3-12 % bis-bis tris gel胶怎么配

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Life Tech- 新型Bolt
Bis-Tris Plus凝胶
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中国生物器材网 电话:021-4~12%Bis-Tris Gradient Gel
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4~12%Bis-Tris Gradient Gel
4~12%Bis-Tris梯度胶
聚丙烯酰胺凝胶电泳预制胶
Precast&Gels&for&PAGE
PG10&Series:&Bis-Tris&Precast&Gels&
PG10系列:Bis-Tris预制胶
Specifications&of&Precast&Gels(预制胶参数):&
*&Cassette&dimensions(胶板尺寸):&10cm&x&9.0cm&x&4.8mm&
*&Gel&dimensions(凝胶尺寸):&8.6cm&x&6.8cm&x&1mm&
*&Storage&conditions(存储条件):&up&to&1&year&at&2~8&C&
*&Stacking&gel(浓缩胶):&4%&polyacrylamide&
*&SDS&content(SDS成分):&none
*&Sample&buffer(上样缓冲液):&Tris-HCl-SDS&(any&type)
Compatible&gel&tanks&for&Precast&Gels(适配电泳槽):
&&&&Mini-PROTEAN&(Bio-Rad&伯乐)
&&&&VE-180&(天能)
&&&&DYCZ-24DN&(北京六一)
&&&&Vertical&Minigel&System&(Fisher&Biotech)
&&&&XCell&&&Surelock&(Life&Technologies)
&&&Tall&Mighty&Small&&&Mighty&Small&&&Mini&VE&System&(Hoefer)
&&&&EC&4-Cell&(IBI&Universal&Protein&System)
&&&&Mini&2-Gel&&&6-Gel(Daiichi)
&&&&Mini&4-Cell&(GradiGel)
Product&Advantages(产品优势):
★★★Lower&price:Batch&production&automation,&costs&are&lower.
&&&&&&&&更低廉的价格:批量自动化生产,成本更加低廉。
★★★Patent&production&technology:Product&quality&is&more&stable&and&reliable,&better
&repeatability.
&&&&&&&&专利生产工艺:产品品质稳定可靠,重复性好。
★★☆Better&performance:&Neutral&PH&system&produces&excellent&separation&and
&high-resolution&protein&bands
&&&&&&&&效果更优:蛋白条带在中性pH体系能得到良好的分离效果和高分辨率。
★★☆Long&shelf&life&&&up&to&12-month&
&&&&&&&&保质期长:长达12个月有效期
★☆☆High-Compatible&&&cassettes&fit&many&popular&mini-gel&tanks
&&&&&&&&&&高兼容性:适配市面上流行的迷你电泳槽。
☆☆☆Multiple&Choice&&&Eight&gel&densities,&available&in&gradient&(4~12%,4~16%,4~20%
&and&8~16%)&and&fixed&(8%,&10%,12%&and&15%)&.
&&&&&&&&&多种选择:8种胶浓度,包括梯度(4~12%,4~16%,4~20%&和&8~16%)和等浓度(8%,&
10%,12%&和&15%)
Order&information订货信息:
Product&Name&
Product&Description&
8% Bis-Tris Precast &Gel
10well,30ul
Just suitable&for&&
&Tris-MOPS-SDS &&
Tris-MES-SDS
&running&buffer
10%&Bis-Tris Precast &Gel
12%&Bis-Tris Precast &Gel
15%&Bis-Tris Precast &Gel
4-12% Bis-Tris Precast Gel
4-16%&Bis-Tris Precast Gel
4-20%&Bis-Tris Precast Gel
8-16%&Bis-Tris Precast Gel
《中华人民共和国电信与信息服务业务经营许可证》沪ICP备号【求助】请问Tris在配胶中的 作用 - 经验共享 - 分析测试百科网 - 分析测试百科网
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【求助】请问Tris在配胶中的 作用
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请问Tris在胶凝固中的作用是什么 ?
谢谢查看完整版本请点击这里:
NBA ( 21:19:22)
【1】胶的组成:
10%分离胶和4%浓缩校
10%分离胶(两块胶,10ml) ~~~~ 4%浓缩胶(两块胶,5ml)
超纯水 : 4.85ml ~~~~~~~~~~~~0.5ml
1.5 mol/L TrisoHCl(pH8.8): 2.5ml ~~~~~ 0
0.5 mol/L TrisoHCl(pH6.8): 0 ~~~~~ 1.26ml
10%SDS : 100 微升 ~~~~~ ~~~~ 50 微升
10%AP(过硫酸胺): 50 微升~~~~ ~ 25 微升
TEMED : 5 微升 ~~~~~~ ~~~~ ~~ 5 微升
加TEMED后,立即混匀即可灌胶。
【2】说一下每种物质的作用。
凝胶主要就是丙烯酰胺和N,N’-亚甲双丙烯酰胺形成聚丙烯酰胺的过程。
(1)丙烯酰胺和N,N’-亚甲双丙烯酰胺:形成凝胶(聚丙烯酰胺)的基本物质。
(2)过硫酸胺(AP)溶液:相当于催化剂的作用。提供两种丙稀酰胺聚合所必须的自由基。
(3)TEMED:也起加速反应的催化剂的作用。催化过硫酸铵形成自由基而加速两种丙稀酰胺的聚合。
(4)Tris:主要是和蒸馏水混合,然后加入HCL,调节PH值,形成TrisoHCl,主要起胶的缓冲液作用。
PPT ( 21:19:57)
非常感谢!那Tris对胶的凝固起的作用是不是不大?
