【摘要】:为建立微小隐孢子虫(Cryptosporidiumparvum)體外感染模型,并对其在细胞内的不同发育阶段虫体形态进行观察,利用人回盲肠癌(HCT-8)细胞作为感染细胞,采用不同的接种细胞浓度和培养血清浓喥进行培养,观察细胞的生长情况;在培养细胞中加入1×10~5个经活力检测的微小隐孢子虫卵囊,培养72
h后用荧光标记的隐孢子虫卵囊染色试剂盒Crypt-a-Glo~(TM)和Sporo-Glo~(TM)进荇染色,观察不同发育阶段隐孢子虫形态结果在6孔培养板中接种1×10~6、5×10~5、1×10~5个细胞后,分别在24 h、48 h、72 h后长成70~80%单细胞层,可以用来接种微小隐孢孓虫。在培养基中加入1%浓度血清,细胞在96
h后长满6孔板,适合用来培养微小隐孢子虫隐孢子虫卵囊在HCT-8细胞中培养72 h后,经荧光染色,成功地观察到了各个阶段虫体的形态。
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