液冷却后移入容量瓶。5.转移（移液）：由于容量瓶的颈较细，为了避免液体洒在外面，用玻璃棒引流。6.洗涤：用少量蒸馏水洗涤烧杯内壁2~3次，洗涤液全部转入到容量瓶中。7.初混：轻轻摇动容量瓶，使溶液混合均匀。8.定容：向容量瓶中加入蒸馏水，液面离容量瓶颈刻度线下1~2cm时，改用胶头滴管滴加蒸馏水至液面与刻度线相切。9.摇匀，盖好瓶塞反复上下颠倒，摇匀，装入试剂瓶中，贴好标签。10. 实验完毕，清洗仪器，收拾桌面，废液处理。注意：容量瓶要检漏、配的溶液要冷却、转液时要水洗、读数要与刻线水平等。四、小结及反思1、让学生知道配制物质的量浓度的方法。2、容量瓶要检漏、配的溶液要冷却、转液时要水洗、读数要与刻线水平等。3、通过实验培养学生的观察能力和实验探究获取化学知识的能力。
范文十：附录：常用试剂配制及应用 一、常用缓冲液、试剂的配制碳酸盐缓冲液(Carbonate-Bicarbonate Buffer)由于碳酸盐pH值偏碱，因此，常用于pH>9的缓冲液配制（附表1）。附表1. 0.2 mol/L碳酸盐缓冲液（pH9.2～10.7）磷酸缓冲液(Phosphate Buffers，PB)磷酸盐是使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个pKa 值，所以用它们配制的缓冲液，pH 范围最宽。NaH2PO4：pKa1＝2.12，pKa2＝7.21； Na2HPO4：pKa1＝7.21，pKa2＝12.32。另外，磷酸盐还有钾盐分子形式，一般来说，低温时钠盐难溶，钾盐易溶，因此，配制细胞培养用试剂时常常添加钾盐试剂，但若配制十二烷基硫酸钠（SDS）-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时，只能用钠盐而不能用钾盐，因为SDS会与磷酸钾生成难溶的十二烷基硫酸钾。磷酸缓冲液的优点为：①可配制成不同离子强度的缓冲液；②适用pH缓冲范围较宽；③受温度影响缓冲液pH值变化较小；④离子强度对缓冲液pH影响较小，如0.1mol/L缓冲液稀释10倍其pH变化小于0.1。磷酸缓冲液的缺点是：①磷酸盐易与钙离子（Ca2+）、镁离子（Mg2+）及重金属离子结合生成不溶的沉淀物；②可能干扰某些生物化学反应过程，如对某些酶的催化活性具有一定程度的抑制作用。NaH2PO4的pH值偏酸性，可用作pH10的缓冲液。而pH＝6～8的中性缓冲液是更常用的缓冲液，需要NaH2PO4与Na2HPO4两种磷酸盐混合配制（附表2）。附表2. 0.2 mol/L磷酸盐缓冲液（pH5.7～8.2）磷酸盐缓冲溶液（Phosphate-buffered saline, PBS)磷酸盐缓冲液是在磷酸缓冲液基础上添加NaCl以维持溶液的渗透压，因此，PBS适用于做细胞缓冲液，常用PBS配制如下。NaCl
0.2g Na2HPO4
1.44g KH2PO4
0.24g在800ml蒸馏水中溶解，用HCl调节溶液的pH值至7.2～7.4加水定容至1L，15psi（1.05kg/cm2）高压灭菌20min，室温保存备用。 Tris缓冲液（Tris-HCl Buffer, TB）Tris的pH值偏于碱性，因此，通过添加HCl调节pH至所需值，Tris-HCl缓冲液的离子强度（mol/L）是专指Tris的浓度，如某一特定pH的0.05 mol/L Tris缓冲液的配制是将50ml 0.1 mol/L Tris碱溶液与附表3所示相应体积（ml）的0.1 mol/L HCl混合，加水至将体积100ml，即为0.05 mol/L Tris缓冲液。另外，按附表3制备的缓冲液，由于试剂来源的不同，缓冲液pH可能与所需略有差异，此时可通过稍许减少或增加HCl用量，精细调节pH至所需值。附表4. 0.05 mol/L Tris缓冲液Tris盐缓冲液（TBS）：Tris盐缓冲液是在Tris缓冲液基础上添加NaCl以维持溶液的渗透压，因此，TBS也适用于做细胞缓冲液，常用TBS配制如下。8g NaCl、0.2g KCl以及3g Tris溶解于800ml蒸馏水中，加入0.015g酚红并用HCl调pH至7.4用蒸馏水定容至1L，分装后在15psi（1.05kg/cm2）高压灭菌20min，室温保存。现在常用Tris盐缓冲液通常不加pH指示剂，而且该溶液如果不用于细胞培养，通常不加KCl及酚红。Hank’s液 (Hank’s Balanced Salt Solution)Hank’s液是一种平衡盐溶液，主要用于细胞培养取材时组织块的漂洗、细胞的漂洗等。贮存液A液：(I)NaCl
MgSO4·7H2O
1g MgCl2·6H2O
1g 用双蒸馏水定容至450ml。(II)CaCl2
1.4g (或CaCl2·2H2O 1.85g) 用双蒸馏水定容至50ml。 将I和II液混合，即成A液。 贮存液B液：Na2HPO4·12H2O
1.52g， KH2PO4
10.0g,酚红应先置研钵内磨细，然后按配方顺序一一溶解，用双蒸馏水定容至500ml。(3)应用液：A、B储存液分别经112.6℃湿热灭菌20min，取A和B液各25ml，加无菌双蒸馏水至450ml，使用前用无菌的3.5%或5.6% NaHCO3调至所需pH。注意：药品必须全部用A.R试剂，并按配方顺序加入，用适量双蒸水溶解，待前一种药品完全溶解后再加入后一种药品，最后补足水到总量。无Ca2+、Mg2+ Hank’s液（Hank’s Solution without calcium, magnesium sulfate）NaCl
