本文只做了解和参考我们需要根据中药材同有效分或活成分择不同的提取方法，每种 方法也有优劣之分例如索氏提取适用于提取溶解度较小的物质，但当物质受热分解和萃取剂沸较高时不宜用此方法，而且提取时间较长而超声提取，可以进行清洗、干燥、杀菌、雾化及无损检测等是超声波的提取理与提不同，所以也根

1．溶提取法的原理：溶剂提取法是根据中草药中各种成分在剂的溶解性选用对性成分解度大，对不需要溶出成汾溶解度小的溶剂而将有效成分从药材组织内溶解出来方法。当溶剂到中草药原料（需适当粉碎）中时溶剂由于扩散、渗透作用逐通過细胞壁透入到细胞内，溶解了可溶性物质造成细内外的浓度差，于细胞内的浓溶液不断向扩散溶剂不进入药材组织细胞中，如此多佽往返直至胞内外溶液浓度达到动态平时，将此饱和溶液滤出继多次加入溶剂，就可以把所需要分近

中草药成分在溶中溶度直接与溶劑性质有关溶剂可分为水、本性有机溶及亲脂性有机溶剂，被溶解物质也有亲水性及亲脂

有机化合物分子结构中亲水性基团多其极性洏于油；有的亲性基少，其极性小而疏于水。这种亲水性、亲脂性及其程度的大小是和化合物的分子结构直接相关。一般来说两基夲母核相同的分，其分子中功能基极性越大或极性功能基数量越多，则整子的极性大亲水性强，而亲脂性就越弱其分子极部分越大，或碳越长则极性小，亲脂

各类溶剂的性质，同样也与其分子结构有关例甲、乙醇亲水性较强溶剂，它们的分子比较小有羟基存茬，与水的结构很近似所以能够和任意混合。丁醇和戊醇分子中虽都有羟基保持水有相似处，但分逐渐地加大与水性质就逐渐疏远。所以它们能彼此部分互溶在互溶达到饱和状态之后，丁醇或戊醇都能与水分层氯、苯和石油醚是烃类氯烃衍物，分子中没有属

这樣，我们就可以通过时中草药成分结构分析去估它们此类质和选用溶剂。例如葡萄糖、蔗糖等分子比较小的多羟基化合物具有强亲水性，极溶于水就在亲水性比较强的乙醇中也难于溶解。淀粉虽然羟基目多但分子大大，以难溶解于水蛋白质和基酸都是酸碱两性化匼物，有一定程度的极性以溶于水，不溶于或难溶子有机溶剂甙类都比其甙元的亲水性，特别是皂甙由于它们分子中往结合有多数糖汾羟基

强的亲水性，而皂甙元则属于亲脂性强的化合物多游离的物碱是脂性合物，与酸结合成盐后能够离子化，加强了极性就变為亲水的注质，些生物碱可称为半极性化合物所以，生物碱的类易溶于水不溶难溶于有机溶剂；而多游离的生物碱不溶或难溶于水，噫溶于亲脂剂一般以在氯仿中溶解度最大。鞣质是多羟基的化台为亲水性的物质。脂、挥油、蜡、脂溶性都

总的说来只要中草成分親性和亲脂性与溶剂的此项性质相当，就会在其中有较大溶解度即所谓“相似相溶”的规律。这是选择适当溶剂自中草药中提取需要成汾

2．溶剂的选择：运用溶剂提取的关是择当的溶剂。溶剂选择适当就可以比较顺利地将需要的成分提取出来。选择剂要注意以下三点：①溶剂有效成分溶解度大对杂质解度小；②溶剂不能与中药的成分学变化；③溶剂要经济、易

1）水：水一种强的极性溶剂。草药中亲沝性的成分如无机盐、糖类、分子不太大多糖类、鞣质、氨基酸、蛋质、有、生碱盐及甙类等都能水溶出。为了增加某些分的溶解度吔采用酸水及碱水作为提取溶剂。酸水提取可生物碱与酸生成盐类而溶出，水提取可使有机酸、黄酮、蒽醌、内酯、香豆素以及酚类成汾溶出但用提取易酶解类成分，且易霉坏质某含胶、粘液质类成的中草药，水提取液常常很难过滤沸水提取，中草药中的淀粉可被糊而增加过滤的困难。故含淀粉量的中草药不宜磨成细粉后加水煎煮。中药传统用的剂多中药饮片直火煎煮，加温可以增大中成分嘚溶解度外还可能有与其他成分产生“助”现象，增加了一些水中溶解度小、亲性强的成分的解度但多数亲脂性成分在水中溶解度是鈈大的，既使有助溶现象存在也不容易提取完全。如果应用量水煎煮就会增蒸发浓缩时的难，且会溶出大量杂质进一步分离提带来麻。中草药水提取液中含有皂甙及粘液质类成分减压浓缩时，还会产生量泡沫造成浓缩的困难。通可在蒸馏器上装臵汽一液分离

2）亲性的有机溶剂：也就是一般所说的与水能混溶有机溶剂如乙醇（酒）、甲（木精）、丙酮等，以乙醇常用乙的溶解性能比较好，对中艹药细胞的穿透能力较强亲水性的成分除蛋白质、粘液质、果胶、淀粉和部多等外，多能乙醇中溶解难溶于水的亲脂性成分，在醇中嘚溶解度也较大还可以根据被提物质的性质，采用不同浓度的乙进行提取用乙醇提取比用量较少，取时间短溶解出的水溶杂质也少。乙醇为机溶剂易燃，但毒性小价便宜，来源方便有一定设备即可回收反复使用，而且醇的提取液不易发霉变质于这些因，用乙醇提取的方法是历来最常用方法之一醇的性质和乙醇相

3）脂性的有机溶剂：也就是一般所说的与水不能溶的机溶，如石油、苯、氯仿、乙醚、乙酸乙酯、二氯乙烷等这些溶剂的选择性能强，不能不容易提出水性杂质但这类溶剂挥发性大，多易燃（氯仿除外）一般有蝳，价格较设备要求较高，且它们入植物组织的能力较弱往往需要长时间反复提才提取完全。如果药材中含有较多的水分用这类溶劑就很难浸有效成分，因此大提取中药原料时，直接应类溶

3．提取方法：用溶剂取中药分、常用浸渍法、渗漉法、煎煮法、回流提取法及连续回流取法等。同时原料粉碎度、提取时间、提取温度、设备条件等因素也都能影响取效率，必

1）浸渍法：浸渍法系将中药粉或誶人适当的容器中加入适宜的溶剂（如乙醇、稀醇或水），浸渍药材以出其中成分的方法本比较简单易行，但浸出率较差且如用水為溶剂，其提取液于发霉变）须注意加入

2）漉法：渗漉法是将中草药粉末装在渗漉器中不断添加溶剂，使其渗过药材上而下渗漉器下蔀流出浸出液的一种浸出方法小当溶剂渗进药粉溶出成分比重加大而向移动时，上层溶液或稀浸液便臵换其位臵造成良好的浓度差，使擴散能较地进行故浸出效果优浸渍法。但应控制流在渗过程中随时自药面补充新溶剂，使药材中效成分充分出止或当渗滴液颜色极淺或渗涌液的体积当于：原药材重的10倍时，便认为基本上已提取完全在大量产中常将收集的稀渗淮液为另

3）煎煮法：煎煮法是我国最早使用的统的浸出法。用器一般为陶器、砂罐或铜制、搪瓷器皿不宜用铁锅，以免药液变色直火加热时最好时常搅拌，以局部药材受热高容易焦糊。有汽加热设备的药厂多采用大反应、大铜锅、大木桶，或水泥砌的池子中通入蒸热还可将数煎煮通过管道互相

4）回流提取法：应用有机溶剂加热提取，需用流加装臵免溶挥发损失。小量操作时可在圆底烧瓶上连接回流冷凝器。瓶内装药材约为容量的％～％溶剂浸过药材表面约1～2cm。在水浴中热回流一般保持沸约：小时小放冷过滤，再在药渣中加溶剂第二、三次加热回流分别约半尛时，或至基本提尽有分为止此法提效率较浸法高，大量生多

5）动连续提取法：应用挥发性有溶剂提中草有成分不论小型实验或大型苼产，均以连续提取法为好而且需用溶剂量较少，提取成也较完全实室常用脂肪提器或称索氏提取器。连续提取法般需数小时才能提取完全。提取成分时间较长热不稳定易变化的

（二）水蒸气蒸馏：。水气蒸馏法适用于能随水蒸气蒸馏而不被破坏中草药成分的取。此类成分的沸点多在100℃以上与不相混溶

且在100℃时存一定的蒸气压。当与水在一起加热时其气压水的蒸压总和为个大气时，液体就开始沸腾水蒸气将挥发性物质一并带出。例如中草药中的挥发油些小分子生物一麻黄碱、萧碱、槟榔碱，以及某些小分子的酚性物质牡丹（paeonol）等，都可应用本法提取些挥发成分在水中的溶解稍大些，常将蒸馏液重蒸馏在最蒸出的部分，分出挥发油层或在蒸馏液水經盐析法并用低沸点溶剂将分取出来。例如玫瑰油、白头翁

（三）升华法：固体物质受热直接气化遇冷后又凝为体化物，称为华草药Φ有一些成分具有升华的性质，故可利用升华法直接自中草药提取出来如樟木中升华的樟脑（camphor），在《本纲目》中已有详细的载为世堺上最早应用华法制取药材有效成分的记述。茶叶中的咖啡碱178℃以上就能升华而不被分解游离羟基蒽醌类成分，一豆素类有机酸类分，有也具有升华的性质如七

升华法虽然简单易，中药炭化后往往产生挥发性的焦油状物，粘附升华物上不精制除去，其次升华不唍全，产率低有还伴随有

上述提取法所得到的中药取或提取物仍然是混合物，需进一步除去杂质分离并进行制。具体的方法随中草药嘚性质不同而异以后将通过实例加以叙述，此只作一般原

（一）剂分离法：一般是将上述总提取物选用、四种不同极性的溶，由极性箌极性分步进行取分离浸膏或乙醇浸膏常常为胶伏物，难以均匀分散在低极性溶剂中故不能提取完全，可拌人适惰性填充剂如藻土戓纤维粉等，然后低温或自然干粉碎后，再以选用溶剂依次提取使总提取物中各组成成分，其在不同极性溶剂中溶解的差异得到分离例如粉防己醇浸膏，碱化后可利用乙溶出脂溶性生碱再以冷苯处理溶出粉防己碱，与其结构类似的防己林碱比前者少一甲基而一酚羟溶于冷苯而得以分离。利用草药化学分在不同极性溶中的溶进行分

广而之，自中草药提取溶液中加入另一种溶剂析出其中种或些成汾，或析出其质也一种溶剂分离的方法。中草药的水提液中常含有树胶、粘液质、蛋白质、糊淀粉等可以入一定量的乙醇，使这些不溶于乙醇的成分自溶液中沉淀析而达到与其它成分分的目的。例如自中药提取中除去这些杂质或自白及水提取液中获白及胶，可用乙醇沉淀法；自新鲜括楼根汁中制取天粉素可滴人丙酮使分次淀出。目前提取多糖及肽类化物，多采用水溶解、浓、加乙

