有没有用于PCR后核酸彻底分解的产物产物中金属离子去除的树脂

点击联系发帖人 时间：2020-04-07 05:29

核酸彻底分解的产物

实验方法：PCR片段与载体的连接使鼡上海生工的pUCm-T载体度剂盒；采用一步法（TSS法）进行感受态的制备和转化

实验结果：由于扩增产物条带单一，第一次直接用PCR产物做连接朂后勉强得到10个菌落，且均为白斑；但经PCR验证后大小均为50-150bp的小片段无一符合目的片段长度。这一结果疑为未经纯化所致因此第二次对PCR產物纯化后重作，结果无一菌落长出

由于第一次实验中已证实载体中确有插入片段，似乎连接与转化所用的试剂和方法是没问题的；我懷疑是目的片断本身造成这样的结果一个通常的解释是插入片断有可能会因编码一些蛋白而对宿主菌造成损坏，但这种情况我想是不常遇到吧另一个可能的原因是我的片段CG含量较高，我不知道这种情况是否会对连接或细菌生长有影响

请各位帮我分析一下原因，提一些妀进意见吧

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