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验证码输入错误，请重新输入第28卷第5期2011年9月新乡医学院学报；JournalofXinxiangMedical；?551?；祝祝J］．新乡医学院学报，）：55；祝缓蜗剑胖九螅脚嗬恚钊竺罚鹾烀罚苷伲唬ㄔ颇现幸窖г阂├硌Ы萄惺遥颇希焕ッ650500）；采用一次性灌胃给药的急性毒性实验测定最大
第28卷第5期2011年9月新乡医学院学报
JournalofXinxiangMedicalCollegeVol．28No．5Sep．2011
J］．新乡医学院学报，）：551-553．本文引用：何晓山，张志朋，山培理，等．天麻成分C小鼠灌胃的急性毒性与催眠作用［
何晓山，张志朋，山培理，李润梅，刘红梅，周正荣
（云南中医学院药理学教研室，云南
昆明650500）
采用一次性灌胃给药的急性毒性实验测定最大给药量；根据戊巴比妥无特定病原体（SPF）级昆明种小鼠为受试对象，
钠致眠作用的影响来评价药物对中枢神经系统的作用。结果
天麻成分C小鼠灌胃给药测不出半数致死量，未观察
天麻成分C对中枢
其灌胃的最大给药量为9．09g?kg。天麻成分C小鼠灌胃给药，单独使用不能引起小鼠睡眠，但可以到明显毒性，
睡眠潜伏期缩短，睡眠持续时间延长。结论使戊巴比妥钠腹腔注射引起的小鼠睡眠作用增强，
天麻；急性毒性；催眠作用；戊巴比妥钠
文献标志码：A
）05-0551-03文章编号：1004-
神经系统可能有一定的抑制作用，不能直接引起小鼠睡眠，但可增强戊巴比妥钠对小鼠的催眠作用。
中图分类号：R965
AcutetoxicityandmesmerismofcomponentCoftallgastrodiarhizomebyadministeredmousein-tragastrically
HEXiao-shan，ZHANGZhi-peng，SHANPei-li，LIRun-mei，LIUHong-mei，ZHOUZheng-rong
（DepartmentofPharmacology，YunnanUniversityofTraditionalChineseMedicine，Kunming650500，YunnanProvince，China）
Abstract：
TounderstandthemessageofacutetoxicityofcomponentCoftallgastrodiarhizomebyadminis-Specific
teredmouseintragastricallyandobserveitsinfluenceonmesmerisminducedbypentobarbitalsodium．Methods
pathogenfreelevelKunmingmicewerechoosenassubjects．Themaximumadministrationdosewastestedbyone-timeoralad-ministrationacutetoxicitytesting．TheeffectofcomponentCoftallgastrodiarhizomeoncentralnervoussystemofmicewase-valuatedwithmesmerisminducedbysuprathresholddoseandsubthresholddoseofpentobarbitalsodium．Results
wereintragastricadministrationcomponentCoftallgastrodiarhizomecouldnotdeterminethemediallethaldose，andnosignif-icanttoxicitywasobserved．ThemaximumadministrationdoseofcomponentCoftallgastrodiarhizomeisintragastrically9．09g?kg－1．ComponentCoftallgastrodiarhizomecann'tcausemicetosleep，butcanstrengthenmice'ssleepinducedbypentobarbitalsodiumandshortensleeplatencyandlengthensleeptime．Conclusioninducedbypentobarbitalsodium．
Keywords：
tallgastrodiarhizome；acutetoxicity；mesmerism；pentobarbitalsodium
ComponentCoftallgastrodiarhizome
hassomeinhibitoryactiononcentralnervoussystemofmouse．Itcannotcausemicetosleep，butcanstrengthenmice'ssleep
茎，是云南昭通道地名贵药材，始载于《神农本草，经》列为上品，功能息风止痉，平抑肝阳，祛风通络，中医临床主要用于治疗肝风内动，惊痫抽搐，肢体麻木，手足不遂，风湿痹，痛眩晕，头痛等病症。天麻水、乙醇提取物及不同制剂，均能使小鼠自发性活动明显减少，且能延长巴比妥钠、环己烯巴比妥钠引起的小鼠睡眠时间，可抑制或缩短实验性癫痫的发作时间