此外也利其某些成分能在酸或碱中

pH后，不溶物而析出以达到离例如内酯类化合物不溶于水，但遇碱开环生羧酸盐溶于水再加酸酸化，又重新酯环溶液中析出从与其它杂质分离；生物一般不溶于水，酸生成生物碱盐而溶于水再加碱碱化，重新生成游离生物碱这些合物可以利用與水不相混溶的有机溶剂进行萃取分离。一般中草药总提取物用酸水、碱水先处理可分为三部：溶于酸水的为性成分（如物碱），溶于堿水的为酸性成（如有机酸）酸、碱均溶的为中性成分（如甾醇）。还利用不同酸、碱度进一步分离如酸性化台物可以为强酸、弱酸性和酷热性三种，它们别溶于碳酸氢钠、碳酸钠和氢氧化钠借此可进分离。些总生物碱如长春花物、石蒜生物碱，可利用不同rH值进行汾但有特殊情况，如酚性生物碱紫董定碱（corydine）在氢氧化溶液中仍能为乙抽出蝙蝠葛（dauricins）在乙醚溶液中为氢化钠溶液抽出，而溶于氯仿溶液中则不能被氢氧钠溶液抽出；有些物碱的盐类如四氢掌叶防己盐酸盐在水溶液仍为氯仿抽

（二）两相溶剂萃取法：

1．萃法：两相溶劑提取又简称萃取法，是利用混合物各成分在两种互不相溶溶剂中配系数的不而达到分离的法萃取如果各成分在两相溶剂中分配系数相差越大，则分离效率越高、如果在水提取液中的有效成分是亲脂性的物一多用脂性有溶剂，如苯、氯仿或乙醚进行两相萃取果有效成汾是偏亲水性的物质，在亲脂溶剂中难溶解就需要改用弱亲性的溶剂，例如乙酸乙酯、丁等还可在氯仿、乙醚中加入适量醇或甲醇以增大其亲性。提黄酮类成分时多乙乙脂和水的两相萃取。提取亲水性强的皂甙则多选用正丁、异戊醇和水作两相萃取过，一有机剂亲沝性越大与水作两相萃的效果就越不，因为能使较多的亲性杂质伴出对

1）先用小试管猛烈振摇约1分钟，观萃取后液层层象如果容易產生乳化，大量提取时要避免猛烈振摇可延长萃取时间。如碰到乳化现象可将化层分出，再新溶剂萃取；或乳化层抽滤或将乳化层稍稍加热；较长时间放臵并不时旋转，令其自然分层化现象较严重，可采用二相溶剂

2） 水提液浓度最好在比重1．1～1．2

3） 溶剂与水溶保一萣量的比例第一次提取时，溶剂要多一一般为水提

4）一般萃取3～4次即可。但亲水性较大的成分不转入有机

萃取法所用设备如为小量萃取，可分液漏中进；系中量萃取可在较大的适当的下口瓶中进行。在工业生产中大量萃取多在密闭萃取罐内行，用搅拌搅拌一定时間二液充分混合，再放臵令其分层；时将两相溶液喷雾混含以增大萃取接触，高萃取效率也可用二相溶剂

2．逆连续萃取法：是一种連续的两相溶剂萃法。其装臵可具有一、数或更多萃取管管内小瓷圈小的不锈钢丝圈填充，以增加两相溶剂萃取时的接触面例如用氯汸从川楝树皮的水浸液萃取川楝素。将仿盛于萃取管内而比重小于氯仿的水提取浓缩液贮于高位容器内，开活塞则水浸液在高位压力鋶入萃取管，遇瓷圈撞而分散成粒使与氯仿接触面大，萃取就比较完全如一种中草药的浸需要用比水轻的苯、乙酸乙酯等进行萃取，則需水提浓缩液装在萃取内而、酸乙酯贮于高位容器内。萃是否完全可取样品用薄层析、纸层显色

3．逆分配法（CounterCurrentDistribution，CCD）：流分配法称逆鋶分溶法、流分布法反流分布法逆流分配法与两相溶剂逆流萃取法原理一致，但加样量一定并不断在一定容量的两相溶剂中，经次移位取分而达到混合物的分离本法所采用的逆流布仪是由若干乃数百只管子组成。若无仪器小量萃取时可用分液漏斗替。预先选择对混匼物分离效较好即配系数差异大的两种不相溶的溶剂。并参考配层析的为分析推断和选溶剂统通过试验测知要经多少次的萃取移位而達到真正的分。逆流分配法对于分离具非常相似质混合物往往可以取得良好的效。但操作时长萃取管易因机械荡而损坏，耗溶剂

4．液滴流分配法：液滴逆流分配法又称液滴逆流层析法为年来在逆流分配法基上改两相剂萃取法。对溶剂系统的选择本同逆流分法，但要求能在短时间内分离成两相并可生成有效的液滴。由于移动相形成液滴在细的分配萃取管中与固定相有效地触、摩擦不形成新表面，促进溶质在两相溶剂中的分配故其分离果往往比逆流分配好。且不会产生乳化现象用氮气压驱动移动相，被分离物质不因遇大中氧气洏氧化本法必须用能生成液的溶剂系统，且对高分子化物的分离效果较差处样品量小（1克以下），并要有定备应用液滴逆流分配法缯有效地分离多种微量成分如柴胡皂甙原檗碱型季铵碱等。液滴逆流分法的装臵近年虽不断在改进，但装臵和操作较繁目前，对适用於流分配法进行分离的成可采用两剂逆流连

（三）沉淀：在中草药提取液中加入某些剂使产生

1． 铅盐沉淀法：铅盐沉淀法为分某些中药荿的典方法之一。由于醋酸铅及碱式醋酸铅在水及醇溶液中能与多种中草药成分生成难溶的盐或络盐沉淀，故可利用这种性使有效成分與杂质分离中性醋铅可与酸性物质或某些酚性物质结合成不铅盐。因此常用以沉淀有机酸、

粘液质、鞣质、树脂、酸性皂甙、部黄酮。可与式酸铅产生不溶性铅盐或络合物的范围更广通常将中草药的水或醇提取液先加入醋酸铅浓液，静臵后出沉淀并将沉洗液并入滤液，于滤液中加碱式醋铅饱和溶液至不发生沉淀为止这样就到醋酸铅沉物、碱式醋酸铅沉

然后将铅沉淀悬浮于新溶剂中，通以硫化氢气體使分解并转为不性硫化铅而沉淀。含盐母液先如脱铅处理再缩精制。硫化氢脱比较彻底溶液中可能存有多余的硫化氢，必先通人涳气或二氧化碳让气泡带出多余的硫化氢气体以免在处理溶液时参与化学反应。新生的硫铅多为体沉淀能吸咐药液中有效成分，要注意用溶剂处理收回铅方法，也可用硫、磷酸、硫酸钠、磷酸钠等铅但硫酸铅、磷酸铅在水中仍有一定溶解度，除铅不彻底用阳离子茭换脂脱铅快而底，但要注意药液中某些有效成也可能被交换上去同脱铅树脂再也较困难。还应注意铅后液酸度增加有时需中和后再處理溶液，有时可用新制备的氢氧化铅、氢氧化铝、氧化铜或碳酸铅、矾等代替醋铅、式醋酸铅例如在黄芩水煎液中加入矾溶液，黄芩甙与铝盐络合生成难溶于水络化物而与杂离这种

试剂沉淀法：例如在生物碱盐的溶液中，加入某些生碱沉试剂（生物碱性下）生物碱苼成不溶性复盐而析出。水溶性生物碱难以用萃取法提取分出常加雷氏铵盐使生生物碱雷氏盐沉淀析出。又如橙皮甙、芦丁、黄芩甙、咁草甙均易溶于碱性溶液加入酸后可使之沉析出。些蛋白质溶液可以变更溶液的pH值利其在等电点溶度最小的性质而使之沉淀析出。此外可以用明胶、蛋白溶液沉鞣；胆甾醇也常用以沉淀地黄皂等。可根据中草药有效和杂

（四）盐析法：盐析法是在中草药的水提液中、加入无机盐一浓度达到饱和状，可某些成分在水中的溶解度降低沉淀析出而与水溶性大的杂质分离。常用作析的无机盐有化钠、硫酸鈉、硫酸镁、硫酸铵等例如三七的水提取液加硫酸镁至饱和状态，七皂甙乙即可沉淀析自藤中提取掌叶防己碱，自三颗针中提取小碱茬生产上用氯化钠或硫酸按盐析制备有些成分如白头翁素、麻黄碱、苦参等溶性较大，在提取时亦往往先水提取液中加入一定

（五）析法：透析法是利用小分子物质在溶液中可通过半透，而大分子物质不通过透膜的质达到分的方法。例如分和纯化皂、蛋白质、多肽、哆糖等物质时可用透析法以除去无机盐、单糖、双糖等杂质。反之也可将大分子的杂质留在半透内而将小子的物通过半透膜进入膜外溶液中，而加以分离精制：透析是否成功与析膜的规格关系极大透膜的膜孔有大有小，要根据欲分离分的具体情况而选择透析膜有物性膜、棉胶膜、羊皮纸膜（硫酸纸）、蛋白质胶膜、纸膜等。常多用市售的玻璃或动性半透膜扎成袋状外面用尼龙网袋加以保护，小心加入欲透的样品溶液悬挂在清水容中。经常换清使透析膜内外溶液的浓度差加大要时适当加热，并加以搅拌以利透速度加快。加快透

放臵二个电极接通电路，则析膜的带正荷的成分如无机阳离子、生物碱等向阴极移动而带负电共荷的成分如机阴离子、有机酸等则姠极移动，中性化合物及高分化合物则留在透析膜中透析是否全，须取析膜内溶液进

一般透膜可以自制：动物半透膜如猪、牛的膀胱膜、水洗净再以乙醚脱脂，即供用；羊纸膜可将滤纸入50％硫酸15～60分钟，取出铺在板上以水冲洗制得。其膜孔大小与硫酸浓度、浸泡时間以及用水冲洗度有关；棉胶膜将火棉胶溶于乙醚及无水乙醇涂在板，干后放臵水中即可供用其膜孔大小溶剂种类、溶剂挥发速度有關，溶剂中加入适量水可使膜孔大加入量醋酸可使膜孔缩小；蛋质胶（明胶）膜可20％胶涂于细布上，干放水中再加甲醛使膜凝固，冲洗干净即可供用近来品有透析膜管成品出售，外习称“ViskingDialysisTubing”有各种大小厚度规，可供不小分子

（六）晶、重结晶和分步结晶法：鉴定中艹药化成分研究其化学结，必首先将中药成分制备成体纯品常温下，物质本身性质是液体的化台物可分别用分馏法或层析法进行分離精制。一般他说草药化学成分在温下多半是固体的物质，都具有结晶的通性可以根据溶解度的不同用结法来达到分离精制的目的。究中草药化学成分时一获得结晶，就能有效地进一步精制为单体纯品纯化台物的晶有一定的熔和结学的特征，有利于鉴定如果鉴定嘚物质不是单体品，不但不能得出正确结论会成工作上的浪费。因此求结晶并制备单体纯品，就成鉴定中草分、研

1．质的除去：中草藥经过提取分离所得到的成分大多然有杂质，或者是混合分时即使有少量或微量杂质存在，也能阻碍或延缓结晶的形成所以在制备結时，必须注意质的干扰应力求尽可能除去。有时可选用溶剂溶出杂质或只溶出所需要的成分。有时可用少量活性炭进行色处理以除去有色杂质。有时可通过氧铝硅胶或土短柱处理后，再进行制备结晶但应用附剂除去杂质时，要注意需的成分也可能被吸附损失此，层析法更是分离制体纯

如果一再处理仍未能使近于纯品的成分结化则先制备晶态衍生物，再回收原物可望得到结晶。例如游离生粅碱可制备各种生物碱盐类羟基化合物可转变成乙化物，碳基化物可制备成苯踪衍物结晶美登碱在原料中含量少，且分离精制难以得箌结晶但制备成3一滇丙基碱结晶后，再经解除澳丙基美登

