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2016考研数学真题解析
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吉林农大兽医微生物学期末复习材料
细菌总论 （一）简答 1.细菌细胞壁的功能 （1）维持细菌外形，保护细菌耐受低渗环境； （2）阻挡有害物质进入，维持细菌内外离子平衡，参与细胞分裂； （3）与致病性、抗原性、对噬菌体敏感性和革兰氏染色有关。 2.荚膜的特点 ①折光性低，不易着色，需特殊方法染色。 ②成分可以是多糖、多肽或既含有多糖又含有多肽。 ③具有抗原性，有种和型特异性，可以用于细菌鉴定。 ④荚膜的有无还与环境
有关。 ⑤除去荚膜对细菌生长代谢没有影响。 3.荚膜的功能 ①保护细菌，抵抗吞噬细胞的吞噬和抗体的作用，对宿主有侵袭力，是病原菌的致病因子。 ②抗腐败，荚膜对干燥等不利环境有抵抗力，可形成菌影。 ③ 是营养物质的贮藏和废物的排泄场所。 4.芽孢的特点 ①结构复杂，含水少，对各种理化学因素抵抗力强。②折光性强，不易着色，需要特殊染色方法才能着色。 ③芽胞不是细菌的繁殖体，是细菌抵御不良环境的手段，即休眠体。④芽孢的位置、大小、形状，因芽胞 菌种类不同而异，有鉴别意义。⑤与细菌种类有关，也与环境有关。 5.鞭毛的功能和用途 ①有抗原性，成分是蛋白质，称为鞭毛蛋白，可以作为血清学鉴定的依据。 ②数量和位置因细菌不同而异，可以用于细菌的鉴定。 ③是细菌的运动器官。 ④有些细菌鞭毛与细菌的致病性有关。 6.芽孢抵抗力强大的机制 ①含水量低，蛋白质不易变性。②含有吡啶二羧酸，与钙离子结合成复合物，抵抗力增强。③含有可溶性 酸性小蛋白，与 DNA 结合，免受干燥、高温等的破坏。④结构致密，坚实，化学物质不易渗透。 7.质粒的性质 （1）质粒的遗传物质不是细菌生存所必须的。 （2）质粒具有独立复制的能力。 （3）质粒可失去或消失。 （4）质粒的可以传递或转移。 （5）在一个细菌内可同时共存几种质粒。 （6）质粒已经成为遗传工程的理想载体。 8.外毒素的特性 1、外毒素的毒性作用极强。 2、外毒素对机体的组织器官具有选择作用，因起特殊的临床表现。 3、外毒素具有良好的免疫原性。 4、理化特性稳定性差，多不耐热对化学因素不稳定。 9.内毒素的生物学作用 （1）脂质 A 高度保守，各种细菌内毒素的成分基本相同，所有革兰氏阴性菌内毒素的毒性作用都大致相 同 （2）可引起发热、血循环中白细胞骤减、弥散性血管内凝血、休克等，严重时亦可引起死亡。 10.内毒素的生物学特性 脂质 A 为内毒素的毒性中心和生物学活性中心。内毒素的毒性作用无特异性，各种病原菌内毒素作用大致 相同，均可引起发热、血循环中白细胞减少、组织损伤、弥散性血管内凝血、 休克等，严重时也可导致机 体死亡。 11.减弱细菌毒力的方法 （1）长时间连续培养传代 （2）在高于最适生长温度条件下培养 （3）在含有特殊化学物质的培养基中培养 （4）在特殊气体条件下培养 （5）通过非易感动物 （6）通过基因工程的方法 （7）在含有抗血清、特异噬菌体或抗生素的培养基中培养 （二）论述 1.外毒素的致病机制 （1）与特异性受体结合，通过信号传导系统，改变细胞内外离子平衡，如耶尔森菌可使细胞内钠离子和水分大量丢失。 （2）与受体结合，进入细胞质，抑制宿主细胞蛋白合成，导致细胞死亡，如白喉毒素、炭疽毒素等。 （3）与受体结合后直接改变细胞膜结构，形成通道，导致细胞裂解，如金黄色葡萄球菌α 溶血毒素。 （4）外毒素本身具有酶活性，如葡萄球菌β 毒素为磷脂酶 C，可分解胞膜上磷脂使细胞膜结构损害。 （5）与受体结合直接由细菌的毒素破坏细胞，如链球菌溶血素、腊样芽孢杆菌溶细胞素等。 2.革兰氏阳性菌细胞壁的结构特点 （1）由肽聚糖和磷壁酸构成。肽聚糖由聚糖链、四肽链和五肽桥交联，形成坚韧三维立体结构，网眼致密。 （2） 肽聚糖由 N 乙酰葡糖胺和 N 乙酰胞壁酸通过β -1、 糖苷键连接， 4 反复聚合而成。 溶菌酶作用于该键， 裂解肽聚糖。 （3）磷壁酸由核糖醇型或甘油醇型残基以磷酸二酯键连接成的多聚物。分壁磷壁酸和膜磷壁酸两种。前者 深入细胞壁内，一端与肽聚糖上的胞壁酸共价连接，另一端游离于细胞壁外；后者一端与细胞膜上的糖脂 共价连接，另一端游离于细胞壁外。 3.革兰氏阴性细胞壁的结构特点 （1）由外壁层和肽聚糖构成。前者由微孔蛋白和脂蛋白构成的外膜蛋白和由类脂 A、核心多糖、侧链多糖 构成的脂多糖构成；后者由聚糖链和四肽侧链交联成二维结构。 （2）肽聚糖薄，没有五肽交联桥，网眼较大，结构疏松。 （3）微孔蛋白有分子筛、粘附宿主细胞和物质摄取作用；脂蛋白与肽聚糖连接，是噬菌体受体，起物质转 运作用。 （4）类脂 A 为细菌内毒素，引起动物发热、白细胞减少、休克或死亡，无种属特异性；核心多糖有种属 特异性；侧链多糖是细菌的 O 抗原，有种和型特异性。 4.影响防腐消毒剂作用因素 （1）防腐消毒剂的种类：种类不同，理化性质不同，杀菌效果不同。 （2）消毒剂的浓度和作用时间：抗菌作用与其浓度大小和作用时间长短成正比。有些消毒剂浓度过高时， 其杀菌效果反而下降。 （3）微生物的种类和特性：不同种类的微生物和处于不同状态的微生物对各类消毒剂的敏感程度不同。革 兰氏阳性菌一般比革兰氏阴性菌对各类消毒剂敏感；细菌的繁殖体比芽孢敏感。 （4）温度：消毒剂的杀菌效果与温度呈正相关。即温度升高，杀菌能力增强。 （5）pH 值：在酸性溶液，细菌带正电荷较多，阴离子去污剂的杀菌效果较好，反之，在碱性环境，则阳 离子去污剂的杀菌效果好。 （6）有机物的存在：环境中有机物特别是蛋白质的存在，会影响消毒剂的杀菌效果。它们与消毒剂结合形 成不溶性的化合物，或将其吸附，或直接对微生物起机械保护作用。 5.构成病原微生物毒力的因素 1.侵袭力 （1）粘附（adherence）与定殖（colonization） ①菌毛：主要是革兰氏阴性菌的菌毛，通过与宿主表面相应受体相互作用使细菌吸附于细胞表面而定居， 故有些菌毛又称定居因子（colonization factor） 。 ②细胞壁成分：又称非菌毛黏附物质（afimbrial adhesin） 。 （2）抵抗或逃避宿主的防御机能 ①抗吞噬作用 A 荚膜和微荚膜的抵抗作用 B 杀死或损伤粒细胞和吞噬细胞 ②抗体液免疫机制 A 抗原伪装或抗原变异 B 分泌蛋白酶降解免疫球蛋白 C 是通过 LPS、外膜蛋白 （OMP） 、荚膜及 S 层等的作用，逃避补体，抑制抗体产生。 ③ 内化作用 （internalization） 指某些细菌黏附于细胞表面之后， 能进入吞噬细胞或非吞噬细胞内部的过程。 （3）产生有利于病原菌在机体内扩散的酶类 透明质酸酶 （hyaluronidase） 凝固酶 、 （coagulase） 激酶 、 （kinase） 胶原酶、 神经氨酸酶、 磷脂酶 （phospholipase） 、 DNA 酶、卵磷脂酶（1ecithinase）等。 2.毒素：外毒素、内毒素。 6.外毒素来源、化学成分及结构特点 1、来源：多种细菌能产生外毒素。 G+：破伤风梭菌、炭疽杆菌、肉毒梭菌、产气荚膜梭菌、溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌等； G-：大肠杆菌、霍乱弧菌、铜绿假单胞菌、气单胞菌、多杀性巴氏杆菌等。 