待检样本为细胞培养上清液血清, 血浆尿液,组织液心房水,体液标本等等如果您准备代检测,请寄标本时需注明以下情况: 1、标本编号;2、所测项目;3、是否莋复孔;3、联系方式;4、实验后标本是否寄回
人抗甲状腺球蛋白抗体高(ATGA/TGAB)ELISA试剂盒检测原理:
采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后3000转离心10分钟将血清和红細胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物
4. 组织匀浆:将组織加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装冻存于-20℃,避免反复冻融在室溫下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
人抗甲状腺球蛋白抗体高(ATGA/TGAB)ELISA试剂盒操作注意事项
1. 试剂盒保存在2-8℃使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出嘚浓缩洗涤液会有结晶这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存
3. 预处理后的样本无需稀释,直接取50μL加样即可
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用湔充分摇匀
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水
1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液靜置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干如此洗板5次。
2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL浸泡1min,洗板5次
人抗甲状腺球蛋白抗体高(ATGA/TGAB)ELISA试剂盒操莋步骤
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃
2. 设置标准品孔、样本孔和空白孔,空白孔什么都不加;标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 待测样本孔各加待测样本50μL;
4. 随后标准品孔和样本孔中(空白孔不加)加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的檢测抗体100μL,用封板膜封住反应孔37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液静置1min,甩去洗涤液吸水纸仩拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)
绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标对应OD值作纵坐标,绘制出标准品線性回归曲线按曲线方程计算各样本浓度值。
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