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粤ICP备号-3179被浏览27,766分享邀请回答9019 条评论分享收藏感谢收起1118 条评论分享收藏感谢收起& “I．人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经...”习题详情
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I．人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体．已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，且疫苗生产和抗体制备的流程之一如图：（1）过程①代表的是逆转录&．（2）过程③构建A基因重组载体时，必须使用限制酶和DNA连接酶&两种工具酶．（3）在将X进行扩大培养之前，至少需要经过两次筛选，方法分别是用选择培养基筛选和用专一抗体检测&．（4）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的A蛋白&所制备的疫苗．对该传染病疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离出病毒，与已知病毒进行核酸序列比较；或用图中的抗A蛋白的单克隆抗体&进行特异性结合检测．II．ω-3脂肪酸是深海“鱼油“的主要成分，它对风湿性关节炎以及糖尿病等有很好的预防和辅助治疗作用．科学家从一种线虫中提取出相应基因，然后将该基因导入猪胚胎干细胞，以期得到富含ω-3脂肪酸的转基因猪．分析回答：（1）在基因工程中，从线虫中提取的上述相关基因称为目的基因&．（2）在利用PCR技术对上述基因进行扩增时需要利用到Taq酶，该酶的独特特性是耐高温&．（3）上述相关基因进入受体细胞并在受体细胞内稳定存在和表达的过程，称为转化&．培养含有上述基因的胚胎干细胞的培养基中，必须加入动物血清&等天然成分．（4）为获得更多的转基因猪，通常将胚胎干细胞培养到桑椹胚或囊胚&期后，采用胚胎分割技术获得更多胚胎，然后再采用胚胎移植等技术将胚胎移植到不同母猪子宫内．
本题难度：较难
题型：填空题&|&来源：网络
分析与解答
习题“I．人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体．已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，且疫苗生产和抗体制备的流程之一如图：（1）过程①代表的是____．（2）过程③构建A...”的分析与解答如下所示：
图示过程中，①表示逆转录、②形成目的基因、③表示基因表达载体的构建、④目的基因导入受体细胞、⑤抗原刺激B细胞、⑥B细胞增殖分化形成浆细胞、⑦细胞融合技术．PCR技术的过程：高温变性、低温复性、中温延伸．条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）．
Ⅰ（1）病毒RNA到DNA的过程代表逆转录．（2）在构建A基因重组载体时，必须使用限制酶和DNA连接酶两种工具酶．（3）在单克隆抗体的制备过程中，细胞融合后首先利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，然后再用专一抗体检测筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞．（4）图中的A蛋白相当于疫苗，因此可用该疫苗对健康人进行该传染病免疫预防．对该传染病疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离出病毒，与已知病毒进行核酸序列比较；或用图中的抗A蛋白的单克隆抗体进行特异性结合检测．Ⅱ（1）在基因工程中，提取的上述相关基因称为目的基因．（2）PCR技术是在体外进行的DNA扩增技术，过程中利用的高温解链，因此PCR技术中利用的Taq酶具有耐高温的特性．（3）转化就是指目的基因进入受体细胞并在受体细胞内稳定存在和表达的过程．培养含有上述基因的胚胎干细胞的培养基中，必须加入动物血清等天然成分．（4）为了获得更多的后代，提高雌性个体的繁殖力，一般利用胚胎分割技术获得更多胚胎，此时选择培养到桑椹胚或囊胚作为对象，采用然后再采用胚胎移植等技术将胚胎移植到不同母猪子宫内．故答案为：Ⅰ（1）逆转录&& （2）限制酶&& DNA连接酶（3）用专一抗体检测（4）A蛋白&& 抗A蛋白的单克隆抗体Ⅱ（1）目的基因（2）耐高温（3）转化&& 动物血清（4）桑椹胚或囊胚
本题难度不大，综合性较强，考查了基因工程、单克隆抗体的制备、PCR技术、胚胎分割等知识，要求考生具有扎实的基础知识，并构建一定的知识网络．
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I．人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体．已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，且疫苗生产和抗体制备的流程之一如图：（1）过程①代表的是____．（2）过...
