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安捷伦1260型高效液相色谱仪详细操作规程
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安捷伦1260高效液相色谱仪
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问题描述:
求安捷伦1260液相色谱 工作站的详细操作方法
问题解答:
Agilent 1260 HPLC 操作规程 1 开机1.1 打开电脑1.2 打开液相色谱各个模块的电源1.3 双击桌面“LC1260(Online)”,进入联机界面1.4 排气:1.4.1 手动旋开泵处冲洗阀(逆时针旋转约1圈)1.4.2 右键单击“Pump”图标区域,选择“Method”选项,进入泵编辑画面,设流速:5ml/min,点击“确定”;1.4.3 右键单击“Pump” 图标区域,点击“Control”选项,选中“ON”,点击“确定”,则系统开始冲洗,直到管线内(由溶剂瓶到泵入口)无气泡为止(一般为5分钟),切换通道继续冲洗,直到所有要用通道无气泡为止;1.4.4 右键单击“Pump” 图标,点击“Method”选项,设流速:0ml/min,手动旋紧冲洗阀;1.4.5 右键单击“Pump”图标,点击“Method”选项,按照方法要求选择合适比例的流动相,设流速:1.0ml/min;(不一定是1)1.4.6 同理右键单击“Column Comp”,“DAD”图标,点击“Method”选项,按照方法的要求设置温度,波长,点击“控制” 选项,“ON”打开柱温箱和检测器.2 编辑方法2.1 点击“Method”—— “Edit EntireMethod”开始编辑完整方法;2.2 选中除“Data Analysis ”外的三项,进入下一选项卡,选择“Als”(自动进样),点击“OK”,进入下一选项;2.3 选择“Method”菜单下“Method Information”选项,在“Method Comments”中加入方法的信息(如:This is for test!),选择“OK”,进入下一选项;2.4 泵参数设定:右键单击“Pump”图标,点击“Method…”选项,设置“Flow”:如1.0ml/min;“Stop Time”:如10 min(该停止时间仅为做一个样品需要的时间),按照要求选择合适比例的流动相配比,选择“OK”,进入下一选项;2.5 自动进样器参数设定:右键单击“Sampler”图标,点击“Method”选项,选择“Injection volume”,输入进样体积,选择“OK”,进入下一选项;2.6 柱温箱参数设定:右键单击“Column Comp”,点击“Method”选项,设置“Left”温度(可设置温度范围:低于室温10℃-80℃),一般“Left”和“Right”温度一致,选择“Combined”绑定即可,“Stop Time”选择“As Pump /Injector”,选择“OK”,进入下一选项;2.7 UV检测器参数设定: 右击“DAD” ,点击“Method…”选项,下方的空白处输入所需的检测波长(可根据需要选择多个波长,最多可选8个波长);“Stop Time”选择“As Pump /Injector”;“Spectrum” ——“Store”选项下,根据需要选择 “None”或“All(全波长扫描)”等选项,选择“OK”,进入下一选项;2.8 编辑方法完毕,从“Method”菜单中,选中“Save Method As”,输入一方法名,选择“OK”,保存方法成功.3 单针进样3.1 从“Run Control”菜单中,选择“Sample Information”选项,输入“Operator Name”;在“Data File”中选择“Path”和 “Prefix/Counter(文件命名)”设置“Prefix(一般设置为年月日)”和“Counter”;输入“Location(样品位置)”和“Sample Name”,选择“OK”,进入下一选项;3.2 基线平稳后选择“Run Control”中的“Run Method”选项,开始进样.4 序列进样4.1 选择“Sequence”菜单下“ Sequence Table”选项,在“Confiqure Table”中选择需要选项,一般为“Vial(样品瓶)”,“Sample Name(样品名称)”,“Method Name(方法名称)”,“Inj/Vial(进样次数)”,“Sample Type(样品类型)”,“Datafile(文件名)”和“Inj