出现症状后72小时内采样

粪便量盡量不少于5ml。

贮存于2～8℃但最多不能超过3天；长期贮存应在－20℃或－70℃。

成形便和肛拭子诊断意义较小

1000?l和200?l微量加样枪及相应不带濾芯的枪头

去离子水(无须高压)或蒸馏水

将试剂和待检测标本置于室温（15～30℃）30min。

阴性对照：将1ml样品稀释液（sample diluent）加至标记好的小瓶中作为阴性对照

阳性对照：1ml阳性对照液（positive control）溶解一瓶阳性对照， 颠倒混匀未用完的阳性对照可在2～8℃贮存1个月，长期贮存应分装存于-20℃

每次檢测均至少一个阳性对照和一个阴性对照。

洗液的配制：1倍体积的洗液浓缩液（WASH BUFFER×25）加24倍体积的去离子水当天用当天配。

加入1ml样品稀释液至1.5ml 小离心管中然后，加入0.1g固体粪便标本或0.1ml液体粪便标本置于漩涡震荡器充分混匀，室温静置10min室温下≥5000rpm离心5min，取上清进行检测或置-20℃冰箱保存备用

1、将需要数量的置于微孔板架上。

2、每孔加入100?l 10％便悬液以及阴性对照阳性对照。

3、每孔加入2滴（或100?l）酶结合物（conjugate）用枪头轻柔混匀（上下5次左右），20～30℃静置60±5min

4、每孔加入350?l洗液（用手轻微摇动1 min左右），弃去洗液在卫生纸上拍干，共洗5次

5、烸孔加入2滴（或100?l）底物液（Substrate），20～30℃静置30min待蓝色显现后迅速观察颜色。

6、每孔加入2滴（或100?l）终止液（Stop solution）充分混匀。

7、读取OD450值打茚输出或记录值。结果必须在加入终止液后30min内读取

阴性对照：肉眼观察无色或OD450值<0.15。

阳性对照：肉眼观察呈现独特的蓝色或OD450值>0.50

a)肉眼观察藍色比阴性对照颜色深判定为阳性，肉眼观察无色判定为阴性

b)OD450值大于临界值判定为阳性，小于临界值判定为阴性OD450值在临界值±0.01

范围内判定为可疑，应重复检测或重新取样判断阴阳结果按上述方法进行。若OD450值在临界值仍在±0.01范围内仍判定为可疑，对于可疑样品应用方法来判定最终结果

1、便标本处理时震荡时应充分震荡，特别是成形便或稀便以便于病毒从标本中释放出来。

2、加酶结合物（conjugate）后应用槍头轻柔混匀（上下5次左右）以便于充分结合。

3、读取吸光度应在加完终止液之后30min内完成

4、所有标本和阳性对照必须被当作具有潜在感染性的物质进行处理。

5、打开后的96微孔板应置于可封口的有剂的口袋中贮存于2～8℃打开后6周内用完。

6、终止液中含0.46mol/L硫酸避免接触到皮肤和眼睛。如果终止液接触到这些部位立即用水冲洗

7、底物液避光保存，不使用已经变蓝的底物液

8、避免试剂、金属离子、氧化性粅质及污染。

9、因标本中可能存在某些腺病毒该病毒具有与眼结膜结合的能力，在检测过程中应避免手与眼的接触

10、ELISA板微孔不能反复使用。

出现症状后72小时内采样

粪便量盡量不少于5ml。

贮存于2～8℃但最多不能超过3天；长期贮存应在－20℃或－70℃。

成形便和肛拭子诊断意义较小

1000?l和200?l微量加样枪及相应不带濾芯的枪头

去离子水(无须高压)或蒸馏水

将试剂和待检测标本置于室温（15～30℃）30min。

阴性对照：将1ml样品稀释液（sample diluent）加至标记好的小瓶中作为阴性对照

阳性对照：1ml阳性对照液（positive control）溶解一瓶阳性对照， 颠倒混匀未用完的阳性对照可在2～8℃贮存1个月，长期贮存应分装存于-20℃

每次檢测均至少一个阳性对照和一个阴性对照。

洗液的配制：1倍体积的洗液浓缩液（WASH BUFFER×25）加24倍体积的去离子水当天用当天配。

加入1ml样品稀释液至1.5ml 小离心管中然后，加入0.1g固体粪便标本或0.1ml液体粪便标本置于漩涡震荡器充分混匀，室温静置10min室温下≥5000rpm离心5min，取上清进行检测或置-20℃冰箱保存备用

1、将需要数量的置于微孔板架上。

2、每孔加入100?l 10％便悬液以及阴性对照阳性对照。

3、每孔加入2滴（或100?l）酶结合物（conjugate）用枪头轻柔混匀（上下5次左右），20～30℃静置60±5min

4、每孔加入350?l洗液（用手轻微摇动1 min左右），弃去洗液在卫生纸上拍干，共洗5次

5、烸孔加入2滴（或100?l）底物液（Substrate），20～30℃静置30min待蓝色显现后迅速观察颜色。

6、每孔加入2滴（或100?l）终止液（Stop solution）充分混匀。

7、读取OD450值打茚输出或记录值。结果必须在加入终止液后30min内读取

阴性对照：肉眼观察无色或OD450值<0.15。

阳性对照：肉眼观察呈现独特的蓝色或OD450值>0.50

a)肉眼观察藍色比阴性对照颜色深判定为阳性，肉眼观察无色判定为阴性

b)OD450值大于临界值判定为阳性，小于临界值判定为阴性OD450值在临界值±0.01

范围内判定为可疑，应重复检测或重新取样判断阴阳结果按上述方法进行。若OD450值在临界值仍在±0.01范围内仍判定为可疑，对于可疑样品应用方法来判定最终结果

1、便标本处理时震荡时应充分震荡，特别是成形便或稀便以便于病毒从标本中释放出来。

2、加酶结合物（conjugate）后应用槍头轻柔混匀（上下5次左右）以便于充分结合。

3、读取吸光度应在加完终止液之后30min内完成

4、所有标本和阳性对照必须被当作具有潜在感染性的物质进行处理。

5、打开后的96微孔板应置于可封口的有剂的口袋中贮存于2～8℃打开后6周内用完。

6、终止液中含0.46mol/L硫酸避免接触到皮肤和眼睛。如果终止液接触到这些部位立即用水冲洗

7、底物液避光保存，不使用已经变蓝的底物液

8、避免试剂、金属离子、氧化性粅质及污染。

9、因标本中可能存在某些腺病毒该病毒具有与眼结膜结合的能力，在检测过程中应避免手与眼的接触

10、ELISA板微孔不能反复使用。