2．溶剂的选择；制备结晶，要注选合的溶剂和应用适量的溶剂合宜的溶剂，最好是在冷时对所需要成分溶解度较小而热溶解度较大。溶剂的沸点亦不宜太高一般常用甲醇、丙、氯仿、乙醇、乙酸乙

合物在一般溶剂中不易形成结晶，而在某些溶剂易于形结晶如葛素、逆没食子酸（ellagicacid）在冰醋酸中易形成结晶，黄素（emodin）在吡啶中易于结晶萱毒素（hemerocallin）在N，N一二甲基甲酞胺（DMF）中易得到结晶穿心莲亚硫酸氢钠加成物在丙酮一水中较易得到结晶。如蝙蝠葛碱通常为定形未但能和氯仿或醚形

3．结晶溶液的制备：制结晶溶，需要成为过饱和的溶液一般是应用适量的溶剂在加温的情况，将化合物溶解再放冷处如果茬室温中可以析出结晶，就不一定放臵于冰箱中以伴随结晶析

“新态”的物质即新游离的物质或无定形的粉未状物，较晶体质的溶解大于形成过饱和溶液。一般经过精制的化合物在蒸去溶剂抽松为无定形未时就是如，有时只要加入少量溶剂往往立即可以溶解，稍稍放即能析出结晶例如春花总弱碱部分抽松后加1．5倍量的甲醇溶解，放臵后很诀析出长春碱结又如蝙蝠葛碱在乙醚中很难溶解，但其盐嘚水溶液用氨液碱化立即用乙醚萃取，所的乙醚液放臵后即可析出葛

制备晶溶液，除选用单一溶剂外也常采用混合溶剂。般先将化粅溶于易的溶剂再在室温下滴加适量的难溶的溶剂，直至溶液微呈浑浊并将此溶液微加温，使溶完全澄清后放臵例如J一细辛醚重结晶时，可先溶于乙再滴加适量水，即析出很好的结晶如自虎中提取水溶性的虎杖甙时，在已精制饱和的水溶液添一层乙醚放臵既有利于溶出其共存的溶性杂质，又可降低水极促使虎杖俄的结晶。自秦中提取七叶甙（秦皮甲）

结晶过程中，一般是溶液浓度高降温訣，析出晶速度也些但其结的颗粒较小，杂质也可能多些有时自溶液中析出的速度太快，超过化合晶核的形成劝分子定向排列的速度往往只能得无定形粉未。有时液太浓粘度大反而不结晶化。如果溶液浓度适当温度慢慢降低，可能析出结晶较大而纯度较高的结晶有的化合物其结形成需要较长的时，例如兰毒甙等有时臵

4．制结晶操作：制备结晶除应注意以上各点外，在臵过程中最好先塞瓶塞，避免液面先现结晶而致晶纯度较。如果放臵一段时间后没有结晶析出可以加入极微量的种晶，即同种化合物结晶的微小颗粒加种昰诱导晶形成常而有效的手段。一般他说结晶化过程有高度选择性的，当加入同种分子或子结晶多会立即长大。而且溶中如果是光学異构体的混物还可种晶性质优先析出其同种学异构体。没有种时可玻璃棒蘸过饱和液滴，在空气中任溶剂挥散再用以磨擦容器内壁溶液边处，以诱导结晶的形成如仍无结析，可打开瓶塞任溶液逐步挥散慢慢析晶。另选适当溶剂处理或再精制，尽可

5．重结及步结晶：在制备结晶时

上层溶液，然后再放臵以得到第二批结晶晶态质以用溶溶解再结晶制。这种方法称为重结晶法结晶经重结晶后所嘚各部分母液，再经处理可分别得到第二批、第三批结晶这种方法则称分步结晶法或分级晶法。晶态物质在一再晶过程中结晶的析出總是越来越快，纯度越越高分步结晶法各部分所得结晶，其纯度往往有较大异但常可获得一以上的晶成分，在未加前

6．结纯度的判定：化合物的结晶都有一定的晶形状、色泽、熔点熔一可以为鉴定的初步据。这非结晶物质所没有的物理性质化合物结晶的形状和熔点往往因所用溶剂不同而有差异。托品碱在氯仿中成棱往状结晶熔点207℃；在丙酮中则形成半球状结晶，熔点203℃；在氯仿和丙酮混合溶剂则形成以上两种晶形的晶又N一氧化苦参碱，在水丙酮中得到的结晶熔点208℃在稀酮（含水）析出的结晶为77～80℃。所以文献中在化合物的晶形、熔点后注所用剂一般单体纯化合物结的熔距较，有时要求在0．5℃左右果熔

但有些例外况，特别是有些化合物的分点不易看得清楚也有的化合物熔点一致，距较窄但不是体。一些立体异构体和结构非常类的混合物常样的现。还有些化合物具有熔点的特性即在某一温度已全部融熔，当温度继上升时又固化再升温至一定温度又熔化或分解。如己诺林碱在1760C时熔化至200℃时又固化，再在2420C时分解中艹药分经过同一溶剂进三次重结晶，其晶形熔点一致同在薄层析或纸层层析经数种不开剂系统检定，也为一斑点者一般以认为是一个單体化合物。但应意化合物在一般层析条件下，虽只呈现一个斑点但并不一定是单体成分。如鹿含草中主成分为高熊果异高熊果甙極难用一般方法分，经反复结后在纸层及聚胺层上都只有一个斑点，易误认为单一成分但测其熔点在115～125℃，熔距长经制其甲醚后，洅经纸层层析检定可以现两个斑点，异高果甙的比移值大于高熊果甙又水菖蒲根挥发油中的α一细辛醚和β一细辛醚，在一般薄层上均為一个斑点前者为结晶，熔63℃后者为液体点296℃，用硝酸薄层或气相层忻很容易区分时个别化合物（氨基酸）能部分地与层析纸或薄層上的微量金属离子（如Cu）、酸碱形成络合物、盐或分解产生复斑。因此判定结纯度时，要据具体情况加以分析此，高压液谱、

层析技术的应用与发展对于植物各类化学成分的离定工作到重大推动用。如中药丹参的化学成分在30年代仅从中分离到3种脂溶性素分别称丹參酮Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ。但以后进一步的研究发现丹参酮Ⅰ为纯品外，Ⅱ、Ⅲ、均为混合结晶后通过各种层析方法，迄今已发现15种单（中有4種为我国首次发现）目前新的层析技术不断发展，着层析理论和电子、光学、计算机等技术的应层

层析过程是基于样品组分在互相溶兩“”剂之间的分配系数之差（分配层析），组分对吸附剂吸附能力不同（吸附析）和寓子交换，分子大小（排阻层析）而分离常又將一般的以流动相为气体的称气相层析，流动相为液体

（一）吸附剂、溶剂与被分离物性质的系：液一吸附析是用较多的一种方法特别適用于很多中等分子量的样品（分子量小于1，000的低挥发性样品）分离尤其是脂性成分一一般不用于高分子量样品如蛋白质、多糖或型亲沝住化合物等的分离。吸附层析的分离决定于吸附、溶和被分离化合

1． 吸剂：常用的吸附剂有硅胶、氧化铝、

（1） 胶：层析用硅胶为一哆孔性物质，分

粒表面有很多硅醇基硅胶吸附作用的强弱与醇基的含量多少有。醇基能够过氢键的形而吸附分因此硅胶的吸附力随吸著的水分增加而降低。若吸水量超过17％吸附力极弱不用作为吸附剂，可作为分配层析中的支持剂对硅胶的活化，当硅胶加热至100～110℃时硅胶表面因氢所吸附的水分即能被除。当温度高至500℃时胶表面的硅醇基也能脱水台转变为硅氧键，从而丧失了因氢键吸附水分的活往就不再有附剂的性质，虽用水处理亦不恢其吸附活性所以硅胶的化不宜在高温度进行（一在170cC以

硅胶是一种酸性吸附剂，适用中或性成汾的层析同时硅胶又是一种弱酸性阳离子交换剂，表面上的硅醇基能释弱酸性的氢离子当遇到较强的碱注化台物，则可因离子交反应洏吸附

（2）氧铝：氧化铝可能带有碱性（因其中可混有碳酸钠等成分）对于分离一些碱性中药成，如生碱类的分离颇理想但是碱性氧鋁不宜用于、酮、醋、内酯等类型的化合物分。因为有时碱性氧化铝可与上述成分发生次级反应如异构化、氧化、消除反应等。除去氧鋁中碱性杂可用水至中性称为中性氧化铝。中性氧化铝仍属于碱性附剂的范畴本适用酸性成分的分离。用稀硝或稀盐酸处理氧化铝鈈仅可中和氧化中含有碱性杂质，并可使氧化铝粒表面带有NO3一或CI一的阴离子从而有离于交换剂的性，合于酸性成的层析这种氧化铝为性氧化铝。供层析用的氧化铝用于拄层析的，其粒度要求在100～160目之粒度大子100，分离效果：小160目溶浓流速大慢，易使谱带散样品与氧化的用量比，一般在1：20～50之间柱的内径

在用溶剂冲洗柱流不宜过快，洗脱液的流速一般以每半～1小时内流

（3）性炭：是使用较多的一種非极性吸附剂一般要先用稀盐酸洗涤，次用乙洗再以洗净，于80℃干燥后即供层析用层析用的活性炭，最好选用颗粒活注炭若为活性炭细粉，则需加入适量硅藻土作为助滤一并装柱免流太慢。活性炭主要且于分离水溶性成分如氨基酸、糖类及某些甙。活性炭的囿吸附作用在水溶液中最强，有机溶剂中则较低弱故水洗脱能力弱，而有机溶剂则较强例如以醇-水进行脱时，则乙醇浓度的递增洗仂增加活性炭对芳香族化合物的吸附力大于脂肪族合物，对大分子化合物的附力大于分化合物利用这些吸附性的差，可将水溶芳香族粅质与脂肪物质分开糖与多

2．剂：层析过程中溶剂的选择，对组分分离关系极大在层析时用的溶剂（单一或混合溶剂）习惯上称洗脱劑，用于薄层或纸层析时常称展开剂洗脱的选择，须根被分离物质与所选用的吸附剂性质这两者结合起来加以虑在用极性吸附剂进层析時当被分离物质为弱性物质，一般选用弱极性溶剂为洗脱剂；被分离物为极性成分则须选用极性溶剂为洗脱。如果对某一极性物质用性较弱的吸附剂（如硅藻土或石粉代替硅胶）则剂

在柱层作时，被分离样品在加样时可采用于法亦可选一适宜的溶将样溶解后加。溶解样品溶剂应选极性较小的以便被分离的成分可以被吸附。然后渐增大溶剂的极性这种极性的增大一个十分缓慢的程，称为“梯度洗脫”使吸附在层析柱上的各个成分逐个被洗脱。如极性增大过诀（梯度太大）就不能获得满意的分离。溶剂的脱能力有时可以用剂嘚介电常数（ε）来表。介电常数高，洗能力就大。以上的洗脱顺序仅适用于极性吸附剂，如硅胶、氧化铝。对极性吸剂，如活性炭，则正好与上述序相反，在或亲水住溶剂所形成的

3．被分离物质的性质：被分的物与附，洗脱剂共同构成吸附层析中的三个要素彼此紧密相连。在指定的吸剂与洗脱剂的条件下各成分的分离情况，直接与分离物质的结构与性质有关对性吸附剂言，成分的极性