收稿日期：
基金项目：国家自然科学基金资助项目（编号：）；云南省科技计划资助项目（编号：M）作者简介：何晓山（1973－），男，彝族，云南元江人，硕士，副教授，主要从事中药药理及民族药研究。
天麻成分C小鼠灌胃的急性毒性与催眠作用
摘要：目的了解天麻成分C灌胃给药的急性毒性，及其对戊巴比妥钠致小鼠催眠作用的影响。方法选择
天麻为兰科植物GastrodiaelataBl．的干燥块化得到了一种淡黄色小晶形酚类成分（下称为天麻成分C）结晶，难溶于水，易溶于体积分数95%乙醇。本实验先进行了天麻成分C的小鼠急性毒性研究，然后根据天麻的功能主治，确定以镇静催眠指标开展动物药效学实验，以明确天麻成分C是否为天麻具有镇静催眠作用的有效成分，为后续深入研究该成分提供实验资料。
。课题组从昭通产天麻中提取分离与纯
材料与方法
昆明种小鼠，无特定病原体（spe-
cificpathogenfree，SPF）级，雌雄兼用，体质量18～22g，由四川省医学科学院实验动物研究所提供，合24，格证号：SCXK（川）2008-批号：0021278，小鼠购
进后适应性常规饲养3d。1．2
药品与试剂
新乡医学院学报http：//www．xxyxyxb．com2011年第28卷
30min后3组均腹腔注射阈上剂量的戊巴比妥钠（质量分数为0.25%）20mL?kg－1，观察并记录小鼠翻正反射消失（以小鼠背部向下保持30s为标翻正反射恢复（以小鼠背部向下30s内可准）时间、
翻正为标准）时间，计算出睡眠潜伏期和睡眠持续时间。睡眠潜伏期=翻正反射消失时间－给完戊巴比妥钠时间；睡眠持续时间=翻正反射恢复时间－翻正反射消失时间。1．4．2．2实验
对戊巴比妥钠阈下剂量催眠作用的影响3］方法，参照文献［取雄性健康昆明种小鼠
天麻成分C（含量＞99%），为淡
黄色小晶形结晶，经初步鉴定为酚类成分，难溶于易溶于体积分数95%乙醇，由课题组从昭通产水，
天麻中经体积分数95%乙醇提取，过聚酰胺柱及硅80（青岛美生源胶柱等工艺分离纯化制备，以吐温-生物科技有限公司生产，批号：）助溶配成22．72%的水溶液备用。戊巴比妥钠（中国医药集团上海化学试剂公司生产，批号：F）以蒸
馏水配成3g?L的药液备用。
1．3主要仪器XS型分析天平（Precisalinstru-30只，随机分为对照组、天麻成分C高剂量组、天麻成分C低剂量组3组，每组10只。天麻成分C高
－1剂量组、低剂量组分别灌胃给予1．81g?kg、
mentsLtd．，Switzerland）；FA1004型上皿电子天平（上海精科天平厂）。1．41．4．1
天麻成分C的急性毒性实验
经预实验，
0．91g?kg－1的天麻成分C，灌胃容积均为20mL?kg－1，80。对照组灌胃给予等容积吐温-30min后3组均腹腔注射阈下剂量的戊巴比妥钠（质量分数为0.25%）10mL?kg－1，记录各组动物入睡数量，并同1．4．2．1的方法计算睡眠潜伏期和睡眠持续时间。1．5
采用SPSS13．0软件进行统计
±s）表示，学分析，计量资料以均数±标准差（x组间
统计学处理
计数资料采用计量资料比较采取单因素方差分析，
P＜0．05为差别有统计学意义。确切概率检验法，
80助溶配制的水溶液在最大浓天麻成分C以吐温-度、最大灌胃体积下一次性给药，动物死亡率为0%，难以测出半数致死量（mediallethaldose，LD50），故进行最大给药量的测定。
取小鼠40只，雌雄各半，根据体质量和性别随机分为给药组和对照组，每组20只，实验前禁食不
给药组灌胃给药剂量为9．09g?kg，给禁水12h，
药体积均为40mL?kg，对照组给予等体积的吐
80水溶液。给药后连续观察14d，温-每天观察2组动物的外观、行为和毒性反应，并记录2组小鼠的体质量和进食量。实验第14天处死、解剖小鼠，肉眼观察其主要脏器的外观。1．4．21．4．2．1实验
天麻成分C的催眠作用研究
对戊巴比妥钠阈上剂量催眠作用的影响2］方法，参照文献［取雄性健康昆明种小鼠
天麻成分C的急性毒性实验结果
量及进食量变化见表1和表2。结果表明，给药组小鼠体质量增加正常，进食量稳定，与对照组比较，体质量和进食量差别均无统计学意义（P＞0．05）。给药后4h内给药组小鼠均出现眯眼、扎堆、自发活2组小鼠一般状况动减少，但无死亡；24h后观察，饮食正常，外观、皮毛、行为、呼吸均正常，鼻、良好，
眼、口腔无异常分泌，未见其他明显异常反应。实验结束后大体解剖观察主要脏器无明显异常。
30只，随机分为对照组、天麻成分C高剂量组、天麻每组10只。天麻成分C高成分C低剂量组3组，
－1剂量组、低剂量组分别灌胃给予1．81g?kg、
0．91g?kg－1的天麻成分C，灌胃容积均为20mL?kg－1，80。对照组灌胃给予等容积吐温-表1Tab．1
天麻成分C最大给药量灌胃前、后小鼠体质量变化
ChangeofmouseweightinducedbymaximumadministrationdoseofcomponentCoftallgastrodiarhizomeintra-（m/g，x±s）
给药前19．3±0．820．0±1．720．4±0．521．1±0．4
第2天22．8±1．623．5±1．722．9±1．123．5±1．3
第4天24．9±1．524．3±1．724．9±0．725．1±1．2
第6天27．1±1．825．4±1．926．8±0．826．3±1．3