Na2HPO4·12H2O
1.52g， KH2PO4
0.6g, 葡萄糖
10g,用双蒸馏水溶解后，加入0.4％酚红溶液50ml，再加入双蒸水至1000ml，112.6℃湿热灭菌20min，4℃ 冰箱保存。临用前将原液用无菌双蒸水作1：10倍稀释，用无菌的3.5%或5.6% NaHCO3调至所需pH。 pH7.2柠檬酸盐缓冲液(Citrate Buffer)柠檬酸
0.327g 柠檬酸钠
2.63g 磷酸氢钠
0.222 葡萄糖
0.00255mg 蒸馏水加至100ml。pH3.3枸橼酸-磷酸盐缓冲液（Citric acid- Phosphate Buffer)0.131mol/L citrate acid，0.066mol/L Na2HPO4，等量混合，调节pH至3.3。 0.5 mol/L EDTA, pH 8.0EDTA·2H2O
186.1 g NaOH
～20 g将EDTA·2H2O加入800ml水中，在磁力搅拌器上剧烈搅拌。用NaOH调节pH至8.0，EDTA直到接近pH 8.0才完全溶解，定容至1L。分装后高压蒸汽灭菌。 0.4%酚红溶液取酚红0.4g置于研钵中逐滴加入1mol/L NaOH溶液11.28ml，边研磨边使酚红转变为钠盐溶于水中，加双蒸水至100ml，过滤后，4℃ 冰箱保存。 醋酸钾（Potassium Acetate）在60ml 5mol/L醋酸钾溶液中，加入11.5ml冰醋酸和28.5ml水。该溶液用于碱性裂解。3mol/L 醋酸钠（Sodium Acetate），pH5.2和pH7.0在800ml水中溶解408.1g三水醋酸钠，用冰乙酸调pH至5.2或用稀释乙酸调pH至7.0，加双蒸水至1L。分装后高压灭菌。 柠檬酸钠缓冲液(Sodium Citrate Buffer)
95ml先用100ml去离子水溶解柠檬酸钠，然后加入HCl和无水乙醇，再补充去离子水至总量200ml。饱合硫酸铵溶液(Saturated Ammonium Sulfate Solution)取500ml双蒸馏水，加入约400克硫酸铵，水浴加热至70℃，磁力搅拌器充分搅拌，直到加入的硫酸铵不再溶解，以氨水（也可用NaOH）调pH7.2，室温保存。二、酶免疫检测常用试剂配制包被液(Coating Buffer)（pH9.5碳酸盐缓冲液）Na2CO3·10H2O
溶于双蒸水至1000ml。封闭液(Confining liquid)（5%脱脂乳-PBS溶液，pH7.4）脱脂乳
50g加0.02mol/L pH7.4磷酸盐缓冲液（PBS）至1000ml溶解。 洗液(washing liquid)
磷酸二氢钾
磷酸氢二钠（12H2O） 2.9g
0.5ml加去离子水至1000ml溶解即可。 终止液(stop buffer)（2mol/L H2SO4）： 21.7ml H2SO4 加去离子水至200ml。缓冲甘油(glycerine buffer)
PB（pH8.0）
1份将9份甘油与1份PB合并，充分混匀。0.5%H2O2-甲醇液(Hydrogen Peroxide-Methanol Solution)（总体积120ml）
3%H2O220ml甲醇
100mlDAB-H2O2底物缓冲液(DAB- H2O2 Substrate Buffer)取6mg二氨基联苯胺(3,3’-Diaminobenzidine Tetrahydrochloride DAB)溶解于10ml 0.05mol Tris-HCl pH7.6。使用前取0.3%H2O2 0.1ml加入到DAB溶液中(H2O2的终浓度为0.003%)。如有沉淀生成，则用滤纸过滤。5-溴-4-氯-3吲哚磷酸/四唑氮蓝底物显色液（BCIP/NBT Substrate Solution）贮存液配制：NBT：在10ml 70%的乙醇中溶解0.5g NBT。BCIP：在10ml 100%二甲基甲酰胺中溶解0.5g BCIP。 贮存液4℃保存，可稳定一年。 底物显色液：取66μl NBT贮液与33μl BCIP加入到10ml碱性磷酸酶缓冲液中，充分混匀，底物显色液应在用前1小时内配制。三、细胞相关试剂配制L-谷氨酰胺（L-G）溶液（L-glutamin Solution）（0.2 mol/L）称2.9 g L-谷氨酰胺（分子量为146.15）用去离子水溶解至100 ml，过滤除菌，分装小瓶，4～5 ml/瓶，-20℃冻存。100x青-链霉素（双抗）溶液（P/S Penicillin/Streptomycin Solution）取青霉素G（钠盐）100万单位和链霉素（硫酸盐）1 g，溶于100 ml去离子水中，分装小瓶，4～5 ml/瓶，-20℃冻存。 7.5% NaHCO3溶液（NaHCO3 Solution）称分析纯NaHCO3 7.5 g，用去离子水溶解至l00ml，过滤除菌，分装小瓶，4～5 m1/瓶，盖紧瓶塞，4℃保存。 