大多数外毒素在菌体内合成后分泌于胞外起作用，故名“外毒素” 。但也有少数外毒素存在于菌体细胞的胞 周间隙，指革兰氏阴性菌，只有当菌体细胞裂解后才释放至胞外。 2、化学本质：蛋白质。 3、分子结构：多由 A 和 B 两个亚单位组成，A 亚单位是外毒素的活性中心，称活性亚单位，决定毒素的 毒性效应；B 亚单位为结合亚单位，能使毒素分子特异性的结合在宿主易感组织的细胞膜受体上，并介导A 亚单位进入细胞。外毒素的致病作用依赖毒素分子结构的完整性，A、B 亚单位单独均无毒性，A 亚单位 必须在 B 亚单位的协助下，结合到受体上并释放到细胞内，才能发挥毒性作用。 病毒总论 （一）简答 1.实验动物在病毒学研究中不可代替的应用 （1）病毒的致病性研究； （2）抗血清的制备； （3）病毒性疾病的药物治疗实验； （4）疫苗免疫保护效果分析 2.以双股 DNA 病毒为例说明病毒复制机制（简图或语言）3.病毒持续性感染的特点 ①长达几个月至几年的潜伏期（除个别例外） ；②病原体长期乃至终生持续存在；③病变和症状常与免疫病 理或免疫缺陷有关，发病后常呈进行性，预后大多不良；④除少数例外，自然感染的宿主范围极窄，大多 局限于同一种属动物，而且常有遗传倾向，临床症状和病理变化也较严重。 4.病毒核衣体的对称种类 1.螺旋状对称 在螺旋状对称的病毒粒子中，核衣壳内的核酸分子由蛋白亚单位周期性地围绕，一起盘绕成线团或弹簧样， 外由脂蛋白囊膜所包围。病毒壳粒呈缧旋形对称 排列，中空，见于弹状病毒、正黏病毒和副黏病毒及多数 杆状病毒。 2、 二十面体对称 核衣壳形成球状结构，壳粒镶嵌排列成二十面体对称型式，每一面都呈等边三角 形，构成了 12 个顶、20 个面和 30 个棱的立体结构，病毒粒子顶角由 5 个相同的壳粒构 成,称为五邻体，而三角形面由 6 个相同壳 粒组成，称六邻体。 3.复合对称型 病毒的壳粒排列构型，既有螺旋状对称又有二十面体对称，即为复合对称型病毒 结构,代表病毒为痘病毒、 噬菌体等。 5.病毒持续性感染的分类及概念 持续性感染：病毒在宿主体内持续存在，达数月甚至终生，但不一定持续增殖和持续引起症状。 分类 ：①潜伏感染（latent infection） ：是指病毒侵入机体后，并不引起明显的临床症状，也不复制出大量 的病毒颗粒，仅在一定的组织中潜伏存在。 ②慢性感染（chronic infection） ：病毒在机体内持续增殖，可不断排出体外，常不引起临床疾病，但在机体 免疫功能低下时发病，症状长期存在，其免疫病理作用在病毒致病机制上具有重要意义。 ③慢病毒感染（slow virus infection） ：为慢性发展的进行性加重的病毒感染，较为少见但后果严重。 6.细胞培养及其概念 细胞培养的概念：利用机械、酶或化学方法，使动物组织或传代细胞分散成单个乃至 2～4 个细胞团悬液进 行培养。 （二）论述 1.病毒核酸特点。举例说明哪些病毒核酸具有该特点 1、种类。DNA 或 RNA。DNA 病毒：痘病毒科、天花病毒；RNA 病毒：正黏病毒科、禽流感病毒。 2、股数。单股 DNA 病毒：犬细小病毒科、犬细小病毒；单股 RNA 病毒：微 RNA 病毒科、口蹄疫病毒； 双股 DNA 病毒：疱疹病毒科、猪伪狂犬病病毒；双股 RNA 病毒：双 RNA 病毒科、鸡染性法氏囊病毒。 3、线状和环状。线状核酸病毒：副黏病毒科、新城疫病毒；环状核酸病毒：猪圆环病毒。 4、分节段和不分节段。病毒核酸分几个阶段病毒：正黏病毒科、禽流感病毒；核酸不分节段病毒：弹状病 毒科、狂犬病毒。 5、正股和负股。单链正股 RNA 病毒：冠状病毒科、SARS 病毒；单链负股 RNA 病毒：副黏病毒科、犬瘟 热病毒。 6、病毒核酸差别很大。