蛋白质低温变性条件下DNA不会变性说明DNA有什么特点

什么叫DNA的热变性?它有什么特征_百度知道
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什么叫DNA的热变性?它有什么特征
DNA的热变性是指DNA分子在加热条件下由稳定的双螺旋结构松解为无规则线性结构的现象。特征有:DNA溶液粘度降低、DNA溶液旋光性发生改变、DNA溶液的紫外吸收作用增强(增色效应)。DNA变性是指核酸双螺旋碱基对的氢键断裂,双链变成单链,从而使核酸的天然构象和性质发生改变。变性时维持双螺旋稳定性的氢键断裂,碱基间的堆积力遭到破坏,但不涉及到其一级结构的改变。凡能破坏双螺旋稳定性的因素,如加热、极端的pH、有机试剂甲醇、乙醇、尿素及甲酰胺等,均可引起核酸分子变性。
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DNA变性后有哪些特点
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DNA双螺旋是紧密的刚性结构,变性后代之以柔软而松散的无规则单股线性结构,DNA粘度因此而明显下降。指变性后DNA溶液的紫外吸收作用增强的效应,碱基中电子的相互作用更有利于紫外吸收,故而产生增色效应。变性后整个DNA分子的对称性及分子局部的构性改变,使DNA溶液的旋光性发生变化。在DNA双螺旋结构中碱基藏入内侧,变性时DNA双螺旋解开,于是碱基外露DNA变性是指核酸双螺旋碱基对的氢键断裂。DNA分子中碱基间电子的相互作用使DNA分子具有吸收260nm波长紫外光的特性。特点:变性DNA常发生一些理化及生物学性质的改变:1)溶液粘度降低,碱基间的堆积力遭到破坏,但不涉及到其一级结构的改变,双链变成单链,从而使核酸的天然构象和性质发生改变。变性时维持双螺旋稳定性的氢键断裂。3)增色效应(hyperchromic effect)。2)溶液旋光性发生改变
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回答问题,赢新手礼包29.将双链DNA在中性盐溶液中加热.两条DNA单链分开.叫做DNA变性.变性后的DNA如果慢慢冷却.又能恢复成为双链DNA.叫做退火. (1)低温条件下DNA不会变性.说明DNA有 ——精英家教网——
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29.将双链DNA在中性盐溶液中加热.两条DNA单链分开.叫做DNA变性.变性后的DNA如果慢慢冷却.又能恢复成为双链DNA.叫做退火. (1)低温条件下DNA不会变性.说明DNA有 特点.从结构上分析原因有:外侧 .内侧碱基对遵循 原则. (2)DNA变性时脱氧核苷酸分子间的共价键不受影响.而 被打开.如果在细胞内.正常DNA复制过程中需要 作用. (3)部分DNA完全解旋成单链所需的温度明显高于其他DNA.其最可能的原因是 . (4)大量如图1中N元素标记的DNA在变性后的退火过程中会形成 种DNA.离心后如图2.则位于 链位置上. (5)如果图1中α链中A和T的比例和为46%.则DNA分子中A和C的和所占比例为 . 【】
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下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的过程,图中tetR表示四环素抗性基因,ampR表示氨苄青霉索抗性基因,BamHI、Bau3A I、Bst I、Haclll、Not I所指位点为限制酶的酶切位点,五种酶的识别序列及切割位点在下表中。据图表回答∶
(1)将双链DNA在中性盐溶液中加热,两条单链分开,叫做DNA变性。变性后的DNA如果慢慢冷却,又能恢复为双链DNA,叫做退火。大量的如下图中N元素标记的DNA在变性后的退火过程中会形成________种DNA。
(2)若对图中质粒进行改造,插入的Not I酶切位点越多,质粒的热稳定性越________。
(3)要将人乳蛋白基因插入载体,如果只允许用一种限制酶酶切载体和人乳铁蛋白基因,应选择的限制酶是________。
(4)筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含________的培养基上进行。
(5)若从细胞中提取DNA和RNA,通过基因工程的方法,转移到另一种细胞时,转入DNA比转入RNA要有优势,理由是________
(6)供体牛的受精卵的性染色体组成为________。在胚胎移植过程中,供、受体牛选择好后,要用激素进行同期发情处理的原因是________,以保证移植的胚胎能够继续正常发育