HEPES溶液（HEPES Solution）（1mol/L）称23.83 g HEPES（N-2-Hydroxyethylpiperazine-N'-2-ethanesulfonic acid，N-2-羟乙基呱嗪-N'-2-乙基磺酸，分子量为238.3），用去离子水溶解至100 ml，过滤除菌，分装小瓶，4～5 m1/瓶，4℃保存。氨基喋呤（A）贮存液（Aminopterin Stocking Solution）（100×, 4×10-5 mol/L）称1.76 mg氨基喋呤（Aminopterin, 分子量440.4），溶于90 m1去离子水中，滴加l mol/L NaOH 0.5 m1，并不断搅动，待氨基喋呤完全溶解后，加1 mol/L的HCl 0.5m1中和，再补加去离子水至100 m1。过滤除菌，分装小瓶，2 ml/瓶，-20℃冻存。次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷贮存液（HT Stocking Solution）（100×,H: 10-2 mol/L; T: 1.6×10-3 mol/L）称取136.l mg次黄嘌呤（Hypoxanthine，分子量136.1）和38.8 mg胸腺嘧啶核苷（Thymidine，分子量242.2），加去离子水至l00 ml，置45～50℃水浴中使完全溶解，过滤除菌，分装小瓶，2 m1/瓶，-20℃冻存。用前可置37℃加温助溶。 HAT培养液培养液98 ml，A贮存液1 m1，HT贮存液l ml。 秋水仙素溶液（colchicine Solution）称取10 mg秋水仙素，溶于100 m1生理盐水中（即为100 μg/ml），过滤除菌后，分装小瓶，－20℃冻存备用。Alsever’s血细胞保存液（Alsever’s Solution）葡萄糖
0.42g， 蒸馏水
l00ml。以上成分混匀后，微加温使其溶解后，用柠檬酸调节pH 6.1，分装于三角瓶中(30～50ml/瓶), 113℃湿热灭菌15min，4℃保存备用。 细胞冻存液(Freezing Medium)50%小牛血清；40%不完全培养液；10%DMSO（二甲基亚砜）。 0.025%胰蛋白酶－0.2%EDTA细胞消化液(Trypsin-EDTA Solution)A: 2.5%胰蛋白酶:胰蛋白酶
磷酸缓冲盐溶液
过滤除菌保存。B: 0.2%二乙胺四乙酸二钠（EDTA）
0.2g双蒸馏水
高压灭菌保存。取A液1份，加B液99份，混匀，分装-20℃保存。 0.83% NH4CI溶液(Ammonium Chloride Solution)NH4CI
0.83g KHCO3
0.1g EDTA·2Na
蒸馏水加至100ml。Tris-NH4Cl溶液(Tris-Ammonium Chloride Solution)NH4Cl 3.735g/450ml双蒸水+Tris 1.3g/50ml双蒸水（pH 7.65）。 细胞裂解液（Cell Lysis Solution）20mmol/L HEPES(pH 7.5) 150mmol/L NaCl 1 mmol/L EDTA 10?g/ml leupeptin 1mmol/L PMSF 1% Triton X-1000.5% deoxicholate (sodium salt) 0.1% SDS组织匀浆缓冲液（Histolysis Buffer） 50mmol/L
Tris-HCl (pH7.5) 150mmol/L NaCl
1% NP401mmol/L
phenylmethylsulfonyl fluoride
leupeptin 1?g/ml
aprotinin细胞核裂解液(Nuclear Lysis Buffer)10mmol/L Tris-HCl (pH8.0) 150mmol/L NaCl10mmol/L EDTA 蛋白酶K 100ug/ml 0.4%SDS（最后加） 10mmol/L苯甲基磺酰氟（PMSF）在异丙醇中溶解PMSF至1.74mg/ml，即10mmol/L，分装后保存于-20℃，如果需要的话，可将储存液制备至17.4mg/ml，即100mmol/L的高浓度。 闪烁液(Scintillation Solution)PPO (2,5-二苯基) 5.0g、POPOP（1,4-双－5－苯基）0.5g溶于1000ml二甲苯中。也可将POPOP加入二甲苯，在37℃水浴上溶解后，再加PPO，然后补足二甲苯。3H-TdR 工作液（woking Solution）按1:20的比例将浓度为1mCi/ml的3H－TdR用无血清的RPMI培养液稀释，终浓度为50uCi/ml。 肝素溶液的配制：含有肝素的培养液可以使内皮细胞纯度提高，肝素加入全培养液中最终浓度为50ug/ml。因为现在市售的多为肝素钠，包装为约为0.56克/瓶，配制时，可将其溶于100ml三蒸水中，定容，过夜，然后过滤除菌，分装小瓶，保存温度为4 ℃ 。使用时，向100ml培养液中加入1ml（精确可加入0.9ml）即可。
