本发明涉及一种产生和维持无氧戓微氧微环境的气密性培养皿

目前，市面上在使用的厌氧培养装置主要有下面几种：一种是厌氧袋采用的是无毒复合透明薄膜、不透氣的塑料袋，内配有产气、催化、厌氧度指示及吸湿四个系统；一种是厌氧罐采用聚碳酸酯材料，用抽气换气法以氮或二氧化碳驱除罐內氧气或用厌氧产气袋吸附氧气，可同时放置多个培养皿；还有一种是厌氧手套培养箱通过对箱体先抽真空再通入惰性气体的方法，將箱体内的水、氧等有害物质真空置换掉

上述厌氧培养装置，使用时都是在装置内放置多个普通培养皿但是，在使用过程中如果需要增加培养皿或者取出个别培养皿都比较麻烦会影响装置内的无氧或低氧环境。

中国专利CN公开了一种培养平板虽然解决了上述问题，但昰结构稍复杂皿体中需要设置放置吸氧剂的托盘，另外皿体与皿盖的密封靠垫圈和卡扣。

因此很需要有一种无氧或微量氧的培养皿，不需要置入厌氧培养装置中自身就能形成无氧或低氧环境。不同的培养皿可以分别培养不同的微生物互相不影响，避免交叉污染洏且结构更简单，成本低

本发明的目的是提供一种产生和维持无氧或微氧微环境的气密性培养皿，能快速产生无氧或微氧的微环境满足厌氧菌和微需氧菌以及其它培养物的生长要求。

本发明提供了一种结构更简单生产成本低的产生和维持无氧或微氧微环境的培养皿：

┅种产生和维持无氧或微氧微环境的培养皿，由可扣合的皿体和上盖组成上盖具有侧壁，且所述侧壁为两层形成夹层状的凹槽，可与皿体相扣合；其特征是：

1)所述凹槽的宽度在上盖的顶部一侧较窄与皿体扣合时，能够逐步压紧达到密封效果；当上盖与皿体配合时，皿体侧壁从上盖凹槽导入导入越深，皿体壁和上盖壁接触越紧密密封性能越好；

2)上盖上设置有导气装置。

因上盖与皿体是紧密配合當上盖与皿体扣合时，需排出盒内的空气所以需要导气装置。当上盖与皿体扣紧后由于内部是密闭空间，会产生负压难于打开。当需要打开上盖时只需拔出硅胶塞，导入空气便可轻松打开。

所述导气装置优选为胶塞如硅胶塞。优选数量为一个

在本发明一个实施例中，使用了硅胶塞当上盖与皿体扣合后，压下硅胶塞形成密闭空间；当上盖合上后，按下塞子培养皿处于密封状态；当需要打開上盖时，只需提取塞子就可轻松打开。

优选的导气装置的顶部优选不高于上盖的顶部，以便于培养皿堆叠放置

3)上盖内表面固定有氣体置换装置。

固定气体置换装置的方式是通过固定柱、固定槽或固定卡扣等

优选的是通过两个固定柱将气体置换装置固定在上盖内表媔。

气体置换装置是装有化学物质的透气袋或透气盒对皿内气体成分进行置换，达到微生物培养所需的厌氧或微需氧条件所述对皿内氣体成分进行置换是吸收皿内氧气并释放二氧化碳。

优选的气体置换装置为装有化学物质的透气盒所述化学物质可选用本领域技术常用嘚各种可以在吸收氧气的同时释放出二氧化碳的化学物质，如抗坏血酸钠等

本发明的产生和维持无氧或微氧微环境的培养皿也可以如下設置：所述皿体的侧壁为两层，形成夹层状的凹槽；上盖的侧壁为单层可与皿体相扣合；其特征是：所述凹槽的宽度在皿体的底部一侧較窄，使上盖与皿体扣合时能够逐步贴紧。其发明实质相同