Volume(进样体积)”;4.2 点击“Inset”生成一行,设置上述参数,选中该行,点击“Copy”和“Paste”复制后修改相应参数,即生成序列表,选择“OK”,进入下一选项;4.3 点击“Sequence”菜单下“ Sequence Parameters”选项,选择序列数据的“Path”(序列会自动生成以“序列名称-时间”为名称的文件夹保存数据),数据建议选择 “Prefix/Counter”保存;在“Shutdown”选项下选中“Post-Sequence Command/Macro”,根据需要选择“PUMPALL OFF(序列结束后关闭泵)”” “LAMPALL OFF(序列结束后关闭紫外灯)”” “STANDBY(序列结束后关闭紫外灯和泵)”,选择“OK”,进入下一选项;(注:若“Path”中默认保存于C盘,则可点击“View”,选择“Preferences”,根据需要添加相应的“SequenceTemplates”“Data”“Master Methods”保存路径)4.4 从“Sequence”菜单,选中“Save Sequence Template As”,输入一序列名,选择“OK”,即可;4.5 基线平稳后选择“Run Control”中的“Run Sequence”选项,开始序列进样.(注:若中途停止运行,则选择“Run Control”中的“Stop Run/Inject/ Sequence”可保留图谱信息,若选择Abort,则所有图谱信息都丢失)5 数据分析(脱机状态使用)5.1 双击“LC1260(Offline)”图标进入的脱机画面5.2 从“View”菜单中,点击“Data Analysis”进入数据分析画面5.3 从“File”菜单选择“Load Signal”,选中所需的数据文件名,点击“OK”,则数据被调出.5.4 谱图优化:从“Graphics”菜单中选择“Signal Options”.从“范围” 中选择“Full”或“Use Ranges” 选择所需“Time Range”和“Response Range”,选择“OK”;从“Integration”中选择“Integration Events”,调整“Area Reject”和“Height Reject”删除杂峰;点击“Set Integration”图标,可选择性消除不需要的积分,若想消除该操作,则选择“Method Manual Events”上排左起第5个图标进行移除操作即可,点击左边“√”图标,将积分参数存入方法并退出“Integration Events”.(注:“Set Integration”图标为)6 标准曲线绘制6.1 选择“Calibration”菜单下“New Calibration Table”,选择“Automatic Setup”中“Level(即标曲中对应的点,第一个点即为1)”和“Defanlt Amount(标准品对应点的浓度)”,选择“OK”;6.2 通过选择“Calibration”菜单下的“Add Level”选项依次添加各点参数,若为外标法,在“ISTD”项下选“NO”,若为内标法则选“Yes”;“#”项下对应标准品和内标无的数字的应统一;若想更改标准曲线中的对应点;6.3 选择“Calibration”菜单下的“Recalibrate”项的“Mode”选项,选择“Average”则表示取当前点与标曲中对应点的平均值替代标曲中原对应点,若选择“Replace”则表示将当前点取代标曲中对应点;(注:修改“Defanlt Amount”中浓度单位的方法:选择“Calibration”项下“Calibration Setting”,修改“Amount Units”,设置浓度单位;选择“Calibration”项下“Calibration Setting”,修改“Default CalibrationCurve”,选择合适的曲线类型-Type,是否过原点-Origin和各点对于标准曲线的比重-Weight,通常选Equal)6.4 调出样品谱图,点击需要计算浓度的色谱峰,选择“Report” 菜单中的“Specify Report”,选择“Report style”为“Detail”,点击“OK”后选择“打印预览”图标,在报告中即可体现计算结果.7 图谱重叠设置7.1 选择“File”菜单下“Overlay Signal”选项,选择任意需要重叠的图谱;7.2 在“Signal”选项下,选择“3D Signal Overlay”图标(紧邻图谱上方左起第四个图标),在弹出的“Adjust Signal OverlayOptions”对话框中调节交错时间和高度;若想移除重叠谱图,点击第六个图标.8 