如何防止RNA酶污染？【生命科学吧】_百度贴吧
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如何防止RNA酶污染？收藏
在所有RNA实验中，最关键的因素是分离得到全长的RNA。而实验失败的主要原因是核糖核酸酶（RNA酶）的污染。由于RNA酶广泛存在而稳定，一般反应不需要辅助因子。因而RNA制剂中只要存在少量的RNA酶就会引起RNA在制备与分析过程中的降解，而所制备的RNA的纯度和完整性又可直接影响RNA分析的结果，所以RNA的制备与分析操作难度极大。在实验中，一方面要严格控制外源性RNA酶的污染；另一方面要最大限度地抑制内源性的RNA酶。RNA酶可耐受多种处理而不被灭活，如煮沸、高压灭菌等。外源性的RNA酶存在于操作人员的手汗、唾液等，也可存在于灰尘中。在其它分子生物学实验中使用的RNA酶也会造成污染。这些外源性的RNA酶可污染器械、玻璃制品、塑料制品、电泳槽、研究人员的手及各种试剂。而各种组织和细胞中则含有大量内源性的RNA酶。一、防止RNA酶污染的措施1.所有的玻璃器皿均应在使用前于180℃的高温下干烤6hr或更长时间。2.塑料器皿可用0.1% DEPC水浸泡或用氯仿冲洗（注意：有机玻璃器具因可被氯仿腐蚀，故不能使用）。3.有机玻璃的电泳槽等，可先用去污剂洗涤，双蒸水冲洗，乙醇干燥，再浸泡在3% H2 O2 室温10min，然后用0.1% DEPC水冲洗，晾干。4.配制的溶液应尽可能的用0.1% DEPC，在37℃处理12h以上。然后用高压灭菌除去残留的DEPC。不能高压灭菌的试剂，应当用DEPC处理过的无菌双蒸水配制，然后经0.22μm滤膜过滤除菌。5.操作人员戴一次性口罩、帽子、手套，实验过程中手套要勤换。6.设置RNA操作专用实验室，所有器械等应为专用。二、常用的RNA酶抑制剂1.焦磷酸二乙酯（DEPC）：是一种强烈但不彻底的RNA酶抑制剂。它通过和RNA酶的活性基团组氨酸的咪唑环结合使蛋白质变性，从而抑制酶的活性。2.异硫氰酸胍 ：目前被认为是最有效的RNA酶抑制剂，它在裂解组织的同时也使RNA酶失活。它既可破坏细胞结构使核酸从核蛋白中解离出来，又对RNA酶有强烈的变性作用。3.氧钒核糖核苷复合物：由氧化钒离子和核苷形成的复合物，它和RNA酶结合形成过渡态类物质，几乎能完全抑制RNA酶的活性。4.RNA酶的蛋白抑制剂（RNasin ）：从大鼠肝或人胎盘中提取得来的酸性糖蛋白。RNasin 是RNA酶的一种非竞争性抑制剂，可以和多种RNA酶结合，使其失活。5.其它：SDS、尿素、硅藻土等对RNA酶也有一定抑制作用。
登录百度帐号推荐应用酶的化学本质及其组成 酶的化学本质除了具有催化活性的RNA之外几乎都是蛋白质.但是.不能说所有的蛋白质都是酶.只是具有催化作用的蛋白质.才称为酶. 证明酶的化学本质是蛋白质的证据有以下几条. (——精英家教网——
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酶的化学本质及其组成 酶的化学本质除了具有催化活性的RNA之外几乎都是蛋白质.但是.不能说所有的蛋白质都是酶.只是具有催化作用的蛋白质.才称为酶. 证明酶的化学本质是蛋白质的证据有以下几条. (1)酶经酸碱水解后的最终产物是氨基酸.酶能被蛋白酶水解而失活. (2)酶是具有空间结构的生物大分子.凡使蛋白质变性的因素都可使酶变性失活. (3)酶是两性电解质.在不同pH值下呈现不同的离子状态.在电场中向某一电极泳动.各自具有特定的等电点. (4)酶和蛋白质一样.具有不能通过半透膜等胶体性质. (5)酶也有蛋白质所具有的化学呈色反应. (6)与蛋白质的分子量相似.结构相似. (7)在物理.化学因素作用下.也可变性沉淀. (8)做元素分析.与蛋白质的元素含量相似.可以用氨基酸人工合成. 按照酶的化学组成可以将酶分为以下两类. (1)单纯蛋白质酶 有些酶只是多肽链.除了氨基酸不含任何其他化学物质.也就是说有些酶是单纯蛋白质.如胰脏的核糖核酸酶.淀粉酶等. (2)结合蛋白质酶 有些酶除了蛋白质外.还含有一些对热稳定的非蛋白质类小分子物质或金属离子.即由蛋白质部分和非蛋白质部分组成.结合蛋白质酶的蛋白质部分称为脱辅酶.非蛋白质部分称为辅因子.脱辅酶与辅因子结合后所形成的复合物称为“全酶 .即全酶=脱辅酶+辅因子.在酶催化时.一定要有脱辅酶和辅因子同时存在才起作用.二者各自单独存在时.均无催化作用.脱辅酶部分决定酶催化的专一性.辅酶在酶催化中通常是起着电子.原子或某些化学基团的传递作用.大部分辅酶是维生素或维生素的衍生物. 【】
