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【求助】为什么用HAT换成HT培养基
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这个帖子发布于7年零163天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
请问各位大侠，在筛选杂交瘤后期为什么将HAT换成HT，可以直接换成1640吗？谢谢！
不知道邀请谁？试试他们
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为什么选择，HAT，HT——首先知道他们的作用是什么？1.HAT系次黄嘌呤（hypoxantin）、氨基蝶呤（aminopterin）和胸腺嘧啶脱氧核苷（thymidin）三种物质各英文首字之缀列，HAT培养基也就是指含有这三种物质的细胞培养基。对具有合成DNA原料的核苷酸的形成上，在细胞内具有起始合成途径（de novo pathway）和中间合成途径（salvage pa-thway）。由于氨基蝶呤可阻碍起始合成途径，所以培养基中含有它时，细胞便只有中间合成途径，所以必须供给核苷酸。至于缺失中间合成途径的细胞——sp2/0，可失去增殖能力而死亡。脾细胞有中间合成途径——在这种情况下，利用HAT培养基可对杂交瘤细胞进行选择。次黄嘌呤和胸腺嘧啶脱氧核苷可作为中间合成途径的原料而进行添加。2.换成HT：刚融合筛选出来的细胞还是很脆弱，所以要H,T作为原料——使杂交瘤细胞能够生长起来~~~也可以用HAT，不过此时A已不重要，没有必要继续添加3.价格因素也是有的
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原理楼上的基本都说得很清楚了，但是从实际应用的角度来说，如果你们的经费承担的起，建议使用HT，在过渡阶段提供原料。但是很多公司并没有使用HT，从实验来看不使用也是可以的，但是可能某些生存能力较差的细胞株会丢失，活下来的都是坚强者。
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HT一般自己配制的话，过滤分装储存使用很重要，如果嫌麻烦不用的话，对筛选一般的抗体是可以了。
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HAT培养基是不是有一定的抑菌作用
我们的实验课，本科生第一次做细胞融合实验，操作过程很多步骤都没有做到无菌操作，奇怪的是大家的结果都没有染菌；但是刚开始养骨髓瘤细胞的时候，大家用1640培养基的，半数的人都染菌了。我想问一下，是不是HAT培养基有一定的抑菌作用啊，就是细菌等能不能再HAT培养基中存活？其中具体的原理是什么啊？有没有大神能帮我解答一下疑问，在线等解答，谢谢~~~
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什么是培养基?
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培养基（Medium）是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）以及维生素和水等.有的培养基还含有抗菌素和色素.按所用原料不同,可分为两类：应用肉汤、马铃薯汁等天然成分配制的,称为天然培养基；应用化学药品配成并标明成分的,称为合成培养基或综合培养基.化学试剂中的培养基,大多为合成培养基.由于液体培养基不易长期保管,现在均改制成粉末.培养基由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同.一般培养基在受热、吸潮后,易被细菌污染或分解变质,因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存.对一些需严格灭菌的培养基（如组织培养基）,较长时间的贮存,必须放在2~6.C的冰箱内.
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