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冠状病毒是常见的一种能导致人和多种动物患病的病原体，是具有囊膜的单股正链RNA病毒，电子显微镜下可见病毒的包膜上有形状类似日冕的棘突，冠状病毒因此而得名。
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逄凤娇1，2，张柏猛1，2，何孔旺2，俞正玉2，徐向伟1，2，郭容利1，范宝超2，温立斌2，李彬2，姜平11.南京农业大学动物医学院；2.江苏省农业科学院兽医研究所　　冠状病毒是常见的一种能导致人和多种动物患病的病原体，是具有囊膜的单股正链RNA病毒，电子显微镜下可见病毒的包膜上有形状类似日冕的棘突，冠状病毒因此而得名。　　冠状病毒可分为4个亚群，即Alpha、Beta、Gamma和Delta冠状病毒。其中Alpha冠状病毒亚群中的猪流行性腹泻病毒（PEDV）和猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）严重威胁着猪群的健康，给养殖业的生产安全带来巨大隐患。　　Delta冠状病毒之前只在禽类体内发现，2009年，禽类Delta冠状病毒在家养及野生鸟类中被大面积发现。猪源Delta冠状病毒（PDCoV）在2012年的一次监测调查研究中第一次被识别，2014年2月，美国从临床上有腹泻症状的猪中第一次检测出PDCoV。PDCoV基因组全长大约25kb，编码4种主要的结构蛋白：纤突（S）蛋白，囊膜（E）蛋白，膜（M）蛋白和核衣壳（N）蛋白。PDCoV能够引起感染猪出现呕吐、腹泻和脱水等症状，其中哺乳仔猪发病尤为严重。　　目前，美国多个州、加拿大、韩国等均已检测到PDCoV。美国一项研究表明，PDCoV基因组的演变速率估计为每个节点每年替换3.8×10-4。中国大陆也分离出多个毒株，例如2012年分离到的四川省CH/Sichuan/S27/2012毒株，2015年分离到的絓-西省PDCoV/CHJXNI2/2015毒株，以及2015年华中农业大学报道的CH/SXD1/2015毒株。有研究数据显示，PDCoV的阳性样品最早可以追溯到2004年，表明PDCoV在中国大陆至少已经存在了11年。　　然而，针对PDCoV的检测方法尚处于发展阶段，本实验依据GenBank中收录的PDCoVM基因核苷酸序列设计出一对特异性引物，建立了一种特异性强、灵敏度高且快速可靠的检测PDCoV的RT-PCR方法。为我国PDCoV的流行病学调查研究提供了技术支持，对防控PDCoV的大面积传播具有重要意义。　　1　材料与方法　　1.1　主要试验材料及病料样品　　本研究中所用的PDCoV毒株是由本实验室于2015年5月从絓-苏省某发生腹泻的猪场中分离鉴定并保存的；轮状病毒（RV）、PEDV、TGEV均由本实验室分离鉴定并保存；感受态菌种大肠杆菌DH5α由本实验室保存；含有PDCoVM基因的重组质粒pMD-M由本实验室构建。492份临床待检样品来自华东地区部分发病猪场送检的粪便、肛门拭子、肠道、肺脏、血清和淋巴结等，其中腹泻样品43份。　　1.2　主要试剂　　核酸（RNA/DNA）提取试剂盒为北京天恩泽基因科技有限公司产品；反转录试剂盒和RT-PCR Mix为北京全式金生物技术有限公司产品；dNTP、pMD19-T载体、DL2000 DNA Marker均购自大连宝生物工程有限公司。　　1.3　引物的设计与合成　　依据GenBank中收录的PDCoVM基因序列，设计并合成一对扩增的特异性引物，扩增片段预计为480bp。上游引物P1：5'-ATCCTCCAAGGAGGCTATGC-3'；下游引物P2：5'-GCGAATTCTGGATCGTTGTT-3'。引物由南京思普金生物科技有限公司合成。　　