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美国及日本两个研究团队的报告中证实皮肤细胞经过“基因直接重组”后可以转化成为具有胚胎细胞特性的细胞。这项发现一方面解决了利用胚胎进行干细胞研究的道德争议，另一方面也使得干细胞研究的来源更不受限。请回答下列有关胚胎工程的若干问题。（1）人类的胚胎发育过程中，细胞分化开始于&&&&&&&&&阶段。（2）胚胎工程中的胚胎移植实际上是生产胚胎的&&&&&&&&和孕育胚胎的&&&&&&&&共同繁殖后代的过程。其生理学基础主要有哪些？&&&&&&&&、&&&&&&&&&（至少答出两点）。（3）美日科学家利用病毒分别将四个基因导入皮肤细胞，促使普通的皮肤细胞产生变化，最后成为带有胚胎干细胞性质的细胞。在基因工程中，这四个基因称为&&&&&&&&&，在基因工程中常用的工具酶有&&&&&&&&&。（4）在胚胎工程中可以利用连续胚胎细胞核移植的方式培育动物，该技术的优点是&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&。
美国及日本两个研究团队的报告中证实皮肤细胞经过“基因直接重组”后可以转化成为具有胚胎细胞特性的细胞。这项发现一方面解决了利用胚胎进行干细胞研究的道德争议，另一方面也使得干细胞研究的来源更不受限。请回答下列有关胚胎工程的若干问题。（1）人类的胚胎发育过程中，细胞分化开始于&& &&&&&&&阶段。（2）胚胎工程中的胚胎移植实际上是生产胚胎的&& &&&&&&和孕育胚胎的&& &&&&&&共同繁殖后代的过程。其生理学基础主要有哪些？&&&&&&&&、&& &&&&&&&（至少答出两点）。（3）美日科学家利用病毒分别将四个基因导入皮肤细胞，促使普通的皮肤细胞产生变化，最后成为带有胚胎干细胞性质的细胞。在基因工程中，这四个基因称为&& &&&&&&&，在基因工程中常用的工具酶有&& &&&&&&&。（4）在胚胎工程中可以利用连续胚胎细胞核移植的方式培育动物，该技术的优点是& &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&。&
美国及日本两个研究团队的报告中证实皮肤细胞经过“基因直接重组”后可以 转化成为具有胚胎细胞特性的细胞。这项发现一方面解决了利用胚胎进行干细胞研究的道德 争议，另一方面也使得干细胞研究的来源更不受限。请回答下列有关胚胎工程的若干问题。 （1）人类的胚胎发育过程中，细胞分化开始于&& &&&&&&&阶段。 （2）胚胎工程中的胚胎移植实际上是生产胚胎的&& &&&&&&和孕育胚胎的&& &&&&&&共同 繁殖后代的过程。其生理学基础主要有哪些？&& &&&&&&、&& &&&&&&&（至少答出两点）。 （3）美日科学家利用病毒分别将四个基因导入皮肤细胞，促使普通的皮肤细胞产生变化， 最后成为带有胚胎干细胞性质的细胞。在基因工程中，这四个基因称为&& &&&&&&&，在基因工 程中常用的工具酶有&& &&&&&&&。 （4）在胚胎工程中可以利用连续胚胎细胞核移植的方式培育动物，该技术的优点是& &&& &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& &&&。
美国及日本两个研究团队的报告中证实皮肤细胞经过“基因直接重组”后可以转化成为具有胚胎细胞特性的细胞。这项发现一方面解决了利用胚胎进行干细胞研究的道德争议，另一方面也使得干细胞研究的来源更不受限。请回答下列有关胚胎工程的若干问题。 （1）人类的胚胎发育过程中，细胞分化开始于&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 阶段。 （2）胚胎工程中的胚胎移植实际上是生产胚胎的&&&&&&&& 和孕育胚胎的&&&&&&&&& 共同繁殖后代的过程。其生理学基础主要有哪些？&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 。（至少答出两点） （3）美日科学家利用病毒分别将四个基因导入皮肤细胞，促使普通的皮肤细胞产生变化，最后成为带有胚胎干细胞性质的细胞。在基因工程中，这四个基因称为&&&&&&&&& ，在基因工程中常用的工具酶有&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 。 （4）在胚胎工程中，可以利用连续胚胎细胞核移植的方式培育动物，该技术的优点是&&&&&&& 。
豌豆素是野生型豌豆天然产生的一种抵抗真菌侵染的化学物质。用两个无法产生豌豆素的纯种（突变品系1和突变品系2）及其纯种野生型豌豆进行杂交实验，F1自交得F2，结果如下：组别亲本F1表现F2表现Ⅰ突变品系1×野生型有豌豆素3/4有豌豆素，1/4无豌豆素Ⅱ突变品系2×野生型无豌豆素1/4有豌豆素，3/4无豌豆素Ⅲ突变品系1×突变品系2无豌豆素3/16有豌豆素，13/16无豌豆素研究表明，决定产生豌豆素的基因A对a为显性。但另一对等位基因B、b中，显性基因B存在时，会抑制豌豆素的产生。（1）根据以上信息，可判断上述杂交亲本中，野生型、突变品系1、突变品系2的基因型分别为　　　　、　　　　、　　　　。（2）第Ⅲ组的F2中，无豌豆素豌豆的基因型有　　种。（3）为鉴别第Ⅱ组F2中无豌豆素豌豆的基因型，取该豌豆自交，若后代全为无豌豆素的植株，则其基因型为　&&&&&&　；若后代中　　　　　　　　　　，则其基因型为　　　　　　　。（4）现有纯种亲本4，其基因型与上表亲本均不同，它与其他豌豆杂交的F1中，　　（有/没有）能产生豌豆素的植株。（5）进一步研究得知，基因A是通过控制酶A的合成来催化一种前体物转化为豌豆素的。而基因B－b本身并不直接表达性状，但基因B能抑制基因A的表达。请在右侧方框内尝试用概念图（文字加箭头的形式）的方式解释上述遗传现象。
