阪崎肠杆菌赖氨酸脱羧酶试验为什么是阴性

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阪崎肠杆菌
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G-杆菌,赖氨酸脱羧酶阴性,鸟氨酸脱羧酶、精氨酸双水解酶阳性,氧化酶、尿素酶阴性,发酵蔗糖、蜜二糖、甘露醇,不发酵山梨醇。产黄色素。兼性厌氧,最适pH7.4~7.6。 研究、质量控制
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阪崎肠杆菌检验规程
【来源/作者】北纳创联 【更新日期】
本规程规定了食品中阪崎肠杆菌(Enterobacter sakazakii)的检验方法。本规程适用于婴幼儿配方食品、乳和乳制品及其原料中阪崎肠杆菌的检验。
二、设备和材料
除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下。
①恒温培养箱:(25±1)℃,(36±1)℃,(44±0.5)℃;冰箱:2~5℃;恒温水浴箱:(44±O.5)℃。
②天平:感量0.1g。
③均质器;振荡器。
④无菌吸管:1mL(具0.0lmL刻度)、10mL(具O.1mL刻度)或微量移液器及吸头;无菌锥形瓶:容量100mL、200mL、2000mL;无菌培养皿:直径90mm。
⑤pH计或pH比色管或精密pH试纸;全自动微生物生化鉴定系统。
三、培养基和试剂
(1)缓冲蛋白胨水(buffer peptone water,BPW)。
(2)改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤一万古霉素(m。dified 1auryl sulfate tryptose bmth vancOmycm,mLST—Vm)。
(3)阪崎肠杆菌显色培养基。
(4)胰蛋白胨大豆琼脂(trypticase soy agar,TSA)。
(5)生化鉴定试剂盒。
(6)氧化酶试剂。
(7)L一赖氨酸脱羧酶培养基。
(8)L一鸟氨酸脱羧酶培养基。
(9)L精氨酸脱羧酶培养基。
(10)糖类发酵培养基。
(11)西蒙氏柠檬酸盐培养基。
四、阪崎肠杆菌的检验
(1)检验阪崎肠杆菌检验程序见图5 11。
(2)操作步骤
①前增菌和增菌取检样100g(mL)加入已预热至44℃装有900mL缓冲蛋白胨水的锥形瓶中,用手缓缓的摇动至充分溶解, (36±1)℃培养(18±2)h。移取1mL转种于10mL mLST—Vm肉汤,(40±0.5)℃培养(24±2)h。
a.轻轻混匀mLST—Vm肉汤培养物。各取增菌培养物1环,分别划线接种于两个阪崎肠杆菌显色培养基平板,(36±1)℃培养(24±2)h。
b.挑取1~5个可疑菌落,划线接种于TSA平板。(25±1)℃培养(48±4)h。
③鉴定 自TSA平板上直接挑取黄色可疑菌落,进行生化鉴定。可选择生化鉴定试剂盒或全自动微生物生化鉴定系统。
(3)结果与报告综合菌落形态和生化特征,报告每100g(mL)样品中检出或未检出阪崎肠杆菌。
五、阪崎肠杆菌的计数
(1)操作步骤
①样品的稀释
a.同体和半固体样品无菌称取样品100g、10g、1g各三份.加入已预热至44℃分别盛有900mL、90mL、9mL BPW中,轻轻振摇使充分混匀,制成1:10样品匀液,置(36±1)℃培养(18±2)h。分别移取lmL转种于10mL mLST-Vm肉汤中,(44±O.5)℃培养(24±2)h。
b.液体样品 蹦无菌吸管分别取样品100mL、10mL、1mL各三份,加人已预热至44℃分别盛有900mL、90mL、9mL BPW中,轻轻振摇使充分混匀,制成1:10样品匀液,置(36±1)℃培养(18±2)h。分别移取1mL转种于10mL mLST—Vm肉汤中, (44±0.5)℃培养(24±2)h。
②分离、鉴定同上。
(2)结果与报告综合菌落形态、生化特征,根据证实为阪崎肠杆菌的阳性管数,查MPN检索表,报告每100g(mL)样品中阪崎肠杆菌的MPN值。
来源:北京标准物质网
【关键词】阪崎肠杆菌 微生物 &
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产品名称HBI阪崎肠杆菌生化鉴定条(GB)英文名称& & & & &规格& & & & & &5条/盒用于阪崎肠杆菌的生化鉴定,每条包括:氧化酶试纸,赖氨酸脱羧酶肉汤,鸟氨酸脱羧酶肉汤,L-精氨酸双水解酶,氨酸脱羧酶对照,西蒙氏柠檬酸盐,D-山梨醇,,L-鼠李糖,D-蔗糖,D-蜜二糖,苦杏仁甙,共11种生化反应HBI阪崎肠杆菌生化鉴定条(GB)的步骤:(一)准确称量试剂:根据不同的菌类和用途,选择适宜的培养基,培养基所需试剂必须纯净。(二)校正pH值:将称量好的培养基各种成分放入容器内,标记划线,加热溶解,补充水分,测定酸碱度,常用pH6.8~8.0的精密试纸或酸度计测定。用1N NaOH和1N HCl调节pH值到适宜范围内。(三)过滤:将玻璃漏斗置铁架上,再用纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中,将上述培养基倒入其中过滤至透明。(四)分装:将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内(试管内每支装5mL;三角瓶中装100~150ml),塞好棉塞用牛皮纸包扎好,准备灭菌。(五)灭菌:培养基的灭菌,常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死,但细菌的芽胞有较强的抗热性,须经高压蒸汽灭菌才能达到彻底灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理,即压力越大,蒸汽温度就越高。因此,在同一温度条件下,采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下,菌体吸收水分后,其蛋白质易于凝固变性,因为蒸汽的穿透力强,杀菌效果好。人白介素12受体亚基β-1(IL12RB1/IL12R/IL12RB)ELISA Kit Human IL12RB1 ELISA kit人白介素17A(IL-17A)ELISA Kit Human Interleukin 17A,IL-17A/IL-17 ELISA Kit人白介素17B(IL17B)ELISA Kit Human IL17B ELISA Kit人白介素17F(IL-17F)ELISA Kit Human Interleukin17F,IL-17F ELISA Kit人白介素18结合蛋白(IL-18BP)ELISA Kit Human IL-18BP ELISA Kit人白介素19(IL-19)ELISA Kit Human IL-19 ELISA Kit人白介素1β前体(pro-IL1B)ELISA Kit Human pro interleukin 1 beta,pro-IL1B ELISA Kit人白介素1β前体(Pro-IL-1β)ELISA Kit Human IL-1β Precursor,Pro-IL-1β ELISA KitHBI阪崎肠杆菌生化鉴定条(GB)人白介素1β转换酶(ICE)ELISA Kit Human Interleukin 1β converting enzyme,ICE ELISA Kit人白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)ELISA Kit Human IL1Ra ELISA kit人白介素1受体相关激酶1(IRAK1)ELISA Kit Human Interleukin-1 receptor-associated kinase 1,IRAK1 ELISA Kit
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