下图是将目的基因导入动物细胞.培育转基因动物的常用操作程序.根据图示过程和所学知识.将下面操作程序补充完整.(1)构建基因表达载体:在构建基因表达载体时常要用到工具酶.常用的DNA连接酶有 和 .后者也可以用于平末端的连接.如果目的基因要在乳腺细胞中表达.基因表达载体构建时要将目的基因与 .标记基因和终止子等组件重组在一起. 题目和参考答案——精英家教网——
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下图是将目的基因导入动物细胞，培育转基因动物的常用操作程序。根据图示过程和所学知识，将下面操作程序补充完整。（1）构建基因表达载体：在构建基因表达载体时常要用到工具酶。常用的DNA连接酶有__________和___________，后者也可以用于平末端的连接。如果目的基因要在乳腺细胞中表达，基因表达载体构建时要将目的基因与__________、标记基因和终止子等组件重组在一起，载体一般要有一至多个限制酶切割位点便于&&&&&_________。（2）获得足够数量的受精卵：为了获得足够数量的受精卵，先利用___________刺激供体雌性鼠超数排卵，然后从______________冲取______________，再完成体外受精。（3）将目的基因导入细胞：确定目的基因是否整合到染色体上，一般需用______________做探针，与转基因小鼠细胞中提取的______________进行DNA分子杂交。（4）早期胚胎培养：早期胚胎培养的培养液成分一般比较复杂，除一些无机盐和有机盐外，还需要添加___________、______________，氨基酸、核苷酸等营养成分，以及动物血清等物质。当胚胎培养到适宜的阶段时，可进行胚胎移植。（5）胚胎移植：在胚胎移植前要对接受胚胎的受体进行_____________处理。移植后，还要对受体雌鼠进行_____________检查。（6）胚胎干细胞形态上具有__________________________________________的特性，它在添加______________的培养液中可以维持不分化的状态。
（1）E·coliDNA连接酶（大肠杆菌DNA连接酶）&&& T4-DNA连接酶乳腺蛋白基因的启动子&&&&&&&目的基因的插入（2）促性腺激素&&&&&&&&&输卵管&&&&&&&&&卵子（卵母细胞）（3）放射性同位素标记（荧光分子标记）的目的基因（单链）&&&基因组DNA（核DNA）（4）维生素&&&&&激素&&&&（5）同期发情&&&&&&妊娠（6）体积小，细胞核大，核仁明显，&&&&&&抑制因子
解析试题分析：（1）基因工程中常用的DNA连接酶有E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶，其中T4-DNA连接酶可以连接黏性末端和平末端；要想让目的基因在乳腺细胞中表达，需要把目的基因与乳腺蛋白基因的启动子、终止子等调控组件重组在一起，获得乳腺生物反应器；载体中要有一个或多个限制酶切割位点便于目的基因插入。（2）超数排卵处理所用的激素为促性腺激素；对于小型动物鼠可以从输卵管中冲取卵子，再进行体外受精。（3）要想检测目的基因是否整合到受体细胞的染色体上，需要用放射性同位素标记（荧光分子标记）的目的基因做探针，与转基因小鼠细胞中提取的核DNA分子进行DNA分子杂交，如果出现杂交带，说明导入成功。（4）早期胚胎培养的培养液成分一般都比较复杂，除了一些无机盐和有机盐类外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及血清等。（5）胚胎移植前要对接受胚胎的受体进行同期发情处理，保证胚胎移植前后所处的生理环境相同；移植后要进行妊娠检查。（6）胚胎干细胞形态上具有体积小，细胞核大，核仁明显的特点；在培养液中添加抑制因子可以使胚胎干细胞增殖而不分化。考点：本题考查基因工程和胚胎工程的有关知识，意在考查考生识记能力和理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
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科目：高中生物
题型：综合题
某豆科植物种子萌发过程中CO2释放和O2吸收速率的变化趋势如图所示。请据图回答问题：⑴在12～24h期间，呼吸速率逐渐增强，在此期间呼吸作用的主要方式是&&&&&&&呼吸，该呼吸方式在细胞中发生的部位是&&&&&&&，其产物是&&&&&&&&&&&&&。⑵从第12h到胚根长出期间，萌发种子的干物质总量会&&&&&&&&&，主要原因是&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&。⑶胚根长出后，萌发种子的&&&&&&&呼吸速率明显升高。
科目：高中生物
题型：综合题
