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紫杉醇与三氧化二砷联合作用于人结肠腺癌LS-174T细胞系的研究.pdf 46页
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紫杉醇与三氧化二砷联合作用于人结肠腺癌LS-174T细胞系的研究
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佳木斯大学硕士学位论文 论文题目：，}杉霸口可三牵化=砷联合作用于人结膊J象癌
LS—174T细胞Jt的研兜
指导教师：
王跃生教授
单位：佳木斯大学
协助指导教师：金锡尊教授
单位：佳木斯大学
周默-巍教授
单位：佳木斯中心医院
学习期限：2003年09月至2006年06月
学位授予单位：佳木斯大学
学术诚信承诺
本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工 作及取得研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方 外，论文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，也不包含为获得 佳木斯大学或其他教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我一同工 作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明并表示
关于论文使用授权的说明
本人完全了解佳木斯大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学 校有权保留送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可以公布 论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论 文。
(保密的论文在解密后应遵循此规定) 签名：塞j邋导师签名：型
日期：口∥。石、盯
佳奉颧人学碗+研究生论文
紫杉醇与三氧化二砷联合作用于人结肠腺癌细胞系的研究
目的：以入结肠腺癌Ls一174T细胞系作为体外模型，研究紫杉醇与三氧化二砷联合 应用抑制增殖及细胞凋亡双重作用的机理。 联合作用于体外培养的人结肠腺癌Ls．174T细胞系，以MTT比色法和形态学观察
V． FIT℃、PI染色、共聚焦显微镜检测其对入结肠腺癌LS．174T细胞系的凋亡诱导作 用。 结果： 后，从形态学上可明显观察到对入结肠腺癌Ls．174T细胞的抑制作用强于单用5、 V．FITC、PI染色、共聚焦显微镜可检测到大量凋亡的人结肠腺癌LS一174T细胞，
明显多于单用5肛lol／L的1敬01和2pmol／L的As203组。 结论：紫杉醇与三氧化二砷联合应用于人结肠腺癌Ls-174T细胞时，二者具有抑制 其增殖的协同作用，并可明显诱导细胞凋亡发生。这为临床上结肠癌的治疗提供了 一个具有可行性的科学依据。 关键词：紫杉醇：三氧化二砷；结肠癌 苎苎苎苎竺垒生坠生!堡兰丝型
英文摘要 The
ofthetreatmentof
andarsenictrioxideoⅡHuman
pnliminary
CeIILineLS-174T． CoIorectalCancer
witharsenic
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0敏01)combining objective：Tbinvestigate
humanc010rectalcancercelllineLS—174T trioxide(As203)on
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LS-174T细胞,人结直肠腺癌细胞
LS-174T细胞,人结直肠腺癌细胞
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生&产&地：中国大陆
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&旗舰版第 2年