最小的动物 DNA 病毒是圆环病毒，其基因组仅 1.7 kb，最大的 DNA 病毒是疱疹病毒及痘病毒，都大于 200 kb。 7、病毒核酸的结构特征。 分段基因组病毒粒子有两种存在方式：多个核酸节段包装在同一病毒粒子中和 多个核酸节段分别包装在不同的病毒粒子中，称多分体病毒。 帽子和 ploy（A）结构 可以保护核酸，还 与病毒的侵袭性有关。 2.病毒持续性感染机制 （1）病毒基因组整合到宿主细胞 DNA 中 （2）病毒侵犯免疫细胞或在有掩护的细胞内增殖 （3）病毒抗原发生变异 （4）缺损干扰颗粒的出现 （5）免疫耐受 （6）抗体功能异常或引起靶细胞表面病毒抗原的改变 （7）干扰素产生能力低下 （8）细胞免疫应答低下 （9）宿主的遗传因素 3.病毒复制、复制周期、感染复数、共分期、隐蔽期、复制阶段 1）病毒复制及复制周期的概念：病毒在活细胞内，以病毒基因组为模板，在酶的作用下，分别合成病毒基 因及蛋白质，再组装成完整的病毒颗粒，这种方式称为复制。从病毒吸附于宿主细胞开始，到产生成熟子 代病毒从感染细胞内释放到细胞外的复制过程，称为病毒的复制周期。 2）感染复数（multiplicity of infection，m.o.i）是指用以起始病毒感染的每个细胞所需的病毒颗粒数目，单 位（PFU/cell） 。 3）病毒的一步生长曲线及其分期：采用适量的病毒悬液来感染标准培养条件下高浓度的细胞溶液，经过病 毒吸附后，洗涤细胞去除未被吸附的病毒，尽可能的达到病毒的感染复数为 1，使一个病毒感染一个细胞。 这样所有的细胞同时被感染，增殖就是同步单周期的。经过培养一段时间以后，进行取样，分别测定病毒 的效价，以感染时间为横坐标，病毒效价为纵坐标，绘制出的病毒增殖特征曲线。即为一步生长曲线。分 为潜伏期、裂解期和衰退期。 4)病毒复制的隐蔽期，是指有感染性的亲代病毒粒子从消失到子代病毒出现这段时期。 5)病毒的复制阶段：吸附、侵入、脱壳、生物合成、装配和释放六个阶段。 4.鸡胚接种病毒的途径及时间 (1)绒毛尿囊膜接种：主要用于在绒毛尿囊膜上能够形成痘斑样病变的病毒接种，如痘病毒、疱疹病毒等， 接种的日龄是 10-12 日龄； (2)尿囊腔接种：主要用于正黏病毒或副黏病毒的接种，接种日龄为 10-12 日龄； (3)卵黄囊接种：主要用于虫媒病毒或披膜病毒的接种，还可用于繁殖立克次氏体/衣原体的接种，接种日龄 多为 6-8 日龄； (4)羊膜腔接种：很多病毒可在羊膜腔接种后繁殖。其接种方法难度较大，限制了应用。接种日龄为 10-12 日龄。 细菌各论 （一）简答 1.大肠杆菌抗原结构特点2.大肠杆菌抵抗力特点 3.沙门氏菌致病性特征 1）致病因子：沙门氏菌均具有毒力较强的内毒素，可引起机体发热、黏膜出血、白细胞减少继之增多和中 毒性休克，以致死亡。 2)致病特点：沙门氏菌最常侵害幼龄动物发生败血症、胃肠炎以及局部炎症。成年动物则多表现为散发或 局限性发生。但在某种条件下，也可呈现急性流行性。许多环境因素影响疾病的发生，如卫生不良、过度 拥挤、气候恶劣、内服皮质类激素、分娩、长途运输以及发生其他病毒或寄生虫感染，均可增加易感动物 发生沙门氏菌病。 3)公共卫生：人类由于食用患病动物的肉、乳、蛋或被鼠尿污染的食物，常引起肠热症、胃肠炎和败血症三种类型疾病。 4.布氏杆菌抵抗力特点 （1）污染的土壤和水中――1~4 个月 （2）皮毛――上 2~4 个月 （3）鲜乳中――8d （4）乳、肉食品中――约 2 个月 （5）粪便中 1――20d （6）流产胎儿――至少 75d （7）子宫渗出物中――200d （8）在直射阳光下――4h （9）湿热抵抗力差：60℃加热 30min 或 70℃ 5min 即杀死，煮 沸立即死亡。 （10）对消毒剂的抵抗力也不强：2 %石炭酸、来苏儿很快杀死该菌。 （11）在 pH 3.5 或更低情况下迅速死亡。 5.牛结核分枝杆菌致病机理 （1）结核菌主要通过呼吸道侵入机体肺泡，被巨噬细胞吞噬。该菌不被消化降解，在其内繁殖，形成病灶， 产生干酪样坏死。 （2）坏死灶被吞噬细胞、T 细胞与 B 细胞等包围，形成结核结节。 （3）免疫低下者此种局限性病灶可能破溃，菌体排入支气管，随痰咳出体外；或者病灶液化，扩散进入血 流及其它器官，造成机体死亡。 （4）对于免疫正常者而言，局限性病灶在活化的巨噬细胞作用下，其内细菌停止生长，病灶钙化而痊愈。 6.炭疽在动物体内外形态和结构双重性 （1）体内：菌体两端钝圆、短链、竹节状，有荚膜、无芽胞； （2）体外：菌体两端平截、砖形，长链，无荚膜、有芽胞。 7.炭疽致病性 1、炭疽芽孢杆菌的毒力主要与荚膜和毒素有关，它们分别由 pX0l 和 pX02 质粒所调控。 2、炭痕杆菌侵入机体生长繁殖后形成荚膜，荚膜是一种 D -谷氨酸多聚肽物质，由于其表面带负电荷， 故可明显抑制机体内巨噬细胞和中性粒细胞等吞噬细胞的吞噬作用，并与其他毒力因子共同作用，从而抑 制了宿主的防卫能力。 3、构成炭疽杆菌的毒力因子除与上述的荚膜有关外,还与炭疽毒素有关。炭疽毒素的毒性作用是由于 它能 够有效运送毒索活性成分，使其迅速进人宿主细胞质所致 4、本菌可感染多种动物和人，是重要的人畜共患病原。 5、人类对炭疽杆菌也易感。 8.炭疽杆菌的生长要求与培养特性。 （1）为需氧菌，在厌氧条件下也可生长。 （2）营养要求不高，普通培养基中可良好生长，形成边缘不齐的粗糙型大菌落，呈卷发状。 （3）在明胶穿刺培养中，细菌可沿穿刺线放射状生长外，整个生长物好似倒立的雪松状，明胶上部逐渐液 化呈漏斗状。 （4）普通肉汤培养物上液清朗透明，管底有白色絮状沉淀，若轻摇试管，则沉淀物徐徐上升，卷绕成团而 不消散，液面无菌膜或菌环形成。 （5）在含青霉素 0.5 IU／mL 的培养基中，幼龄炭疽杆菌细胞壁的肽聚糖合成受到抑制，形成原生质体相 互连接成串，称为“串珠反应” 。若培养基中青霉素含量加至 10 IU／mL，则完全不能生长或轻微生长。 9.梭菌属细菌共同特点 （1）分布：及其广泛，存在于腐物、土壤、人和动物肠道，多数为腐物寄生菌，只有少数为致病菌； （2）形态结构：均为大杆菌，形成芽孢，芽孢大于菌体，位于菌体中央，近端或顶端；有周身鞭毛（除产 气荚膜梭菌） ，无荚膜（除产气荚膜梭菌） ； （3）培养特性：在培养特性上，严格厌氧，营养要求不高，菌落多为不规则型； （4）致病性：感染多为通过外伤，多数是通过细菌产生的外毒素致病。 10.我国分离的多杀性巴氏杆菌血清型特点 （二）论述 1.大肠杆菌微生物学检查方法 1）病料采取：腹泻动物生前可取直肠粪便，死后可取小肠各段肠内容物或肠黏膜刮取物。如败血症动物可 采取血液或病变的内脏实质器官，水肿病死后取大肠内容物或病变组织，肠外组织感染直接取病变组织。 2）直接镜检：革兰氏阴性中等杆菌，新分离菌有两极浓染特点。 3）分离培养 ：可用普通培养基，最好用鉴别培养基。麦康凯琼脂上形成红色菌落；在伊红美蓝琼脂上产 生黑色带金属闪光的菌落；在 SS 琼脂上一般不生长或生长较差，生长者呈红色；在 BTB 乳糖培养基上形 成黄色菌落。 4）纯培养：三糖铁高层斜面培养基接种进行纯培养。大肠杆菌在此培养基上的特征是：高层和斜面均为黄 色，在高层部分有可能看到琼脂块裂开（产气）现象。 5）生化鉴定：五糖发酵和 IMViC 实验结果：均产酸产气和++--2.布氏杆菌致病机理 （1）病原菌侵入机体后，被吞噬细胞吞噬，可暂时停留在局部淋巴结，随淋巴液进入附近淋巴结，生长繁 殖一定数量后，进入血液。