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& Brdu 5-溴-2′-脱氧尿苷
英文名称 : 5-Bromo-2′-deoxyuridine
别名 : 5-BrdU 5-溴-1-(2-脱氧-β-D-呋喃核糖)尿嘧啶 5-溴脱氧尿苷
CAS : 59-14-3
分子式 : C9H11BrN2O5
分子量 : 307.10
储存条件 : -20°C
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Brdu说明：DNA病毒的抑制剂。在免疫组化中的应用：BrdU标记细胞免疫组化染色(SP法)，BrdU(溴化脱氧尿嘧啶核苷)可以在体内和体外掺入到处于S期的细胞所合成的DNA链中，以标记DNA。
特性：纯度：≥99% (HPLC)
熔点：191-194 ℃
溶解性：溶于水（参考浓度10mg/ml），也可溶于DMF或DMSO（参考浓度50-100mg/ml）。
Brdu溶解：
在1M的氢氧化铵中的溶解度为50mg/ml；在水中的溶解度为10mg/ml。也可以溶于DMF、DMSO和水（加热），溶解度在50-100 mg/mL.。0.16 - 500 mg/mL的BrdU可以抑制胚胎肾细胞细胞的生长，1.0 mg/mL有较强的抑制作用。
Brdu应用：
在免疫组化中的应用：BrdU标记细胞免疫组化染色(SP法)，BrdU(溴化脱氧尿嘧啶核苷)可以在体内和体外掺入到处于S期的细胞所合成的DNA链中，以标记DNA。通过流式检测BrdU的掺入量可以从单个细胞水平评价DNA合成细胞频率。用于在单细胞水平检测功能性激活，即同时检测DNA合成、细胞表面激活抗原表达以及胞内细胞因子分泌。包括在BrdU存在下培养激活的单个核细胞，固定通透后，以抗BrdU荧光抗体检测BrdU的摄取。同时，以适宜浓度的DNA酶使胞内DNA变性，加强掺入BrdU与抗体的亲和力，同时保留胞内蛋白结构和荧光素荧光强度。此方法避免了DNA变性条件与胞内及表面标志同时检测条件的冲突。持续的BrdU的掺入可以用于确定和分析处于DNA合成活跃状态的细胞，区分于那些处于静止期的细胞，从而进行细胞增殖比例的分析；另一方面，不同时间点加入BrdU，可以分析细胞周期动力学。
BrdU掺入研究已在很多实验中得到广泛开展，包括体外和体内标记实验。
注意事项：该品对肌体有不可逆损伤的可能性。使用时应穿防护服和戴手套。应避免吸入本品的粉尘。　　生物通报道& 近日来自耶鲁大学医学院的研究人员在实验研究中发现一种被广泛用于细胞研究中的BrdU标记技术有可能导致神经发生研究产生错误的结果。这篇在线发表在《神经科学杂志》（Journal of Neuroscience）杂志上的研究论文引起了神经科学界的高度关注，国际顶级学术期刊Nature网站在10月18日的每日新闻中对其进行了详细报道。
BrdU是一种胸腺嘧啶核苷的类似物（其化学结构特点是胸腺嘧啶的碱基嘧啶环上与5位C原子连接的甲基被溴代替），它能像胸腺嘧啶核苷一样掺入到细胞合成的DNA中。当细胞处于DNA合成期而同时又有BrdU存在时，就会有BrdU掺入新合成的DNA中，只要细胞不消亡，这种BrdU就在胞核的DNA中长期存留。
数十年来研究人员将BrdU标记技术常规地用于跟踪监测细胞的分裂、存活、分化和功能状态，尤其在神经发生研究中用于鉴别发育大脑新生成的神经元。此外，它也被广泛地应用于成体哺乳动物大脑的大量神经学研究。
“BrdU对我们了解神经发生的时限及模式可谓是贡献良多，”文章的共同作者、耶鲁大学医学院神经生物学家Pasko Rakic说。
而此次在这项新研究中，Rakic与他的同事Alvaro Duque在恒河猴中展开了一项对比检测试验。他们分别在不同的胚胎发育阶段向一个实验组中的7只恒河猴注射了BrdU，而第二组的恒河猴则被注射了另一种DNA标记氚胸腺嘧啶。
以往的研究表明两种标记物能在啮齿类动物中生成接近的实验结果。研究人员解释此次他们采用猴子作为模型动物是因为它拥有更大的大脑，发育更为缓慢，这使得他们能够更详细地监测到大脑发育过程中的细胞事件。
作者们在对胚龄在两个半月到3个月之间的恒河猴的大脑进行检测后发现两种不同方法标记的细胞在数量和分布上出现了显著的差异，用BrdU标记的细胞比用氚胸腺嘧啶标记的细胞分布更为弥散
研究人员解释说这些差异是由于BrdU在结构上完全不同于胸腺嘧啶所造成的，因而有可能导致随机突变对研究的细胞造成不可预知的影响。
&“许多利用BrdU的神经学家有可能并不清楚它对于DNA结构和功能产生的副作用，或许也并不了解它可能潜在的毒性，”Rakic说道。
此外，BrdU还能标记那些濒死细胞或修复这些细胞的DNA。“BrdU并不是一种新细胞的特异性标记物，”Rakic说：“需要特别说明的是，所有的分裂细胞都能被BrdU标记，但并非所有BrdU标记细胞都在进行细胞分裂。”
在胚胎发育研究中，当多数细胞发生细胞分裂时，这些因素不会导致明显的问题。然而如果研究者们用BrdU来对出生后以及成体大脑组织中的细胞增殖进行定量分析则可能导致生成错误的数据。
&“这对于开展神经发生研究的科学家们而言无疑是个可怕的消息，”美国NIH国立老年研究所神经科学家Jason Snyder说。长期以来Snyder都采用BrdU标记技术在啮齿类动物中开展成体神经发生研究。