当然草药成分嘚整体分子观是重要的，例如极基团的数目愈多吸附住能就会大些，在同物中碳原数目少些被吸附也会强些。总之只要两个成分在結构上存在差别，就有可能分离关键于条件的选择。根据被分离物质的性质吸附剂的吸附强度，与溶剂的性质这三者的相关系来考虑首先要考虑被离物质的极性。如被分离质极性小为不含氧的萜烯虽含氧但非极性基团，则需用吸附性较强吸剂并用弱极性溶剂如石油醚或苯进行洗脱。但数中药成分的极性较大则需要择附性能较弱的吸附剂（一Ⅲ～Ⅳ级）。采用的洗脱剂极应由小到某一

析以判断被汾离物在某种溶剂系统中的分离情外，否获得意的离还与选择的溶剂梯度有很大关系。现以实例说明吸附层析中吸附剂、洗脱剂与样品极性之间的关系如有多组的混合物，象植油脂系由烷烃、烯烃、舀醇酯类、甘油三酸醋和脂肪酸等组份硅胶为吸附剂时，使油脂被吸附后选用一系列混合剂行洗脱油脂中单一分即可按其极性的

又如于C-27甾体皂甙元类成分，能因其分字中羟基目的少而获分离：将合皂甙溶于含有5％氯仿的苯中加于氧化铝的吸附柱上，采用以下的溶剂进行度洗脱如用吸附性较弱的硅酸镁以替代氧化铝，由于硅酸镁的吸附较弱洗脱剂的极牲需应降低，亦即采用或含5％氯仿的苯即可将一元羟基皂甙元从吸附剂上洗脱下。一例子说明同样的中草药成分茬不同吸附剂中层析时，需用不溶剂才能达到相同的离效果而说明吸附剂、溶剂分离

（二）簿层层析：薄层析种简便、快速、微量的层析方法。一般将柱层析用的吸剂撒布到平面如璃片上形成一薄层进行层析时一即称薄层层析。其理与柱层

1．薄层析特点：薄层层析在应鼡与

2．吸附剂的选择：薄层层析用的吸附剂与选择原和柱层相同主要区别在于薄层层析要求吸附剂（支持剂）的粒度更细，一般应小于250目并要求粒度均匀。用于薄层析的吸附剂或制薄层一般活度不过高以Ⅱ～Ⅲ级为宜。而展开距离则层的粒度粗细而定薄层粒度越细，展开距离相短一般不超过10厘，否则可引起色扩

3．展开剂的选择：薄层层析当附剂活为一值时（如Ⅱ或Ⅲ级），对多组分的样品能否獲得满意的分离决定于展开剂的选择。中草药化成分在脂溶性分中大致可按极性不同而分为无极性、弱极性、中极性与强极性。但在實际工作中经要利用溶剂极性大小，对展开

4〃特殊层：针对某些性质特殊的化合物的分

① 荧光薄层：有些化合物本身无色在紫外灯也顯荧，又无当的色剂时则可在吸附剂中加入荧光物质制成荧光薄层进行层析。展层后于紫外光下照射薄层板本身显荧光，而样品斑处鈈显荧光即检出样品的层析位臵。用的荧光物质多为无机物其一是在 254nm紫外光激发下显出荧光的，如锰激洁的硅酸锌另为在365nm紫光激下發出荧光的，如激化

② 络合薄层：常的酸银薄层用来分离碳原子数相等而其中CC双键数目不的一系列化合物，如不饱和醇、酸等其主要機理是

键能与硝酸银形成络合物，而饱和的C一C键则不硝酸银合此在硝酸银薄层上，化台物可由于饱和程度不同而获得分离层析时饱和囮合物由于吸附最弱而Rf最，含一个双键较含两个双键的Rf值高含一个三键的较含一个双键的Rf值高。此外在一个双键化台物中，顺式的与銀络合较反式的于进因此，还可

碱薄层和PH缓冲薄层：为了改变吸附剂原来的碱可铺制薄层采用稀或稀碱以代替水调制薄层。例如硅胶帶微酸性有时对碱性物质如物碱的分离不，如不能展层或拖尾则可在铺薄层时，用稀碱溶液0.1～0．5NNa0H溶液制成碱性硅胶薄层例如***豆碱在鉯硅胶为吸附剂时，以氯仿-酮甲醇（8：2：1）为展开剂RfRf＞0．05外，薄层层析法亦应用于草药品种、材及其剂真伪的检查、质量控制和资源调查对控制化反应的进程，反应副品产物的检查中间体分析，学药品及制剂杂的查临床

索氏提取法是从固体物质萃取化合物的一种方法。用溶剂将固体长期浸润而将所需要的质浸出来即长期浸出法。此法费时间长溶量大、效率不高。常常利用索提取器来进行提取操莋索氏取器利用溶剂回流虹吸原理，使固体物质连续不断地被纯溶剂萃取既约溶剂萃取效率又高。萃取前先将固物质研碎以增加固液接触的面积。然后将固体质放在滤纸套1臵于提取器2中，取器的下端勺有溶剂圆底烧瓶相连上面回冷凝管。加热圆底烧使溶剂沸腾，蒸气通过提取器的支管3上升冷凝后入提取器中，溶剂和固体接触行萃取当溶剂面超过虹吸管4的最高处时，含有萃取物的溶剂虹吸回燒因而萃取出一部分物质，如此复使固物质不断为纯的溶萃取、将萃取出的质富集在烧瓶中。液—固萃取是利用溶剂对固体混物中所荿分的溶度大,对杂质的溶解度小来达提取离的目的一种方是把固体物质放于溶剂中长期浸而达到萃的目的,但是这种方法时间长,消耗溶剂,萃取效率也不高；另一种是采用索氏提器的方法,它是利用剂的回流和虹吸原,对固体混合物中所需成分进连续提取。当提取中回流的溶剂的液面超过索氏提取器的虹吸管时,提取筒中的溶剂回圆底烧瓶内,即发生虹.随温度升高,再次回流始,每次虹前,固体物质都能被的溶剂所萃取,

超声提取法是利用超声波增大物质分子运动频和速增加剂穿透力，高药物出速度和溶出次数缩短提取时间的浸提方法。超声提取的主要理論依据是超声空化效应、热应和机械作用当大能量的超声波作用于介质时，介质被撕裂许多小空穴这些小空穴时闭合，并产生高达千個大压的瞬间压力即化现象。超声空化中微气泡的爆裂产极大的压力使植物细胞壁及整个生物体破裂在瞬间完成，缩短了破时同时超声波产生的振作用加强胞内物质的释放、扩散解，

[最新]中药材提取方法大全

本文只做了解和参考～我需要根据中药材不同有效成分或活性成分选择不同的提取方～每种 方法也有优劣之分～例如索氏提取适用于提取解度较小的物质～但当质受热易分解和取剂沸点较高时～宜鼡此种方～而且提取时间较长～超声提取法～可以进行清洗、干燥、杀菌、雾化及无损测等～但是超声波的提取原理与水提同～所以也要根据实际情况选择 此处盖提取各种方

1(溶剂提法的原理:溶剂取法是根据中草药中各种成分在溶剂中的溶解性质～选用对活性成分溶解度大～对不需要溶出成分溶解度小的溶剂～而将有效成分从药材组织内溶解出来的法。当溶剂到中草药原料,需当粉碎,中时～溶剂于扩散、渗透莋用逐渐通细胞壁透入到细胞～溶解了可溶性物质～而造成胞内外的浓度差～于是细胞内的溶液断向外扩散～溶剂又不断进入药组织细胞Φ～如此多次往返～直至细胞内外溶液浓度到态平衡时～将此饱和溶液滤出～继续多加新溶～可所要的成分于完

中草成分在溶剂中的溶解喥直接与溶剂性质有关溶剂可分为水、亲本性有机溶剂及亲脂性有机溶剂～被溶解物质有亲水性亲的

有机化合物分子结构亲水性基团多～其极性大而疏于油,有的亲水性基团少～其。极性小而疏于水这种亲水性、亲脂性及其程度大小～是和化合物的分结构直接相关。一般來说～两种本母核相同的分～其分子中功能的极性越大～或极性功能基数量越多～则整个分子的性大～亲水性强～而亲脂性就越弱～分子非极性部分越大～或碳键长～则性～性强～而

各类溶剂的性质～同样与其分子结构有关例如甲醇、乙醇是亲水性比较强的溶～它们的分孓比较小～有羟基存在～与水的结构很近似～以能够和水任意混合。丁和戊醇分子中都有羟基～保持和水相似处～但分逐渐地加大～与水性也就逐渐疏远所以它们能彼此部分互溶～在它们互溶到饱和状态之后～丁醇或戊醇都能与水层。氯仿、苯和石油醚是烃类或烃生～子氧～属于亲

这样～我们就可以通过时草药成分结构分析～去估计它们的此类性质和选用的溶剂例如萄糖、蔗糖等分子比较小的多羟基化匼物～具有强亲水性～极易于水～就是在亲水性比较的乙醇中也难于溶。淀粉虽然羟基数目～但分子大大～所以难溶解于水蛋白质氨基酸都是酸碱两性化合物～有定程度的极性～所以能溶于～不溶于或难溶子有机溶剂。甙类都比其元亲水性强～特别是皂甙由于它们分中往結数分子～羟基

强的亲水性～而皂甙元则于亲脂性强的化合物多数游离的生物碱是亲脂性化合物～酸结合成盐后～能够离子化～加强了極性～就变为亲水注质～这些生物碱可称为极性化合物。以～生物碱的盐类易于水～不溶难溶于有机溶剂,而多游离的生物碱不溶或难溶于沝～易溶于亲脂性溶剂～一以在氯仿中溶解度最大鞣质是多羟基化台物～为亲水性的物质。油脂、发油、蜡、色素都是强

总的说～只要Φ草药成分的亲水性和亲脂性与溶剂的此项性质相当～就会在其中有较大的溶解度～即所谓“相似相溶”的规律这选择适当溶剂自草药Φ提取所要的依

2(溶剂的选:运用溶剂提取法的关键～是选择适的溶剂。溶剂选择适当～就可以比顺利地将需要的成分提取出来选择溶剂要紸意以下三点:?溶剂对有效成分溶解度大～对杂质溶解小,?溶剂不能与中药的分起化学变化,?剂要、、使

常见的提取溶剂可分为以下

1,水:水是一种強的极性剂。中草药中亲水性的成分～如盐、糖类、分子不太大的多糖类、鞣质、氨基酸、蛋白质、有机酸盐、生物碱盐及甙类等都能被沝溶出为了增加某些成分的溶解度～也常采用酸水及碱水作取溶。酸水提取～可使生碱与酸生成盐类而溶出～碱水提取可使有机酸、黄酮、蒽醌、内酯、香豆素以及酚类成分溶出但用水提取易酶解甙类成～且易霉坏变质。某些含果、粘液质类成分的中草药～其水提取液瑺很难过滤沸水提取时～中草中的淀粉被糊化～而增加过困。故含淀粉量的中草药～宜磨成细粉后加煎煮中药传统用的剂～多用中药飲片直火煎煮～加温可以增大中药成分的溶解外～还可能有与其成分产生“助溶”现象～增加了一些水中溶度的、亲脂强的成分的溶解度。但多数亲脂性成分在沸水中的溶解度是大的～使有助溶现存在～也不容易提取完全如果应用大量水煎煮～就会增加蒸发浓缩时困难～苴会溶出大杂质～给一步分离提纯带来麻烦。中草药水提取液中含有皂甙及粘液质类成分～在减压时～还产生大量泡～造成浓的困难通鈳在馏器装一个汽一液离防溅以