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下列有关化学物质的叙述正确的是 A．酶的化学本质是蛋白质或RNA，具有高效性，一般不直接参与代谢反应 B．抗体与淋巴因子的化学本质都是蛋白质，不具有微量高效的特点 C．不同的化学本质可能是不同的，但都有微量高效的特点，一般可以直接参与细胞内的代谢反应 D．神经递质一般都是小分子有机物，在神经调节中使突触后膜兴奋
答案:B【解析】试题分析：酶的化学本质是蛋白质或RNA，具有高效性，起催化作用，直接参与代谢反应；抗体和淋巴因子都是蛋白质，不具有微量高效的特点；不同的化学本质可能不同，可能是蛋白质、固醇等，具有微量高效的特点，不直接参与细胞内的代谢反应，起调节作用；神经递质是小分子有机物，作用于突触后膜，使之兴奋或抑制。考点：考查化学物质的特点和作用。点评：难度中等，理解酶、激素、、淋巴因子和神经递质的特点和作用。
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【求助】75%的乙醇能不能使RNA酶降解?
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这个帖子发布于9年零57天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
我带手套做实验,但是也避免不了,会去摸一些东西,我的手套摸过东西后,我用75%的乙醇清洗手上手套,请问大家,我要无RNA酶操作,我用75%的乙醇清洗手上的手套,能不能降解我手套上的RNA酶呢?
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显然不能。勤换手套就可以了。
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哦,真没办法呀,老板说了,做一次实验只能带一双手套,悲哀呀?有没有好办法呀?
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还是勤换吧
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RNA酶活性很稳定，它耐热耐酸碱，就是煮沸也不能使其失活，蛋白变性剂可使之暂时失活，一旦去除变形记后RNA酶又会恢复活性。异硫氰酸胍是一种RNase最有效的抑制剂。但是不清楚能不能像酒精那样喷洒到手套上使用。至于你说的能使酶降解的试剂我还不清楚有没有
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手套是要勤换的，毕竟是做RNA水平的，你说污染了RNA划算还是节约一双手套划算了？可以问问你们的老师。
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RNA酶主要存在什么地方，通过什么途径可以传播么？
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空气中，口气中等等，为什么会说RNA容易降解呢？主要就是到处都有不可避免的RNA酶
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晕 一次实验一双手套 什么手套这么金贵啊
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带口罩能阻止RNA酶吗？实验室开空调做RNA实验可以吗？
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个人认为也许是个实验操作习惯问题，你就是戴RNase free的手套还是赤裸着双手，都不会起决定性作用，因为你的手不会直接接触RNA。只要确保直接接触RNA的东西RNase free，再不要发生什么小意外，一切就OK了。
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是真的吗？做RNA的实验，所用的枪头不用DEPC水处理，可以吗？
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买DNAse,RNAse free的就可以了,不放心的话可以再高压灭菌下.
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