1.4　病料样品的处理及模板的制备　　将肠道、肺脏和淋巴结等临床组织样品剪碎，加入PBS缓冲液充分研磨，反复冻融3次，4000r/min离心5min，取上清液并参照RNA提取试剂盒说明书提取病毒总RNA，-70℃保存备用。利用反转录试剂盒将样品提取的RNA反转录成cDNA，保存备用。　　1.5　RT-PCR检测方法的优化　　在扩增体系的优化过程中，上下游引物采用5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L三种不同浓度分别进行扩增；模板cDNA采用2μL、4μL及6μL三种不同体积分别进行扩增；加入DNA聚合酶（5U/μL）0.5μL、dNTP（2.5mmol/L）8μL、10×PCR缓冲液和DEPC处理水。PCR退火温度设置5个梯度，分别是：55℃、56℃、57℃、58℃、59℃。所得PCR产物经1%琼脂糖凝胶电泳检测。　　1.6　特异性试验　　参照RNA提取试剂盒方法分别提取RV、TGEV、PEDV的RNA，以PDCoV、RV、TGEV、PEDV反转录制备的cDNA为模板，同时以无菌水做阴性对照，利用优化后的扩增体系进行RT-PCR扩增，检测该方法的特异性。　　1.7　敏感性试验　　利用pMD19-T载体构建重组质粒pMD-M，测定其浓度并计算拷贝数。以连续10倍稀释的重组质粒为模板，利用优化后的RT-PCR方法进行扩增，测定该方法的敏感性。　　1.8　PCR方法的可靠性检测　　选取10份RT-PCR临床检测呈PDCoV阳性的PCR产物，分别克隆至pMD19-T载体，重组质粒送至南京思普金生物科技有限公司进行序列测定，将测序结果利用NCBI中的Blast软件进行序列比对分析，验证PCR方法的可靠性。　　1.9　临床样品检测　　取2014年～2015年间收集的492份我国华东地区猪场的病料样品进行处理，提取病料样品的总RNA，利用本研究建立的RT-PCR方法进行检测和结果分析。　　2　结果　　2.1　RT-PCR检测方法的建立　　经过对引物浓度、模板量及退火温度等的优化，结果显示RT-PCR最佳反应体系为50μL：引物P1（20μmol/L）和引物P2（20μmol/L）各2μL，模板cDNA2μL，DNA聚合酶（5U/μL）0.5μL，dNTP（2.5mmol/L）8μL，10×PCR缓冲液5μL，DEPC处理水30.5μL。反应条件为：94℃ 5min；94℃ 30s、57℃ 30s、72℃ 30s，进行30个裓-环；最后72℃延伸10min。PCR产物经1%琼脂糖凝胶电泳检测，结果表明扩增片段约为480bp，与预期相符。　　2.2　特异性试验　　利用建立的RT-PCR方法对其他腹泻相关病毒如RV、TGEV、PEDV以及PDCoV的核酸进行扩增，结果显示只有PDCoV扩增出约480bp特异性片段，而其它病毒扩增结果均呈阴性，表明该方法特异性较好（图1）。图1　RT-PCR的特异性试验2.3　敏感性试验　　分光光度计测定PDCoVM基因重组质粒pMD-M浓度为220ng/μL，换算拷贝数为6.33×1010拷贝/μL，以其10倍倍比稀释后的产物分别作为模板，进行RT-PCR方法的敏感性检测。结果显示，该方法检测的敏感性可达6.33×104拷贝/μL（图2）。图2　RT - PCR的敏感性试验2.4　可靠性检测　　选取10份RT-PCR临床检测呈PDCoV阳性的PCR产物，分别克隆至pMD19-T载体，经Blast序列比对分析显示，10份临床样品所测序列与Gen-Bank中登录的PDCoV序列同源性均为99%～100%，表明本次试验建立的RT-PCR方法具有可靠性。　　2.5　临床样品的检测　　应用建立的RT-PCR方法对2014年～2015年收集的492份华东地区猪场组织样品进行检测，结果显示PDCoV总阳性率为2.85%（14/492），其中8份腹泻样品为阳性，腹泻样品中的阳性率为18.60%（8/43）（表1）。