2,亲水性的有溶剂:也就是一般的与水能混溶的有机溶剂～如乙醇,酒精,、甲醇,木精,、丙酮等～以乙醇最常用。乙醇的溶解能比较好～对中草细胞的穿透能力较强亲水性的成分除蛋白质、粘液质、果胶、淀粉和部分糖等外～大多能在醇中溶解。难溶于水的脂性成分～在乙醇的溶度也较大还可根据被提取物质性质～采不同浓度的醇进行提取。用乙醇提取比用水量较～提取时间短～溶解出的水溶性杂质也少醇为机溶剂～虽易燃～但毒性小～价格便宜～来方便～有一定设备即可回收反复使用～而且乙醇的提液不易发變质。由于这些原因～用乙醇提取的方法是历来最常用的法之甲的性质乙似～点较低,64?,～但

3,亲脂性的有机溶剂:也就一般所说的与水不能混溶的有机溶剂～如石油醚、苯、氯仿、乙、乙酸乙酯、二氯乙烷等。这些溶剂的选择性能强～不能或不易提出亲水性杂质但这类剂挥发性大～多燃,氯仿除外,～一般毒～价格较贵～设备要求较高～且它们入植物组织的能力较弱～往往需长时间反复提取才能提取完。如果药材Φ含有较多的水分～用这类溶剂很浸出其有效成分～因此～大量取草药料～接用这类溶剂

3(提取法:用溶剂提取中草药成分～、常用浸渍法、滲漉法、煎煮法、回流提取法及连续回流提取法等同时～原料的粉碎度、提取时间、提取度、设备条件等素也都能影响提效率～须加

1,浸漬法:浸渍法系将中草药粉末或碎块装适当的容器中～加入适宜的溶剂,如乙醇、稀醇或水,～浸渍药材以溶出其中成分的方法。本法比较简单噫行～但浸出率较差～且如用水为溶剂～其取液易于发霉变质,须适当的

2,渗漉法:渗漉法是将中草粉末装在渗漉器中～不断添加新溶剂～使其滲透过药材～自上而下从渗漉器部流出浸出液的一种浸出方法小当溶剂渗进药粉溶出成分比重加大而向下动时～上层的溶液或稀浸液便臵其位臵～造成良好浓度差～使扩散能较好地进～故浸出效果优浸渍法但应控制流速～在渡过程中随时自药面上补充新溶～使材中有效成汾充分浸出为止。或渗滴液颜色极浅或渗涌液的体积相当于:原药材重10倍时～便可认为基本上已提取完全大量产常将集淮液作为另批

3,煎煮法:煎法是我国最早使用的传统的浸出方法。所用容器般为陶器、砂罐或铜制、搪瓷器皿～不宜用铁～以免药液变色直火加热时最好时常攪拌～以免部药材受热高～容易焦糊。蒸汽加热设备的药厂～多采用大反应锅、大铜、大木桶～或水泥砌的池子中入蒸汽加热还可将数個煎器通道连接～进

4,回流提取法:应有机溶剂加热提取～需采用回流加热装臵～以免溶剂挥损失。小量操作时～可在圆底烧瓶上连接回流冷凝器瓶内装药材约为容量的,，,～溶剂浸过材表面约12cm。在水浴中热回流～一般保持沸约:小时小放冷过滤～再在药渣中加溶剂～作第二、佽加热回流分别约半小时～或至基提尽有效成分为止此法提取效较冷法～量产中多采

5,动连续提法:应用挥发性有机溶剂提取中草药有效成～不论小型实验或大型生产～均以连续取法为好～而且需用溶剂量较少～提取成分也较完全。验室常用脂肪提取器或称索氏提取器连续提取法～一般数小时才能提取完全。提取分受热时间较长～遇热稳定分不宜

,二,蒸气蒸馏法:水蒸气蒸馏法～适用于能随水蒸气蒸馏而不被破坏的中草药成分的提取。此类成分的点多在100?以上～与不相溶或

且在约100?存一定的蒸气压当与水在一起加热时～其蒸气压和水的蒸气压总囷为一个大气压时～液体就始沸腾～水蒸气将挥发性物质一并带出。例如中草药中的挥发油～某些分子生物碱一麻黄碱、萧碱、槟碱～以忣某些小分子酚性物质牡丹酚,paeonol,等～可应用本法提取。有些挥发成分在水中的溶解度稍大些～常蒸馏重新蒸馏～在最先蒸馏出的部分～分絀挥发油层～或在蒸馏液水层经盐析法并用低点剂将成分提取出来例如玫瑰油、原头翁,protoanemonin,等

,三,升华法:固体物受热直接气化～遇冷后又凝固為固体化合物～称为升华。中草药有一些成分具有升华的性质～故可利用升华法直接自中草药中取出来例如樟木中升华樟脑,camphor,～在《本草綱》中已有详细记载～为世界上最早应升华法制取药材有效成分的记述。茶叶中的咖啡碱在178?上就能升华而不被分解游离羟基蒽醌类分～┅些香豆素类～有机酸类成分～有也有华。例如七叶

升华法然简单易行～但中草药炭化后～往往产生挥发性的焦油状物～粘附在升华物上～不易精制除去～其次～升不完全～产率～有时还伴有

上述提取所得到的中草药提取液或提取物仍然是混合物～需进一步除去杂质～分离並进行精制具体的方法随各中草药的性质不同而异～以后将通过实例以叙述～此处作一则性

,一,溶剂分法:一般是将上提取物～选用三、四種不同极性的溶剂～由低极性到高极性分步进行提取分离。水浸膏或醇浸膏常常为胶伏物～难以均匀分散在低极性溶剂中～故不能提取完铨～可拌人适量性填充剂～如硅土或纤维粉等～然低温或自然干燥～粉碎后～再以选用溶剂依次提取～使总取物中各成成分～其在不同极性溶剂中溶解度的差而得到分离例如粉防己乙醇浸膏～碱后可用乙醚溶出脂溶性生物碱～再以冷苯处溶出粉防己碱～与其结构类似的防巳诺林碱比者少一甲而有酚羟基～不溶于冷苯而得以分离。利用中草化成分～不同性中溶解度进行离

广而言之～自中草药提取溶中加入另┅种溶剂～析出其中某种或某些成分～或析出其杂质～也是一种剂分离的方法中草药的水提液中常含有树胶、粘液质、蛋白质、糊化粉等～可以加入一定量的乙醇～使这些不溶于乙醇的分自溶液中沉淀析出～达到与其它成分离的目的。例如自中草药提液中除去这些杂质～戓自白及水取中获得白及胶～可采用加乙醇沉法,自新鲜括楼根汁中制取天花粉素～可滴人丙使次沉淀析出目前～提取多糖及多类合物～哆采解、浓缩、加醇

此外～也可利用其某些成分能在酸或碱中溶解～又在加碱加酸

pH后～成不溶物而析出以达分。例如内酯类化合物不溶～泹遇碱开环生成羧酸盐溶于水～再加酸酸化～又重新形成内酯环从溶液中析出～从而与其它杂分离,生物碱一般不溶于水～遇酸生成生物碱鹽而溶水～加碱碱化～又重新成游离生物碱这些化合物可以利用与水不相混溶的有机溶剂进行萃取分离。一般中草药总提取物用酸水、堿水先后理～可以分为三部分:溶酸水的为碱性成分,如生物碱,～于碱水的为酸性成分,如机酸,～酸、均不溶的为中性分,甾醇,还可用不同酸、喥进一步分离～酸性化台物可以为强酸性、弱酸性和酷热酚性三种～它们分别溶于碳酸氢、碳酸钠和氢氧化～借此可进行分离。有些总生粅碱～如春生物碱、蒜生物碱～可利用不同rH值进行分离但有些特殊情况～如酚性物碱紫董定碱,corydine,在氢氧化钠溶液中仍能为乙醚抽出～蝙蝠堿,dauricins,乙醚溶液中能为氢氧化钠溶液抽出～而溶于氯仿溶液中则不能被氢氧化钠溶抽出,些生物碱的类～如四掌叶己盐酸在水液仍能为氯抽出。性

1(萃取法:两溶剂提取又简称萃取～是利用混合物中各成分在两种互不相溶的溶剂中分配系数的不同而达到分离的方法萃取时如果各成分兩相溶剂中分配数相差越大～则分离效率越高、如果在水提取液中的有效成分是亲脂性的物质～般多用亲脂性有机剂～如苯、氯仿或乙醚荇两相萃取～如果有成分偏于亲水性的物～在亲脂性溶剂难溶解～就要改用弱亲性的溶剂～例如乙酸乙酯、丁醇等。还以在氯仿、乙醚中加入适量乙醇或甲醇以增其亲性提取黄酮类成分时～多用乙酸乙脂和水的相萃取。提取亲水性强的皂甙则多选用正丁醇、异戊和水作两楿取过～一般有机溶剂亲水性越大～与水作两相萃取的效就越好～为能使多亲性质伴随而出～有效

两相溶剂萃取在操作中还要注意以

1,先鼡小试管烈振摇约1分钟～观察萃取后二液层分层现象。如果容易产生乳化～大量提取时要避免猛烈摇～可延长萃取时间如碰到乳化现象～可将乳层分出～再新溶剂萃取,或乳化层抽滤～或将乳化层稍稍加热,或较长间放臵并不时旋转～令其自分层。乳化现象较严重时～可以用逆流连

2, 水提取液的浓度最好在比重1(11(2之间～过稀则溶剂用太大～响

3, 溶剂与水溶液应保持一定量的比例～第一次提取时～溶剂要多一些～一般为水提取液的1/3～以后的用量可以

4,一般萃取3，4次即可但亲水性较大的成分不易转入有机溶剂层时～须增加萃取数～或

萃取法所用设备～洳小量萃取～可在分液漏斗中进行,如系中萃取～可在较大的适当的下口瓶中进行。工业生产中大量萃取～多在密闭萃取罐内进行～用搅拌機拌一定时间～使液充分混合～再放臵令其分层,有时将相溶液喷雾混含～以增大萃接触～提高萃取效率～可采二逆流连

2(逆流连续取法:是一種连的两相溶剂萃取法其装臵可具有一根、数根或更多的萃取管。管内用小瓷圈或小的不钢丝圈填充～以增加两相溶剂萃取时的接触面例如用氯仿从川楝树皮的水浸液中萃川楝素。将氯盛于萃取管内～而重小于氯仿的水提取浓液贮于高位容器内～开启活塞～则水浸液在高位压力流入萃取管～遇瓷圈撞击而分散细粒～使与氯仿接触面增大～萃取就较完如果一种中草药的水浸液需要用比轻的苯、乙酸乙酯等进行萃取～则需将水提缩液装在萃管～而苯、乙酸乙酯贮于高位容器内。萃取是完～可样品薄析、纸层析及显反应

3(逆流分配法,CounterCurrentDistribution～CCD,:逆流分配法又称逆流分溶法、逆流分布法或反流分布逆流分配法与两溶剂逆流萃取法原理一致～但加样量一定～并不断在一定容量的两相溶剂Φ～多次移位萃取分配达到混合物的分离。本所采用的逆流分布仪由若乃至数百只管子成若无此仪器～小量萃取时用分液漏斗替。预先選择对混合物分离效果较好～分配系数差异大的两种不相混溶的溶剂并考分层析的行为分析推断和选用溶剂系统～通过验测知要经多少佽的萃取移位而达到真正的分离。逆流配法对于分具有常相似性质的混合物～往往可以取得良好的效果操作间长～取管因械荡损坏～消耗溶亦多～应

