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【摘要】：本实验用成年雄性Sprague-Dawley大鼠,在pentobarbital麻醉下切开背部皮肤,暴露T3-T4胸椎切除椎板,将细的聚乙烯管插入蛛网膜下腔,选术后7天双下肢活动正常大鼠,再次麻醉,按Decosterd等的方法暴露大鼠右側下肢坐骨神经,行2组手术:1组为spared nerve injury(SNI)手术组,术中保留腓肠神经,切断胫神经和腓总神经,建立神经病理性疼痛模型;另1组为假手术组,不切断任何神经鉯动物左侧下肢为对照组。动物成活10,20及30天,其间用有刻度的von Frey尼龙丝分别刺激左、右跖外侧部皮肤,检测大鼠缩爪阈值(paw withdrawal mechanical acid(PPADS,P2XR拮抗剂),再测PWMT值发现FCA、CBX、PPADS均可抑制机械性痛觉增敏现象,给药4小时后PWMT值分别由(3.0±1.0)g、(3.0±1.2)g和(35±2.0)g上升到(13.0±3.2)g、(20.0±5.5)g和(80±2.7)g,而SN组的PWMT值无升高。部分实验动物在术后20天被处死,其腰髓的切片分别用抗P2X4和抗NeuN(标记神经元),抗P2X4和抗GFAP(标记星形胶质细胞),抗P2X4和抗OX42(标记小胶质细胞)的双重免疫荧光染色,观察了SNI大鼠脊髓后角浅层P2X4受体表达增强,並与GFAP、OX42或Neu-N等阳性结构共表达Fos阳性神经元增加。FCA处理后,脊髓后角的星形胶质细胞、小胶质细胞和神经元的反应被抑制;CBX处理后,星形胶质细胞、小胶质细胞的反应未被抑制,神经元的反应被抑制;PPADS处理后,星形胶质细胞、小胶质细胞和神经元的反应无明显变化免疫电镜的结果证明P2X4受體不仅可表达在突触前、后成分内的结构上,而且可表达在神经胶质的胞体和突起上。而表达P2X4受体的神经胶质样结构可与神经元轴突末端、樹突及神经胶质的突起紧密接触(它们可为P2X4受体阳性或阴性)形成突触样结构(synaptoid