(7)为检测人乳铁蛋白是否成功表达,可采用________技术。
下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的过程,图中tetR表示四环素抗性基因,ampR表示氨苄青霉索抗性基因,BamHI、Bau3A I、Bst I、Haclll、Not I所指位点为限制酶的酶切位点,五种酶的识别序列及切割位点在下表中。据图表回答:(1)将双链DNA在中性盐溶液中加热,两条单链分开,叫做DNA变性。变性后的DNA如果慢慢冷却,又能恢复为双链DNA,叫做退火。大量的如右图中N元素标记的DNA在变性后的退火过程中会形成&&&&&&&&&&&&&&&&&&种DNA。(2)若对图中质粒进行改造,插入的Not I酶切位点越多,质粒的热稳定性越&&&&&&&&&&。(3)要将人乳蛋白基因插入载体,如果只允许用一种限制酶酶切载体和人乳铁蛋白基因,应选择的限制酶是&&&&&&&&&&&&&&&&&&。(4)筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含&&&&&&&&&&&&&&的培养基上进行。(5)若从细胞中提取DNA和RNA,通过基因工程的方法,转移到另一种细胞时,转入DNA比转入RNA要有优势,理由是&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&(6)供体牛的受精卵的性染色体组成为&&&&&&&&&&&。在胚胎移植过程中,供、受体牛选择好后,要用激素进行同期发情处理的原因是&&&&&&&&&&&&,以保证移植的胚胎能够继续正常发育(7)为检测人乳铁蛋白是否成功表达,可采用&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&技术。
下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的过程,图中tetR表示四环素抗性基因,ampR表示氨苄青霉索抗性基因,BamHI、Bau3A I、Bst I、Haclll、Not I所指位点为限制酶的酶切位点,五种酶的识别序列及切割位点在下表中。据图表回答:(1)将双链DNA在中性盐溶液中加热,两条单链分开,叫做DNA变性。变性后的DNA如果慢慢冷却,又能恢复为双链DNA,叫做退火。大量的如右图中N元素标记的DNA在变性后的退火过程中会形成&&&&&&&&&&&&&&&&&&种DNA。(2)若对图中质粒进行改造,插入的Not I酶切位点越多,质粒的热稳定性越&&&&&&&&&&。(3)要将人乳蛋白基因插入载体,如果只允许用一种限制酶酶切载体和人乳铁蛋白基因,应选择的限制酶是 &&&&&&&&&&&&&&&&&&。(4)筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含&&&&&&&&&&&&&&的培养基上进行。(5)若从细胞中提取DNA和RNA,通过基因工程的方法,转移到另一种细胞时,转入DNA比转入RNA要有优势,理由是&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&(6)供体牛的受精卵的性染色体组成为&&&&&&&&&&&。在胚胎移植过程中,供、受体牛选择好后,要用激素进行同期发情处理的原因是&&&&&&&&&&&&,以保证移植的胚胎能够继续正常发育(7)为检测人乳铁蛋白是否成功表达,可采用&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&技术。&
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请输入姓名
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沉淀DNA时为什么要用无水乙醇及在高盐、低温条件下进行?
无水乙醇脱水,低温高盐DNA溶解度低.三者一起可以最大限度沉淀DNA.
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酚氯仿抽提DNA后,会使溶液分层,上层为水相,含有DNA;中间为蛋白(有时看不到);下层为有机相.原因是酚氯仿可以使蛋白质变性,从而从溶液中析出,但是蛋白密度会小于酚氯仿,所以离心后它分布在中间;而DNA溶于水而不溶于有机相.沉淀DNA用无水乙醇,是因为DNA不溶于乙醇,而乙醇可以夺取水,从而使得DNA聚集沉淀,如果用
二者没有什么本质区别.不过异丙醇沉淀效率高一些.用异丙醇沉淀的话等体积就可以了,用无水乙醇的话要用二倍体积去沉淀.