表明本次试验建立的RT-PCR方法可以应用于临床中PDCoV的检测。表1　RT-PCR方法检测临床样品统计　3　讨论　　PDCoV是2014年2月在美国最新检测出的一种病毒。PDCoV可导致感染猪出现呕吐、腹泻和脱水等症状，仔猪死亡率为30%～40%。对感染仔猪的胃、肠进行石蜡切片制作，经HE染色后显微镜下可见胃小凹和小肠上皮细胞变性、坏死，继而导致绒毛严重萎缩。　　胃肠道并不是受感染仔猪唯一的病变部位，仔猪的明显病变有时也出现在肺脏。PDCoV的传播给养殖业带来严重的经济损失，引起了人们极大的关注。　　然而，业界对PDCoV的认识还比较匮乏，人们对其感染动态、致病力等方面存在诸多疑问，与其他猪冠状病毒相比，PDCoV的诊断和检测工具更是处于发展阶段，目前尚无有效的防治方法，这就要求我们及时采取有效的诊断工具、为PDCoV预防工作的开展做好准备。　　PCR技术能够特异性地扩增目的基因，在较短时间内进行快速检测，凭借其自身的简便快捷、高特异性和高敏感性等优势已成为人们进行基因研究和分析的最常用方法之一。　　本次试验即依据PCR技术原理，基于PDCoVM基因建立了一种检测PDCoV的RT-PCR方法。在冠状病毒编码的四种主要结构蛋白中，M基因编码的膜蛋白是一种穿膜蛋白，负责营养物质的跨膜运输，同时它也是一种重要的结构蛋白，刺激机体产生免疫保护，在病毒粒子的组装、出芽释放及病毒外包膜的形成过程中扮演着重要角色。　　根据GenBank中PDCoV的M基因序列进行同源性分析，发现不同PDCoV毒株之间M基因的同源性均大于99%，与其它冠状病毒（PEDV、TGEV、PRCV）M基因的同源性均不足50%，表明M基因具有很高的保守性，适合用于PCR检测中PDCoV特异性引物的设计。　　试验数据表明，该方法具有较强的特异性和敏感性，仅对PDCoV核酸具有特异性扩增，对其它猪主要腹泻病原核酸均无扩增。将重组质粒pMD-M连续10倍倍比稀释，至10-7仍有较明显的扩增片段，敏感性可达6.33×104拷贝/μL。　　492份临床样品中检测阳性率为2.85%，腹泻样品中的阳性率高达18.60%，证实本研究建立的检测PDCoV的RT-PCR方法可以对临床病料样品中的PDCoV进行快速检测，且2014年～2015年华东地区猪场中PDCoV的阳性率较高，为我国PDCoV流行病学调查的开展及相应防控工作的实施奠定了基础。
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免疫PCR技术（Immuno-PCR）
免疫PCR技术（Immuno-PCR）&免疫PCR方法（Immuno-PCR）是Takeshi等1992年将免疫学反应和PCR技术相结合而创建的一种新的检测技术，具有抗原、抗体反应的特异性和PCR技术的高效性。它运用PCR的高度敏感性来放大抗原抗体反应的特异性，使实验中只需数百个抗原分子即可检测，甚至在理论上可检测到1至数个抗原分子。这种灵敏度使免疫检测技术达到了一个新的高度。免疫PCR主要由两个部分组成：第一部分是类似于普通酶联免疫吸附实验（ELISA）的抗原抗体反应；第二部分即常规的PCR扩增和电泳检测。其基本过程如下:首先将待检测的抗原吸附于固相，经封闭和冲洗后加入特异的抗体，此抗体常采用生物素标记。经孵育和冲洗后加入作为连接分子的亲和素或叶绿素，再孵育和冲洗加生物素标记的DNA，孵育和冲洗去除游离的DNA分子，然后加PCR扩增系统放大结合于固相的DNA，用琼脂糖凝胶电泳检测放大的PCR产物。近几年来，科技界陆续提出了免疫基因组学、肿瘤免疫组学、免疫组学、抗原组学、抗原表位组学等新概念。这些概念的提出，表示继基因组、蛋白质组之后在科学上又一个新领域的产生；对生物技术来说，基因组研究的应用，通过抗原表位组学、抗体组学和抗原表位组学与抗体组学是建立在基因组学和蛋白组学基础上的新兴领域，正在成长为继基因组和蛋白组后的科学热点。