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单细胞凝胶电泳的操作流程与注意事项
单细胞凝胶电泳的操作流程与注意事项
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单细胞凝胶电泳(又名彗星实验)的操作流程主要包括单细胞悬液的制备、凝胶板制备、细胞裂解与解旋、电泳与中和、染色和观察等步骤。本文总结了单细胞凝胶电泳操作步骤和注意事项，希望对初入实验的同学有帮助。
一、分离制备单细胞悬液：
体外培养的细胞株：用胰酶消化，最后用PBS悬浮吹打成单细胞悬液，细胞要计数，具体的量我前边已经说过。
体内脏器细胞：处死动物，取出脏器，于Hanks’液中制备成单个细胞悬液。
二、胶板制备：
取100 μl于45 ℃水浴中保温的0.5%NMA，铺于磨沙载玻片上，形成底胶。盖玻片推匀，不能有气泡，4度凝固5至8分钟。
水平取下盖片，取100 μl于37 ℃水浴中保温的0.5%LMA与20μl细胞悬液(约400个细胞)混匀，立即铺片，加上盖玻片，4度凝固5至8分钟。
三、细胞裂解与电泳：
将制备好的胶板去掉盖玻片后，浸于4 ℃预冷的细胞裂解液中，在4 ℃下裂解2.5到3小时。
取出胶板，用双蒸水浸没漂洗后放入电泳槽中，浸泡在4 ℃预冷的电泳液中解旋20分钟。
玻片水平放置阳极端附近，4 ℃电泳20到25分钟(25 V，300 mA)。可在电泳槽周围加冰块以保持低温。
四、中和与染色：
电泳结束，将胶板浸泡于中和液中，每次10分钟，共中和3次，每次要更换中和液。最后晾干。
取出胶板，置于染色缸中，在2 μg/ml的EB染色液中，暗处染色5到10分钟。
蒸馏水漂洗2次，每次5分钟。
稍晾干，滤纸吸去多余水分，尽快在荧光显微镜下观察。
注意事项：
细胞一定要消化成单个的，如果你养的细胞是悬浮生长的，或者形状是圆形的(例如hela)，那么你可以直接用细胞刮收细胞做，否则，如果细胞是非圆形的，例如成纤维细胞等，一定要用胰酶消化，使之成圆形，然后才可做实验。很多做彗星实验总是出不来结果的，可以考虑下是否是这方面的原因。
电泳时，电流与电压强度在每次实验时要恒定(例如：20 V，200 mA恒定)，这样出来的慧尾才有分析价值，否则你不知道分析因素的差异是由电泳条件的改变引起的还是细胞处理不同引起的。
关于掉胶的问题：盖玻片最好两面都涂上剥离硅烷(挺便宜的一大瓶，但是有毒)，这样会好很多
裂解液是整个实验中最关键的因素，裂解液最终使用时必须是澄清没有任何沉渣的，如果没有溶解好是肯定影响实验的，如果常温不容易溶解的话可以放入4 ℃冰箱中一段时间，就比较容易溶解了
小结：本实验所有操作步骤从胶板制备开始到最后都应该在暗光或者红光下操作，实验的关键步骤是凝胶制备，一定要均匀平整无气泡，此外要避免试验中细胞裂解液等有毒物质对自己的伤害。
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阴极电泳漆与阳极电泳漆的不同点及生产工艺介绍
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阴极电泳漆与阳极电泳漆的不同点及生产工艺介绍
阴极电泳漆工业化产品应用时间不长，但由于突出的抗腐蚀性能，高的泳透力及库仑效率，给工业涂装提供了有生命力的涂料品种，已广泛用于涂装。但它仍有许多不完善之处，需要改进，今后研制开发的方向除继续提高抗腐蚀性能外，应使PH值更接近中性，以减少对设备的腐蚀，降低涂装线成本，研制新的反应型的树脂，大幅度降低固化温度以节约能源，发展供浅色涂装用涂料等。
涂装过程与阳极电泳基本相同，但有以下几个方面应注意：
1、被涂物即金属工件是阴极。电源电极应作相应的连结。