柠檬油是植物芳香油中的一种，它是一种广谱性的杀虫剂，它可杀死蚊子、苍蝇、蟑螂和臭虫等传染疾病的害虫，以及危害粮食、蔬菜的常见害虫，包括幼虫、蛹等，被称为一种绿色杀虫剂。必经步骤为如下图。请根据实验流程图回答下列问题：(1)新鲜的橘皮中含有大量的________________和水分，如果直接压榨，出油率较低。(2)压榨是个机械加压过程，要求是既要将原料压紧，防止原料滑脱，又要将&&&&&&挤压出来。(3)A是&&&&&&&&&&&&&，目的是破坏细胞结构，分解果胶，防止压榨时果皮滑脱，提高&&&&&&&&&&&&。B过程一般加入相当于柠檬果皮质量0.25%的小苏打和5%的硫酸钠，其目的是使柠檬油易与水分离，并调节pH至_________。(4)C过程为用&&&&&&&&&&过滤，目的是除去固体物和残渣。(5)柠檬油是食品、化妆品和香水配料的优质原料，具有很高的经济价值，提取柠檬油不采取水中蒸馏的原因是:水中蒸馏会导致&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&的问题。柠檬果皮精油的提取适宜采用&&&&&&法。
科目：高中生物
题型：综合题
下图甲为桑基鱼塘农业生态系统的模式图；图乙实线表示该生态系统中某种鱼净补充量（出生率与死亡率的差）与种群密度的关系，虚线I、II、III、IV表示不同的捕捞强度下这种鱼收获量与种群密度的关系。请据图回答：(1)图甲所示的生态系统稳定性较弱，原因是____________________________________。蚕粪中的碳元素以_________形式流向鱼。(2)当种群密度为K/2时，在IV所示捕捞强度下种群数量的变化趋势是________。若要获得该鱼最大的持续产量，应维持的捕捞强度为图中的曲线________。 (3)在没有明显迁入和迁出的情况下，决定鱼种群净补充量的因素是________。(4)该生态系统中所有生物含有的总能量________（填“是”或“不是”）流经该生态系统的总能量，原因是________________________。从生态系统能量流动的角度分析，该农业生态系统的优点是________________________________________________________。
科目：高中生物
题型：综合题
某野外调查小组在我国东部地区对东部群落进行深入调查，请分析回答：（1）调查获得了树林中物种数与面积的关系图（如图1）：该野外调查小组的研究方法叫做_____________。上图显示，调查该地区物种数的样方面积最好是_________________。（2）图2东部群落在空间结构上具有___结构。影响群落中动物分层现象的主要因素___。（3）图3是调查小组同学从当地主管部门获得的某物种种群数量的变化图，据此分析该种群在30年中种群数量最少开始于第&&&&&&年，第20～30间种群的增长率为________。（4）调查小组对一块荒地的几种植物的种群密度进行了连续五年的调查，调查的结果如下表所示（单位：株／m2）。&&&&&&年份植物 2001 2002 2003 2004 2005 A 10.O 9.2 8 6.8 5.5 B 3.0 2.1 1.1 0.3 O.1 C 0.3 0.6 1.1 1.5 2.3 D 3.0 2.0 0.4 0 O 如果4种植物中有一种属于入侵物种，则该入侵物种可能是C；入侵物种往往会对本土物种环境造成危害，其主要原因是______________________。
科目：高中生物
题型：综合题
下图为神经系统的结构示意图,椐图回答问题:甲&&&（1）甲图中①所示的结构属于反射弧的&&&&&&&&&&&&&。（2）A、B、C细胞间兴奋的传递方向为 &&&&&&&&&&&&&&&&&。（3）刺激部位④，该部位的膜外电位变化情况是&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&。（4）突触是由乙图中的&&&&&&&&&&&&&&（填序号）构成的。（5）Ach （乙酰胆碱）是一种兴奋型递质，当兴奋传到传出神经末梢时，Ach与Ach受体结合，引起肌肉收缩。当完成一次兴奋传递后，Ach立即被分解，若某种药物可以阻止Ach的分解，则会导致&&&&&&&&&&&&&&&。（6）研究表明，不少重症肌无力患者是由于受病毒感染后，机体产生&&&&&&&&&&&，它除与病毒结合之外，还能与Ach受体特异性结合，阻碍兴奋的传导，导致肌无力。这说明患者所感染的病毒表面有一种&&&&&&与Ach受体相似。在免疫学上此病属于自身免疫病。
科目：高中生物
题型：综合题
甲、乙为某种二倍体植物的2个植株，其体细胞中2对同源染色体（Ⅰ和Ⅱ）及相关基因分别见图甲和图乙，其中图乙表示变异情况。减数分裂时，染色体联会过程均不发生交叉互换。A和B是显性基因，A和a分别控制高茎和矮茎；B和b分别控制红花和白花。（1）若甲植株进行自交产生的子代为N。N的矮茎红花个体中纯合子占&&&&&&&；若N的全部高茎红花植株自由交配，其子代中矮茎白花个体占&&&&&&&&&。（2）乙植株发生了的变异类型是&&&&&&&&&；发生该变异时，基因的碱基&&&&&&&&&。（3）如果乙植株产生配子时，具有同源区段的染色体都可以正常进行联会，该植株产生的配子类型共有&&&&&&&&&&种。（4）为检测某植物体是否含有A基因，首先要在含有A基因的&&&&&&&&&，以此作为探针，与从该植物提取出来的&&&&&&&&&&&进行&&&&&&&&&&。
科目：高中生物
题型：综合题
