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(a)在细胞传代时将灭菌过的清洁盖玻片放入培养瓶内,然后加
入细胞悬液待细胞贴壁生长在盖片后,將盖片取出用PBS洗涤l~2
(b)在传代时,将细胞悬液滴在灭菌过的洁净载玻片上再将该玻
片横放在灭菌过的玻片染色皿内,加盖用橡皮筋扣住,然后放入含5g
6C0228℃培养箱中,以保持pH的恒定约经24h,细胞贴壁生长后
取出固定备用。这样操作可使细胞形态少受其它因素的影响
(c)将培养液倒去大部后,用橡皮刮子沾取少量的培养液轻轻挂下
细胞,在用吸管吸取细胞悬液涂片检查此方法往往使部分细胞损壞,
悬浮细胞:吸取细胞悬液进行滴片若进行组织化学染色时,先将
细胞悬液进行离心(1000r/min)倒去培养液后再用PBS洗涤1-2次,以
除去血清等粅质离心后加适量PBS 滴片,风干后固定备用
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1.一种使宿主细胞适应悬浮细胞培養的方法此方法包括: 使一个或多个宿主细胞在第一细胞培养皿中生长,该第一培养皿具有表面区域; 使用允许宿主细胞生长和维持的生長支持培养基; (a)移除生长支持培养基; (b)从培养皿上分离细胞; (C)培养所述细胞; (d)将所述细胞重悬于所述生长支持培养基中; (e)接种上述重悬细胞;
(f)让所述重悬细胞生长一段时间该一段时间为使细胞重新贴壁培养皿所需的时间; (g)将步骤(a)-(f)重复至少一次; (h)将细胞转移至悬浮培养瓶; (i)攪拌细胞。
2.根据权利要求1所述的方法其特征在于,宿主细胞为至少一个BHK-M或HEK-293T
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