异丙醇比较疏水,能很更好地沉淀核酸,用乙醇的目的是去盐,它比异丙醇更亲水,所以能去掉一些盐离子.有时还用70%的乙醇洗样品也是为了增加盐的溶解度.在沉淀核酸时可用乙醇与异丙醇,乙醇的极性要强于异丙醇,所以一般用2倍体积乙醇沉淀,但在多糖、蛋白含量高时,用异丙醇沉淀可部分克服这种污染,尤其用异丙醇在室温下沉淀对摆脱多糖、
因为无论用哪种方法提取,沉淀DNA时总会加入高浓度的盐,加盐的目的是破坏能使蛋白质保持稳定的两个因素,使蛋白和DNA分离并沉淀下来.而此时盐的阳离子会与DNA结合形成DNA-阳离子盐溶于溶液中,再用无水乙醇可以将DNA-阳离子盐沉淀下来,但这样一来,DNA中就含有较多的盐离子,这势必会影响下一步实验的进行,所以要用70
可我提取的时候好像是用95%的乙醇沉淀的,而后再用70%的乙醇洗涤.1.为什么用无水乙醇沉淀DNA?用无水乙醇沉淀DNA,这是实验中最常用的沉淀DNA的方法.乙醇的优点是可以任意比和水相混溶,乙醇与核酸不会起任何化学反应,对DNA很安全,因此是理想的沉淀剂.DNA溶液是DNA以水合状态稳定存在,当加入乙醇时,乙醇会夺去
一 教学目的 1.初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法.2.观察提取出来的DNA物质.二 教学建议 在本实验的教学中,教师应注意以下几点.1.实验材料必须准备充足.本实验所用的实验材料是鸡血细胞液,由活鸡的鲜血经沉淀后获得.每组(2个学生)需用5 mL 鸡血细胞液,则每班(50人)至少需要130 mL,而鸡血细胞液与鸡血
用柱提取法,就是将70%乙醇加到柱子上,离心过柱,然后晾干以除去乙醇.不用柱子提取,那就是在70%乙醇中用枪头把沉淀的DNA轻轻挑起,离心管轻轻颠倒几次,离心. 再问: DNA轻轻挑起,会断裂吗?离心用多少转 再答: DNA没那么脆弱,动作轻点就好。 用无水乙醇沉淀的时候,加入无水乙醇要快速混匀,局部的高浓度乙醇一会使
一般95%乙醇和无水乙醇都是可以用来沉淀DNA的,而75%乙醇一般是最后几步用来洗涤DNA的.
主要是因为DNA在一定的盐浓度条件下才能更好地沉淀下来.如果你不急用其实可以沉淀过夜的.这样就可以少了75%乙醇洗涤的那一步,那一步主要是洗去多余的盐.急用的话就加吧,但是一定要用75%乙醇洗涤.
我们当时做实验的时候没有遇冷.不过遇冷后会降低DNA的溶解度更容易提取!
提问的女孩 因为低温可以促进DNA的沉淀,在DNA量很少的情况(比如你的实验)可以提高抽提效率.不过如果DNA量较多时,常温也没问题,比如我们做小鼠脚趾的基因型鉴定时,都是常温操作的,沉淀照样超多.
这个是要看情况的.平常我们都用异丙醇沉淀,因为它沉淀效果比较好,但是异丙醇不容易除去,要用乙醇洗,乙醇就很容易除去啦
看你提取的DNA是不是沉淀可以看到了.如果可以看到很明显的一片就把它轻轻的弹起来,浸泡几分钟再离心,反复2-3次即可.如果你提取的沉淀颜色很深可以早70%的乙醇中浸泡过夜(4度),第二天再漂洗1-2次.如果提取的沉淀很小肉眼看不清楚就只需要加70%乙醇浸泡后离心,千万别再弹起来,因为再次离心时贴壁不会很牢固,容易在弃上
一切与提取RNA有关的液体试剂,必须用DEPC水配制,这是最基本的要求,因为RNA降解酶的分布太广了,无处不在,放不胜防啊
1.DNA不溶于乙醇2.乙醇可以吸附水分子(极性相同),使得溶液中相对的水分子减少,增大了DNA在水中的相对浓度.3.附:乙醇沉淀DNA需要盐离子,用金属离子屏蔽DNA上磷酸的负电荷,降低DNA分子间的斥力,才能沉淀完全.
配制方法:在大烧杯中加入80mL去离子水,再加入300g 苯酚,在水浴中加热搅拌、混合至苯酚完全溶解.将该溶液倒入盛有200mL去离子水的1000mL分液漏斗中,轻轻振荡混合,使其成为乳状液.静止7~10小时,乳状液变成两层透明溶液,下层为被水饱和的酚溶液,放出下层,贮存于棕色瓶中备用.有商品化试剂更方便.
白色混浊即饱和了,沉淀后取清液即可.
常温下,苯酚在水中的溶解度不大,变白色混浊时即已经饱和.
提取基因组DNA和细胞核DNA是不同的方法提取细胞核要先把细胞破碎分离出细胞核,要在甘油或其他保护剂中进行SDS十二烷基磺酸钠:可破坏细胞膜、核膜,并使组织蛋白与DNA分离CATB是一种抽提液,破坏细胞膜的~具体忘了~DNA不溶于异丙醇,异丙醇可以析出DNA,产生白色絮状沉淀,用枪头挑出就可以了以下是一些具体方法,希望}

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