信噪比等参数计算8.1 选择“Report”菜单中的“System Suitability”项下的“Edit Noise Range”选项,设置时间范围(超过1min);8.2 选择“Report” 菜单中的“Specify Report”,选择“Report style”为“Perfomance+Noise”,点击“OK”后,即可预览信噪比参数;8.3 选择“Report” 菜单中的“Specify Report”,选择“Report style”为“Extended Perfomance”,点击“OK”后,即可预览对称性、拖尾因子等所有参数.9 程序运行时检测出峰情况选择“File”菜单下的“Snapshot”选项即可.10 打印报告10.1 从“Report”菜单中选择“Report Mode”,选择“Use Classic Reporting”;10.2 从“Report”菜单中选择“打印报告”,则报告结果将被打印.11 关机11.1 冲洗色谱柱和系统后,退出化学工作站及其它窗口,关闭计算机;11.2关闭Agilent 1260各模块电源开关.仪器使用注意事项1. 用棕色的溶剂瓶盛放水溶液或磷酸盐缓冲液.光照影响瓶中藻类的生长会堵塞溶剂过滤器,从而影响泵的运行.勿使用多日存放的蒸馏水.2. 在比例阀的混合点,重力作用使盐颗粒沉淀下来,通常,下面阀A/D接水相/盐溶液,C/B接有机溶剂.使用盐时脱气机易堵,可将管路入口与出口反接,用60摄氏度的温水反冲,用针筒缓慢吸200mL左右.3. 流动相瓶中的滤头脏.压力波动,可将滤头拔下,检查是否与滤头有关.滤头污染,可用30%-35%的稀硝酸泡1-2h或过夜,看污染程度,最后用水冲洗干净,重新装好.4. seal-wash 用10%的异丙醇.使用缓冲盐时要加seal-wash选项,周期清洗.5. LAN与CAN不能串联,LAN接仪器,PC.CAN为模块间通讯.6. 柱温箱选择3uL,减少死体积,延迟体积.7. 液相上各种灯颜色.电源打开后,四个模块左侧灯亮绿色.状态指示灯位于各自模块的右上方:呈黄色:该仪器在未准备好状态(Not-ready) 或正在自检.呈绿色:该仪器正在运行,采集数据(Run).无颜色:该仪器已准备好等待运行(Pre-run).呈红色:该仪器检测到有故障发生,仪器在错误状态,红色多发生于漏液时.8. 过滤白头位于排气阀内,当系统压力有异常增高时,首先需要检查过滤白头是否阻塞了.判断的方法是:打开排气阀,以纯水作流动相,将流速设为5mL/min,如果泵压超过10bar,则说明过滤白头需要更换了.如果过滤芯的颜色发黑,说明是被柱塞密封垫磨损下来的碎屑堵塞的.9. 毛细管线分类:0.17mm内径 ------绿色 ;0.12mm内径-------红;0.25mm内径-------蓝PEEK 管线:内径 -----0.18mm.10. 灯能量测试,先将灯预热,用水平衡系统.启动Agilent Lab advisor 进行测试.启动软件 connect(界面右上部分) Service&Diagnostics(左侧导航栏) 选择G4212B Intensity Test Run 查看结果.11. 柱子存放:柱子填充乙腈或甲醇,两端堵头封存,每一个月重新使用乙腈或甲醇,填充封存.
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Agilent 1260 HPLC 操作规程 1 开机1.1 打开电脑1.2 打开液相色谱各个模块的电源1.3 双击桌面“LC1260(Online)”,进入联机界面1.4 排气:1.4.1 手动旋开泵处冲洗阀(逆时针旋转约1圈)1.4.2 右键单击“Pump”图标区域,选择“Method”选项,进入泵编辑画面,设流速
好像是没有这个功能吧,你可以和空白对比,把空白的峰扣掉,自动扣除好像没有这个功能
四元泵色谱系统一般是一个泵+比例阀,是泵前混合.四元泵是泵前混合,属于低压混合,通过比例阀调节.朋友可以到行业内专业的网站进行交流学习!分析测试百科网这块做得不错,气相、液相、质谱、光谱、药物分析、化学分析、食品分析.这方面的专家比较多,基本上问题都能得到解答,有问题可去那提问,网址百度搜下就有.
压力变化的时候可能就是梯度洗脱是浓度变化吧,我使用液相没用过梯度洗脱,具体的不知道
进空气了吧.
做好的曲线存成方法呀,以后分析数据的时候调用该方法,打印报告(报告输出到屏幕)就可以看到定量结果了建议您可以到行业内专业的网站进行交流学习!在此,我推荐您分析测试百科网!我和我身边很多人也都是在这个网站学习很成长起来的!