第8天28．6±2．226．5±1．427．8±0．928．2±1．4
第10天29．0±2．127．8±1．529．7±1．228．7±1．6
第12天29．1±2．328．9±1．830．2±1．231．6±1．5
第14天30．9±1．630．4±1．933．3±1．234．1±1．5
gastrically
性别雌性雄性
第5期何晓山，等：天麻成分C小鼠灌胃的急性毒性与催眠作用
天麻成分C最大给药量灌胃前、后小鼠进食量变化
Changeofmousefood-intakeinducedbymaximumadministrationdoseofcomponentCoftallgastrodiarhizomein-（m/g）
给药前5．845．535．465．58
第1天5．324．674．784．85
第2天5．414．544．295．32
第3天5．415．134．965．79
第4天5．315．034．884．72
第5天5．485．235．694．43
第6天5．475．595．373．76
第7天5．295．634．563．92
第8天5．185．304．934．01
第9天5．155．185．614．46
第10天第11天第12天第13天第14天5．135．295．584．28
5．125．345．194．87
5．285．595．075．44
5．455．565．185．52
5．625．585．816．68
tragastrically
性别雌性雄性
2．2对戊巴比妥钠阈上剂量催眠作用的影响结
果见表3。和对照组比较，天麻成分C高剂量组的睡眠潜伏期缩短、睡眠持续时间延长，差别有统计学意义（P＜0．01）；天麻成分C低剂量组的睡眠潜伏期缩短、睡眠持续时间延长，差别有统计学意义（P＜0．05）。天麻成分C高剂量组、低剂量组间比较，天麻成分C高剂量组缩短睡眠潜伏期、延长睡眠持续时间的作用强于天麻成分C低剂量组，差别有统计学意义（P＜0．05）。
天麻成分C对戊巴比妥钠腹腔注射阈上剂量催眠作用的影响Tab．3
InfluenceofcomponentCoftallgastrodiarhizome
睡眠持续时间/min72．59±6．6．23b117．61±15．14
本实验以天麻成分C为受试物观察了其灌胃
给药的急性毒性和对戊巴比妥钠催眠作用的影响。80助溶配急性毒性结果显示，天麻成分C以吐温-－1
制的水溶液灌胃的最大给药量为9．09g?kg，实验小鼠均未显示出明显毒性，表明天麻成分C以常规剂量灌胃给药是安全的，可进一步深入研究其生理活性。
对戊巴比妥钠催眠作用的影响实验结果显示，
天麻成分C高剂量（1．81g?kg）、低剂量（0．91g?kg－1）灌胃给药，均能明显缩短戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠潜伏期，延长睡眠持续时间，作用具有剂量依赖性，但天麻成分C单独应用对小鼠无催眠作用。表明天麻成分C对中枢神经可能有一定的抑制作用，从而使戊巴比妥钠引起的小鼠睡眠作用增强。鉴于天麻成分C急性毒性实验中观察如果能排除小鼠活到小鼠出现了活动减少等症状，
动减少并非因为中毒（小鼠灌胃急性毒性实验中未显示明显毒性），由于其可明显增强戊巴比妥钠腹腔注射引起的小鼠睡眠作用，则可初步认为天麻成分C对小鼠中枢神经系统有直接抑制作用。在下一步实验中，课题组将采用小鼠爬杆实验等方法研究天麻成分C对小鼠自发活动的影响，明确天麻成分C对戊巴比妥钠腹腔注射引起的小鼠睡眠作用增强的可能机制。
参考文献：
［1］唐大轩，杨文宝，梁娅君，等．天麻提取物对神经系统作用的药
J］．四川中医，）：64-66．理研究［
［2］林焕冰，钟文，李铁军，等．灯盏细辛和灯盏花素对戊巴比妥钠
J］．药学实践杂志，）：85-87．致小鼠催眠的影响［
［3］徐淑云，．3版．北京：人民卞如濂，陈修．药理实验方法学［M］
6．卫生出版社，
onmousemesmerisminducedbysuprathresholddoseofpentobarbitalsodiumintraperitoneally
组别对照组
天麻成分C高剂量组天麻成分C低剂量组
睡眠潜伏期/min5．18±0．521．25±0．36b2．18±0．17
P＜0．01；与天麻成分C高剂量组比较cP＜0．05与对照组比较aP＜0．05，
2．3对戊巴比妥钠阈下剂量催眠作用的影响结
果见表4。动物入睡率天麻成分C高剂量组和低剂量组间比较差别无统计学意义（P＞0．05），与对照组比较，差别有统计学意义（P＜0．05）。
天麻成分C对戊巴比妥钠腹腔注射阈下剂量催眠作用的影响Tab．4
InfluenceofcomponentCoftallgastrodiarhizome
睡眠持续时间/min0．00±0．．．38
onmousemesmerisminducedbysubthresholddoseofpen-tobarbitalsodiumintraperitoneally
组别对照组
天麻成分C高剂量组天麻成分C低剂量组
入睡动物数/只睡眠潜伏期/min
－4．96±0．355．83±0．26
与对照组比较aP＜0．05
（本文编辑：孟月英文编辑：孟月）
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