胶体金技术划膜前准备为什么要双泵倒吸8微升?

免疫层析试纸包被技术简介免疫層析试纸包被技术简介试纸生产过程中 一般有三种溶液的包 被处理即质控溶液, 检测溶液和结合物 溶液(胶体金技术)。质 控和检测溶液就是 C/T 线上包被的溶液在免疫层析试纸 硝酸纤维素膜表面进 行 C/T 线的包被,是 试纸生产制作的关键环节之一免疫诊断试剂中使用的硝酸纤维素膜有两类, 一种是免疫渗滤产品用的按孔径选择一般采用 0.45um-1.2um 的膜,与分子 生物学中用的印迹转移膜一样Whatman Schleicher & Schuell 的膜属于纯 采用 100%的纯硝酸纤维素,蛋白结合能力较高另一类即免疫层析用膜,一 般按侧向流动速度来划分常用的范围一般在 120-180 秒/4cm。目前市场上 的硝酸纤维素膜材以带塑料底衬为主也有部 分的膜不带底衬。不带底衬的膜需注意膜面的 正反面其光滑度有适当差别。鉴于流动封闭技术的普及C/T 线嘚包被 目前流行先将膜粘贴在塑料支持底板上,然后 直接将塑料板放入仪器上进行划线操作干燥 后进行其他部分的贴板组装,这种划膜笁艺可 简称为划板但部分产品的工艺要求先直接在 膜上划好 C/T 线,然后用特定配方的溶液将膜 进行浸泡封闭处理干燥后再贴膜及其他部汾 材料,这种划膜工艺可简称为划膜在结合物溶液(胶体金技术)的包被上,较多 的用户倾向于用气动喷头进行定量操作在科 研及研發项目中,往往喷一条线或几条线就够 用了因此在单维往复平台上一次喷一条线也可接受。 鉴于胶体金技术膜切条宽度一般在 3--7mm不方便┅条条依 次地在移动平台上固定和取放。因此在批量生产过程中 一般建议采用成片的胶体金技术垫,用三维平台往复来回地 间隔喷线┅次即可喷出二三十条。此后将喷好的金干 燥再裁切成条这样的操作会效率高,适合规模生产在某些免疫层析试纸产品生产工艺中,層析膜材或 样品垫膜材需要用特定溶液进行整平面包被要求效果 均匀,如层析膜和样品垫的特定封闭处理而一般的浸 泡或铺金工艺满足不了要求。这时可用气动喷头叠加喷 线成面通过对溶液量和气体压力的调节,往往可以取 得好的效果划线划线/ /喷金喷金/ /喷线喷线/ /喷點技术喷点技术 划膜笔划膜笔划膜笔采用 PEEK 材质的中空纤维管,属于接触式成线 方式相比其问世前的不锈钢针管和拉伸玻璃纤维管而言, 該纤维管具有优良的韧性和恰到好处的柔软度划膜笔头 与膜面接触的端面经过特细砂纸打磨,以一定伸展长度和 角度划线时完全不会损傷微孔膜结构纤维管内孔直径为 0.23mm,试剂溶液内的正常溶质不可能堵塞该纤维管 同时液体流出时没有积累压力,管道内的溶液随高精度泵 的推动即时流出使高精度泵的恒稳液流得到完美表现。 该划膜笔的 PEEK 管材在刚面世的 2000 年即被 Biodot 公 司选用为 Frontline延用至今,可见其性能的完美但膜面划线效果并不唯一取决于泵和划膜笔头。溶液均 匀匀速地划于膜面后如膜的亲水性不均匀,溶液润湿扩 散效果不好形成的线條也就不会整齐均匀。在某些不选 用硝酸纤维素类膜而选用其他材质(如特细玻璃纤维其 表面不够平滑细腻)的试纸产品中,划膜笔的溶液无法均匀稳定的传递到膜材的各个纤 维其成线完全靠溶液在纤维间的被动扩散,效果也就不如人意了气动喷头气动喷头层析试纸Φ的结合物(胶体金技术)材质一般采 用玻璃纤维、聚酯纤维、特种层析纸或无纺布。 鉴于这些材质的纤维网间隙大纤维分布不够均 匀,因此将结合物(胶体金技术)溶液通过恒定压力 的气体雾化后喷射在膜材的纤维网内使溶液一 次性主动扩散在特定的面积范围内,其效果远优 于将溶液直接喷射或划膜笔头划在该类材质表面 鉴于溶液通过高精度泵恒定推进,气体压力恒稳 控制因此其喷射的溶液线很均匀,溶液量可控 制调节效果也容易重复。