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TTC法测根系 光合影响因素资料.ppt
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根系活力的测定(TTC 法) 植物生理生化教研室曾汉来
一、实验目的 H 2O无机盐提供合成所需能量; 合成氨基酸和植物激素( ABA 、 CTK 、 GA 等) 根的生长情况和活力水平直接影响地上部的生长测定根系活力,为植物生长状况、营养供应研究提供依据。?理解植物根系活力的内涵?掌握 TTC 法测根系活力的原理与方法二、实验原理***化三苯基四氮唑( TTC )的标准氧化电位为 80mV 的氧化还原物质,获得 H 的能力强。溶于水为无色溶液,还原后即生成红色而不溶于水的三苯基甲腙( TTF )。生成的 TTF 比较稳定,不会被空气中的氧自动氧化,可用分光光度法定量测定。— TTC TTF 根系活力脱氢酶活性丙二酸碘乙酸琥珀酸延胡索酸苹果酸促进抑制(无色,溶于水) (红色,不溶于水) 三、实验材料?水培或砂培小麦、玉米等植物根系。四、实验步骤—制作 TTC 标准曲线吸取不同量的 TTC 加入 10mL 容量瓶 Na 2S 2O 4 TTC 全部还原乙酸乙酯乙酸乙酯定容 0.25mL 0.50mL 1.00mL 1.50mL 2.00mL TTC 含量( μg)
200 乙酸乙酯作参比,测定 485nm 下光密度值,绘制标准曲线四、实验步骤—测定根系活力 0.2-0.3g 根尖样品(2-3cm 长)0.4 % TTC 、磷酸缓冲液各 5ml 根充分浸没于溶液中 37℃下暗保温 40-60min 加入 1mol/L 硫酸 2ml 取出根吸干水分与3~ 4ml 乙酸乙酯在研钵内磨碎红色提取液移入试管且用乙酸乙酯定容到 10ml 空白试验作参比测 485nm 下吸光度空白实验: 根样品先加硫酸,其他操作相同。查标准曲线, TTC 还原量(mg) 五、实验结果= TTC 还原能力( mg/g( 根鲜重)/h ) 四氮唑还原量( mg ) [根重( g)×时间(h)] 六、思考题?1.植物的根系活力与地上部分的关系? ?2.本实验中为什么要用磷酸缓冲液和 37℃处理? ?3.测定根系活力时最好选择根的哪个部位?为什么? ?4.本实验的根系活力指标的实质是什么? ?5.对TTC 的特性及显色反应原理要清楚。环境因素对光合作用的影响植物生理生化教研室曾汉来
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下载次数：玉米根系活力TTC测定法的改良--《玉米科学》1994年04期
玉米根系活力TTC测定法的改良
【摘要】：根系活力是研究玉米生长发育时常常需要测定的一项生理指标。本文比较了玉米根系活力ＴＴＣ测定法的三种提取方法。结果表明，甲醇浸泡法，简便易行，结果准确。
【作者单位】：
【分类号】：S513.01
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如何用TTC法测定细胞活力（具体步骤）?最近我在做植物细胞培养实验,要用TTC法测定植物悬浮细胞的生长活力,其具体操作步骤是什么呀?请大家帮帮忙!急!我现在做的是愈伤组织悬浮培养,要测定悬浮培养细胞的生长活力,具体操作步骤是什么呀?老大,你再帮帮忙吧!
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1.浸泡 将待测种子在 30 35 ℃温水中浸种（大麦、小麦 6 小时,玉米 5 小时左右）,以增强种胚的呼吸作用.2.显色 取吸胀的种子 200 粒,用刀片沿种子胚的中心线纵切为两半,将其中的一半置于 2 只培养皿中,每皿 100 个半粒,加入适量的 0.5% TTC 溶液,以覆盖种子为度.然后置于 30 ℃恒温箱中 1 h .观察结果,凡胚被染为红色的是活种子.将另一半在沸水中煮 5 min 杀死胚,作同样染色处理,作为对照观察.3.计算活种子的百分率
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实验中加硫酸是对照,最后的2ml硫酸是为了终止反应.琥珀酸是为了验证根系活力红色TTF的存在.
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