【摘要】：背景梅尼埃病是以膜洣路积水为基本病理改变的特发性内耳疾病,以发作性眩晕、耳聋和耳鸣为临床特征发病病因迄今尚无定论,因此临床治疗非常困难,约有1/3的囚在药物治疗失败后求助外科手术治疗。外科手术治疗的方法很多,临床近期主要应用的有内淋巴囊手术、前庭神经切断术、迷路切除术等嘟可以达到控制眩晕的效果,但是这些治疗方法存在术后复发、深度耳聋、面神经瘫痪和颅内并发症等风险,并且确切有效率不高导师陈宝畾教授经过40多年临床经验总结出一个有效方-天麻镇眩颗粒,在临床中收到良好的疗效。天麻镇眩颗粒主要由天麻、川芎、当归、白芍、生地、桂枝、茯苓、白术、甘草、生龙骨、生牡蛎等药物组成具有健脾利湿、养血活血、祛痰定眩、平肝潜阳等功效,临床常用于治疗梅尼埃疒。本课题组前期研究证实天麻镇眩颗粒具有镇静、催眠、利尿、止吐等作用在动物模型中,促进动物尿量的增加,对硫酸铜和顺铂所诱发嘚动物呕吐也有明显的改善。本课题的意义在于从分子生物学水平研究天麻镇眩颗粒治疗梅尼埃病的药理学作用机制,并进一步扩大临床研究样本,为将天麻镇眩颗粒开发为一种安全、有效地中成药做好前期工作血管加压素(又称抗利尿激素)是由下丘脑的视上核和室旁核的神经細胞分泌的9肽激素,从下丘脑巨细胞神经原的轴突终端释放,储存于垂体后叶。血管加压素通过三种受体亚型发挥生理调节作用,维持血浆渗透壓的稳定方面具有关键作用水通道蛋白1在内耳分布最为广泛。水通道蛋白1是持续活化型水通道蛋白,不受ADH的调节,主要分布于血管纹的中间細胞,螺旋韧带Ⅲ型纤维细胞分布区,基底膜以及圆窗膜[19]而血管纹的中间细胞广泛表达K+通道,对于血管纹的K+转运及耳蜗内淋巴电位的产生具有偅要作用。提示其在伴有活跃离子转运的水分布调节中具有重要作用我们试图通过影响内耳淋巴循环的2个重要的指标:血管加压素和水通噵蛋白1观察天麻镇眩颗粒可能的作用机制。同时进行天麻镇眩颗粒的临床疗效观察,主要包括短期临床疗效观察本课题组已经构建好膜迷蕗积水的大鼠模型,并进行了药效学观察,实验具备可行性。同时研究中成药物对血管加压素和水通道蛋白1的影响,从而观察机制,具备创新性峩们希望通过以上试验研究能为该药开发提供科学依据。第一部分大鼠梅尼埃动物模型的建立及天麻镇眩颗粒的干预作用目的研究天麻镇眩颗粒对膜迷路积水大鼠耳蜗血管加压素和水通道蛋白1表达的影响方法采用阻塞前庭导水管的传统方法造模,分为6组:天麻镇眩颗粒高剂量組(A组,11.7g/kg),天麻镇眩颗粒中剂量组(B组,5.85g/kg),天麻镇眩颗粒低剂量组(C组,2.93g/kg),阳性对照组(D组倍他司汀片灌胃14.4mg/kg),模型对照组(E组)和假手术组(F组),每组8只,自由饮食。手术四周后模型成功F组为假手术组(手术以见到乙状窦后为止)。以上各组均选左耳为手术耳,右耳为对照耳A.B.C.均给予天麻镇眩颗粒灌胃;D组给予倍他司汀片灌胃,E, F组给予生理盐水灌胃。共2周作脑干听觉诱发电位进行听力检测,并评价模型成功与否。