一般情况下,有一份色谱柱选择的参考文件给你,每种色谱柱也有说明适合测哪种化合物
我一般2个瓶都装和样品溶剂相同的溶剂,这样可以避免溶剂带来更多的杂质.如果要装不同的溶剂,我认为应该是2种互溶的才好.一般不要用水洗针,不信你2个瓶都用溶剂洗针,进样量为0,你看看,会有多大的峰,如果是水的话可想而知对柱子的损害程度
应该是1 HP-1 &#% 二甲基聚硅氧烷 • 非极性 • 高性能通用色谱柱——“工业标准” • 应用范围广 • 对低分子量醇类• 键合交联 • 可用溶剂清洗
一句话来概括的话就是相似相溶.气相色谱法的分离原理是利用要分离的诸组分在流动相(载气)和固定相两相间的分配有差异(即有不同的分配系数),当两相作相对运动时,这些组分在两相间的分配反复进行,从几千次到数百万次,即使组分的分配系数只有微小的差异,随着流动相的移动可以有明显的差距,最后使这些组分得到分离.气相色谱法的理论基础
气相色谱柱只有正确的安装才能保证发挥其最佳的性能和延长使用寿命.安装过程如下:1.检查气体过滤器、载气、进样垫和衬管等,检查气体过滤器和进样垫,保证辅助气和检测器的用气畅通有效.如果以前做过较脏样品或活性较高的化合物,需要将进样口的衬管清洗或更换.2.将螺母和密封垫装在色谱柱上,并将色谱柱两端要小心切平.3.将色谱柱连
看了你的图片,主要原因是你的系统脏了,按照以往的经验建议你这样处理:1、去掉色谱柱,色谱柱可用不锈钢对接代替连接号整个流路系统,用10%的硝酸水溶液冲洗1小时.2、更换过滤后的纯水再冲洗1小时.3、更换异丙醇不断冲洗过夜,冲洗的时候模拟采样过程,排一些针,每针的检测时间可设为1分钟,这样的目的是让进样阀也达到冲洗的目的
峰型不好也不一定就是过载的.有些极性很强的物质会产生峰的前倾或是拖尾也是正常的.判断一上样品是否过载如果用最为科学的方法那就是做线性,做7个或是更多的点来判断,如果线性达到三个9以上基本就认为没 过载,如果说再加一个点线性下降的很厉害基本就说明是从这个点就是过载了.当然了如果你做出曲线来的话,就算你不用算出相关因子,也
一般倒峰是由样品中水组分引起的,分析方法中如果用纯有机相的话很容易出现.
建议你去“色谱世界”网站看看吧,这个网站在色谱方面非常专业.有很多专业人士,对你解决色谱方面的问题和学些色谱知识都会有很大帮助.
当然可以做了,不管什么样的泵,做等度分析这是最基本的.1、你可以将你流相A、B两相,分别放置在A、B两泵上,按方法要求设置好两相在双泵上的比例.直接运行就行.2、还可以将流动相两相按方法中要求配在一个瓶子里.然后,放置在其中一个泵上(A、B任意一个),运行其中一个泵就行.3、将流动相两相按方法中要求配在一个瓶子里,将A
我们用的是1220的,工作站是安捷伦工程师安装的,软件是收费的.
不能就绪有很多原因的,你可以具体看一下它的提示,或者你清洗一下流通池,再启,如果不行,就可能是灯的寿命或者光路问题了
1、可以把流通池拿出来,重新安装一下.可能池上的标识卡没有对好,仪器读取不到信息.2、在工作站界面,点流通池的标致,右键点“控制”在下面找到“总是识别”或”仅当可用时“大体是两个选项,改变一下,试试. 再问: 您好!想请教下标识卡在哪儿?我的流通池型号是G4212B的那种,拿下来就是一个整体的黑色盒子,外观看不到什么标
安捷伦的!岛津的也ok
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企业认证:
注册资本:10万
企业性质:私营有限责任公司
主营产品:主营产品:气相色谱仪GC,液相色谱仪HPLC,气
公司地址:上海市隆昌路619号C区1栋309室
规格:Agilent 1260 Infinity
品牌:安捷伦/Agilent Technologies
产地:美国
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上市时间:2010年6月
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Agilent 1260系列高效液相色谱仪配置及报价单
Date of Issue:
Quotation NO.:
安捷伦科技(中国)有限公司
DESCRIPTION
液相主机部分:
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1260 Infinity 单元泵,耐压600
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1/16&x 10-32 Male
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