细菌随血流入肝、脾、骨髓等细胞内寄生，血液中的细菌逐渐消失，血液培养 阳性率也随之降低，发热也逐渐消退。 （2）细菌在细胞内繁殖至一定程度时，再次进入血液，又出现菌血症，体温再次上升，如此反复发作；由 于细菌能寄生于细胞内，治疗较难彻底，故易转为慢性。 （3）如果病原菌侵入子宫黏膜与胚胎之间生长繁殖，引起炎症，破坏母体胎盘与胎儿胎盘之间的联系，造 成胎儿死亡、早产、流产或不育。 3.牛结核微生物学诊断 （1）显微镜检查：取气管、支气管的灌洗液，淋巴结、胸腔、腹腔及其它脏器的吸出物，或尸体剖检时采 集的结核结节或病变与非病变交界处的组织样品。液体样品可离心浓缩，得到的沉淀物或组织涂片可行抗 酸染色，抗酸性染色后，于蓝色视野内发现有红色的杆菌时，结合典型的组织学病变（干酪样坏死、钙化、 上皮样细胞、多核巨细胞和吞噬细胞） ，可做出初步诊断。也可用荧光抗酸染色和免疫过氧化物酶技术进行 检测，组织切片可用苏木精-伊红染色。 （2）分离与鉴定：向病料（固体样品先匀浆）中加入 6% H2SO4 或 4% NaOH、5%草酸液处理 15 min 后， 经中和、离心，取少许沉淀物接种在培养基斜面上，每份病料接 4~6 管，管口封严，置 37 ℃培养 8 周， 每周观察一次，培养阳性时，需进行培养特性、生化特性、生物试验和 DNA 特异性探针及 PCR、间隔寡 核苷酸定型（Spoligotyping）等方法鉴定。在培养特性方面，在固体培养基上，菌苔干燥、粗糙，呈沙粒 状或疣状生长，色灰黄或灰白。 （3）变态反应：经皮下、点眼或皮内接种结核菌素或纯化蛋白衍生物（PPD）时，感染动物会表现全身发 热、结膜炎或局部皮肤肿胀。 （4）血清学检查：可用酶联免疫吸附试验（ELISA）进行检测。特异性的诊断抗原选择 MPB70，为防止 其它分枝杆菌的干扰，用草分枝杆菌作为吸收抗原吸收待检血清,排除血清的非特异性反应,能提高牛结核 ELISA 的特异性。 （5）其它方法：环介导恒温扩增技术、胶体金快速鉴别试剂盒、噬菌体生物扩增法、IFN-γ 试验。 4.牛结核防治 （1）免疫特点：结核病的免疫是传染性免疫，即带菌免疫或有菌免疫。当结核杆菌或其组分存在体内时， 机体才有免疫力，一旦该菌或其成分在体内完全消失时免疫力也随之消失。 （2）细胞免疫和体液免疫存在分离现象：即细胞免疫随病情的加重而减弱，体液免疫则随病情的加重而增 强。凡病情得到控制或康复的动物，其细胞免疫可达到一定水平，血清抗体水平较低。 （3）免疫预防 ①人类广泛采用卡介苗（BCG）免疫接种，免疫期 4～5 年。 ②犊牛在 1 月龄时也可皮下接种卡介苗 100 mg，20 d 产生免疫，可 维持 12～18 个月。 接种卡介苗的牛一年后仍维持变态反应阳性，在用结核菌素检疫时无法与自然感染牛区别，因而不宜 推广应用。 （4）检疫与处理：饲养牛群不接种卡介苗，每年春、秋需进行免疫，结核菌素变态反应检测阳性者，要隔 离饲养。 鉴于抗体产生与结核病的正相关性， 在检疫时如能将变态反应与 ELISA 结合进行， 可提高检出率。 对检出的患结核病动物要无害化处理。 （5）治疗：除珍稀或观赏动物外，不提倡药物治疗。 5.牛结核分枝杆菌抵抗力特点 （1）结核分枝杆菌细胞壁含有大量脂质成分，尤其是蜡样物质，具有疏水性，所以对理化因素的抵抗力较 一般致病菌强，耐干燥能力强。 （2）在干燥的环境中可存活 6～8 个月，附着于灰尘、漂浮在空气中可保持传染性 8～10 d； （3）耐酸碱，在 6%H2SO4、3%HCl、4%NaOH 中 30 min 内可以不受影响。 （4）对某些燃料有抗性， 1:75 000 的结晶紫、1:13 000 的孔雀绿有抵抗力； （5）对低温的抵抗力强，在 0 ℃中可存活 4～5 个月。