4(液滴逆流分配:液滴逆流分配法又称逆流层析法。为近年来在逆流分配法基础上改进的两相溶剂萃取法。对溶剂系统的选择基本同逆流分配法～但要求在时间内分离成两～并可生成有效的液滴由于移动相形成液滴～在细的分配萃取管中与固定相有效地接触、摩擦不断形成新的面～促进溶质在两相溶剂中分配～故其分离效往比逆流配法好。且不会产乳化现象～用氮气驱动移动相～被分离物质不洇遇大气中氧气而氧化本法必须选用能生液滴的溶剂系统～且对高分子化合物的分离效果较～处理品量小,1克以下,～并要有一定设备。应液滴流分配法曾有效地分离多种微量成分如柴胡皂甙原小檗碱型季碱等液滴流分配的装臵～近年来虽不断在改进～但装臵和操作较繁。目前～对适于逆流分法进分离成～采用两溶剂逆连续

,,沉淀法:是在中草药提取液中加入某些试剂使产生沉淀～以获得有效成分除去质

1( 铅盐沉澱:铅盐沉淀法为分离某些中草药成分的经方法之一由于醋酸铅及碱式醋酸铅在水醇溶液中～能与多种中草药成分生成难溶的铅盐或络盐沉～故可利用这种质使有效成分与杂质分离。中性醋酸铅与酸性物质或某些酚性物质合成不溶性铅盐因此～常用沉酸、氨

粘液质、鞣质、树、酸性皂甙、部分黄酮等。可与碱式醋酸铅生不溶性铅盐或络合物的范围更广通将中草药的水或醇提取液先加入醋酸铅浓溶液～静臵后滤沉淀～并将沉淀洗液并入滤液～于滤液中加碱式醋酸铅饱溶液至不发生沉淀为止～这就可得到醋酸铅沉淀物、碱醋淀物及母

然后将鉛盐沉淀悬浮新溶剂中～通以硫化氢气～使分解并转为不溶性硫化铅而沉淀。含铅盐母液亦须先如法脱铅处理～再浓缩精制硫化氢脱铅仳较彻底～但溶液中可能存多的硫化氢～必须通人空气或二氧化碳让气泡带出多余的硫化氢气体～以免在处理溶液时参与化学反应。新生態的化铅多为胶体沉淀～吸咐药液中的有效成分～要注用溶剂处理收回脱方～也可硫酸、磷酸、硫酸、磷酸钠等除铅～但酸铅、磷酸铅沝中仍有一定溶解度～除铅不彻底。用阳离子交换树脂脱铅快彻底～但要注意药液中某些有效成分也可能被交上～同时铅树脂再生也较困難还应注意脱铅后溶液酸增加～时需中和后再处理溶液～有时可用新制备的氢氧化铅、氢氧化铝、氢氧化铜或碳铅、明等代替醋酸铅、堿式醋酸铅。例如在黄芩水煎液中加入明矾溶～黄甙就与铝络合生难溶水络化而与质分离～种络

试剂沉淀法:例如在物碱盐的溶液中～加入某些生物碱沉淀试剂,见生物碱性质下,～则生物生成不溶性复盐而析出水溶性生物碱难以用萃取法提取分出～常加入氏铵盐使生成生物碱雷氏盐沉析出。又如橙皮甙、丁、黄芩甙、甘草皂甙易溶于碱性溶液～当加入酸后可使之沉淀析出某些蛋白质溶液～可以变更溶液pH值利鼡其在等电点时溶解度最小性质而使之沉淀析出。此外～还可以用明胶、蛋溶沉淀鞣质,胆甾醇也常用以沉淀洋黄甙等可根药效成分和质

,㈣,盐析法:盐析法是在草药的水提液中、加入无机盐至一定浓度～或达到饱和状态～可使某些成在水中的溶解度降低沉淀析出～而与水溶性夶的杂质分离。常用作盐的无机盐有氯化钠、硫酸钠、酸镁、硫酸铵等如三七的水提取液中加硫镁至饱和状态～七皂甙乙即可沉淀析出～自藤中提取掌叶防己碱～自三颗中取小檗碱在生产上都是用氯化钠硫酸按盐析制备。有些成分如原白头翁素、麻碱、苦参碱等水溶性较夶～在提取时～亦往在水取中定量的食～

,五,透析法:透法是利用小分子物质液中可通过半透膜～而大分子物质不能通过半透膜的性质～达到汾离的方法例如分离和纯化皂甙、蛋白质、肽、多糖等物质时～可用透析法以除去无机盐、单糖、双糖等杂质。反之也可将大分子的杂質留在半透膜～而将小分子的物质过半透膜进入膜外溶液中～而加以分离精制:透是否成与透析膜的规格系极大透析膜的孔有大有小～要根据欲分成分的具体情况而选择。透析膜有动物性、火棉胶膜、羊皮纸膜,硫酸纸膜,、蛋白质胶、玻纸膜等油常多用市售的玻璃纸或动物性透膜成袋状～外面用尼龙网袋加以保护～小心加入欲透析的样品液～悬挂在水容中。经常更换清水使透析膜内外溶液的浓度差加大～必時适加热～加以搅～利析度加快为了加透析

放臵二个电～接通电路～则透析膜中的带有正荷的成分如无机阳离子、生物碱等向阴极移动～而带负电共荷的成分如无机阴离子、有机酸等则向阳极移动～中性化合物及高分子化物则留在透析膜中。透是否完全～须取透膜内定性

┅般透析膜可以制:动物半透膜如、牛的膀胱膜、用水洗净～再以乙醚脱脂～～即可供用,羊皮纸膜可将滤纸浸入50,的硫酸1560分钟～取出在板上～以水冲洗制得。其膜孔大小与硫酸浓度、浸泡时间以及用水冲洗速有关,火棉胶膜将火棉胶溶于乙醚及无乙醇～涂在板上～干放臵中即可供用～膜孔大小与溶剂类、溶剂发速度有关～溶剂中加入适量水可使膜孔增大～加少量醋酸可使膜孔缩小,蛋白质胶,明胶,膜可20,明胶涂于细布仩～阴干后放水中～再甲醛使膜凝固～冲洗干净即可供用近来商品有透膜管成品出～国习称“ViskingDialysisTubing”～有种大厚度～供不同大小分量多

,六,结晶、结晶和分步结晶法:鉴定中草药化学成分～研究其化学结构～必须首先将中草药成分制备成单体纯品。在常温下～物质本身性质是体的囮台物～可分别用分馏法或层析法进行分离精制一般他说～中药化学成分在常下多半是固体的物质～都具有结晶他的通性～可根据溶解喥的不同用结晶法来到分离精的目的。究中草药化学成分时～一旦获得结～就能有效地进一步精制成为单体纯品纯化物的结晶有一定的熔点和结晶学的特征～有利于鉴定。如果鉴定的物质不是单体纯品～但不能得出确结论～还会造成工作上的浪费因此～求得结并制成单純品～就鉴中草药成分、究分

1(杂质的除去:中草药经提取分离所得到的成分～大多仍然含有杂质～或者是混合成分。有时即使少量或微量杂質存在～也能阻碍或延缓结晶的形成所以在制备结晶～必须注意杂质的干扰～应力尽可能除去。有时选用溶剂溶出杂质～或只出所需要嘚成分有时可用少量活性炭等进行色处理～以除去有色杂质。有可过氧化铝～硅胶或硅藻土短柱处后～再进行制备结晶但应用吸附剂除去杂质～注意所需要的成分也可能被吸附而损。外～析更制备单体品

如果一再处理仍未使近于纯品的成分结晶化～则可先制备其晶态的苼物～再回收原物～可望得到结晶例如游离生碱可制备各种生物碱盐类～羟基化合物可转变成乙酸物～碳基化物可制备成苯踪衍物结晶。美登碱在原料中含量少～且反复分离制难以得到结晶～但制备成3一丙基美登碱结晶后～再经水除去丙～碱就能制

2(溶剂选择,制备结晶～要紸意选择合的溶剂和应用适量的溶剂合宜的溶剂～最好是在冷时对所需要的成分溶解度较小～而热时溶解度较大。溶剂的沸点亦宜太高一般常用醇、丙酮、氯仿、醇、

合物在一般溶剂中不易形结晶～而在某些溶剂中则易于形成结晶。例如葛根素、逆食子酸,ellagicacid,在冰醋酸中易形结晶～大黄素,emodin,在吡啶中于结晶～萱草毒素,hemerocallin,在N～N一二甲基甲酞胺,DMF,中易得到结晶～而穿心莲硫酸氢钠加成物在丙酮一水中较易得结晶又如蝙蝠葛碱通常为无形粉未～但或乙醚形成

3(结晶液的制备:制备结晶的溶液～要成为过饱和的溶液。一般是应用适量的溶剂在加温的情况下～將化合物溶解再放臵冷处如果在室温中可以析结晶～就不一定放于冰箱中～以免随结更多

“新生态”的物质即新游的物质或无定形的粉未状物质～远较晶体物质的溶解度大～易于形过饱和溶液。一般经过精制的化合物～在蒸去溶剂抽松为无定形粉时就是如此～有时只要加叺量溶剂～往往立可以溶解～稍稍放臵即析出结晶例如春花总弱碱部分抽松后入1(5倍量的甲醇溶解～放臵后诀析出长春碱结晶。又如蝙葛堿在乙醚中很难溶解～但当其盐的水溶液氨碱化～并立即用乙醚萃取～所得的醚液～放后出蝙蝠葛碱的

制备结晶溶液～除选用单溶剂外～吔常采用混合溶剂一般是先将化合物溶于易溶的溶剂中～再室温下滴加适量的难溶的溶剂～直至溶液微呈浑浊～并将此溶液微加温～使溶液完全澄清后放臵。例如J一细辛醚重晶时～可先溶于乙醇～滴加适量水～即析出很好的结晶又如自杖中提取水溶性的虎杖甙时～已制飽和的水溶液上添加一层乙放臵～既有利于溶出其共存的脂溶性杂质～又降水的极性～促使虎杖俄的结晶化。秦中取七,秦甲素,～也运

结晶過程中～一般是溶浓度高～降温诀～析出结晶的速度也快些但是其结晶的粒较小～杂质也可能多些。有时自溶液中析出的速度太快～超過化合物晶核的形成劝子定向排列的度～往往只能得到无形粉未有时液太浓～粘度大反而易结晶化。如果溶液浓度适当～温度慢慢降低～有可能出结晶较大而纯度较高的结晶有的化物其结晶的形成需要较长的时间～例铃毒等～需放臵数天

4(制备结晶操:制备结晶除应注以上各点外～在放臵过程中～最好先塞紧瓶塞～避免液面先出现结晶～而致结晶纯度较低。如果放一段时间后没有晶析出～可以加入极微量的種晶～即同种化合物结晶的微小颗粒加种晶诱导晶核形成常而有效的手段。一般他～结晶化过程是有高度选性的～当加入同分子或离子～结多会立即大而且液中如果是光学异构体的混合物～还依种晶性质优先析出其同种光学异构体。有种时～可用玻璃棒蘸过饱和溶液一滴～在空气任溶剂挥散～再用以磨擦容器内壁溶液边缘处～以导结晶的成仍无结晶析出～可打开瓶塞任溶液逐步挥散～慢析晶。或另适當溶处～或精制一次～尽能尽

5(重结晶及分步结晶:在制备结晶时～最好在形成一批晶后～

上层溶液～然后再放臵以到第二批结晶晶态物质鈳以用溶剂溶解再次结晶精制。这方法称为重结晶法结晶经重结晶后所得各部分母液～再处理又可分别得到第二、第三批结晶。种方法則称为分步晶法或分级结法晶态物质在一再晶过程中～结晶的析出总是越来越快～纯度也越来越高。步结晶法各部分所得结晶～其纯度往有较大的差异～但常可获得一种以结晶分～检查前不要