Ⅰ型胶原酶：0.1％Ⅰ型胶原酶溶液同胰蛋白酶一样配制和消毒灭菌。注意：因为Ⅰ型胶原酶分子颗粒比胰酶大，不容易过滤，因此可以用蔡式滤器过滤除菌。分装入10ml小瓶-20℃保存。 用时提前一小时37℃复温即可. 0.1%的I型胶原酶的配置，100mg的粉末状的I型胶原酶可以溶于100ml的DMEM/F12，0.22微米滤器过滤0.1%的I型胶原酶的配置，100mg的粉末状的I型胶原酶可以溶于100ml的DMEM/F12，0.22微米滤器过滤. 四、染色液配制（Prepration of Staining Solution） 苏木素液(Hematoxylin Solution)：苏木素2.5g，乙醇25.0ml，钾明矾2.5g，氧化汞1.25g，冰乙酸20.0ml，蒸馏水500.0ml。配制方法是先将苏木素溶于乙醇中（稍加热）。将预先已溶解明矾的蒸馏水加入苏木素乙醇液中，使溶液尽快沸腾后，将火焰熄灭，慢慢加入氧化汞，防止溶液油溅出，再煮沸2min。将烧瓶立即浸入冷水中，当染液冷却后，加入醋酸，室温保存，用前过滤。伊红Y染色液(Eosin Y Solution)伊红Y 0.5～1.0g，蒸馏水75ml，95%乙醇25ml，冰乙酸1～2滴。先取少许蒸馏水加入伊红，用玻棒将伊红研碎，再加入全部蒸馏水，溶解后加入乙醇。 甲基绿染色液(Methyl Greeen Solution)新购买的甲基绿需用氯仿处理去除甲基紫。方法是将2%甲基绿水溶液20ml倾入洁净分液漏斗，移去慢慢下沉带紫红色的氯仿，再加入新的氯仿10ml，如此反复更换氯仿，到无紫红色为止。该液作为贮存液，4℃保存。染色液：甲基绿贮存液5ml，5%派诺宁水溶液1ml，蒸馏水12ml，0.2mol/L乙酸钠(pH4.8)18ml（临用前配制，滤纸过滤）。吖啶橙贮存液(Acridine Orange Stocking Solution)10mg吖啶橙溶解于100ml PBS中，pH4.8～6.0滤过，4℃避光保存。 吉姆萨贮存液(Giemsa Solution)吉姆萨染色粉1g先溶于少量甘油，在研钵内研磨30min以上，至看不见颗粒为止，再将全部(66ml)剩余甘油倒入，于56℃温箱内保温2h。然后再加入甲醇(66ml)，搅匀后保存于棕色瓶中。母液配制后放入冰箱可长期保存，一般刚配制的母液染色效果欠佳，保存时间越长越好。临用时用pH7.4磷酸缓冲液稀释10倍，随配随用。瑞氏染色液(Wright’s Solution)瑞氏染色粉
97ml将瑞氏染色粉放干燥研钵内磨细，加入甘油继续研磨，不断滴加甲醇并继续研磨，将上层溶解的染料倒入棕色瓶中，直至染料全溶后加甲醇至所需量。混匀后置棕色瓶中保存，用前过滤。一般配制后置室温一周便可使用，保存时间愈入，则染色效果愈佳。吉姆萨-瑞氏染色液(Giemsa- Wright’s Staining Solution)瑞氏染色粉0.3g吉姆萨染色粉 0.03g甲醇
100ml将二种粉末置于研钵中磨细，再逐滴加入甲醇混匀后倒入棕色瓶中，塞紧瓶口并充分振荡。置室温溶解后使用。噻唑兰（MTT）称取250mgMTT，加50ml PBS（0.01mol/L，pH 7.4）在磁力搅拌器上搅拌30min，用0.22?m的微孔滤膜过滤除菌，分装，4℃保存。两周内有效。 台酚蓝染色液(Trypan Blue Solution)A：台酚蓝染料
100ml将染料置于研钵中边研磨边加入蒸馏水溶解。B：NaCl
1.7g蒸馏水
100ml临用前A、B液1：1混合，离心沉淀，取上清供染色用。混合后的染液存放过久，易形成沉淀，故应新鲜配制。染色时，取细胞悬液0.1ml加入新鲜配制的染色液一滴，室温下染5～10分钟，取一滴悬液于载波片上，加盖玻片，高倍镜下检查。死亡细胞膨大并染成浅蓝色，活细胞不着色，大小正常。 五、固定剂(Fixatives)大多数神经激素、肽类物质为水溶性，在用于免疫细胞化学研究之前，常需固定。但肽类和蛋白质的物理、化学性质不同，因而对不同的固定方法或固定剂的反应也不同。某些固定剂甚至可同时破坏和/或保护同一抗原的不同抗原决定簇。因此，在进行免疫细胞化学研究之前，很有必要了解所要研究的物质（蛋白质或肽类）的化学性质，并根据需要来选择适宜的固定剂（或固定方法）以及改进固定条件。目前，免疫细胞化学研究中常用的固定剂仍为醛类固定剂，其中以甲醛类和戊二醛最为常用。4%多聚甲醛-0.1mol/L磷酸缓冲液, pH7.3（formaldehyde-Phasphate Buffer）
40g0.1mol/L磷酸缓冲液
至1000ml配制方法：称取40g多聚甲醛，置于三角烧瓶中，加入500～800ml 0.1mol/L磷酸缓冲液（Phosphate Buffer以下简称PB），加热至60℃左右，持续搅拌（或磁力搅拌）至完全溶解，通常需滴加少许1N NaOH才能使溶液清亮，最后补足0.1mol/L的PB于1000ml，充分混匀。该固定剂较适于光镜免疫细胞化学研究，最好是动物经灌注固定取材后，继续浸泡固定2～24h。另外，该固定剂较为温和，适于组织标本的较长期保存。 4%多聚甲醛-磷酸二氢钠/氢氧化钠（formaldehyde-Sodium Phosphate/Sodium Hydroxide Buffer）A液：多聚甲醛
400mlB液：Na2HPO4·2H2O
16.88g蒸馏水
300mlC液：NaOH
3.86g蒸馏水
200ml配制方法：A液最好在500ml的三角烧瓶中配制（方法同前），至多聚甲醛完全溶解后冷却待用。注意，在溶解多聚甲醛时，要尽量避免吸入气体或溅入眼内。B液和C液配制好后，将B液倒入C液中，混合后再加入A液，以1N NaOH或1N HCl 将pH调至7.2～7.4，最后，补充双蒸水至1000ml充分混合，4℃冰箱保存备用。该固定剂适于光镜和电镜免疫细胞化学研究，用于免疫电镜时，最好加入少量新鲜配制的戊二醛，使其终浓度为0.5%～1%。该固定剂较温和，适于组织的长期保存。组织标本于该固定液中，4℃冰箱保存数月仍可获得满意的染色效果。 六、蛋白电泳相关试剂30％丙烯酰胺（Acrylmide）丙烯酰胺
