我的sf9前列腺液白细胞怎么治是怎么了

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  Leibovitz's L-15 Medium——30-2008
  SF9细胞细胞冻存和复苏实验原理:细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融,实验证明这样可以最大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂,这两种物质能提高细胞膜对水的通透性,加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外,减少细胞内冰晶的形成,从而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。复苏细胞应采用快速融化的方法,这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化,避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损伤。
  SF9细胞细胞冻存和复苏实验注意事项:
  1. 从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存,但最好为对数生长期细胞。在冻存前一天最好换一次培养液。
  2. 将冻存管放入液氮容器或从中取出时,要做好防护工作,以免冻伤。
  3. 冻存和复苏最好用新配制的培养液。
 SF9细胞冻存和复苏的原则:慢冻快融
  当细胞冷到零度以下,可以产生以下变化:细胞器脱水,细胞中可溶性物质浓度升高,并在细胞内形成冰晶。
  如果缓慢冷冻,可使细胞逐步脱水,细胞内不致产生大的冰晶;相反,结晶就大,大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重结晶。
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请教一下刚复苏的SF9和sf21细胞&&有股味道&&细胞镜检都正常 悬浮培养的复苏时没有去DMSO&&以前复苏时没有去注意有没有味道 最近连续复苏了三次 都有这种情况 不知道是否正常?
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细胞镜检都正常就应该没有什么问题,只要传几代后,生长正常就可以(例如每24小时左右分裂一代)。
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先把味道来源搞清楚啊
该用户从未签到
生物秀举人
是不是细胞或者培养基有什么问题,你可以试试换液,换瓶子试试看,在看看会不会有染菌现象
该用户从未签到
fengyatoudengni 发表于
是不是细胞或者培养基有什么问题,你可以试试换液,换瓶子试试看,在看看会不会有染菌现象
换了三批冻存的细胞&&以前也用过的&&应该不是细胞问题&&培养基也不会&&因为还有前一批的细胞在养&&也都好好的&&瓶子的话&&已经换了一次性的了&&
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生物秀举人
佐罗传奇 发表于
换了三批冻存的细胞&&以前也用过的&&应该不是细胞问题&&培养基也不会&&因为还有前一批的细胞在养&&也都好 ...
前一批的细胞和你现在培养的细胞是一样的吗?SF9和SF12属于昆虫细胞对吗?你首先要搞清楚你养的这样细胞的习性等一些问题,我觉得你都换液,换瓶子之类的都尝试过的,我个人觉得也有可能是细胞本身所分泌的物质有异味,导致细胞培养液的有味道,坚持隔段时间观察细胞的状态看看是不是有染菌现象;以上是我个人的建议
该用户从未签到
fengyatoudengni 发表于
前一批的细胞和你现在培养的细胞是一样的吗?SF9和SF12属于昆虫细胞对吗?你首先要搞清楚你养的这样细胞的 ...
恩&&谢谢&&已经解决了&&怀疑是刚复苏的细胞&&因为没有去除DMSO 导致有一股味道&&前三天置换了培养基&&现在没有味道&&生长状态也正常&&
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生物秀举人
佐罗传奇 发表于
恩&&谢谢&&已经解决了&&怀疑是刚复苏的细胞&&因为没有去除DMSO 导致有一股味道&&前三天置换了培养基&&现在 ...
互相学习,除去DMSO是离心吗?还是
该用户从未签到
fengyatoudengni 发表于
互相学习,除去DMSO是离心吗?还是
直接离心&&转速低点&&我们一般用500g&&对细胞伤害小
更新你的简历,加入生物秀人才库,高薪工作基因编辑峰会支持人类胚胎研究(胚胎、基因细胞治疗:生物医药产业下一个风口(细胞治生物秀论坛手机版全新改版,更快速度,更好体聚焦“基因剪刀”奠基人的科研历程
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murongxiaoxiao大叔级摄影爱好者,喜欢分享绝对零度积极有责任心,热心公益事业yiii红米达人,爱拍照的北京女孩关注今日:82 | 主题:483919
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【求助】我的sf9细胞是怎么了?老长不好!
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这个帖子发布于8年零188天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
养的sf9细胞,碎片很多,而且碎片常与细胞聚集成团。刚刚传代分瓶时,看起来细胞还不错,光亮的,等到贴壁后,细胞似乎变形了,还有很多碎片?请问,是否吹打太过所致?我是用自己弯的滴管吹打的。改如何避免吹打太过,如何去除碎片?谢谢高人指点迷津!
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更糟的!麻烦高人诊断一下,是不是感染了野生病毒啊,细胞都碎裂了,而且包内很多颗粒样!上面好些的是加大FBS到20%的!
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sf9, high 5等昆虫细胞,只要吹打太过,就会在刚传完时看起来细胞还不错,光亮的,等到贴壁后,细胞变形了,还有很多碎片,然后死亡,。用自己弯的滴管吹打不好,用10ml的移液管最好,吹打3-5次,就可以了,不要舍不得弃细胞如何去除碎片:1 低速离心 800r.p.m
2 淋巴细胞分离液分离
3 自然淘汰
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您好!再请帮我看下细胞,诊断一下!这是染毒了的细胞,胞内出现空泡了,不知道是细胞状态不行了,还是病毒在复制!因为病毒液是还未进行鉴定的,前面转染后看不到症状,所以还未鉴定,想先增加滴度了再鉴定!结果就出现了图片中的状况!请您再帮我解释下,好吗,再次感谢!
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您好!看到您也在养sf9细胞,不知道您是哪里的?我也在养sf9,但一直养不活,快急死了。不知道方不方便分我一瓶?万分感谢!
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昆虫细胞Sf9细胞的传代
昆虫细胞Sf9细胞的传代
来源:互联网
点击次数:9366
说说昆虫细胞Sf9细胞(一种昆虫表达系统的宿主细胞): Sf9细胞生长条件:27℃、无需CO2、既可悬浮生长也可贴壁生长、培养基SF-900Ⅱ(无血清)。悬浮培养时把细胞在悬浮培养瓶中,要有滚动装置(若无上述装置可把培养瓶放在小摇床上&200rpm摇振陪养)。贴壁培养时可把细胞在悬浮培养瓶中直接静置30-60分钟即可贴壁,传代时不用消化,用吸管轻轻吹打即可使细胞脱落下来,一般三天传一次代。 就我个人经验,悬浮培养更方便,细胞生长状态也不错。尤其对刚复苏的细胞最好先进行悬浮培养。待细胞长满或需要细胞时,用吸管把细胞吸入离心管中,1000转离心5分钟,然后弃掉上清,用手指将离心管中的细胞弹打均匀,加新培养基,吹打均匀即可分到另外一瓶中。原来瓶中可再加新培养基继续摇振陪养。
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