2、由于阴极电泳漆工作液呈酸性，故对电泳槽要作相应的防腐蚀处理（衬里涂层），管道，循环装置，超滤装置应作相应的考虑。
3、不象阳极电泳那样，隔膜装置是必颓的，因此有专门的阳极用隔膜，及阳极室，阳极液循环调整装置。
4、被涂物金属表面的化学处理要求质量更严格，电泳设备超滤装置有新的考虑，以保证沉积膜的质量和减少环境污染。
阴极电泳漆目前较为流行的有丙烯酸树脂、环氧树脂和聚氨脂等。所有阴极电泳漆都有清漆和色漆两类。清漆由有机树脂、稳定剂、乳化剂等组成。色漆除上述组成外，还加入固体颜料研磨而成。根据产品的不同要求，可选用清漆或色漆涂装。
清漆：可涂装在镀银、仿金层及黄铜抛光件的表面上。漆膜特点：透明性好，漆膜薄而均匀，防护装饰效果好。
彩色清漆：适用于底层为光亮镀镍、抛光铝等表面，经电泳后再染色、固化，可获得古铜色、金色、红、绿、兰等透明彩色膜。
漆膜特性：彩色透明、金属观强、防护装饰效果好。如灯具、眼镜架及工艺品等。
色漆：适用于所有金属表面。现有发光黑色、亚光黑色、灰色、奶白色、红色、绿色漆等。漆膜特性：漆膜丰满、色彩鲜丽、漆膜较厚，但漆膜不透明。可用于自行车车把、仪表机壳、金属家具以及抗蚀性要求高的汽车底漆。
工艺流程：
(1)电泳清漆、基材前处理&镀金、镀银、镀仿金、镀彩色层或黄铜抛光&清洗&去离子水洗&阴极电泳清漆&去离子水洗&清洗&固化。
(2)彩色清漆：基材前处理&光亮镀镍或抛光铝等&清洗&去离子水洗&阴极电泳&去离子水洗&染色&清洗&固化。(也有直接电泳成彩色清漆工艺)
(3)色漆：基材前处理(包括磷化)&清洗&去离子洗&阴极电泳&去离子水洗&清洗&固化。
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在选购工业幕墙型材铝材时 应注意些什么
来源：网络
发布时间： 13:54
本司经过二十余年的艰苦拼搏现已成为集技术、研发、生产、销售、服务为一体的大型综合性企业，坚持“以人为本，诚实守信，追求卓越，开拓创新”的企业理念，本着做大做强的思路，得到了飞速的发展，现已拥有两个生产基地，是天津市最大的铝型材生产企业，也是华北地区重要的铝型材生产企业之一。
具有年生产“大邱庄牌”电泳香槟百叶型材、电泳白香槟百叶型材、电泳黑香槟百叶型材、净化铝型材、75净化板铝型材、75净化铝型材、75净化房铝型材、75净化车间铝型材、50净化板铝型材、50净化房铝型材、50净化车间铝型材、50净化铝型材等100净化铝型材、幕墙型材、门窗型材、百叶型材、工业型材、散热器型材、电动百叶窗型材、百叶窗型材、电动伸缩门型材、三翼门两翼门型材、各种规格铝管、肯德基门型材、格栅型材、断桥隔热门窗型材、铝角、铝管、铝板、铝棒及免费开模具等各种规格型材；表面处理：阳极氧化、静电粉末喷涂、氟碳喷涂、电泳白、立体手感木纹、电泳香槟、电泳拉丝、木纹转印等各种铝合金型材8万余吨的能力。
随着现代生活水平的提高，人们对于自家的装修也越来越重视，那么对于我们来说在选择幕墙型材的时候应该注意哪些地方呢？ 幕墙型材所具备的要素。首先必须要有一个非常好的延展性。所谓的延展性也就是说在伸缩性或者是柔韧性方面具备一个非常好的要素，这些对于我们来说也是非常重要的。其次就是一个款式的多样性，因为每一个家庭对于装饰的要求是不一样的，那么只有经过多个层面的考虑之后，才能够达到最佳的装饰需求。
另外，记者了解到， 现在市面上也流行着一种叫做天津铝管，这种铝管不仅使用的范围比较广，而且对于我们来说也具备了多方面的优势，只有站在不同的角度进行有效的处理的话，往往才能够达到最佳的一个性能优势。
而现在个性化的装饰也越来越多，有的客户在市面上也根本就找不到自己所需要的材料，那么在这样的情况下的话，也可以通过使用天津铝型材特殊加工来实现自己购买的想法，在个性化设计，专业性设计等方面，只要我们能够根据自己的实际需要来进行选择购进的话，往往能够带来非常好的优势。