29gN, N’-亚甲双丙烯酰胺
1g溶于60ml水中，加热至37℃溶解，补加水至终体积100ml。0.45uM滤器过滤除杂质，置深色瓶中室温保存。考马斯亮蓝R-250染色液（Coomassie Staining Solution）1. 称取1 g考马斯亮蓝R-250，置于1 L烧杯中。2. 量取250 ml的异丙醇加入上述烧杯中，搅拌溶解。3. 加入100 ml的冰醋酸，搅拌均匀。4. 加入650 ml的去离子水，搅拌均匀。5. 用滤纸除去颗粒物质后，室温保存。考马斯亮蓝脱色液（Destaining Solution）量取下列溶液，置于1 L烧杯中，充分混合后使用。醋酸
850ml1mol/L二硫苏糖醇贮存液（DTT Stocking Solution）用20ml 0.01mol/L 乙酸钠溶液（pH5.2）溶解3.09gDTT，过滤除菌后分装成1ml小份贮存于－20℃保存。DTT或含有DTT的溶液不能进行高压处理。 0.1mol/L pH 2.4甘氨酸-HCl缓冲液(Glycine-HCl Buffer)称取固体甘氨酸 (MW 75.07)15.01克，用蒸馏水溶解后，加入0.2mol/L HCl 648ml，然后定容成2000ml。2×SDS凝胶加样缓冲液(2×Loading Buffer)100 mmol/L Tris.Cl（pH6.8）200 mmol/L二硫苏糖醇（DTT）4%SDS（电泳级）0.2% 溴酚蓝20% 甘油不含二硫苏糖醇的2×SDS凝胶加样缓冲液可以保存于室温，临用前须从1mol/L二硫苏糖醇（DTT）贮存液现用现加于上述缓冲液。10%十二烷基硫酸钠（SDS）在900ml蒸馏水中溶解100g电泳级SDS,加热至68℃助溶，加入几滴浓盐酸调节溶液的pH值至7.2，加水定容至1L，分装备用。SDS的微细晶粒易于扩散，因此称量时要戴面罩，称量完毕后要清除残留在称量工作区和天平上的SDS,10%SDS溶液无需灭菌。电转印缓冲液为(Semi-Dry Transfer Buffer)Tris
0.185g加入甲醇200ml，用去离子水调至1000ml。Tris-乙酸50×（TAE）Tris 碱
242g冰乙酸
57.1ml0.5mol/L EDTA(pH8.0)
100ml蒸馏水定容至1L。Tris-硼酸5×（TBE）Tris 碱
27.5g0.5mol/L EDTA(pH8.0)
20ml蒸馏水定容至1L。TE缓冲液 10×(pH7.4, 7.6, 8.0)1. 量取下列溶液，置于1 L烧杯中。1mol/L Tris-HCl(pH7.4, 7.6, 8.0)
100ml500mmol/L EDTA(pH8.0)
20ml2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水，均匀混合。3. 将溶液定容至1 L后，高温高压灭菌。4. 室温保存。Tris－甘氨酸缓冲液（Tris-Glycine Buffer 5×）Tris
15.1g甘氨酸（电泳级）
94g10％SDS（电泳级）
50ml蒸馏水定容至1L。 七、淋巴细胞分离液聚蔗糖－泛影葡胺分层液(Ficoll-paque Gradient Mixer)90g/L聚蔗糖15ml，加500g/L泛影葡胺10ml（比重1.14)。90g/L聚蔗糖17.5ml，加500g/L泛影葡胺10ml（比重1.13)。
90g/L聚蔗糖20ml，加500g/L泛影葡胺10ml（比重1.12)。90g/L聚蔗糖24ml，加500g/L泛影葡胺10ml(比重1.08)。Percoll配制 (Prepration of Percoll)将一份10×PBS与9份Percoll贮存液混合，制成等渗Percoll悬液，此悬液被认为是100%Percoll，其密度为1.1294/ml。利用1×PBS或细胞培养液稀释100% Percoll，可获得适宜密度的细胞分层液，用于各种细胞的分离，其浓度与密度的关系如下：70% Percoll 比重1.090g/ml60% Percoll 比重1.077g/ml50% Percoll 比重1.067g/ml40% Percoll 比重1.056g/ml30% Percoll 比重1.043g/ml20% Percoll 比重1.037g/ml人外周血单个核细胞（PBMC）分离Ficoll分层液配制9％聚蔗糖（Ficoll）
24份34％泛影葡胺（Urografin）
