胰岛素抗体乙肝三项抗体阳性阳性

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胰岛自身抗体临床意义
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目录1 拼音yí dǎo sù kàng tǐ2 英文参考InsAbinsulin antibody3 概述的出现有两种情况,一种出现于接受外源性胰岛素治疗的病人,主要和胰岛素制剂的纯度有关系,一种出现于从未接受胰岛素治疗的病人,称为胰岛素。
4 胰岛素抗体的医学检查4.1 检查名称胰岛素抗体4.2 分类类测定 & 4.3 胰岛素抗体的测定原理4.3.1 (1)酶联免疫吸附法以聚板为,用胰岛素-卵交联物为,加待测后,如待测血清中有抗胰岛素抗抗抗体(antiinsulin antibody,A-IAb),则与包被抗原结合,再与随后加入的酶标记A蛋白反应,在酶底物下显色,显色强度可反映抗胰岛素抗抗抗体水平。4.3.2 (2)免疫酶斑点法用膜为载体,胰岛素-卵清蛋白交联物为包被抗原,如待测血清中有抗胰岛素抗抗抗体,则与包被抗原结合,再与HRP-SPA反应,在酶底物作用下显色。如检样中无抗胰岛素抗抗抗体,则包被抗原处不呈色。4.4 试剂4.4.1 (1)酶联免疫吸附法①胰岛素-卵清蛋白交联物:取普通岛素(40u/ml=1.6mg/ml,市售商品)5ml加3ml pH8.6,0.06mol/L(内含卵清蛋白160mg),混匀后,0.25%0.24ml,室温搅拌1h。分装,-20℃,用作包被抗原。
②豚鼠抗毒:按上备胰岛素-清交联物,加等量福氏完全充分乳化,交替注射豚鼠(400~500g/只)的背部,两后肢内等处,每只豚鼠每次注射胰岛素量约20u,10天注射1次,4次后,抽观察血清,一般免疫5~6次后用不加佐剂的胰岛素一片作加强注射3天后,抽血,血清,-20℃保存备用,作为对照。
③酶标记的葡萄球菌A蛋白(HRP-SPA),最适稀释度预试选定。
④包被液、稀释液、液、底物同一般酶联免疫法。4.4.2 (2)免疫酶斑点法①胰岛素-卵清蛋白交联物、豚鼠抗胰岛素抗抗抗体制备参见酶联免疫吸附法。
②HRP-SPA,最适稀释度预试选定。
③包被液、稀释液、洗涤液同一般酶联免疫吸附法。
④底物溶液:3,3'-二四(DAB)5mg,用0.2ml后,补加pH7.4,0.01mol/L PBS10ml,30%H2O2 0.05ml,使用前新鲜配制。
4.5 操作方法4.5.1 (1)酶联免疫吸附法将胰岛素-卵清蛋白用包被液稀释至20μg/ml,包被聚苯乙烯反应板微孔,每孔100μl,4℃过夜。洗涤液洗3次,每次3min,用pH7.4,0.01mol/L PBS(内含15%小牛血清)封闭,43℃ 1h。同上法洗后加待测血清(1∶100)或、阳性对照,每孔100μl,43℃ 1h(37℃ 2h)。同上法洗后加最适稀释度的HRP-SPA,每孔100μl,45℃ 1h(37℃ 2h)。同上法洗后加底物(OPD-H2O2)溶液,每孔100μl,37℃ 10min显色。用2mol/L H4SO4终止反应。
酶联免疫仪检测492nm波长吸光度值。4.5.2 (2)免疫酶斑点法将NC膜划成5mm×5mm的格,浸于pH7.4,0.01mol/L PBS中30min,滤纸吸干。取2μl胰岛素-卵清蛋白交联物点样于小方央,室温。用pH7.4,0.01mol/L PBS(内含卵清蛋白10.0g/L)封闭,45℃ 1h,滤纸吸干。加待测血清2μl于抗原包被处,45℃ 30min后,用pH7.4,0.01mol/L PBS洗3次,每次3min,滤纸吸干。将膜置于最适浓度HRP-SPA中,45℃ 30min,同上法洗后滤纸吸干。浸于新配底物中5~10min,显色后流水冲洗,终止反应。4.6 正常值阴性。4.7 化验结果临床意义胰岛素抗抗体对和的诊断、鉴别诊断及治疗具有非常重要的意义。4.7.1 (1)1型糖尿病的早期发现正常人群如在血中发现胰岛素抗抗体则很容易罹患。胰岛素自身抗体可能系β破坏所产生,因此胰岛素自身抗体的检测可作为性β细胞的标志,可用于早期发现和预防1型糖尿病。4.7.2 (2)诊断胰岛素抵抗,指导糖尿病治疗中存在胰岛素抗抗体是产生胰岛素抵抗的重要原因,糖尿病在使用胰岛素治疗的过程中可因胰岛素抗抗体的产生而出现胰岛素抵抗,表现为胰岛素用量逐日增加但并不。此时应检测胰岛素抗抗体,若出现阳性或滴度增高可作为胰岛素抵抗的客观依据。换用、高纯度胰岛素及停用胰岛素、口服降糖药或应用皆有助于降低胰岛素抗抗体的浓度,改善胰岛素抵抗。
4.7.3 (3)胰岛素自身免疫综合征自Hirata等于1970年首次报告后,国报告逐年增多。胰岛素自身免疫(insulin autoimmune syndrome,IAS)的特征为严重低血糖、高胰岛素血症、胰岛素抗抗体(IAA)阳性及从未接受外源性胰岛素治疗。IAS低血糖发作呈自限性,82%不经治疗1年内自行缓解,但发作时多较严重且诊断困难。除外,应用可能有一定价值。在IAS中可能起重要作用。4.8 附注胰岛素依赖性糖尿病抗胰岛细胞抗阳性率为20%~40%,期阳性率可达60%~70%;非胰岛素依赖性糖尿病阳性率仅为6.2%。因此,检测抗胰岛细胞抗体可区分。4.9 相关疾病糖尿病、低血糖、1型糖尿病、2型糖尿病相关文献
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