DNA电泳时没有条带是怎么回事?Marker很明显!
DNA电泳时没有条带是怎么回事?Marker很明显!
　　有很多可能性：1.样品中没有DNA,或者DNA太少,或者DNA已经降解.2.DNA较小而电泳时间太长,导致DNA跑了出去.3.DNA太大,还在加样孔附近,甚至还没有跑到胶里.
与《DNA电泳时没有条带是怎么回事?Marker很明显!》相关的作业问题
你的结果上的“一条带”位置在哪里?我想你能确定不是目的带的话,那应该结果显示的条带比较靠前,DNA长度较小.那很有可能是引物二聚体.出现这个情况,可能的原因有3：1.引物本身不对,不是目的DNA扩增需要的引物.2.DNA回收提纯的问题3.PCR体系内镁离子浓度问题.建议排查下各项.
回收产物做模板浓度是提高的你这应该是回收错了条带 或者本来那条带就是非特异性扩增出来的 不是你想要的
RNA那么不稳定,到处都有RNA酶一般人想要提RNA还提不出来呢.你确定是RNA条带? 再问： 我能确定，这个我在第二次跑电泳时，那些RNA条带都消失了 再答： RNA酶加到EP管壁上，没有甩下去？
基因组DNA会在你抽提过程中发生断裂,形成几十至几百kb的大片段.如果你跑的是比较浓的胶的话,无法区分不同大小的DNA,所以看起来像是一条带.你可以配点0.6%的胶加lamda hindIII marker跑长时间看看.一般应该有几条带.
这是一个问题的两种说法.正常质粒是闭合的双链DNA.在电泳过程中可能使质粒发生开环,或者由开环解开螺旋变成线形.这三种形态电泳时的分离率不同,分离速度不同,分成三带.闭环（超螺旋）,开环,线形的螺旋率依次降低
菌体PCR.那是蛋白质啦,即使是提的DNA样品里经常还会有蛋白质,更不用说菌体PCR了
用这个方法复溶蛋白时很难完全溶解掉,样品处理很是个问题,应该是蛋白浓度不高.我做过类似的 也是用这个方法,电泳出条带很浅甚至没有,很郁闷. 再问： 那你后来是怎么解决这个问题的呢？是bufferB溶解的时候有问题是吗？ 再答： 是啊 溶解不了 最后没做出来哎 就放弃了。。
要知道RNA电泳的理想带型是什么：完整的RNA琼脂糖电泳会有三条带,某些试剂盒可能会有两条带（没有最下面的5S条带）.上面两条带应该最亮,分别代表28S和18S rRNA,且第一条带（28S）亮度应为第二条（18S)亮度的约2倍.最下面一条带最淡,为5S条带.如果你发现最下面一条带很亮而上两条带很淡甚至没有,那就说明你
如果后续要做转染之类的高要求实验,不要求质粒跑出来必须是三条带,只要的是最前端的那条带,既CCCDNA.两条带说明你提的技术高!
一句话,你是否完全按照标准操作完成实验,如果没有,自己重新来一次.可能原因一看加错东西没有二看机器有问题没三看操作过程是不是太久,接触过一些什么含分解酶的东西（空气中的唾沫液气体中的酶也有可能）把底物分解了四看量是不是太少或者损耗大,条带看不出.
1.PCR产物回收后的浓度不是很高,导致第二次回收的浓度更加的低2.回收过程会不会出现什么问题3.电泳中出现问题,你把酶切回收后的上样量多上点,看看会不会有条带,很有可能量太少,没检测到.
很有可能是整流器问题,有些厂家做整流器的时候偷工减料说是100V却只做50V然后换一个大一点的电压表.
出现这种情况 你可以考虑以下因素：1、测试之前是否做了空白液试验,空白液是否和稀释或者溶解液相同.2、放置是否同光杯一致,看看光径有没有调节好.3、容易犯得错误,溶液是否完全溶解,液体中是否存在气泡,很多人粗心大意经常在这里吃亏.4、很多人喜欢用清水做空白试验,不知道你是不是,如果是的话是否保证了水的新鲜和清洁,如果水
那要看你的样品了阿.不管是单链还是双链,都不是是纯粹的单链双链的,双链中也会含有单链的.单链样品中也会含有双链的.如果你加的样是单链的,那跑电泳的时候肯定也是单链了,但是单链和单链会通过碱基配对的作用,有不同程度的结合.如果没有加特殊的试剂来阻止单链碱基配对,电泳时是不可能有纯粹的单链的.大部分电泳的时候都是双链.不对
westernblot检测是用特定抗体检测特定蛋白,BCA法是检测蛋白浓度,即使BCA法检测蛋白浓度高,但也不一定有你检测的蛋白啊?还有你要保证你westernblot操作没问题哦,最好做个内参.