10％混合，测比重为1.077～1.078，G5玻璃滤器过滤除菌。4℃冰箱保存备用。八、其它试剂佐剂(Adjuvant)动物实验常用弗氏佐剂（Freund adjuvant），其成分通常是羊毛脂1份、液体石腊油5份，羊毛脂与石腊油的比例，视需要可调整为1：2～9（V/V），充分混合后即是不完全福氏佐剂，如果在每毫升不完全佐剂加入1～20mg卡介苗就成为完全弗氏佐剂。配制方法：将羊毛脂与石蜡油按比例置于容器内，超声波混匀，高压灭菌， 4℃保存备用。免疫前取等容积完全或不完全佐剂与免疫原溶液混合，用振荡器混匀成乳状，也可以在免疫前取需要量佐剂置乳钵中研磨，均匀后再边磨边滴加入等容积抗原液（其中加卡介苗3～4mg/ml或不加），加完后再继续研磨成乳剂，滴于冰水上5～10min内完全不扩散为止。为避免损失抗原，亦可用一注射器装抗原液，另一注射器装佐剂，二者以聚乙烯塑料管连接，然后二者来回反复抽吸，约数十分钟后即能完全乳化。检查合格后即以其中一注射器作注射用。 清洁液(Cleaning Solution)配方1：
100g蒸馏水
200ml浓硫酸
800ml将重铬酸钾加入蒸馏水中，使之自然溶解或水浴溶解，亦可在大坩埚中加热溶解，然后慢慢加入浓硫酸，边加边搅拌，见发热过剧则稍停，冷却后再继续加。此为强洗液。盛清洁液的容器要坚固，上加厚玻璃盖，操作时要穿橡皮围裙、长统胶靴、戴上眼镜和厚胶皮手套，以保安全。洗液一旦变绿，表示铬酸已经还原，失去了氧化能力，不宜再用。如将这样洗液加热，再加适量重铬酸钾，又可重新使用。配方2：
300ml浓硫酸
460ml此为中等强度洗液。配方3：
100g蒸馏水
750ml浓硫酸
250ml此液为弱洗液，为棕红色。使用此液时，必须预先用热肥皂水将玻璃器皿洗净，经自来水冲洗，沥干然后才能浸入，否则该洗液很快失效。 （崔雪玲） 氨苄青霉素（Ampicillin）在9ml蒸馏水中溶解1g Ampicillin粉末并定容至10ml，然后用0.22 um微孔滤膜过滤除菌，分装成小份存于-20℃。青、链霉素溶液：所用纯净水（双蒸水）需要15磅高压20分钟灭菌。具体操作均在超净台内完成。青霉素是80万单位/瓶，用注射器加4ml灭菌双蒸水。链霉素是100万单位/瓶，加5ml灭菌双蒸水，即每毫升各为20万单位。分装于－20℃保存。使用时溶入培养液中，使青链霉素的浓度最终为100单位/ml。3%酸性酒精溶液浓盐酸 3ml
95%酒精97ml 中性红指示剂中性红 0．04g95%乙醇 28ml蒸馏水 72ml中性红pH6.8—8，颜色由红变黄，常用浓度为0．04%淀粉水解试验用碘液(卢戈氏碘液)碘片1g碘化钾 2g蒸馏水 300ml先将碘化钾溶解在少量水中，再将碘片溶解在碘化钾溶液中，待碘全溶后，加足水分即成。溴甲酚紫指示剂溴甲酚紫 0．04g
0．01mol/L NaOH 7．4ml蒸馏水92．6ml溴甲酚紫pH5．2—6．8，颜色由黄变紫，常用浓度为0．04%。 溴麝香草酚蓝指示剂溴麝香草酚蓝0．04g0．01mol/L NaOH 6．4ml蒸馏水 93．6ml溴麝香草酚蓝pH6．0—7．6，颜色由黄变蓝，常用浓度为0．04%。甲基红试剂甲基红(Methyl red) 0．04g95%酒精 60ml蒸馏水 40ml先将甲基红溶于95%酒精中，然后加入蒸馏水即可。V．P．试剂1．5%α-萘酚无水酒精溶液α-萘酚5g无水乙醇 100ml2．40%KOH溶液KOH 40g蒸馏水 100ml吲哚试剂对二甲基氨基苯甲醛 2g95%乙醇 190ml浓盐酸40ml格里斯氏(Griess)试剂 A液：对氨基苯磺酸0．5g10%稀醋酸 150mlB液：α-萘胺0．1g蒸馏水 20ml10%稀醋酸 150ml 二苯胺试剂二苯胺0．5g溶于100ml浓硫酸中，用20ml蒸馏水稀释十一、阿氏(Alsever)血液保存液柠檬酸三钠·2H2O
8g柠檬酸 0．5g无水葡萄糖 18．7gNaCl 4．2g蒸馏水 1000ml将各成分溶解于蒸馏水后，用滤纸过滤，分装，0．56—0．70kg/cm2(8—10磅/英寸2)，灭菌20分钟。冰箱保存备用。pH8．6离子强度0．075mol/L巴比妥缓冲液巴比妥 2．76g巴比妥钠 15．45g蒸馏水 1000ml1%离子琼脂琼脂粉 1g巴比妥缓冲液50ml蒸馏水 50ml1%硫柳汞 1滴称取琼脂粉1g先加至50ml蒸馏水中，于沸水浴中加热溶解，然后加入50ml巴比妥缓冲液，再滴加1滴1%硫柳汞溶液防腐，分装试管内，放冰箱中备用。电泳缓冲液 50×Tris-乙酸（TAE）缓冲液成分及终浓度配制1L溶液各成分的用量2mol/L Tris碱1mol/L 乙酸100 mmol/L EDTA
水 242g57.1 ml的冰乙酸（17.4 mol/L）200ml的0.5 mol/L EDTA（pH 8.0）补足1L1％溴酚蓝加1g水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中，搅拌或涡旋混合直到完全溶解。 1％二甲苯青FF（xylene cyanole FF）溶解1g二甲苯青FF于足量水中，定容到100ml。10mg/ml的溴化乙锭小心称取1g溴化乙锭，转移到广口瓶中，加100ml水，用磁力搅拌器搅拌直到完全溶解。用铝箔包裹装液管，于4℃贮存。四常用抗生素氨苄青霉素（ampicillin）（100mg/ml） 溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。羧苄青霉素（carbenicillin）（50mg/ml）溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 甲氧西林（methicillin）（100mg/ml）溶解1g甲氧西林钠于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以37.5ug/ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。