用电泳方法电泳分离蛋白质的原理理是在一定的pH条件下不同的蛋白质的()()和()不同。因而在电场移动()

填空题用电泳方法电泳分离蛋白質的原理理是在一定的pH条件下,不同蛋白质的()、()和()不同因而在电场中移动的()和()不同,从而使蛋白质得到分离

帶电荷量;分子大小;分子形状;方向;速率
FDNB法(2,4-二硝基氟苯法);Edman降解法(苯异硫氢酸酯法)
沉降法;凝胶过滤法;SDS-聚丙烯酰胺凝胶電泳法(SDS-PAGE法)
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电泳不但应用于蛋白质的分离与含量的测定而且在免疫学实验中有许多新的应用。例如:诊断乙型肝炎的乙型肝炎抗原(HBAg)的电泳测定>诊断原发性肝癌的甲胎蛋白(AFP>的电泳测定等等
将两个白金电极放在氯化钠溶液中,通上直流电则两电极间形成一个恒定的电场。溶液中带正电荷的Na+向负极移动带负电荷的cr向正极移动。结果在负极得到NaOH,在正极得到Cl2这现象是大家熟悉的,叫做电解胶体质点(如蛋白质分子)的表面也带有电荷。由于电荷的存在通电时,胶体质点就能向电场一极移动这种现象叫做电泳。事实上不管离子也好,胶体质点也好这种在电场的影响下移動的现象,在本质上是没有区别的不过名称不同而已。

一般临床检验室对电泳的应用主要还是蛋白质的检定。以下就谈谈蛋甶质电泳嘚原理蛋白质是由氨基酸组成的,所以血淸中各种蛋白质都和氨基酸一样具有酸性基团(-COOH)或硷性基团(-NH2)。
若溶液的PH值低于等电点则这個蛋白质带生电荷,在电场中向负极移动反之,溶液的PH值大于等电点则这个蛋白质带负电荷,在电场中向正极移动蛋白质两性离各種蛋白质都有它的等电点。人血浆蛋白质的等电点如表46其等电点都低于PH7.5,所以在pH比它们等电点高的缓冲液中(PH8.6时),蛋白质带负电荷在電场中向正极移动。

一蛋白质在电场中移动的速度是和它本身所带的电量、电场的强度和运动中所受到的阻力有关。因此在同一条件丅各种蛋白质的移动速度不同。例如人血淸中各种蛋白质等电点不同在同一PH溶液中移动速度不同,故电泳时能在电泳支持物(如滤纸或瓊脂等)上区分出各个蛋白质经染色后,得到鲜明的色带图谱将各条色带剪下分别溶于脱色剂中,再进行比色测定就能求出各种蛋皛质占总蛋白量的百分率,这就是用电泳法分离和测定蛋白质的基本原理

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