基因组电泳是不可能有两条DNA带的,因为琼脂糖凝胶电泳只能分辨20kb以下的线性DNA分子,高于20kb的线性DNA分子会全部聚于20kb迁移率的地方分不开,而真核生物的基因组是远远超过这个大小的,所以如果基因组DNA提取的很好的话,那么就只会看到20kb迁移率那儿有一条带.如果有物理损伤的话,也会因为损伤片段大小不一
20bp的marker,范围20bp到200bp,跑小片段用的,看你目的基因多大了
检查PCR过程,你的样品没问题吧
电泳时没用明显的条带?你的DNA来源是什么?如果是PCR产物 就不一定是降解.更可能是你就没有P到产物.一般问题不会出在电泳环节.如果你确认被降解 注意；1.所有DNA接触的环境体系 必须是偏碱性的,因为DNA易被酸水解.2.体系中必须加入EDTA 螯合DNA水解酶的激活因子（镁离子）具体方法 各实验指导会有的 我就不& “DNA和蛋白质是两种重要的生物大分子物质...”习题详情
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DNA和蛋白质是两种重要的生物大分子物质，它们在生物体的生命活动中发挥着重要的作用。请根据所学知识回答下列有关问题：（1）关于DNA粗提取：①DNA的粗提取过程中，需要去除DNA滤液中的杂质。可选择&溶液使DNA充分溶解，使杂质沉淀。②将以上处理过后的滤液过滤，加入与滤液体积相等的、冷却的　&溶液，静置2-3分钟，溶液中就会出现　&，这就是粗提取的DNA。鉴定DNA时，可用　&试剂，需用沸水浴加热5分钟，观察溶液是否会变为蓝色。③若提取到的DNA含量过低，还可采用PCR技术进行扩增，PCR技术中用到的一种重要的酶是　&。（2）红细胞含有大量血红蛋白，常用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行提取和分离血红蛋白。①血红蛋白的提取和分离一般可分四步：样品处理、　&、　&和纯度鉴定。②实验前取新鲜的血液．取血后一般要在采血容器中预先加入柠檬酸钠，加入柠檬酸钠的目的是　&。③通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，该方法的原理是相对分子质量较小的蛋白质扩散进入凝胶内部的通道，通过凝胶柱的路程　&，移动速度　&；相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外移动，路程和移动速度刚好相反，相对分子质量不同的蛋白质分子因而得以分离。最后经　&电泳进行纯度鉴定。&
本题难度：一般
题型：解答题&|&来源：2012-陕西省宝鸡市高三第三次模拟考试生物试卷
分析与解答
习题“DNA和蛋白质是两种重要的生物大分子物质，它们在生物体的生命活动中发挥着重要的作用。请根据所学知识回答下列有关问题：（1）关于DNA粗提取：①DNA的粗提取过程中，需要去除DNA滤液中的杂质。可选择____溶液...”的分析与解答如下所示：
⑴DNA粗提取的大致过程如下：先将材料加入2mol/L的氯化钠中，根据溶解度的不同，去除杂质，然后将处理后的溶液过滤，加入体积相等的、冷却的体积分数为95%的酒精溶液，使DNA析出。鉴定DNA时，加入二苯胺试剂同时沸水浴加热，溶液会变成蓝色。PCR技术所需要的酶是耐高温的DNA聚合酶。⑵蛋白质的提取和分离一般包括样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定四步。利用凝胶色谱法分离蛋白质的原理：相对分子量大的蛋白质不能进入凝胶内部，路程短、速度快，先到达色谱柱的下端，而相对分子质量小的蛋白质则进入凝胶内部的通道，路程长、速度慢，最后达到色谱柱的下端。可用SDS——聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。
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DNA和蛋白质是两种重要的生物大分子物质，它们在生物体的生命活动中发挥着重要的作用。请根据所学知识回答下列有关问题：（1）关于DNA粗提取：①DNA的粗提取过程中，需要去除DNA滤液中的杂质。可选择_...