金线莲是一种珍稀中草约，在福建省多个地区均有分布。为确定金线莲人工载培的最佳光照强度，某科研机构利用组织培养快速繁育种苗进行人工载培，并测定人工载培植株的生长情况和光合速率。其实验过程如下：1．选取长有3－4个叶片的金线莲组织培养苗，随机分为5组，每组48株。2．将栽有植株的育苗盘分别放置在20、50、100、50、200·s）光照强度下。3．在每天6时～22时给予光照、温度为25oC的条件下栽培3个月，测定数据并绘制曲线图如下。（1）利用组织培养技术快速繁育种苗所依据的原理是&&&&&&&&&&&&&&。进行组织培养时选取的材料最好是金线莲的&&&&&&&&&&&&（芽/叶/茎）。（2）据图分析，金线莲在&&&&&&&&·s）的光照强度下生长最好，过高光照强度会抑制金线莲生长，原因是随着光照强度增加，&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&。（3）本实验测定叶绿素含量时， 在叶绿体色素的提取过程中加入丙酮的目的是&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&。（4）如果需要更准确地确定金线莲生长的最适光照强度，根据实验结果分析，应在_________________·s）范围内设置多组梯度的光照强度继续进行实验。
科目：高中生物
题型：综合题
为探究影响光合作用强度的因素，某实验小组将一定浓度的小球藻浸入盛有适宜培养液的两支试管中，1号试管和2号试管的二氧化碳浓度分别设置为0.05%和0.03%，以白炽灯作为光源，移动台灯改变光源与试管的距离进行实验。根据实验结果绘制成图中曲线1、曲线2.请分析回答。（1）测定净光合速率除了测定氧气释放量外，还可以测定_____________。（2）据图可知，限制D点净光合速率的主要因素是_____________，限制EF段净光合速率的主要因素是_____________。F点的含义是_____________。（3）该小组又做了探究小球藻最适生长温度的预实验，实验结果见下表：（二氧化碳浓度为0.05%）请根据实验结果，分析并设计探究实验思路：温度（℃）1020304050光照下释放氧气的速率（mg·h-1）9.6714.6719.6721.6719.33在实验过程中控制自变量的方法是_____________。该实验中还有应控制好的两个主要无关变量是_____________。预实验中温度为_______℃时，光合速率最大。此时，叶绿体中ADP的移动方向是_____________。
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伏念DL33NZ67
常用的运载体有两种,一类是质粒,一类是病毒当质粒做运载体时,其实并没有将基因导入宿主细胞,因为质粒可以存在于宿主细胞内,而且不影响宿主的生活,并能正常表达所携带的遗传信息,因此只要将质粒注入细胞就可以了而当某些病毒做运载体时,这些病毒具备逆转录能力,可以在逆转录酶的作用下,利用自身的RNA,逆转录出相应的DNA,且能使其与宿主细胞的DNA接到一起,并正常表达
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pBI121转化到真核生物中时，是否一定会将目的基因整合到宿主的基因组DNA上？
我有一个可能比较小白的问题想请教大家，将植物表达载体pBI121转化到真核生物中时（我做的是真核微生物），是否一定会将目的基因整合到宿主的核基因组DNA上？因为pBI121载体含有一段带有LB和RB的T-DNA序列，如果将目的基因插入到T-DNA区域，是否会随着T-DNA序列插入到宿主的核基因组上呢？有点不明白，恳请大家多多指教！谢谢！
谢谢你的回复啦！非常感谢
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随时随地聊科研目的基因如何整合到动物细胞的染色体DNA上就是携带目的基因的重组质粒导入动物细胞后是整合到动物细胞核内的染色体DNA中还是以质粒的形式在细胞中存在，还有如果是整合的话 那么如何整合呢？
效率稍微高点的利用病毒具有转座功能的部分序列,其余的都是随机整合,看运气.所以转基因成功的概率是非常非常低的.还有一楼的你做过转基因么?显微注射是用的最少的,只有高中的白痴教材才会把它写成常用方法!
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1、原核徽注射法。外源基因徽注射法（Microinjection）的创始人是Jaenish（1974），当Palmiter利用此法获得快速生长的“超级小鼠”后，这一转基因方法被广泛使用，其主要步骤包括：公母畜交配（或通过人工授精）获得原核期受精卵，将上源DNA通过徽注射导入原核中（一般是雄原核，然后将徽注射后的受精卵移入受体输卵管中继续发育。
2、反转录病毒载体法。反转录病毒（Retr...
迄今为止，显微注射技术是转基因动物中采用最多，也是最为有效的一种将目的基因导入动物的方法。
对于动物细胞，一般整合到染色体的多，独立质粒形式的少，但都是有的。
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