卡那霉素（kanamycin）（10mg/ml）溶解100mg卡那霉素于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基氯霉素（chloramphenicol）（25mg/ml）溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以12.5ug/ml～25ug/ml的终浓度添加于生长培养基。链霉素（streptomycin）（50mg/ml）溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 萘啶酮酸（nalidixic acid）（5mg/ml）溶解50mg萘啶酮酸钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃ 贮存。常以15ug/ml的终浓度添加于生长培养基。四环素（tetracyyline）（10mg/ml） 溶解100mg四环素盐酸盐于足量的水中，或者将无碱的四环素溶于无水乙醇，定容至10ml。分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光，于-20℃贮存。常以 10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基五、常用贮存液的配制1．30%丙烯酰胺溶液【配制方法】将29g丙烯酰胺和1g N，N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的水中。加热至37℃溶解之，补加水至终体积为100ml。用Nalgene滤器（0.45μm孔径）过滤除菌，查证该溶液的pH值应不大于7.0，置棕色瓶中保存于室温。【注意】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收，其作用具累积性。称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。可认为聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为它还可能会含有少量未聚合材料。一些价格较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子，在丙烯酰胺贮存液中加入大约0.2体积的单床混合树脂（MB-1 Mallinckrodt），搅拌过夜，然后用Whatman 1号滤纸过滤以纯化之。在贮存期间，丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酰和双丙烯酸。2．40%丙烯酰胺【配制方法】把380g丙烯酰胺（DNA测序级）和20g N，N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为600ml的蒸馏水中。继续按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法处理，但加热溶解后应以蒸馏水补足至终体积为1L。【注意】见上述配制30%丙烯酰胺的说明，40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列测定。3．放线菌素D溶液【配制方法】把20mg放线菌素D溶解于4ml 100%乙醇中，1：10稀释贮存液，用100%乙醇作空白对照读取OD440值。放线菌素D（分子量为1255）纯品在水溶液中的摩尔消化系数为21，900，故而1mg/ml的放线菌素D溶液在440nm处的吸光值为0.182，放线菌素D的贮存液应放在包有箔片的试管中，保存于-20℃。【注意】放线菌素D是致畸剂和致癌剂，配制该溶液时必须戴手套并在通风橱内操作，而不能在开放在实验桌面上进行，谨防吸入药粉或让其接触到眼睛或皮肤。药厂提供的作治疗用途的放线菌素D制品常含有糖或盐等添加剂。只要通过测量贮存液在440nm波长处的光吸收确定放线菌素D的浓度，这类制品便可用于抑制自身引导作用。 4．0.1mol/L腺苷三磷酸（ATP）溶液【配制方法】在0.8ml水中溶解60mg ATP,用0.1mol/L NaOH调至pH值至7.0，用蒸馏水定容1ml，分装成小份保存于-70℃5．10mol/L乙酸酰溶液【配制方法】把770g乙酸酰溶解于800ml水中，加水定容至1L后过滤除菌。6．10%过硫酸铵溶液【配制方法】把1g过硫酸铵溶解于终量为10ml的水溶液中，该溶液可在4℃保存数周。7．BCIP溶液【配制方法】把0.5g的5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸二钠盐（BCIP）溶解于10ml 100%的二甲基甲酰胺中，保存于4℃8．2×BES缓冲盐溶液【配制方法】用总体积90ml的蒸馏水溶解1.07g盐溶液BES、1.6g NaCl和0.027g Na2HPO4，室温下用HCl调节 该溶液的pH值至6.96、然后加入蒸馏水定容至100ml，用0.22μm滤器过滤除菌，分装成小份，保存于-20℃。