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联系人：王梦华，阿仪网看到您的。
LS-174T细胞,人结直肠腺癌细胞首先每一种细胞的消化时间都不同，甚至不是同一次的原代消化时间可能也有差异，第一次消化时要注意，时间可以尽量短些，第二，不能只看镜下的状态，有时镜下还没有松动，但其实在你弃去胰酶的时候的冲涮作用足以把细胞冲掉。所以时间还是要短，LS-174T细胞,人结直肠腺癌细胞第三，在一定时间消化完后，要用吸管吸去胰酶，不要直接倒掉胰酶，这样液体的冲涮作用足以把细胞冲掉！
详细内容公司简介
&LS-174T细胞,人结直肠腺癌细胞培养的质量好坏是细胞相关实验的基石，许多朋友都曾经历过因为细胞污染影响实验进度的郁闷，被老板批评是小事，要是影响到正常毕业就是大事了。怎么分辨细胞污染，是不是细胞污染？是那种细胞污染？细胞污染后如何处理？预防污染细胞培养是个细致活儿，一不小心就会造成污染，最好养成良好无菌操作习惯。个人经验是，进实验室之前最好洗手，很多实验者都不bother，这是国人研究者的一种极端错误，我告诉大家，你仔细洗手比喷酒精效果还好。最好的是肥皂/香皂仔仔细细的洗手，一直到手腕，指甲缝都要洗。洗两遍是一个不错的选择。实验必备白大褂，而且一定要是长袖，袖口扎紧的那种，如果不能的话，把袖口窝向手臂。裸露的手腕部分一定也要喷酒精。最好是戴上手套后手请避免接触工作台外面，如果不得已接触，那再喷酒精。LS-174T细胞,人结直肠腺癌细胞实验前，超净台/实验间紫外照射30min，细胞培养室有24h的空气消毒装置更好了。操作前70％ 酒精擦超净台消毒，酒精擦手，擦培养瓶，擦培养基瓶以及各种瓶子的口，总之，所有进超净台的物品最好都用酒精擦拭一遍。拿培养瓶和培养液时候尽量托下面 拿，切忌不要拿瓶颈部位。有一点要注意的是，超净台里面的东西一定要尽量少放，东西太多活影响超净台内空气流通及空气除菌。实验过程中尽量避免打闹说笑。每天观察细胞状态，一旦发现细胞不对劲（比如生长缓慢）立即进行处理。一些刚接触细胞的朋友可能有时拿不准情况，也迫切的希望得到帮助。怎么分辨细胞污染，是不是细胞污染？是那种细胞污染？细胞污染后如何处理？细胞污染鉴别方法LS-174T细胞,人结直肠腺癌细胞这里告诉您判断污染的方法：如果是细菌污染，应该很快培基就浑浊了。如果是真菌感染，特 别是初期感染，在低倍镜下可以看到小黑点，特别是成团的小黑点，要特别注意。如果无法确定，就换高倍镜，如果是死细胞，高倍镜下就可以分辨，而真菌高倍镜 下仍然是小黑点。有些（比如支原体）污染，镜检是看不到的，但是细胞的生长异常。所以如果细胞生长异常，那么请扔掉，同时由于支原体空气传播，请检查自己 的培养液和培养箱是不是污染。白色念珠菌是人体霉菌感染的常见霉菌种类，尽管我们有时感觉不到，但它就在你我的身边甚至身上存在着。霉菌污染多来自空气， 所以做实验时说话聊天，或瓶口敞开时间太长，还有培养箱开关频繁是主要原因，应多找自身原因。培养箱水盘最好一个星期用酒精或0.2％的新吉灭擦一次，如果有紫外线照射就更好了一旦细胞污染了，怎么解决呢？一旦细胞污染了，怎么解决呢？当然如果你的细胞仍有富余或者冻存的，我还是建议你把污染 的扔掉，再复苏方便省事。如果不幸没有，就不得不救活细胞了。对于细菌污染（常见为金黄色葡萄球菌和大肠杆菌），可以用普通双抗（链霉素和青霉素）处理； 若为霉菌或者真菌污染，加入两性霉素B清洗和培养，LS-174T细胞,人结直肠腺癌细胞终浓度一般为2.5&g/ml（在30&g/ml时会有细胞毒性）。另外也可以选择在培养基里加3ug/ml的制霉菌素或放线菌素D。若为支原体或者黑胶虫污染，因为这个太难处理，处理的代价更大更麻烦，建议直接扔掉算了。以免造成实验室其他污染就得不偿失了。对于贴壁生长的细胞，相对来说比较简单但很麻烦。以下我主要讨论贴壁生长的细胞。洁净区，并不是没有细菌，而是细菌的数量非常少，国家标准100级的洁净标准是浮游菌数不得超过5个每立方米，沉降菌数不得超过1个每培养皿。而国外的标准比我国的还要高一点，要求的数量更少。所以在我们的洁净操作台里，并不是真正一个细菌都没有的，所以在操作的时候还是要尽量利索迅速地完成操作。尽量减少进入培养体系细菌的数量。所以处理细菌污染的重要原则就是：无限地稀释细菌的浓度，无限地减少细菌的数量！1）将污染的培养液倒掉，转烧瓶口，加入10mlPBS，适当晃动清洗培养瓶，然后倒掉。