6(结晶纯度判定:化合物的晶都有一定的结晶形状、色泽、熔点和熔距～一可以作为鑒定的初步依据这是非结晶质所没有的物理性质。化合物结晶的形状和熔点往往因所用溶剂不同而有差异原品碱在氯仿中成棱往状结晶～熔点207?,在丙酮中则形半球状结晶～熔点203?,氯仿和丙酮混合溶中则形成以上两种晶形的结晶。如N一氧化苦参碱～在无水丙酮中得的结熔点208?～茬稀丙酮,含水,析的结晶为7780?。所以文献中常在化合的晶形、点后注明所用溶剂一般单体纯化合物结晶的距窄～时要在0(5?左右～如果距较

但囿些例外情况～特别是有些化物的解点不易看得清楚。也有的化合熔一致～熔距较窄～但不是单体一些立体异构体和结构非类似的混合粅～常有这样的现象。还些化合物具有双熔点的特～即在某一温度已经部融熔～当温度继续上升时又固化～再升温定温又熔化或分解如防己诺碱在1760C时熔化～至200?时又固化～再在2420C时分解。中草药成分经过同一溶剂进行三次重结晶～其晶形及熔点一致～同时在薄层析或纸层析法經数种不同展开剂统检定～也为一个斑点者～一般可以认为是一单体化合物但应注意～有的合物在般层析条件～虽然只呈现一个斑～但┅定是单体成分。例如鹿含草中主分为高熊果砍～异高果甙极难用一般方法分～经反复结晶后～在纸层及聚酞胺薄层上都只有个斑点～易誤认为单一分～但测其熔点在115125?～熔距很长。经制备其甲醚后～再经纸层析定～可以出现个斑点～异高熊果甙的比移值于高熊果甙又如沝菖蒲根茎挥发中α一细辛醚β一细辛醚～在一般薄层上均为一个斑点～前者为结晶～熔点63?～后者为液体沸点296?～用酸银薄层或气相层忻很易區分。有个别化合物,如氨基酸,可能部分地与层析纸或薄层上微量金属离子,如Cu,、酸或碱形合物、盐分解而产复因此～判结晶纯度～要据具體况加分。此外～高压液、气相层、紫

层析技术的应用与发展～对于植物各类化学成分的分离鉴定工作起到重大的推动作用中药丹参的囮学成分在30年代仅从中分离到3种脂溶性素～分别称为丹参酮?、?、?。但以后进步的研究～发现除丹酮?为纯品外～?、?、均为混合结晶此后通過各种层析方法～迄今已发现15种单体,其中有4种为我国首次发现,。目前新的层析技术断发展～随着层析理论和电子学、、计机应用～层析

层析过程是基于品组分在互不相溶的两“相”溶剂间的分配系数之差,分配层析,～组分对吸附剂吸附能力不同,吸附层析,～和寓子交换～分子的夶小,排阻层析,而分离通常将一般的以流动相为气的称为气相层析～动相称为

,一,吸附剂、溶与被分离物性质的关系:液一固吸附层析是运较哆的一种方法～特别适用于很多中等分子量样品,分子量小于1～000的低挥发性样品,的分～尤其是溶性成分一一般不用于高分子量样品如蛋白质、多糖或离子型亲住化合物等的分离。吸附层析分离效果～决定于吸附剂、溶剂和离物的性质

1( 吸附剂:常用的吸附剂有硅胶、氧化铝、活性炭、硅酸镁、聚胺、藻

,1, 硅胶:层析用硅胶为一多孔性物质～分子中具有硅氧烷的交结构～同

粒表面又有很硅醇基硅胶吸作用的强弱与硅醇基的含量多少有关。硅醇基能够通过氢键的形成而吸附水分～因硅胶的吸附力随吸着的水分增加而降低若吸水量超过17,～吸附力极弱不能鼡为吸附剂～但作为分配层析中的持剂。对硅胶的活化～当硅胶加热至100110?时～硅胶表面因氢所吸附的水分即能被除去。当温升高至500?时～硅膠表面的硅基也脱水缩台转变为硅氧烷键～从而丧了因氢键吸附水分的活往～就不再有吸附剂性质～虽水处亦不能恢复其吸附活性所以矽胶的活化宜较高度进,在170cC以即

硅胶是一酸性吸附剂～适用于中性或性成分的层析。同时硅胶又是一种弱酸性阳离子交换剂～其表面上的硅醇基能释放弱酸性的氢离子～当遇到强的碱注化台物～则可因离子交换应而碱性

,2,氧化铝:氧化可能带有碱性,因其中有碳酸钠等成分,～对于分離一些碱性中草药成分～如生物碱类的分离颇为理想但是碱性氧化铝不宜用于醛、酮、醋、酯等型的化合物分离。因为有时碱性氧化铝鈳与上述成分发生次级反应～如异构化、氧化、消除反应等除去氧化铝绚碱性杂质可用水洗中性～称为中性氧化铝。中氧化铝仍属于碱性吸剂范畴～适用于酸性成分的离用稀硝酸或稀盐处理氧化铝～不仅可中和氧化中含有的碱性杂质～并可使氧化铝颗粒表面带NO3一或CI一的陰离子～从而具有离于交换剂性质～合于酸性成分的层析～这种氧化铝称为酸性氧铝。供析用的氧化铝～用于拄层析的～其粒度要求在100160目间。粒度大子100～分离效果差:小于160目～溶浓流速大慢～易使谱带扩散样品氧化铝的量比～般在1:20，50之层析柱内径与长

在用溶剂洗柱时～流速不宜过快～洗脱液的流速一般以每半1小时内流出液体的毫升数与所用吸附剂重量,克,相

,3,活性炭:使用较多的一种非性吸附剂。一般需要先鼡稀盐酸洗涤～其次用乙醇洗～再以水洗净～于80?干燥后即可供层析用层析用的活性炭～最好选用颗粒活注炭～若为活性炭细粉～则需加叺适量硅藻土作为助滤剂一装柱～以免流速慢。活性炭主要且于离水溶性成分～如氨酸、类及某些甙性炭的有为吸附用～在水液中最强～有机溶剂中则较低弱。故水的洗脱能最弱～而有机溶剂则较强例如以醇-水行洗时～则随乙醇浓度的递增而洗脱力增加。性炭对芳香族囮合物的吸附力大于脂肪族化合物～大分子化合的吸力大于小分子化合物利用这些吸附性的差别～将水性芳族物与脂物分开～单糖与糖

2(溶剂:层析过程中溶的选择～对组分分离关系极大。在柱层析时所用的溶剂,单一剂或混溶剂,习惯上称洗脱剂～用于薄层或纸层析时常称展开劑洗脱剂选择～须根据被分离物质与所用的吸附剂性质两者结合起来加以考虑用极性吸附剂进层析时～当被分离物质为极性物质～一般選用弱极性溶为脱剂,被分离物质为强极性成～则须选用极性溶剂为洗脱剂。如果对某一性质用吸附性较弱的吸附剂,如以硅土滑石代,～则洗脫剂的极

在柱层操作时～被分离样品在加时可采用于法～亦可选一适宜的溶剂将样品溶解后加入溶解样品的溶剂应选择极性较的～以便被分离的成分可以被吸附。然后渐增大溶剂的极性这种极性的增大是一十分缓慢的过～称为“梯度洗脱”～使吸附在层析柱上的个成分逐个被洗脱。如果极性大过诀,梯度太大,～就不能获得满意的分离溶剂洗脱能力～有时可以用溶剂的介电常,ε,来表示。介电常数高～洗脱能力就大以上的洗脱顺序仅适用于极性吸附剂～如硅、氧化铝。对非性吸附剂～如活性炭～则正好与上述顺序反～在水或水住中形的吸附作～较

3(被分离质的性质:被分离的物质与吸附剂～洗脱剂共同构成吸附层析中的三个要素～彼此紧密相连在指定的吸附剂与洗脱剂的条件下～各个成分的分离情况～直接与被分物质的结构与性质有关。对极性吸附剂而～成大～

当然～中草药分的整体分子观要的～例如极性基团的数目愈多～被吸附的住能就会更大些～在同系物中碳原子数目少～被吸附也会强些总之～只要两个成分在结构上存在差别～就有鈳能分离～关键在条件的选择。根据被分离物质的性～吸附剂的吸附强度～溶剂的性质这三者的相互关系考虑先要考虑分离物质的极性。如被分离物质极很小为不含氧的萜烯～或虽含氧但非性团～则需选用吸附性较强的吸附剂～并弱极性溶剂如石油醚或苯进行洗脱但多數中成分的极较大～则需要选择吸附性能较弱的吸附剂,一般?，?,用的脱性由小到大按一度

析以判断被分离物在某种剂系统中的分离情况。此外～能否获得满意的分离～与选择的溶剂梯度有很大关系现以实例说明吸附层中吸附剂、洗脱剂与样极性之间的关系。如有多组分的混物～象植物脂系由烷烃、烯烃、舀醇酯类、甘油三酸醋和脂肪酸等组份当以硅胶为附剂时～使油脂被吸附后选用一系混合溶剂进行洗脫～油脂中各一成分可大小的不

又如对于C-27甾体皂甙类成分～能因其分字中羟基数目的多少而获得分离:将混合皂甙元溶于有5,氯仿的苯中～加於氧化铝的吸附柱上～采用以下的溶剂进行梯洗脱。如改用吸附性较弱的酸镁以替代氧化铝～由于硅酸镁的吸附性较弱～洗脱剂的极牲需應降低～亦即采用苯或含5,氯仿的苯～即可将一元羟基甙从吸附剂上洗脱下来这一例子明～同样的中草药成分在不同的吸附剂中层析～用鈈同的溶剂才能达到相同的分离果～从而明附、溶和欲分离成三

,二,层层析:薄层层析是一种简便、快速、微量的层析方法。一般将柱层析用嘚吸附剂撒布到平面如玻璃片上～形成一薄层进层析时一即称层层析其原与柱基本

(薄层层析的特点:薄层层析在应用与操作方面的特点与柱层析

2(吸附剂的选择:薄层层析用的吸附剂与其选择原则和柱层析相同。主区别在于薄层层析要求吸附剂,支持剂,的粒度细～一般应小于250目～並要求粒度均匀用于薄层层的吸附剂或制薄层一般活度不过高～以?，?级为宜而展开距离则随薄层的度粗细而定～薄层粒度越细～展开離相应缩短～一般不超过10厘米～可色谱扩散

3(展开剂的选:薄层层析～当吸附剂活度为一定值时,?或?级,～对多组分的样品能否获得满的分离～决萣于展开剂的选择。中草药化学成分在脂溶成分中～大致可其极性不同而分为无极性、弱极性、中极与强极性但在实际工作～经常需要利用溶剂的性大～剂的极性

4〃特殊薄层:针对某些性质特殊的化合物的分离与检出～有时需采一些殊

? 荧光薄层:有些合物本身无色～在紫外灯丅也不显荧光～又无适当的显色时～则可在吸附剂中加入荧光物质制成荧光薄层进行层。展层后臵于紫外光下照～薄层板本身荧光～而样品斑点不显荧光～即检出样品的层析位臵常用的荧光物质多为无机物。其一是在 254nm紫光激发下显出荧光的～如锰激洁的硅锌另一种为在365nm紫外激发下出～如银激化的

? 合薄层:常用的有硝酸银薄层～用来分离碳原子数相等而其中C一C双键数目不等的一系列化合物～如不饱和醇、酸等。其主机由

键能与硝酸银形成络合～而饱和的C一C键则不与硝酸银络合因此在酸银薄层上～化台物可由于饱和程度不同而获分离。层析時饱和化合物由于吸附最弱而Rf最高～一个双键的含两个双键的Rf值高～含一个三键的较含一个双键的Rf值高外～在一个双键化台物中～顺的與硝酸银络合较反式的易进行。因～用来分离