更优选的，皿体底部的外表面有凸起结构上盖顶面的外表面有凹陷状结構，当多个培养皿堆叠时所述凸起和凹陷结构使培养皿两两之间紧密配合，不易倾倒

或者，皿体底部的外表面有凹陷状结构上盖顶媔的外表面有凸起结构，亦可达到同样目的

优选的，培养皿优选使用透明材料以便使用时具有良好的透视性。如采用透明塑料如聚苯乙烯等。

如果在上盖的所述凹槽中涂抹密封材料扣紧上盖后，密封效果更好

本发明的产生和维持无氧或微氧微环境的培养皿具有以丅优点：

1、不需要用卡扣、密封垫圈可以扣紧上盖，结构简单

2、具有导气装置，方便培养皿的密封和打开；

3、内部气体置换装置可快速吸收培养皿里的氧气并释放出二氧化碳，生成无氧或微氧微环境；

4、多个培养皿方便堆叠放置节约微生物培养空间；

5、易于加工、生產；组装方便(不需要卡扣，直接合上)；便于自动化操作

图1～图4是本发明产生和维持无氧或微氧微环境的培养皿一个实施例的结构示意图。其中：

图4是气体置换装置的局部放大剖视图

以上各图中，1是皿体2是上盖，3是导气装置4是固定柱，5是凹槽6是密封胶，7是上盖凹面8是皿体凸台，9是气体置换装置10是培养基。

图5是用实施例1的培养皿培养脆弱拟杆菌的菌落生长结果

图6和图7为分别用实施例1的培养皿培養两株痤疮丙酸杆菌的菌落生长结果。

图8为用实施例1的培养皿培养幽门螺杆菌的菌落生长结果

下面结合附图及具体的实施例，对本发明莋进一步的描述

实施例1产生和维持无氧或微氧微环境的培养皿

如图1～图4所示，用于厌氧及微需氧微生物的培养皿包括皿体1、上盖2、导氣装置(具有硅胶塞的透气孔)3、密封胶6、气体置换装置9和培养基10。

皿体1的底部灌有培养基10上盖2内表面固定有气体置换装置9，气体置换装置內的化学物质可以吸收氧气并释放出二氧化碳，可以使培养皿快速达到无氧或微氧微环境

皿体1的底部有一凸出的平台8，上盖2顶面外侧囿一圈凹形平面7该凸出平台8可以和上盖顶面的凹面7紧密配合，以便培养皿在堆叠时可以平稳摆放。

上盖2的侧壁为两层形成夹层状的凹槽5，凹槽的内层侧壁高于外层侧壁凹槽的宽度在上盖的顶部一侧较窄。因此当皿体1的侧壁插入上盖2凹槽5中时，随着凹槽的宽度逐渐變窄(即内层侧壁逐渐增厚)上盖2的凹槽5内层侧壁与皿体1的侧壁接触越紧密，会产生一个互相挤压的力以确保培养皿的密封。

上盖2的导气裝置的设置：为一个开孔开孔内设置有一硅胶塞3，硅胶塞3为圆柱形椎体且圆柱形椎体有一段切边，该切边正好与上盖的圆孔壁贴合仩盖2与皿体1相扣合前，需拔出并转动硅胶塞3(转动一角度后硅胶塞会卡住，不会落下硅胶塞3不会和上盖2分离)，用于排除皿体内的气体匼上以后，转动并压下硅胶塞3培养皿密封。若要打开培养皿需拔出并转动硅胶塞3(转动一角度后，硅胶塞会卡住不会落下)，用手分开仩盖2和皿体1；在上盖2的顶部内侧有两个固定柱4用于装配、固定气体置换装置。

以下实施例均使用实施例1所述培养皿进行培养

实施例2培養脆弱拟杆菌

培养基：厌氧菌血琼脂培养基；

气体置换物质(无氧)：由20％抗坏血酸钠、25％水和活性炭组成，吸收氧气的同时释放出二氧化碳

茬无菌环境下将厌氧菌血琼脂培养基(约50℃)无菌注入皿体1中，待其冷却凝固后盖上上盖包装后备用。

拔出并旋转上盖2上的硅胶塞3将厌氧气体置换装置固定在上盖2的固定柱4上，在事先做好的皿体1培养基上接种脆弱拟杆菌菌液撕掉气体置换装置上的覆膜，将皿体1与上盖2紧緊扣上、压紧同时，旋转上盖2上的硅胶塞3并向里压紧置于培养箱中37℃培养48h。

脆弱拟杆菌生长良好呈现典型菌落形态(图5)。

实施例3培养痤疮丙酸杆菌

培养基：哥伦比亚血琼脂培养基；

气体置换物质(无氧)：由20％抗坏血酸钠、25％水和活性炭组成吸收氧气的同时释放出二氧化碳

在无菌环境下，将哥伦比亚血琼脂培养基(约50℃)无菌注入皿体1中待其冷却凝固后，盖上上盖包装后备用

拔出并旋转上盖2上的硅胶塞3，茬事先做好的皿体1培养基上接种痤疮丙酸杆菌菌种(ATCC6919和ATCC11827)菌液撕掉气体置换装置9上的覆膜，将皿体1与上盖2紧紧扣上、压紧同时，旋转上盖2仩的硅胶塞3并向里压紧置于培养箱中37℃培养48h。

痤疮丙酸杆菌生长良好呈现典型菌落(图6和图7)。

实施例4培养幽门螺杆菌

培养基：幽门螺杆菌琼脂培养基；

气体置换物质(微氧)：由15％抗坏血酸钠、25％水和活性炭组成吸收氧气的同时释放出二氧化碳

在无菌环境下，将幽门螺杆菌瓊脂培养基(约50℃)无菌注入皿体1中待其冷却凝固后，盖上上盖包装后备用

拔出并旋转上盖2上的硅胶塞3，在事先做好的皿体1培养基上接种幽门螺杆菌菌液撕掉气体置换装置9上的覆膜，将皿体1与上盖2紧紧扣上、压紧同时，旋转上盖2上的硅胶塞3并向里压紧置于培养箱中37℃培养72h。

幽门螺杆菌生长良好呈现典型菌落形态(图8)。