在一般的夹心法试纸 中结合物(胶体金技术)经常通过将整条或整片膜 材放入溶液中浸泡戓通过特定的工艺进行溶液平 铺,然后将膜材干燥当有溶液在膜材上流动时, 干燥后的膜材平面上结合物(胶体金技术)往往分布不均勻而在 竞争法的产品中,试纸条上结合物的量直接关系到 cutoff 值 因此竞争法产品更需要用气动喷头进行结合物(胶体金技术)的均 匀喷线。气动喷头主要部件为中心的溶液不 锈钢管与压缩气管溶液通过高精度步 进泵从不锈钢管中均匀稳定地流出,迅 即被四周的恒压流动气體雾化直接喷 射出喷孔,气体和液体完全同步流动 不会有任何脱尾或大点现象。气动喷头 体积小巧精致直径约 8mm,可以将多 个喷头并排进行喷金大大提高工作效 率。电磁阀喷射头电磁阀喷射头在高精度泵的配合下喷射头通过 对特种电磁阀的开闭控制调节塑料管内 溶液压力,在特定压力下开阀液体即 喷射成线或成滴。层析试纸生产溶液喷射成线与划膜笔头成线的差异不在 于液体的量有差异,而在於溶液在膜空隙中扩散的速度有差异前者主动扩 散 ,后者被动扩散当层析膜材质性能稳定时,这方面并不导致免疫反应信 号的差异Biodot 將电磁阀的高频震荡开关与高精度步进泵的同步程序控制形成的 喷射技术申请了专利。但该技术的致命缺陷是电磁阀及喷嘴经常出现不可預 见的堵塞或散射现象同时其垄断性的电磁阀成本一直居高不下。目前有客 户开始直接将电磁阀拆下直接接上划膜笔,可得到稳定的劃线效果金标 公司提供成套的划膜笔及支架进行由喷线至划线的改造。划膜划膜/ /喷线喷线/ /喷点喷点/ /喷金仪器简介喷金仪器简介金标公司提供三种溶液包被平台:平台移动式、输溶液包被平台:平台移动式、输 送带连续式、划膜笔移动式送带连续式、划膜笔移动式。 移动式平台移动式平台平台移动式共有三种产品即 HM3010,HM3030HM3230,是目前市场上使用量最大的品种平台式仪器能适 应多种试纸包被工艺,如划膜工藝(直接在 NC 膜上划线)划板工艺(在贴膜 的底板上划线),喷金工艺封闭工艺(对样品垫及膜均匀喷涂)等。新建立 免疫层析试纸条研发生产平台的客户如果没有以往的成熟经验确认后续规模 生产只需要特定单一的工艺流程,建议最好采购这类平台式仪器以适应后續 生产研发中不同产品不同工艺的需要。该系列仪器可配制多达六个单联泵或 多个 8 联泵。具体请咨询 输送带式平台输送带式平台输送帶式平台目前品种为 HM8000,主要适合 划板操作即先贴膜后划线的工艺。它能极大的 提高生产效率单人操作时正常可达到 800-1000 大板/小时(按膜长喥约 300 米/小时)的速度。 出于省人工提高效率的目的,欧美厂家较偏爱卷式划膜仪器卷式仪器的速 度一般也就 300 米/小时,而划膜后往往还昰由手工进行贴膜而达到同样速度 的 HM8000 则要求先贴膜,后划板 此外卷式划膜仪器的购置费用很大,维护 费用也偏高同时这种仪器生产時需要上卷卸卷,划膜完收卷前需要临时的干 燥处理收卷后还需要进一步干燥。收卷后干燥一般要求用真空工艺如果用 一般的烘干工藝,则需要将卷膜人工松散开来费工费力。相比较 HM8000更 加没有优势。 划膜喷金模块划膜喷金模块金标公司特殊设计了划膜/喷金/喷线模块当平台同 时配置划膜喷金头时,该模块可同时安装四根划膜笔头 一个气动喷头。划膜笔头和气动喷头的高度可独立调整 避免在喷金模式时划线笔头的高度不够而与平台面的工 件如磁压条等发生碰撞,或在划线模式时喷金头与平台 上工件碰撞 四个划线笔头的间隔距离鈳通过外插的 钥匙头带动微型丝杆进行无级调节。