虽说是一种材料，但是在购买，使用，或者是其他要素等方面，或者是说在每一个细节方面都能够根据自己的实际需要来进行加以设计的话，那么往往也能够给我们带来最佳的一个性能上的改变了。发表于&&0条回复&&2048次阅读&&&&&&
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　　众所周知，电泳相比于常规喷涂方式来说，是目前用来涂装金属工件中最有效的一种方法之一。它是将具有导电性的被涂金属工件浸泡在装满水稀释的、浓度比较低的电泳漆槽中作为阳极(或阴极)，再在槽中设置对应的阴极(或阳极)，最后在两极间接通直流电一段时间后，在被涂物表面沉积出均匀细密、不被水溶解涂膜的一种特殊的涂装方法。因此其电泳漆可以按照其被涂工件的电极的不同，分为阴极电泳漆、阳极电泳漆两种。而在这种电泳漆产品中，阴极电泳漆是最受用户喜爱的一种，那么阴极电泳漆与阳极电泳漆有什么区别呢?下面飞扬来为大家讲解一下：　　阳极电泳漆：　　在电泳历史的初期阶段，人们使用的电泳漆产品都是阳极电泳漆。阳极电泳漆主要成膜聚合物是阴离子型树脂，中和剂为无机碱或有机胺，如KOH、一乙醇胺、三乙醇胺、三乙胺等。在现今主要应用于铝制品，因为铝材氧化后用阳极电泳漆保护，其光泽度可以保持在50-90度之间，且漆膜较薄，因此在铝型材行业上的应用较广泛。　　但是，经过长期的使用与研究发现，阳极电泳漆在其它金属制品上应用有很多的先天不足：　　1、电泳漆自身特点——其合成的树脂必须是水溶性的，所以必须在聚合物分子链上引入一定量的强亲水性基团，例如羧基，羟基，醚基等。但是这些强亲水性基团的引入会导致阳极电泳漆的耐碱性、耐盐雾性、耐用水性能均欠理想。　　2、在阳极电泳漆中所进行涂装的工件都是以阳极来进行涂装的，因为阳极溶解之故，则在电泳过程中会使被涂的基体金属以及表面处理膜(如磷化膜)在电沉积过程中被析出而混入到漆膜中，这种现象不仅会使漆膜色泽变深，而且还会降低漆膜的耐蚀性。　　3、在进行电泳涂装时，由于在阳极区发生电解产生的氧气对树脂影响很大，特别是对于漆液的稳定性方面。因此在电泳涂装过程中，必要时还须要加入抗氧剂以维持漆液的稳定。　　：　　阴极电泳漆主要采用阳离子型树脂做为成膜聚合物，中和剂则为甲酸、乙酸、乳酸等有机酸，其在水中可以离解成为阳离子的聚合物，最常用的村脂有环氧树脂和聚胺酯等。其阴极电泳漆是继阳极电泳漆后，所诞生的一种新产品，它相比于阳极电泳漆来说，具有比较多的优势：　　1、阴极电泳漆的泳透力要比阳极电泳漆高出1.3-1.5倍，因此即使当阴极电泳加工复杂工件，内腔也可获得很好的涂装，可以有效地省略辅助电极，简化了电泳涂装工艺和材料消耗，减少成本。　　2、阴极电泳漆的耐腐蚀性好，其在脱脂钢板上耐蚀时间超过了经磷化处理的阳极电泳漆;同样的裸钢板电泳一般是为阳极电泳漆的3-4倍。而在锌盐磷化钢板上，其耐蚀性则为阳极电泳漆的2-3倍，在某些情况下甚至还可以10倍之多，其耐腐蚀性可以说是相当显著的。　　3、根据相关的从实验数据证明，阴极电泳漆的耐碱性相比于阳极电泳漆来说更高，其阴极电泳加工膜的的耐碱性(5%NaOH溶液)通常可以比阳极电泳漆膜高20-40倍。而且阴极电泳漆液比较稳定，容易控制，不似阳极电泳漆那么容易受杂质离子和微生物的影响而变质。通过上述内容分析，我们可以发现，阴极电泳漆对比阳极电泳漆具有较多的优势，特别是在泳透力、耐腐蚀性、耐碱性…等方面，因此大部分的用户都会选择阴极电泳漆来进行涂装使用。本文出处：
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