应用相关的学科的最新成就，结合相关的技术，经过建立抗原表位库和抗体库，高通量筛选抗原靶标和抗原表位，可大大加速诊断、治疗药物靶标的筛选和研究与开发的进程。1995年，美国科学家Mulis众望所归地获得了诺贝尔化学奖，他所取得的成就是发明了PCR技术。PCR，中文译为聚合酶链式反应，其实是一种DNA的快速扩增技术，其扩增效率之高就象核裂变的&链式反应&那样。PCR技术通过两个短的称为引物的DNA小片段和一种耐热的酶的作用，可以在3个小时内把特定的DNA量提高1000万倍。这种技术一问世，立刻引起了分子生物学研究的一场革命，人们利用这种轰动全世界的技术很快就把微观领域的生物学研究大大地往前推了一步。可以这么说，PCR技术使分子生物学研究一下子获得了突破，而且随着PCR技术的日趋完善，PCR在人类社会生活中的应用也越来越广泛。比如说在&DNA指纹&中我们提到，科学家们只需要一根头发甚至一个细胞就可以完成DNA指纹的鉴定工作，这里实际上就要采用PCR技术，因为一个细胞中的DNA含量实在太少了，人们根本不可能检测到它的指纹；有了PCR技术就好办了，通过PCR技术把这个细胞中的DNA断扩增1000万倍，这样DNA量就足够作指纹鉴定了。再比如，在医院里检验血液中的某种病毒，有时病毒量极少（例如有的艾滋病病毒携带者），通过传统的检查方法费力又费时，这时PCR技术也许就可以帮上忙。可以先选定这种病毒DNA上的一段DNA，设计合适的引物DNA，然后通过PCR技术一扩增很快就可以判断出血样中是否扩增出了大量的DNA，如果是的话，那么就说明血样中带有该种病毒了。PCR方法不但有极高的灵敏度，而且可以同时一次做近百个扩增反应，省时省力效率高。PCR技术神奇就神奇在以下几个特点上：一是被扩增的DNA所需量极小，理论上讲一个分子就可以用于扩增了；二是扩增效率高，目的基因的量成指数形式扩增，几个小时就扩增1000万倍以上。现在PCR技术已经被广泛地应用于生命科学研究、食品卫生、医疗、法医及环境监测等诸多方面，真不愧是&获得诺贝尔奖&的好技术！免疫PCR技术（Immuno-PCR）90年代初提出了抗体库技术。抗体库技术简单地说就是用细菌克隆取代B细胞克隆来表达抗体库（repertoire）。由于RT-PCR技术的发展，大肠杆菌直接表达有功能性抗体分子片断的成功以及噬菌体显示技术（phage display）的问世，在90年代初出现噬菌体抗体库（phage antibody library）技术，该技术使得人们从应用DNA重组技术改造现有的单抗发展到用基因工程技术克隆新的单抗，从而使抗体工程进入一个全新的时期。噬菌体抗体库 继杂交瘤技术之后又一突破性进展的用于制备新型抗体的是噬菌体抗体库技术。Winter等人在1994年创建了噬菌体抗体库技术，克服了人体不能随意免疫的缺点，用人的外周血制备抗体文库，从而获得人源性基因工程抗体。而且将抗体基因的克隆和表达融为一体，同在一种载体上进行，将抗体基因表达在载体的表面，用固相化抗原对表达产物的载体进行淘筛（panning），在数日内就可筛选出阳性克隆，从而能构建出大库容文库囊括天然全套抗体基因，人们完全可以用基因工程方法研制任何一种具有高度特异性的抗体，使抗体工程的设想成为现实。采用噬菌体抗体库技术筛选抗体不必进行动物免疫，易于制备稀有抗原的抗体及筛选全人源性抗体、高亲和力抗体。同时也将抗体工程的研究推向了新高潮。1.方法简单易行，节省时间。可通过发酵生产、大量制备。2.筛选容量增大，可在数周内筛选100万-1亿个克隆，可获得高亲和力的人源化抗体。3.可直接从未经免疫的人或小鼠的淋巴细胞中得到抗体基因或IgV区基因，因此可以获得完全人源化的抗体，克服了人杂交瘤细胞不稳定的缺点，避开了人工免疫和杂交瘤技术。4.可模仿体内免疫过程，模拟天然全套抗体库，方便的&制造&和克隆针对任何抗原的抗体。