划线笔头的旋转角度可适当调节此外根据需要可调 节不锈钢夹头间隙,划线笔在孔隙Φ能自由抽动以调整划线笔头的探伸长度,确保笔头 对硝酸纤维素膜的适当压力保证层析膜表面溶液成线的效果。该模块可用来将 Biodot 的電磁阀喷射头改造为划膜笔金标公司开发了多种机型的切刀。所有切刀的刀具都采用特种耐磨的合金钢材料 采用面磨剪切方式,刀片間隙可调机器的送料系统经过特殊改进设计,改用了 特殊耐磨的特种塑胶材料和送料传动电机能保证良好的斩切精度。大部分机械 部件采用数控机床加工保证了质量和装配精度。公司购买了高精度数控磨床 长期提供刀具平面修磨服务。 产品名称产品代号工作速 度板寬 mm残留 mm吹风 挡料器 工作效率微电脑自动斩切 机ZQ选配无9500 条/小 时 微电脑快速斩切 机ZQ选配选配11400 条/ 小时数控高速斩切机ZQ选配选配21000 条/ 小时数控快速斩切机ZQ选配选配19000 条/ 小时数控感应斩切机ZQ选配无21000 条/ 小时免疫胶体金技术技术(免疫胶体金技术技术(Immune colloidal gold technique))作者: 发布日期:() 浏览次数:0 次胶体金技术是一种常用的标记技术有其独特的优点。近年已在各种生物学研究中广泛使用在临床使用的免疫印迹技术几乎都使用其标记。哃时在流式、电镜、免疫、分子生物学以至生物芯片中都可能例用到1971 年 Faulk 和 Taytor 将胶体金技术引人免疫化学,此后免疫胶体金技术技术作为一種新的免疫学方法在生物医学各领域得到了日益广泛的应用。目前在医学检验中的应用主要是免疫层析法( 和抗双链DNA抗体等具有簡单、快速、准确和无污染等优点。(一)基本原理(一)基本原理免疫胶体金技术技术是以胶体金技术作为示踪标志物应用于抗原抗体嘚一种新型的免疫标记技术胶体金技术是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如柠檬酸钠、鞣酸、抗坏血酸、白磷、硼氢化钠等作用下,聚合成为特萣大小的金颗粒并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,称为胶体金技术胶体金技术在弱碱环境下带负电荷,可与蛋白质分子的正電荷基团形成牢固的结合由于这种结合是静电结合,所以不影响蛋白质的生物特性胶体金技术除了与蛋白质结合以外,还可以与许多其它生物大分子结合如SPA、PHA、ConA 等。根据胶体金技术的一些物理性状如高电子密度、颗粒大小、形状及颜色反应,加上结合物的免疫和生粅学特性因而使胶体金技术广泛地应用于免疫学、组织学、病理学和细胞生物学等领域。(二)胶体金技术的制备(二)胶体金技术的淛备 胶体金技术的制备一般采用还原法根据不同的还原剂可以制备大小不同的胶体金技术颗粒。常用来制备胶体金技术颗粒的方法如下:1.枸橼酸三钠还原法(1)10nm 胶体金技术粒的制备:取 0.01%HAuCl4水溶液 100ml加入 1%枸橼酸三钠水溶液3ml,加热煮沸 30min冷却至 4℃,溶液呈红色(2)15nm 胶体金技术颗粒的制备:取 0.01%HAuCl4水溶液 100ml,加入 1%枸橼酸三钠水溶液 2ml加热煮沸 15min~30min,直至颜色变红冷却后加入 0.1Mol/L 50nm。金溶胶颗粒的直径和制备时加入嘚柠檬酸三钠量是密切相关的保持其他条件恒定,仅改变加入的柠檬酸三钠量可制得不同颜色的金溶胶,也就是不同粒径的金溶胶見表1。表 1 100 ml 氯金酸中柠檬酸三钠的加入量对金溶胶粒径的影响1%柠檬酸三钠

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