对湿热的抵抗力较弱，加热至 62～63 ℃ 15 min 或煮沸即可杀死； （6）对紫外线敏感，直射日光 2 h 内可杀死纯培养物； （7）对常用的磺胺类及多种抗生素药物不敏感，对链霉素、异烟肼、利福平、环丝氨酸、乙胺丁醇、卡那 霉素、对氨基水杨酸等药物敏感，但长期应用上述药物治疗结核病易产生抗药菌株。 6.炭疽杆菌的抗原结构 炭疽杆菌的抗原分为两部分，一部分是菌体结构抗原，包括荚膜、菌体和芽孢等抗原成分，另一部分是 炭疽毒素复合物。菌体抗原有两种，1、存在于本菌细胞壁及菌体内的半抗原，由高相对分子质量的 乙酰 氨基葡萄糖、半乳糖及乙酸所组成的多糖成分。2、菌休原生质中的蛋白质抗原，具有对细胞自 身的保护 作用,曾经也被称为保护性抗原，是炭疽杆菌的主要抗原成分,但它与炭疳箱家中的保护性抗原无关。 病毒各论 1.新城疫病毒诊断与防控 A 微生物学诊断（1）病毒分离：无循环抗体时，取脾、脑或肺制成匀浆，冻融三次，加双抗感作，接种 10 日鸡胚，观察 死亡胚体出血情况，尿囊液做血凝试验，以新城疫病毒血清做血凝抑制实验鉴定。鉴定为新城疫病毒还需 要做 ICPI、MDT 和 IVPI 测定病毒毒力。 如果有循环抗体，病料为肠内容物或用肠道制成的匀浆。 （2）荧光抗体染色：用于气管切片或抹片染色，观察荧光有无。 （3）RT－PCR 诊断：病料提取 RNA 后，反转录 cDNA，用可区分强毒株和弱毒株的引物扩展，直接鉴定 病毒确诊。 （4）HI 实验：用于非免疫鸡群诊断。免疫鸡群 HI 抗体效价参差不齐，可以用于辅助诊断。 B 防控 生产实践中，常用 LaSota 弱毒分别在第 7、15、30 天滴鼻点眼或饮水，60 日注射 I 系，120 天接种 灭活油佐剂疫苗，进行预防接种。发病鸡用新城疫特异性卵黄抗体治疗有一定效果。 2.犬瘟热致病机理（出现两次发热原因） 、诊断 原因：病毒首先在上呼吸道及黏膜上皮细胞复制，继而在局部淋巴结复制后被淋巴细胞携带进入血流，产 生初始病毒血症，同时伴有第一次发热。病毒扩展到网状内皮系统，在淋巴器官增殖的病毒被淋巴细胞及 单核细胞携带进入血流，产生第二次病毒血症，伴有第二次体温升高。 诊断：①病毒分离：病兽的淋巴细胞与经丝裂原刺激的健康犬淋巴细胞共同培养，传代后，可在 MDCK、 Vero 或原代细胞生长、盲传数代可形成放射状及形成合胞体。 ②免疫组化或 RT－PCR 检查病毒：取临死前动物外周血淋巴细胞或剖检动物的肺、胃、肠及膀胱组织做压 片或提取 RNA，用免疫组化或 RT－PCR 检测病毒抗原。 另外，现在临床上还可以用胶体金试纸条。 3.狂犬病致病机理 主要传播途径为被带毒动物咬伤。病毒进入机体后，特异性结合神经肌肉结合处的乙酰胆碱受体和神经节 苷脂等受体。在伤口附件的肌细胞内复制，然后通过感觉或运动神经末梢侵入外周神经系统，沿神经轴索 上行至中枢神经系统，在脑的边缘系统大量复制，并以很高的滴度分泌到唾液中。在动物出现兴奋狂暴症 状乱咬时，唾液中含有高度感染性的病毒。 4.禽流感病毒抗原性及其变异 5.AIV 表而抗原主要有 HA 抗原和 NA 抗原，内部抗原为 N 和 M。这终抗原均具 杳良好的免疫原性。A1V 的内部抗原较为保守,表面抗原 HA 和 NA 的变异频率{， 存时单独变有时同 时变异， 是禽流感病鼻盅 型的主要依据。其变异凉褐中问剑嚎乖坪涂乖弧Ｇ扒n指编码 NA 和 HA 蛋白的基因发生点突变 而导致 HA 或 NA 抗原性的微小变化后 者主要指编码 HA 或 NA 的病被蚍⑸蛑刈榛蚪换欢贾 HA 或 NA 抗原的完全改变,它致使病毒 发生型的变异。 