随着基因工程抗体技术的发展，在我国有些实验室开始了噬菌体抗体库的构建。用抗体库技术可直接制备人源抗体，例如利用被病原微生物感染的病人外周血细胞制备噬菌体抗体库，用特定抗原进行筛选，获得抗乙肝表面抗原、甲肝病毒的人源抗体。抗体库技术也被用于抗体性能改良，例如用链替换方法，以亲本抗体的一条链（轻链）与另一条链 （ 重链）的文库组合，构建抗体库，筛选高亲和力的克隆，再固定重链，用同样方法选择具有更高亲和力的轻链。一些特异性好、有应用前景的鼠抗体，利用抗原表位定向选择（EGS）方法，以鼠单抗可变区为模板，经噬菌体展示技术，通过抗原导向，筛选能够模拟鼠单抗可变区、结合相同抗原决定簇的人抗体，经这一方法获得人源抗体。国内也有实验室在计算机辅助设计下，将鼠抗体表面氨基酸残基&人源化&，主要将鼠 Fv段表面暴露的骨架区残基中与人Fv不同者改为人源性，使Fv的表面人源化，但仍保留其与抗原结合的特性。目前的问题是，有很多试剂型抗体或诊断用抗体进入市场，而治疗用抗体只有少数进入临床试验。分析主要原因，一是工程抗体表达量低。国内很多实验室，真核细胞中抗体表达量在1 毫克／升以下，很难用于生产。仅个别实验室在对载体进行改造后，抗体表达量达到40毫克／升。二是动物细胞规模化培养技术还不成熟，与国外相比存在很大差距。由于技术和经费等原因，我们动物细胞培养的规模最大为50升，培养方式大多是采用微载体，悬浮批次和悬浮灌流尚属空白。在噬菌体抗体库的基础上，在近几年又发展了核糖体展示抗体库技术。核糖体展示抗体库技术代表了抗体工程的将来发展趋势。通派细胞库 细胞查询：人胚肺成纤维细胞MRC-5 &人胚肺成纤维细胞CCC-HPF-1 &人胚胎气管组织来源细胞CCC-HBE-2 &人胚胎肺成纤维细胞WI-38 &SV-40Z转化肺成纤维细胞WI38/VA13 &人胚肺二倍体细胞2BS &人胚肺二倍体细胞KMB-17 &人肺细胞HLF-a &人小细胞肺癌细胞DMS 153 &人胚肺细胞 VA13细胞WI-38 VA13亚系 2RA &人胚肺二倍体细胞HEL-1 &人胚肺细胞系KuMA &人肺转化细胞系AE1201 & &人肺鳞癌细胞NCI-H226 &人胚肺二倍体细胞HEL-2 &人支气管上皮样细胞BEAS-2B &人胚肺转化细胞SL-1 &人肺腺癌细胞Calu-3 &人小细胞肺癌细胞NCI-H209 &人低分化肺腺癌细胞GLC-82 &人小细胞肺癌细胞NCI-H446 &人非小细胞肺腺癌细胞NCI-H157 &人肺鳞癌细胞NCI-H520 &人肺巨细胞癌高转移细胞株PG-BE1 &人肺巨细胞癌低转移细胞株PG-LH7 &人肺癌细胞A-427 &人低分化肺腺癌细胞SK-LU-1 &人肺支气管癌细胞NCI-H1650 &人非小细胞肺腺癌细胞NCI-H1975 &人非小细胞肺腺癌细胞NCI-H2087 &人小细胞肺癌细胞NCI-H2227 &人非小细胞肺癌细胞NCI-H23 &人肺腺鳞癌细胞NCI-H596 &人非小细胞肺癌细胞NCI-H838 &人肺鳞癌细胞LTEP-s &人小细胞肺癌细胞LTEP-sm &人肺鳞癌瘤株LTEP-s &人肺鳞癌细胞NCI-H1703 &人肺鳞癌细胞NCI-H2170 &人非小细胞肺癌细胞NCI-H524 &人肺腺癌细胞SPC-A1 &人肺癌细胞A549 &人非小细胞肺癌细胞H125 &人肺癌细胞H1299 &人肺癌细胞TKB-1 &人肺腺癌细胞LTEP-a-2 &人肺腺癌细胞Lu-165 &人大细胞肺癌细胞NCI-H460 &人肺腺癌细胞SPC-A-1 &人高转移肺癌细胞095-D &人肺鳞癌细胞SK-MES-1 &人大细胞肺癌细胞NCI-H661 &人肺黏液上皮样癌细胞NCI-H292 &人肺退行性癌细胞Calu-6 &人肺腺癌细胞NCI-H1395 &
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