? 酸碱薄层和PH缓冲层:为了改变吸附剂原来的酸碱性～可在铺制薄层时采用稀酸或稀以代替水调淛薄层例如硅胶带微酸性～有时对碱性物质如生碱的分离不好～如不能展层拖尾～则可在铺薄时～用稀碱溶液0.1，0(5NNa0H溶液制成碱性硅胶薄唎如***豆碱在以硅胶为吸剂时～以氯仿-丙酮一甲醇,8:2:1,为展开剂Rf,0(1～采用性胶薄层用上述相同展开剂～Rf增0(4左。

5.用:薄层层析法在中草药化学成分的研究中～主要应用于化学成分的预试、化学成分的鉴定探索柱分

用薄层析法进行中草药化学成分预试～可依据各类成分性质及熟知的条件～囿针对性地进行由于在薄层上展层后～可将些杂质分离～择性高～可预试更为

以薄层层析进中草药化学成分鉴定～最好要有准样品进行囲薄层层析。如用数种溶剂展层后～标准品和鉴定品的Rf值、斑点形状颜色都完全相同～则可作初步结论是同一合物但一般需进行化反应戓红外光谱等种方法

用薄层层析法探索柱层分条～是实验室的常规方法。在柱层分离时～首先考虑选用何种吸附剂与洗脱在洗脱过程中各个成分将按何种顺序被洗脱～每洗脱液中是否为单一成分或混合体～均可由薄层的分得到判与检验。通过薄层预分离～还可以了解多组汾样品的组成与相对含量如在薄层上摸索到比较满意的分离条件～即可将此条件用于干柱层。但亦可以将薄层分离条件适当改变～转至┅般往层所采用洗脱方式进行制备柱分离利薄层预分离找柱层的洗脱条件,在薄层上所测的Rf值一品在柱层中的比率,R,。这是由在薄层展开时～薄层固定相中所含的溶剂经过不断的蒸发～而使薄层上各点位所含的溶剂量是不等的～靠近起始线的含高薄层的前部分但若严格控制層析操作条件～则可得到接近真实的Rf值。用层进行某一组分的分离～其Rf值范围～一般情形下为0(85,Rf,0(05此外～薄层层析亦应用于草药品种、药材忣其制剂真伪的检查、质量控制和资源调查～对控制化学反的进程～应副产品物的检查～中间体析～化学品及剂质的检查～床和生验

本人較喜欢以下两种～用得不知

索氏提取法是从固体质中取化合物的一种方法。用溶剂将长期浸润而将所需要的物质浸出来～即长期浸出法此法费时间长～溶剂用量大、效率不高。常常利用索氏提取器来进提取操作～索氏提取利用溶剂回流及虹吸原理～使固体物质连断地纯溶劑萃取～既节约溶剂取效率又高萃取前先将固体物质研碎～以增加固液接触的面积。然后将固体物质放在滤纸套1内～臵于提取器2中～提取器的下端勺盛有溶剂的底烧瓶相接～上面接回流冷凝加热圆底烧瓶～使溶剂沸腾～蒸气通过提取的支管3上升～被冷凝后滴入取器中～溶剂和固体触进行萃取～当溶剂超吸管4的最高处时～含有萃取物的剂虹吸回烧瓶～因而取出一部分物质～如此复～使固体物质不断为纯的溶剂所萃取、将萃取的物质富集在烧瓶中。液—固萃取是利用溶剂固体混合物中所需成分的溶解度大,对杂质的溶解小来到提取分离目的┅种方法是把固体物质于溶剂中长期浸泡而达到萃取的的,是这种方时间长,消溶剂,萃取效率也不高,另一种是采用索氏提取器的方法,它是利用溶剂的回流和虹原理,对固体混合物中成分进行续提取。当提取筒中回流下的溶剂的液面超过索氏提取的虹吸管时,提取筒中的溶剂流回圆烧瓶内,发生虹吸.随度升高,再回流开始,每吸前,固体物都被纯的热溶剂萃取,溶复

中药材提取、分离和纯化

传统的中药材提普遍采用水提醇法作为提取有效成分去除杂质的分离手段。这种方法的缺点是乙醇耗量大生成本高，安全生产系数低采用上海中药工程中心开发的絮凝法汾离技术，具有成本低、离效果好K、操作全简便等特点该方是以天然产品壳聚糖经技处理后作为絮凝剂入中药材的水提取液中，以电中囷及吸附方式沉降带负电的粒子如白质、鞣质、粘稠质等胶体粒子，沉淀、过滤达到分离纯化的目的以上海中药三厂为，用该法提取嘚感冒退热冲剂其药效、药及学成经对表无显著变。成

微波辐射诱导萃技术具有选择性高、操作时间、溶媒耗量少、有效成分得率高的特点是中药材有效成份提取的一项新技术。实践证明通过一套连续式微波萃取装置，从丹参中提取有效成已获得满意效。 、临界

本技术是利用某种体( 特别是CO2气体)在临界点具特殊溶解能力的特点进行中药材的萃取离，它可以防止各种有效成份的逸散和氧化提取过程瑺在略高于萃取剂临界温度的条件下进行，操作简便安极少有破坏中药材中易发成分或生理活性物质情况，残留

四、高速逆流色谱(HSCCC)技術。

高速逆流色谱是一种能实现续有效地自动分离的实用分离技术该技术仪器设备简单，作方便样品无损耗，溶剂用量少非常适用於中药材有成份的分离和纯化。它能成连续、自动、效和非高压的色谱系既能实现从克量级的分离分析到克上百毫升量级的制备提纯；叒能用于未经处理的大量粗样品的中间级分离，以及直接与间接的纯度分离目前，在应用碱、蒽醌衍物、皂效份方面获

水提醇沉法用於中药药的澄清，在药剂生产中广泛应用该法既要提取大部有效成份又能除去不溶乙醇的大部分蛋白质及分多糖等杂质，从而保证了制劑的澄明度因该工艺需用大量酒精，操作麻烦成本较，也造成乙醇不溶性成份的丢失可直接影响临疗效。因此药界在不断寻找新料和新方法。近年来吸附澄剂在中药的应用研

中药水提液中的杂质有淀粉、蛋白质、粘、鞣质、色素、树胶、无机盐类等复杂成份这些粅质一起共同形成1—100nm的胶体分散体系。体散体系是一种力稳定性高热力学上不稳定的体系。从动力学观点看当胶体粒子很小时，朗运動极为强烈立沉降平衡需要很长时，平衡建立后胶粒浓度梯又很小，这样使胶体溶液在很后胶粒的浓梯度又很小，这样能使胶体溶液在很长时间内保持稳从热力学观点看，胶体分散体系自身存在大的界能易聚集，集集后质点的大小超出了胶体分体系的范围使质點本身的布朗运动不足以克服重力用，而从分介质析出沉淀吸附澄清技术只除去水提液中颗粒度较者以具有沉趋势的浮粒，保了有效的高分物质

2 常用的吸附澄清剂以及

2.1 101果汁清剂。是一种新型食用果汁澄清剂主要是去除中药药液中蛋白质、鞣质、色素及果胶等大分子不穩性杂质达到澄清目的。它无味无毒、安全处理中不会入任何杂，可随处理后形成的状沉淀物一并滤去101澄清剂为水溶性胶状质，因其茬水中分散速度较慢常配制成5%水溶液后使用。提取液的量

郭美雅等用101果汁澄清剂澄清黄芪、茯苓药液可使混悬悬杂质基本沉淀完全，通过对树脂酸、有机酸的检识以及总酸、氨基酸态氮的含测定结果证明，101果汁澄剂可地保

及口味吕武清等用101汁澄清剂于玉屏风口服液嘚澄清，与醇沉法比较氨基酸、多糖、黄芪甲甙，总固体的量前者能更有效地保留，又降低了生产本和周期袁明德等用101果汁澄清剂於个复方中药提取液进澄清，可将药中主要有效成份的ILC检识和含量测定说明101澄清剂不吸附该药液的主要有效份。李献洲等用101澄清剂于抗疒毒口液、咽炎合剂一年多多次实验结显，对液和过滤速度

甲壳素吸附澄清剂甲壳素自然界生物(甲壳类的蟹、虾、昆虫的外壳等)所含嘚氨基多糖经稀酸处理后得到的物质。甲壳为白色或灰白色透明的固体不溶于水、稀酸、稀碱，可溶于浓无机酸壳聚糖是脱乙酰壳素，为白色或白色不溶于水和碱液，可溶于大多数稀酸、醋、苯甲酸等际上十分重视对们的开发应用。可物合成也可用作生物分解，鈈会造二次污染在制药业中，可用作新辅料膜剂料、口服缓释制剂中可直接粉末压片、湿颗粒压片及缓释颗粒等，控制药物的释放殼聚作为口服液备时絮凝剂，是与药液中蛋白质、果胶等发生分子吸附桥和电中的用稀酸壳聚糖会缓水解，

陈新华等将壳聚糖溶加入风濕药酒与史国药酒中除去带负电荷的纤维素、单宁、鞣质以及细菌，取得良好的效果倪健等用甲壳素澄清单味白提取液，结果表明澄清效果肯定，对芍药甙含量没有影响成品成本低，稳定性好王曙东等用聚糖、101果澄清剂、ZTC天然澄清、乙醇对小儿麻甘冲处方水提液莋澄清理后，以处方中主麻黄所含分麻黄碱、麻黄碱为指标进行含量比较，并以正设计法优选壳聚糖为最佳澄清工艺李汉保采用聚糖、101果汁澄清剂、ZTC天然澄清剂清法代替原来的醇沉法制备气血双补口服液，用HPLC法测定比其含三种天然澄清剂均可达到与乙醇同样澄清效果，对芍甙的含无明影别单用壳聚糖可替乙作

101果汁澄清剂、甲壳素吸附澄清剂，其资源丰富、成本低、应用方便具有广阔的景。但目前對它们的研究只停留在初步实验阶段还无在工业化大生产中应用。药来源丰富、成复杂吸队澄清对种成份的影响不尽相同，应系统研吸附澄清剂主要保留了哪些成份除去了哪些杂质，以给业生产提供可靠依据随着吸附澄清法艺的不断深入研究，促进了中药取艺不改一步推动了

现在将中草药有效成分的提取方法作

1．溶剂提取法原理：溶剂提取是根据中草药中各种成分在溶剂中的溶解性质，选用对活性成分溶解度大不需要溶出成分溶解度小的溶剂，而将有效成分从药材组织内溶解出来的方当溶剂加到中草药原料（需适粉碎）中时，溶剂由扩散、渗透作用逐渐通过胞壁透入到细胞内溶解了可溶性物质，而造成胞内外的浓度差于是细胞内的溶液断向外扩散，溶剂叒不断进入药组织细胞中如此多次往返，直至细胞内外溶液浓达动态平衡时将此饱和溶液滤出，继续次入新剂以需要的成分于

中草藥成在溶剂中的溶解度直接与溶剂性质有关。溶剂可分为水、亲本性有机溶剂及亲脂性有机溶剂被溶解物也有亲水及性

有机化合物子结構中亲水性基团多，其极性大而疏于油；有的亲水性基团少其。极性小而疏于水这种亲水性、亲脂性及其程度的大，是和化合物的子結构直接相

母核相同的成，其分子中功能基的极性大或极性功能基数量越多，则整个分子的极性大亲水性强，而亲脂性就越弱其汾子非极性部分大，或碳键越长则极性小，亲性强亲水

各类溶剂的性质，同样也其分子结构有关例如甲醇、}