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中国药科大学99-10年生物化学真题问答题汇总
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师姐说我的96孔板为什么要洗呢？已有7人参与
一天做ELISA，新板刚开封，我要用PBST洗三次，学食品的一个师姐（她平时用板做细胞）问我为什么要洗呢，那不是新的吗？我想了想，说可能是先润润的道理吧？大家认为主要是什么原因呢？还是大家做的时候不洗呢？
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洗啊，刚买的板子是要洗的
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为啥要洗呢？尤其是注有灭过菌的更不用。
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一次性的不用洗，反复用的得好好洗净！
dasheng1980
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洗洗更健康
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洗啊，刚买的板子是要洗的 哦，原来是常识啊，呵呵
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一次性的不用洗，反复用的得好好洗净！ 您是说回收的要洗不回收的不用洗直接包被，是吗？谢谢啦
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洗洗更健康 呵呵，很健康！
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用生物化学方法从植物内生真菌提取液中高通量筛选细菌β-内酰胺酶抑制物
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内容提示：用生物化学方法从植物内生真菌提取液中高通量筛选细菌β-内酰胺酶抑制物
biochemical high throughput screening of bacterial β-lacta
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用生物化学方法从植物内生真菌提取液中高通量筛选细菌
官方公共微信MTT及种96孔板体会(必读)(反应时间,加样顺序,上清,边缘) - 细胞实验 - 生物秀
标题: MTT及种96孔板体会(必读)(反应时间,加样顺序,上清,边缘)
摘要: [MTT及种96孔板体会(必读)(反应时间,加样顺序,上清,边缘)] 本人做了2周MTT，结果一直不理想，浓度之间误差大，副孔之间差异大，但每次大体趋势相似。原因主要在于细胞接种方法不合理和加DMSO一步。经验总结如下（纯属个人总结）：1、消化细胞前，用PBS冲洗2遍，去除死亡的细胞，减少计数误差。2、不要触摸96孔板底面，以免影响OD值。3、细胞周围的孔PBS填充，避免“周围效应”（水分蒸发造成的浓度改变）。4、加样时，慢吸、慢加，贴壁加，尽量是细胞分布均匀（细胞 关键词:[反应时间 加样顺序 边缘 上清 死亡 接种方法 分布均匀]……
本人做了2周MTT，结果一直不理想，浓度之间误差大，副孔之间差异大，但每次大体趋势相似。原因主要在于细胞接种方法不合理和加DMSO一步。经验总结如下（纯属个人总结）：1、消化细胞前，用PBS冲洗2遍，去除死亡的细胞，减少计数误差。2、不要触摸96孔板底面，以免影响OD值。3、细胞周围的孔PBS填充，避免“周围效应”（水分蒸发造成的浓度改变）。4、加样时，慢吸、慢加，贴壁加，尽量是细胞分布均匀（细胞易向周围分散）。5、如果横向设浓度、纵向设副孔，则加样顺序为从左到右、从上到下，加完一行再加下一行。加的过程中不断摇晃细胞悬液，开始及每加完一行吹打混匀一次。6、加MTT时，要慢，保证能看到液滴滴入孔内，光线亮点没关系。7、反应时间不严格，反应结束后吸上清时，将板倾斜45度，不要吸到底面的甲鐟颗粒，要洗干净（可接触孔低的边缘，可用1000ml的枪会提高速度）。8、最后加入DMSO后，因为颜色会随时间变深（效果较明显），如果操作时间过长，会导致孔与孔之见反应时间差异太大，影响结果。所以这一步操作要迅速，加样顺序同第5条。一次MTT试验种的孔数量不要太多，影响操作速度。200ul移液枪一定要好用。9、上机前，观察孔底颜色是否均匀，若不均匀可轻拍几下。10、初次做药物毒性试验，浓度梯度应宽，浓度点尽量多。观察，药物浓度在一定范围时与活细胞数（OD值）呈线性，过高或者过低会相对呈现平台。问题：为了孔之间减少DMSO反应时间的差异，最好把所有的孔吸干后再加DMSO。但是，这样可能会造成前面的孔底干燥，这样是否影响结果？
回复那楼主具体是怎么接种的，是接了一块板还是多块啊回复那楼主具体是怎么接种的，是接了一块板还是多块啊种一块而且没种满，多了操作不过来。
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