摘 要:近日来自美国纽约大學医学院Agnel Sfeir研究小组发现非同源末端连接过程能够利用聚合酶θ促进肿瘤细胞中的端粒发生染色体末端融合。这项研究对治疗携带同源重组修复突变基因的肿瘤具有重要意义。研究人员指出,细胞的非同源末端连接(NHEJ)机制能够促进部分基因组重排,但同时也可能导致细胞性狀发生转化这种容错修复途径会在端粒发生脱保护,有害染色体末端融合的情况下被触发 |
【摘要】:为研究染色体外重组方法在创建转基因动物中的应用,选取牛asl酪蛋白基因的5′及3′侧翼区和氯霉素乙酰化酶编码区,构建了两个具有3 kb相互重叠的融合基因.将这两个DNA爿段末端脱磷酸后,以摩尔比1:1的比例混合,通过显微注射导入小鼠受精原核,最后获得了11个品系的转基因小鼠.对其中10个品系的小鼠的整合分析表奣,所注射的两个DNA片段均发生了染色体外同源重组,而且除了 1个品系的小鼠丢失了大约1kb的序列外,其余品系小鼠的重组产物与预想的结构符合.在當代和后代的转基因小鼠乳汁中均可测到氯霉素乙酰化酶的活性.这表明融合基因在转基因小鼠乳腺中得到表达和分泌,也说明显微共注射两個相互重叠的基因片段是建立转基因动物的一个可行途径.
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大肠杆菌DH5α upp基因的敲除及其应用研究
: 反向筛选标记指在一定的筛选条件下含有标记基因的菌株死亡,不含有筛选标记基因的菌株反而能存活下来的标记基因这样一來,既不引入抗性基因又能到达筛选的目的。upp基因广泛存在于原核生物和某些低等真核生物细胞中其表达产物为尿嘧啶磷酸核糖转移酶(Uracil
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