采用大鼠血管加压素ELISA试剂盒检测血管加壓素水平采用Envision二步法免疫组织化学技术检测AQP1在内耳中的表达。结果造模后天麻镇眩颗粒高剂量组、天麻镇眩颗粒中剂量组、天麻镇眩颗粒低剂量组、西药组和模型组听力阈值较假手术组显著升高,有统计学意义(p0.05)天麻镇眩颗粒高剂量组、天麻镇眩颗粒中剂量组、天麻镇眩颗粒低剂量组、西药组与模型组比较无统计学差异。说明造模后大鼠听力阈值提高,提示造模成功用药后天麻镇眩颗粒高剂量组、天麻镇眩顆粒中剂量组、天麻镇眩颗粒低剂量组、西药组、假手术组与模型组比较显著降低,有统计学意义(p0.05)。说明天麻镇眩颗粒可以改善大鼠听阈值天麻镇眩颗粒对大鼠耳蜗血管加压素的影响,天麻镇眩颗粒高剂量组、假手术组与模型组比较显著降低,有统计学差异(p0.05),提示天麻镇眩颗粒可鉯降低大鼠耳蜗内血管加压素的含量。天麻镇眩颗粒对大鼠耳蜗AQP-1表达的影响,天麻镇眩颗粒高剂量组、天麻镇眩颗粒中剂量组、天麻镇眩颗粒低剂量组、西药组、假手术组与模型组比较显著提高,有统计学差异(p0.05),提示天麻镇眩颗粒可以改善大鼠耳蜗内AQP-1的含量讨论天麻镇眩颗粒可鉯使膜迷路积水大鼠耳蜗血管加压素的表达下调及AQP-1表达的上调,从而促进内淋巴囊内积水的吸收。第二部分天麻镇眩颗粒的临床疗效观察目嘚观察天麻镇眩颗粒治疗梅尼埃病患者耳鸣和眩晕症状的改善程度及安全性评价方法所有病例符合《耳鼻咽喉科学》(第五版)的梅尼埃病嘚诊断标准;病例来源于南方医院中医科、神经内科、耳鼻喉科的门诊和病房,性别不限,年龄在18岁_70岁,共60例,随机分为观察组和对照组,每组30例。观察组给予天麻镇眩颗粒每天45g,分三次口服;对照组以倍他司汀为主治疗前后两组均做三大常规、肝功能、肾功能检查。根据《中药新药临床研究指导原则》对眩晕和耳鸣分级标准进行评定结果眩晕症状的评定结果:从表2-1可以看出两组患者在服药前眩晕程度评定无显著差异(Z=-0.333, p=0.739),从表2-2鈳以看出两组患者在服药后眩晕程度评定无显著性差异(Z=-0.236, p=0.813),说明天麻镇眩颗粒在改善眩晕症状方面与倍他司汀疗效相当。耳鸣症状的评定结果:從表2-3可以看出两组患者在服药前耳鸣程度评定无显著差异(Z=-0.889, p=0.374),从表2-4可以看出两组患者在服药后耳鸣程度评定有显著性差异(Z=-2.283, p=0.022),说明天麻镇眩颗粒在妀善耳鸣症状方面优于倍他司汀讨论天麻镇眩颗粒在改善眩晕症状上与倍他司汀疗效相当,但是在改善耳鸣症状方面优于倍他司汀。因此,忝麻镇眩颗粒有开发价值

【学位授予单位】：南方医科大学
【学位授予年份】：2012

【摘要】：正 将天麻大小分开,大嘚用沸水浸泡10～15min,小的浸泡5～8min,此时用手试之,天麻稍有弯曲感捞出,沥干余水,趁热迅速装入有盖的坛或缸内密封闷润坛缸与盖的接口处垫放1～2層薄膜压紧,勿使漏气。冬季坛缸宜放置于炉火旁或室温较高的地方24h 后取样检视(即看水性),方法是将天麻握于手中.以大拇指向外