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主题：【求助】吸光度为负值，怎么办？
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发表于： 19:32:21
因科研需要，最近在用可见光分光光度法测尿素的含量。以对二氨基苯甲醛为显色剂，420nm为测量波长，已用尿素标液作出了标准曲线。现在用标准曲线测某溶液中尿素的含量，可测量时吸光度为负值？什么原因造成的？如何解决？谢谢！焦急等待中！
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未做基线校正或空白扣除。此外你的样品的吸光值要比空白溶液的浓度还要低。
20:29:03 Last edit by anping
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可是待测溶液的颜色要比空白溶液的颜色要深呀？怎么回事？
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样品的吸光值要比空白溶液的浓度还要低这种情况是何原因引起的？
abcdefghijkl123
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是不是因为你的样液中有产生负干扰的物质啊
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请楼主将标样用的空白溶液的吸光值及测试的样品的吸光值传上来，这样问题便一目了然了。
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空白溶液的透光度由18.7%调整为T%=100；尿素样品的吸光度A=-0.113
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原文由 jbz1124(jbz1124) 发表:空白溶液的透光度由18.7%调整为T%=100；尿素样品的吸光度A=-0.113楼主的测量方法有两个问题：（1）空白溶液用透过率表示，而样品用吸光度表示。尽管100%的吸光值是0ABS，但是这样做比较你不感到别扭吗？（2）由于楼主事先已经将空白扣除了零，所以即使空白溶液的吸光值比样品的高，现在也看不出来了。所以，样品用曲线的回归方法得出的吸光值为负值了。正确的判断方法：（1）波长设定为425nm，测量方式设定为吸光度。（2）样品室内任和物品不放，调零，此时，仪器的吸光度为0。（3）将空白样品放到样品池架内，记录下吸光值。（4）将样品放到样品池架内，记下吸光值（5）比较3，4项的两个记录值，不就一目了然吗？
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样品室内任和物品不放，调零，此时，仪器的吸光度为0还可以不放样品啊
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原文由 天天洗碗(binglang1985) 发表:样品室内任和物品不放，调零，此时，仪器的吸光度为0还可以不放样品啊什么意思？
wolfly2007
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一、楼主的操作估计有问题，调零没做好，标准曲线没有做二、还有一个可能的原因是试样的浓度过大，已经超过你所测标准曲线的范围，这时候的吸光度是不准的，请稀释后重试。三、吸光度最大的时间把握，一定要在刚刚冷却后测，最好先对样品进行个扫描，找出最大吸光度时的波长，然后测，一般这个样品的最大吸光度波长是423nm左右，并不是国标里的425nm，建议仪器允许的做相关操作UV1801紫外-可见分光光度计操作说明_图文_百度文库
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