转烧瓶口。2）继续加入10mlPBS，同样方法晃动，清洗培养瓶，然后倒掉。3）继续加入5mlPBS，同样方法洗瓶，主要是培养面，然后倒掉。4）重复步骤3再洗。5）重复步骤3再洗。6）加入3-5ml双抗，洗瓶，静置3-5分钟，然后吸出。7）加入3ml双抗，洗瓶，静置3-5分钟，然后吸出。8）再加入5mlPBS洗瓶，然后吸出。9）加入10ml培养液，加入2ml双抗，放置培养箱培养，5小时之后，倒掉培养基，加入PBS洗瓶两次，然后加入胰酶消化，吹打后置于800-1000r/min离心，然后洗一次。置于新的培养瓶里培养，培养体系加入2ml双抗。10）24h之后，视情况换液，若仍然污染严重，培养基浑浊，重复以上步骤，若看不到污染物，则继续步骤1)、3）、4）、6）、8），然后加入培养液培养，培养体系加入2ml双抗.11）24h之后，若仍污染严重，可再重复一次，若还污染只能弃之（不过一般没有出现这种情况），若镜下不见污染物，则换液PBS洗瓶，正常培养。LS-174T细胞,人结直肠腺癌细胞很多人有个误区，认为进口血清都是贵，其实不然。GIBCO的NCS，马血清，都比国产的便宜的多，质量好的多。只有FBS才很贵，很多时候国产血清往往是污染源，所以用国产血清要严格监控状态。以上方法主要是针对贴壁生长的细胞，在操作的过程中，一定要小心操作动作，轻柔缓慢，切忌大动作鲁莽。防止细胞脱落。以上方法操作得当，基本上都能救活你的细胞。这个拯救细胞还是主要针对你就只剩这一瓶细胞无路可退的时候。&非洲绿猴肾细胞CV-1 [Part of the Wistar Special Collection]非洲绿猴肾细胞Vero非洲绿猴肾细胞VERO C1008 (E6)恒河猴胚肾细胞FRhK-4恒河猴肾细胞LLC-MK2猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞RF/6A绒猴EBV转化的白细胞B95-8负鼠肾细胞OK狗肾细胞MDCK(NBL-2)狗肾细胞Super Tube鸡胚成纤维细胞UMNSAH/DF-1鸡淋巴瘤细胞DT40猫肾细胞CRFK猫肾细胞F81牛胚气管细胞EBTr (NBL-4)牛肾细胞MDBK (NBL-1)袋鼠肾细胞Pt K1 (NBL-3)猪髋动脉内皮细胞PIEC小鼠胚胎细胞NIH/3T3小鼠胚胎成纤维细胞3T3-Swiss albino小鼠胚胎成纤维细胞3T6-Swiss albino小鼠SRSV转化的3T3细胞SRSV/3T3小鼠Mo-MuLv感染的3T3细胞Mo-MuLV/3T3小鼠胚胎成纤维细胞BALB/3T3 clone A31小鼠胚胎成纤维细胞C3H/10T1/2, Clone 8小鼠胚胎成纤维细胞Psi2 DAP小鼠成纤维细胞L929
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中国药理学通报　ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ　２０１３Ｊｕｎ；２９（６）：７７８～８２ 网络出版时间：２０１３－５－２８１４：４４　网络出版地址：ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／３４．１０８６．Ｒ．２０１３０５２８．１４４４．００９．ｈｔｍｌ
相关ｍｉＲＮＡｓ对 ＬＳ１７４Ｔ细胞中ＭＲＰｓ的影响
应梦佳，毕惠嫦，胡冰芳，周许年，金　晶，钟国平，黄　民
（中山大学药学院药物代谢与药动学实验室，广东广州　５１０００６） ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－１９７８．２０１３．０６．００９
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植物、线虫和人类的细胞中。ｍｉＲＮＡ通过不完全结 摘要：目的　探讨相关ｍｉＲＮＡｓ对多药耐药蛋白ＭＲＰｓ转录
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ｌａｔｅｄｒｅｇｉｏｎ，３′ＵＴＲ）互补匹配导致该 ｍＲＮＡ分子的 ＭＸ?ｍｉＲ?２０６及ｐＣＭＸ?ｍｉＲ?６１３表达质粒转入 ＬＳ１７４Ｔ细胞，
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