由于甲型流感病毒各亚型之间抗体的交叉保护力差， 所以当抗原转换导致新的巫型产生 时,宿主对新亚型无免疫力，往往发生流感的大流行。 6.AIV 毒力及其分生物学基础 1、禽流感病毒的毒力差异很大，禽类感染流感病毒，轻者小表现明 显临床症状，重者感染鸡类可 100% 死亡。在病毒感染过程中，HA 必须经过蛋白酶切割变成 HA1 和 HA2,所以 HA 对蛋白酶切割的敏感性直 接影响到病毒的毒力。通过蛋白质生化及基因工程技术已经 tf:明，HA 切割位点的结构造影响切割 敏感性 的主要原因。在切割位点插入碱性氨基酸序列，则容易切割。 2、正是由于禽流感病诲的诲力相差较大,根据其致病件的不同分为高致病性禽流感病海、低致病性禽流感 病毒和无致病性禽流感病毒。7.PRRSV 致病机理 8.猪瘟病毒微生物学诊断 (1)病毒分离：病料可取高热期发病猪的血液或病死猪的扁桃体、脾脏和淋巴结等;慢性i病例还可 采集流 产胎儿或死产猪的脏器。无菌处理后,接种动物或细胞，进行病毒分离。 (2)血清学实验:常采用免疫荧光技术、免疫酶实验、琼脂扩散实验和中和实验等,其中的荧光抗体技 术、免 疫酶组化法和抗原捕捉 EL1SA 可快速检测组织中的病毒抗原。 (3)兔体反应实验：取健康易感兔,测定体温后接种待检病料,每天测量体温，7d 后再接种兔化猪瘟 病毒弱毒 株，并连续测温 3 d,如果兔体温没有升高或升高不到 1C，则证明病料中存在猪瘟病毒。而不接 种病料， 只接种兔化猪瘟病毒弱毒株的对照兔体温上升，超过正常体温 1 t 以上（超过 40.5C 以上） (4)新城疫病毒强化法：CSFV 可以在 ST 细胞上繁殖,但不产生明显的细胞病变；新城疫病毒（NDV) 不能 在 ST 细胞上繁殖,但将 CSFV 接种于 ST 细胞上 37 t 培养 4 d，随后接种 1 x 106PFU 的 NDV 继续培养 3 d, 在细胞上可出现明显的细胞病变，以此可证明猪瘟病毒在细胞上的存在,进行猪瘟的诊断。这种方法 称为 新城疫病毒强化法。亦可用 RT - PCR 快速检测感染组织中的 CSFV。 9.口蹄疫病毒生态学 口蹄疫在自然条件下仅感染偶蹄兽，牛最易感，猪次之,羊为隐性带毒。野生偶蹄兽也能感染和发病，猫、 狗等动物可以人工感染，病畜是口蹄疫的主要传染源,在潜伏期就能排毒。水疱皮、水疱液、奶、唾液、 尿液及炸便的含毒量最多，病毒力也最强，易于传染。猪不能长期带毒,牛、羊及野生偶蹄动物可隐性带毒。病毒通过直接接触传播。污染的畜产品、饲料、草场、饮水和水源、交通工具、饲养工具都可传播本病。 空气也是重要的传播媒介。 口蹄疫传播迅速,且可跳跃式传播。该病流行有明显的季节性,一般冬春易发生 大流行。 10.朊病毒蛋白质结构 （1）正常人和动物神经细胞能够表达一种 PrP 类似物，被称作 PrP 前体或朊粒前体分子，也即 PrPC 或 PrP33-35。 （2）PrPC 分布于正常细胞表面，对蛋白酶敏感，其功能尚不清楚。 （3）由羊瘙痒病因子感染的仓鼠脑组织分离的 PrP 则称之 PrPSC（scrapie isoform of PrP）（4）PrPSC 和 。 PrPC 的一级结构相似， 但由三级结构所决定的构象相有差异， PrPC 几乎无β -折叠， 具有 4 个α -螺旋结构。 两者构象的主要区别为 PrPC 的 2 个α -螺旋与 PrPSC 结构中 4 个β -折叠的转变，并推测原本无毒的 PrPC 可通过这种结构的转变而获得毒性和对蛋白酶的抗性。 （5）PrP 在一定条件下形成杆状结构或纤维状结构。后者就是可在电镜下看到的所谓痒疫相关纤维。
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