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“DNA和蛋白质是两种重要的生物大分子物质...”的最新评论
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dna凝胶电泳_提速DNA电泳速度_DNA电泳胶体的技巧
提速DNA电泳速度 来自宾夕法尼亚州费城杰佛逊医学院(Jefferson Medical College)外科系，以及Kimmel肿瘤中心(Kimmel Cancer Center)的研究人员申请到了一项新专利，这项专利也许未来某天会成为DNA分析过程中的关键技术，而且这一发现也可以应用于多个领域，比如法医鉴定，克隆或者生物恐怖(bioterrorism)。 这一专利由约翰霍普金斯医学院助理教授Jonathan Brody博士，以及其同事Scott Kern共同拥有，他们发明了一 DNA电泳（agarose胶） 一、 试剂与材料： 1、 琼脂糖 2、 电泳缓冲液（1×TAE） 3、 10mg/ml溴化乙锭 4、 上样缓冲液 5、 电泳仪和水平电泳漕 6、 透射紫外灯 7、 胶带纸 二、 操作方法 按1～2%的琼脂糖浓度（据DNA样品分子量不同而定）配胶100ml ↓ 置于微波炉内加热搅拌，至琼脂糖完全溶解 ↓ 温度降至大约50℃时（勿忘记加入溴化乙锭）， 立即倒入靠近一端梳子的电泳槽 ↓ 待凝胶完全溶解后，小心拔去 核酸电泳（DNA电泳与RNA电泳） （一）DNA的凝胶电泳 凝胶电泳是
来自宾夕法尼亚州费城杰佛逊医学院(Jefferson Medical College)外科系，以及Kimmel肿瘤中心(Kimmel Cancer Center)的研究人员申请到了一项新专利，这项专利也许未来某天会成为过程中的关键技术，而且这一发现也可以应用于多个领域，比如法医鉴定，克隆或者生物恐怖(bioterrorism)。 这一专利由约翰霍普金斯医学院助理教授Jonathan Brody博士，以及其同事Scott Kern共同拥有，他们发明了一
一、 试剂与材料： 1、
2、 电泳缓冲液（1×TAE） 3、 10mg/ml溴化乙锭 4、 上样缓冲液 5、 电泳仪和水平电泳漕 6、 透射紫外灯 7、 胶带纸 二、 操作方法 按1～2%的琼脂糖浓度（据DNA样品分子量不同而定）配胶100ml ↓ 置于微波炉内加热搅拌，至琼脂糖完全溶解 ↓ 温度降至大约50℃时（勿忘记加入溴化乙锭）， 立即倒入靠近一端梳子的电泳槽 ↓ 待凝胶完全溶解后，小心拔去
（一）DNA的凝胶电泳 凝胶电泳是分子克隆的中心技术之一。 1. 琼脂糖凝胶用于分离大于200～1000bp的片段;操作简单、快速，且分离范围广，分辨率高 2. 聚丙烯酰胺凝胶用于分离5－500bp的片段; 效果好、分辨率极高，相差1bp的DNA片断就能分开，能容纳相对大量的DNA ，用于核苷酸多态性的分析。 的基本过程 材料：电泳缓冲液（常用TAE或TBE）、电泳级琼脂糖、溴化乙
制作电泳胶体的技巧：你是否对胶体上的气泡感到困扰，本视频提供你瞬间消除胶上气泡的妙招。您所在位置： &
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基因组DNA的提取及电泳鉴定详解.ppt 33页
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如果是Smear带，说明所提基因组DNA的断裂现象严重。
5 marker 未酶切的基因组 思考题：
1. 本实验中所用到的各试剂的作用是什么?
蛋白酶K, SDS, TE 饱和酚，氯仿, 乙醇, EDTA
2. DNA提取过程中有哪些注意事项？ 实验结束后整理实验台, 值日生值日! * 8:00~8:05
* 实验仪器的使用及注意事项 ：（1：25~1：30） * * （1）吸头的安装要紧密：（2）吸取液体前，先打到第一挡：第一挡为实际读数体积，第二挡为帮助彻底打出液体，避免吸头内液体残留。 （3）将吸头插入液面下，不易过深或过浅：（4）缓慢松开拇指，吸取液体。（5）完全放开拇指后，吸头在液面下停留一下（约半秒钟）：（6）抬起加样器，观察吸头外壁上是否挂有液体。将外壁液体用容器口引流回容器： 尤其国产吸头容易沾附液体。 （7）将液体匀速打到目的容器内，加样器推到第二挡：速度不易过快。 （8）取下加样器头，放到废物盒内。如果需要吸取相同液体，吸头没有被其他试剂污染，可不换吸头。