&“幸运的是目前尚未在啮齿类动物中观察到这些差异，”Snyder说：“因为大多数的神经研究目前都是在大鼠和小鼠上开展。但BrdU有可能仍然对啮齿类动物产生了微妙的副作用，这项研究提醒我们要意识到这种可能性。”
尽管存在着这些限制，BrdU仍然是目前研究神经元生成、活动及终末命运最可靠及最廉价的一种检测方法。法国国家健康和医学研究院（Inserm）下属干细胞和脑研究所所长Henry Kennedy表示这一研究的意义在于提醒广大的科研工作更加审慎地注意到这些标记技术的局限性。
（生物通：何嫱）
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Different Effects of Bromodeoxyuridine and [3H]Thymidine Incorporation into DNA on Cell Proliferation, Position, and Fate
As markers of DNA synthesis, [3H]thymidine ([3H]dT) and the later developed analog bromodeoxyuridine (BrdU) have revolutionized our ability to identify dividing cells and follow their fate in various tissues, including the nervous system. However, the effect of the incorporation of these molecules into DNA on cell proliferation, migration, differentiation, and function is not fully understood. Here, we compare the number and distribution of labeled cells in the cerebral cortex of postnatal macaque monkeys exposed to either [3H]dT or BrdU as embryos. The large size and prolonged brain development in this species allows higher resolution of cellular events and more accurate discrimination between the two methods. Our analysis revealed substantial differences in the number and distribution of labeled cells. The data indicate that random incorporation of the thymidine analog BrdU into the genes of dividing cells makes the fate of postmitotic neurons more prone to unpredictable errors than the incorporation of the more natural DNA constituent nucleotide [3H]dT. These findings have implications for the interpretation of results obtained by BrdU as an index of the number of neurons produced, and their migration, placement, subsequent connectivity, function, and survival.
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<font color="#0-5—BrdU在洋葱DNA中的掺入与姐妹染色单体交换--《杭州师范学院学报(社会科学版)》1988年03期
5—BrdU在洋葱DNA中的掺入与姐妹染色单体交换
【摘要】：本文对洋葱的姐妹染色单体的分染方法作了改进。洋葱鳞茎在100ug/ml BrdU溶液中连续培养2个细胞周期。秋水仙素前处理,卡诺氏液固定,酶解压片、冰冻揭片、空气干燥2—7天。切片在2×SSC溶液中65℃温育60分钟,同时用6W×2UV线灯照射,灯距标本4—5cm,水洗后Giemsa染色15分钟,可获得反差明显的分染效果。 洋葱的培养温度在23℃以下,BrdU容易掺入。BrdU替代Thymine后,对染色体的结构产生影响,使螺旋化程度降低。掺入的难易与基因型有关,因此筛选易掺入材料,对环境检测有其独特的价值。
【关键词】：
【正文快照】：
姐妹染色单体区分染色技术(SCD),是细胞遗传学近年来发展起来的一种新技术。 分析SCE频率已成为检测各种致癌物质和诱变因子的一种有效手段。同时这项技术也可以 用于染色体结构、细胞周期、DNA的损伤修复等有关的理论研究。目前有关检测工作和理 论研究主妻是利用人和动物细
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