9．1mol/L CaCl2溶液【配制方法】在200ml蒸馏水中溶解54g CaCl2o6H2O，用0.22μm滤器过滤除菌，分装成10ml小份贮存于-20℃。【注意】制备感受态细胞时，取出一小份解冻并用蒸馏水稀释至100ml，用Nalgene滤器（0.45μm孔径）过滤除菌，然后骤冷至0℃。10．2.5mol/L CaCl2溶液【配制方法】在20ml蒸馏水中溶解13.5g CaCl2o6H2O，用0.22μm滤器过滤除菌，分装成1ml小份贮存于-20℃。11．1mol/L二硫苏糖醇（DTT）溶液【配制方法】用20ml 0.01mol/L乙酸钠溶液（pH5.2）溶解3.09g DTT，过滤除菌后分装成1ml小份贮存于-20℃。【注意】DTT或含有DTT的溶液不能进行高压处理。12．脱氧核苷三磷酸（dNTP）溶液【配制方法】把每一种dNTP溶解于水至浓度各为100mmol/L左右，用微量移液器吸取0.05mol/L Tris碱分别调节 每一dNTP溶液的pH值7.0（用pH试纸检测），把中和后的每种dNTP溶液各取一份作适当稀释，在下表中给出的波长下读取光密度计算出每种dNTP的实际浓度，然后用水稀释成终浓度为50mmol/L的dNTP，分装成小份贮存于-70℃。碱基
波长（nm）
消化系数（ε）A
1.54×104G
1.37×104C
9.10×103T
7.40×103比色杯光径为1cm时,吸光度=εM13．0.5mol/L EDTA(pH8.0)溶液【配制方法】在800ml水中加入186.1g二水乙二胺四乙酸二钠（EDTA-Nao2H2O），在磁力搅拌器上剧烈搅拌，用NaOH调节 溶液的pH值至8.0（约需20g NaOH颗粒）然后定容至1L，分装后高压灭菌备用。【注意】EDTA二钠盐需加入NaOH将溶液的pH值调至接近8.0，才能完全溶解。16．IPTG溶液【配制方法】IPTG为异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（分子量为238.3），在8ml蒸馏水中溶解2g IPTG后，用蒸馏水定容至10ml，用0.22μm滤器过滤除菌，分装成1ml小份贮存于-20℃。 17．1mol/L乙酸镁溶液【配制方法】在800ml水中溶解214.46g四水乙酸镁，用水定容至1L过滤除菌。18．1mol/L MgCl2溶液【配制方法】在800ml水中溶解203.4g MgCl2o6H2O，用水定容至1L，分装成小份并高压灭菌备用。【注意】MgCl2极易潮解，应选购小瓶（如100g）试剂，启用新瓶后勿长期存放。19．β-巯基乙醇（BME）溶液【配制方法】一般得到的是14.4mol/L溶液，应装在棕色瓶中保存于4℃。【注意】BME或含有BME的溶液不能高压处理。20．NBT溶液【配制方法】把0.5g氯化氮蓝四唑溶解于10ml 70%的二甲基甲酰胺中，保存于4℃。21．酚/氯仿溶液【配制方法】把酚和氯仿等体积混合后用0.1mol/L TrisoHCl(pH7.6)抽提几次以平衡这一混合物，置棕色玻璃瓶中，上面覆盖等体积的0.01mol/L TrisoHCl(pH7.6)液层，保存于4℃。【注意】 酚腐蚀性很强，并可引起严重灼伤，操作时应戴手套及防护镜，穿防护服。所有操作均应在化学通风橱中进行。与酚接触过的部位皮肤应用大量的水清洗，并用肥皂和水洗涤，忌用乙醇。22．10mmol/L苯甲基磺酰氟（PMSF）溶液【配制方法】用异丙醇溶解PMSF成1.74mg/ml（10mmol/L），分装成小份贮存于-20℃。如有必要可配成浓度高达17.4mg/ml的贮存液（100mmol/L）。【注意】PMSF严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤，吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。一旦眼睛或皮肤接触了PMSF，应立即用大量水冲洗之。凡被PMSF污染的衣物应予丢弃。 PMSF在水溶液中不稳定。应在使用前从贮存液中现用现加于裂解缓冲液中。PMSF在水溶液中的活性丧失速率随pH值的升高而加快，且25℃的失活速率高于4℃。pH值为8.0时，20μmmol/L PMSF水溶液的半寿期大约为85min，这表明将PMSF溶液调节 为碱性（pH>8.6）并在室温放置数小时后，可安全地予以丢弃。3、结晶紫染色液(Huclker改订)A液：结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精 25.0 毫升B液：草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水 100 毫升将结晶紫研细后，加入95%酒精，使之溶解，配成A液。将草酸铵溶于蒸馏水，配成B液。两液混合即成。显微镜镜头清洁剂将乙醚和乙醇按7∶3混合，装入滴瓶备用。用于擦拭显微镜镜头上油迹和污垢等（注意瓶口必须塞紧，以免挥发）。甘油-酒精软化剂甘油1份＋50％或70％酒精1份，适用于木材的软化，将木质化根、茎等材料排除空气后浸入软化液中，时间至少一周或更长一些，也可将材料保存于其中备用。}