* 按箭头所示，讲解离心机使用程序： * 简单介绍一下真核细胞和真核细胞基因组，及我们今天实验的几部分内容（模板DNA的提取、电泳） * 置50°C水浴50分钟讲解：但以2价离子镁氯化镁的沉淀效率最高，还能提供Mg2+稳定DNA。
* 实验第二部分（2：50~3：30）
实验前讲解： 1）本实验将用到的TE饱和重蒸苯酚、氯仿/异戊醇是有机试剂，比水的比重大，而DNA溶解在水里，达到分离DNA和杂质的目的； 2）介绍实验步骤；
3）强调注意事项（不能将加样器倒置，以防液体导流损坏加样器：尤其在抽取氯仿、苯酚等有机试剂时）。
1）? 模板DNA由于太大，非常容易受机械剪切而断裂，因此，为了得到完整的基因组DNA，尽量不要多次进行物理性操作，如用加样器反复吹打等，有时需要将加样器头尖剪断，以防由于太细造成基因组DNA通过狭小通道而断裂。
实验中到学生中间指导实验。
* 注意事项：教师在实验中到学生中间指导实验。
* 步骤8）时注意：完整基因组DNA有一个物理特性，就是比较粘，因此，如果基因组DNA黏度还在，一般情况下可以认为完整性尚可。 * 哺乳动物DNA的分离通常是在有EDTA及SDS一类的去污剂存在下用蛋白酶K消化细胞．随后用酚抽提而实现的。低分子量杂质则用透析法加以去除。这一方法获得的DNA，其大小(100—150kb)适用于Southern分析和用噬菌体构建基因组DNA文库。 然而，若要用粘粒成功地构建文库则要求更大的DNA。
—端受到剪切而另一端则由限制酶切割产生的DNA片段，可在连接反应中争夺粘粒DNA，从而有效地阻碍了可被包装进曙菌体颗粒的多联体的形成。为避免出现这—问题，初始DNA的长度需数倍于用来构建文库的部分酶切产物。图9．2表示两端均适于克隆的部分消化产物所占组分与基因组DNA的初始长度的相互关系。DNA初始长度应至少是用于克隆的片段的4倍，否则生成的有效片段相对较少。因此，用就粒构建基因组DNA文库，初始DNA的长度应大干200kb。对于涉及有机溶剂抽提和机械剪切作用的方法来说，分离这样大小的DNA片段是困难的，因为在这些步骤里，DNA发生大量丢失。
，实时PCR可以定量分析基因的拷贝数,等等
* 要。 * 实验第 部分：60~80分钟。（3：30~4：00）
* * 小图为教师做的予实验结果。由于在一个反应体系中有很多条基因组DNA，因此，理论上说，内切酶可以切割出相差一个碱基的DNA片段。 本次实验使用未经酶切的DNA样品电泳，由于片段大，在加样孔附近可看到一条很亮的DNA带。
* 小图为教师做的予实验结果。由于在一个反应体系中有很多条基因组DNA，因此，理论上说，内切酶可以切割出相差一个碱基的DNA片段。 本次实验使用未经酶切的DNA样品电泳，由于片段大，在加样孔附近可看到一条很亮的DNA带。
分子生物学实验
1、 欢迎大家参加分生实验的学习； 2、 学习分生实验的重要性； 3、 守纪律，听老师安排，穿白衣； 4、 每组做一份实验 4、 本课件原则上禁止拷贝，要作好记录;
5、 关于课间休息和上课时间 每天实验结束应主动整理实验台。值日安排。 实验课考试 1.
最后2学时进行实验课考试
开卷, 内容为实验课学习内容。
?一、加样器的使用及注意事项
2、 如何使用？ 2.1 根据取样量，选择合适的加样器。
5ul、50ul、500ul，应选择哪个加样器? 顶部标有加样器的最大量程， 分别为： 20ul:
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&&DNA电泳没有条带
DNA电泳没有条带
这是我的DNA电泳图，1%琼脂糖，120V一个半小时，左侧是扩增的，右侧是同浓度未扩增，每图的左起第一孔为marker。求助一下，我做了好几次了，老是看不到条带怎么回事？DNA用的是人端粒序列，染料
可是那个第二张图的marker明显没跑开啊~~~跑了一个小时的时候loadding buffer那个蓝色在胶的中部，我以为还没跑好~~~~
那最后那个条带是怎么回事，那么多那么亮？
一般红色的是曝光过度了。不知道你的目的条带是多大的，我觉得应该是目的条带。就算是marker没跑开，你那些条带也太下面了吧。会不会是你的marker或者loading buffer有问题，别人跑正常么？还是你配的胶不行，
目的条带大概在25~50bp.marker应该没问题，loading buffer 是6×的，常用的那种。胶的浓度一般不都是1%吗？我没用琼脂糖跑过，只能按学姐的经验试试:work:
你没写错？25~50bp？！这么小？
没写错，人端粒序列，扩增成功应该是34bp
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