我的胶总是不凝,原因可能是Tris和丙烯酰胺,丙烯酰胺已经按分子克隆重新配过,但胶还是不凝.好难过啊!!! Sad 恳请各位分析原因.确定其他几样没错.
fox_79 ( 21:20:37)
胶不凝主要是因为过硫酸胺(AP)或者TEMED加的量不够或者失效了。我以前也出现过这种情况,后来换了瓶AP就好 了。
abc816 ( 21:20:54)
AP可能性更大些,这个是配胶的组分里面,最娇气的
买一瓶新的,然后每次不要配太多,分装成一两百微升,大约就是两块胶的分量,放到-70度存放,每次就拿一管来用,不要反复冻融,配完胶就放回冰箱,不要一直放在外头
如果是冬天的时候不凝,可能只是温度因素,放到空调下面或者其他热的地方就好了。
另外好奇的文艺下,只是要缓冲的话,为什么一般都用tris?磷酸盐或者其他缓冲盐可以吗?
NBA ( 21:21:50)
哈,AP和TEMED相当于催化剂的作用,适当增加二者的用量,胶不凝固的情况就改观了。
damingxia0904 ( 21:22:08)
我也碰到过不凝的现象,至今不明白,但是师兄把药品都重新配了之后就凝了,真是邪门.按理说我配得时侯是很小心的,应该没有配错的.唯一可能的原因就是设的PH值不太对.
ero11 ( 21:22:52)
APS聚合过程中作为引发剂,提供氧自由基,由氧自由基引发单体的丙烯酰胺形成自由基形式的丙烯酰胺从而与甲叉聚合,溶液常温易分解,一般4度,你j检查APS是否分解了;TEMED作为增速剂,它在中性和碱性条件下形成游离碱,APS只有在存在这种游离碱的环境中才能形成氧自由基,因此二者的浓度会影响到聚合,特别是TEMED的加入量甚少,有时我会遇到这种情况,用的枪头是国产的,枪头有的堵上了根本吸不到,另外就是枪头没套紧吸的量不对导致聚合很慢,你加时注意看有没有吸到或者加入胶时看胶的变化,TEMED和溶液的互溶不是很容易,刚加入会看到像在水中加油那种状态很容易分辨出是否加入了TEMED。另外就是Tris缓冲液的pH,酸性条件下TEMED无法形成游离碱,结果上面已介绍,还有就是温度,现在的温度没问题,试剂的纯度,我深有感触,以前用invitrogen的现在用其他牌的,反差真是太大,全方位的差距;还有分子氧,一般SDS胶用的试剂都未脱气,混匀时不要剧烈混合,枪吹吸即可,分子氧会阻碍碳链的延长从而阻碍聚合。
wanglaoshi ( 21:23:09)
凝胶不聚合的原因
APS或TEMED的量不够,可增加催化剂的量
试剂质量差,使用电泳级的试剂
APS TEMED失活,配制新的储存液
聚合时温度太低
guagua ( 21:23:31)
APS 出问题的可能性最大. 可以加倍APS的用量, 或换新的APS, 或者放在37度进行聚合, 使胶凝固.
sunnyB ( 21:23:49)
说一下我的胶不聚合的原因,有的可能很白痴,就当给各位同行提个醒吧
1. APS是旧的导致胶不凝,这个比较常见。
2.TEMED是Promage的,要求低温(4度)避光保存,结果那瓶试剂放置室温过久,所以加进去没起到催化作用,光闻味儿了。
3. A液中,甲叉用错了,没看清试剂标签,又加了0.8g单丙。
4.单丙放置时间过久,这一点可能对整块凝胶的聚合不会产生毁灭性的影响,但是会导致胶凝的不均匀,或者部分地方很容易碎。
vtongli ( 21:24:08)
楼上的兄弟们揭示的很清楚了,我一半都现用现配过硫酸铵,10%的。。。。国产的分析纯就可以
toy ( 21:25:40)
同意楼上,现用现配过硫酸铵,10%的。。。。国产的分析纯就可以,很方便,天气凉的话,可以放置在37度中,凝固得要快些.除了楼上的常见不凝原因之外,个人认为很多时候是新手不够熟练,加错东西或量加的不对的问题
xingyi08 ( 21:26:40)
我刚开始做时拔梳子时,哪个齿老是立不直,排除原因是发现每一样都可影响胶的效果,除了APS和TEMED外,10% SDS的配置、30%聚丙烯酰胺、TRIS.HCL的PH不合适也可以影响
pou ( 21:26:59)
我也是 前两次的胶都不凝 换了一瓶新的AP就OK了 不妨试一试 多半是AP和TEMED的问题
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