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版权所有& CopyRight , , All Rights Reserved平板划线分离法和稀释涂布法优缺点
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2平板划线法分离菌种与斜面接种培养
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下载所得到的文件列表平板划线法分离微生物纯种的一个经验.pdf
文档介绍：
平板划线法分离微生物纯种的一个‘经验复旦大学生物学系周德庆张文治强义国纯种分离,是任何微生物学实验中最常加的技术。纯种分离方法有两类,一是单细胞或泡子分离,二是单菌落分离。后者因方法简便,且不需要特殊的仪器设备,所以是一种常规的分离方法。通过形成单菌落以获得纯种的具体方法甚多,如平板划线分离法,平板表面涂布分离法,以及浇注平板培养基作稀样分离的方法等。其中最常用的为平板划线分离法。这种方法是把混杂在一起的微生物或! 一微生物群体中的不同细胞,通过一在固体培养基平板表面作多次的由点到线的划线稀释,从而得到许多独立分布的细胞,再经适当培养后,每一细胞就发展成一个菌落。由# 每一菌落一般是由一个细胞繁殖而成的子细胞集团,因而通常就把一个单菌落作为某一微生物的“纯种”。划线的形式有多种。根据我们在教学工作中的经验,提出了在一个平板上分成四个不同面积的小区而进行划线的方法。初学者如果掌握以下儿个原则,不但可取得较高的成功率,而且线条也比较匀称美观。%分四区划线,各区面积不同。划线前,可把整个平板分成&、、(、) 四区。& 区主要是作待分离的菌源,、( 两区是逐级稀释的过渡区,) 区是关键区,主要使其出现大量的单菌落,以供挑选“纯种”之用。由于划线分离的目的是取得较多的典型单菌落,所以)区面积应最大,其次是(,再次才是,而&区应最小见图。%承傅文瑜和褚美萍同志协助摄影,谨志谢意。图 四区面积分配) 下+ 歹, & 及划线线条模式图%划完& 区,随即烧去环上的残菌。作划线用的菌源,以长在固体培养基上的菌苔为好。挑菌量不宜过多。按图划完& 区后,应随即烧去接种环上的残菌,这样,尽管& 区接种量变化幅度较大,也不至显著影响以后各区的分离效果。.%划线动作应轻巧,线条宜平行而密集。为了在有限的平板面积上获得良好的稀释效果,在划线时应尽量发挥腕关节的作用,动作轻巧敏捷,线条平行密集。各区之间的转角应掌握在
/。左右,这样,) 区的线条正好与&区平行注意) 区切勿触及& 区或 区 0。除以上三点外,还应遵循一般划线时所必须掌握的一些要点,例如,平板不能浇得太薄 1平板培养基内的琼脂含量不应低于 2 ,平板最好在使用前一天倒成,并放夕、. 3 ℃培养箱中倒置过夜,以去除平板表面的水膜1划线用的接种环,环柄宜稍长约/ 厘米,环口宜园滑 1以及在划线时,接种环与平板间的交一 4角宜小以防止划破平板,等等。作平板划线时,可用左手取出预先倒好的平板皿底,以近乎垂直的方向放在火焰旁,用右手执接种环,并随之以上述介绍的方法进行划线。分离结果可见图。图啤酒酵母的平板划线分离结果叭认阳咖脚、‘哪卜,呐俩州、卜叭认肠叼护口喇5卜州、卜峭份妇决万扭巩6而肠介劫阳济叭叭喃协、份阳叫加占沪加州劫阳耐加困劫加峭份加确卜毗协吊叭场,气,碑碱、认%, 彻卜哟伽期钧肠%心卜叫拟卜叫伽‘呐卜叫彻料、伽呐卜% 刃内’甘阴7 勺 8%7 7 气绝封 9生:江苏省南通市第十三中学8%7 7 气:蛛 0七一7一主桂庆伟大的祖国,地形复杂,气候多样,昆虫种类繁多,单就鳞翅目锤角亚目而言,据文献记载,就有.。。余种。在这么多的蝴蝶里,最有趣的要算枯叶蝶又名木叶蝶了,它具有惊人的模拟枯叶的本领,翅形奇特,尖角突出,犹如枯叶叶柄。翅背面鳞片美丽。黑褐色。后翅色深,呈蓝色闪光。前翅中间为一条黄褐色宽带,其下方有卵园形透明斑一枚。脉序纵横似叶脉。翅腹面斑纹褐黄色。一且栖息枝上,酷似一片拈叶,以致蝶叶真伪难辨,从而避过敌害。因此,枯叶蝶一直成为生物学中“保护性拟态”的著名实例。枯叶蝶栖息于无叶的粗枝上,并不息于有叶的细枝上。它休息时,头部向外,尾部朝向主干,但在有的书和图片上常将枯叶蝶设计成头朝主干,尾部向外停息。这样的布局,诚能达到维妙维肖,真假莫沸,摹拟枯叶形态的境地,但这是出于人为的“想象”,实与大自然界里的客观事实不符。%枯叶蝶多分布于我国南方各省树木茂盛的山岳地带,出没于悬崖峭壁下,葱郁的混交林间。雄蝶常常飞栖在溪涧水上; 一 3尺处的阔叶树木的无叶枝条上,以等候雌蝶飞过追逐交尾。如你在此地挥网兜捕,极易获得成双的枯叶蝶。但它们一受惊扰,立即飞入丛林,栖息于藤蔓树枝或沿山峭壁上,或一直飞越山顶,另觅栖息场所。枯叶蝶的幼虫,以马兰等植物为食。雌蝶产卵在寄主植物上方 7
尺处的树木枝条上。一旦虫卵孵化,幼虫就沿着吐出的细丝下降,随风荡漾,坠落于寄主植物的叶面上,取食叶片,完成生活史的一环。立·7
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细菌的平板划线分离法
　　细菌的平板划线分离法是中西医执业助理医师考试的考察内容，主要考点整理如下：　
　　在被检标本中，常混杂有多种细菌，平板划线分离法可使这多种细菌在培养基表面分散生长，各自形成菌落，以便根据菌落的形态及特征，挑选单个菌落进行纯培养。常用的平板划线分离法有以下两种：
　　1.连续划线分离法：此法主要用于杂菌不多的标本。用接种环取标本少许，于平板1/5处密集涂布，然后来回作曲线连续划线接种，线与线间有一定距离，划满平板为止。
　　2.分区划线分离法：本法适用于杂菌量较多的标本。先将标本均匀涂布于平板表面边缘一小区（第一区）内，约占平板1/5面积，再在二、三、……区依次连续划线。每划完一个区，均将接种环灭菌一次。每一区的划线均接触上一区的接种线1、2次，使菌量逐渐减少，以获得单个菌落。
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