western电泳过程中有气泡是什么原因(电泳,分离胶,浓缩胶,电泳跑) - DNA技术 - 生物秀
标题: western电泳过程中有气泡是什么原因(电泳,分离胶,浓缩胶,电泳跑)
摘要: [western电泳过程中有气泡是什么原因(电泳,分离胶,浓缩胶,电泳跑)] 做WESTERN跑电泳，分离胶和浓缩胶制好的时候插好梳子还没有气泡的。开电泳跑浓缩胶的时候也没有气泡很正常，但是到分离胶的时候胶里面就会出现气泡，请问是什么原因？ 关键词:[电泳 分离胶 浓缩胶 电泳跑 跑电泳]……
做WESTERN跑电泳，分离胶和浓缩胶制好的时候插好梳子还没有气泡的。开电泳跑浓缩胶的时候也没有气泡很正常，但是到分离胶的时候胶里面就会出现气泡，请问是什么原因？
回复做WESTERN跑电泳，分离胶和浓缩胶制好的时候插好梳子还没有气泡的。开电泳跑浓缩胶的时候也没有气泡很正常，但是到分离胶的时候胶里面就会出现气泡，请问是什么原因？电泳的电流太大?回复电泳的电流太大?不清楚呀，现在还没找出原因。
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【求助】western blot电泳时分离胶跑的快
各位高手，我是新手，刚开始做western，在电泳的时候我用的时间太短了，使蛋白跑不开，怎么办？
积层胶如果电压是90V的话，电流显示为11，用时间为5.5分钟，就要进入分离胶了，分离胶用150V，电流显示为23，最后电流为11，分离胶用时间为27分钟，结束，染色蛋白只在分离胶顶端出现两条带，其他的没有。
我换电压后，积层胶电压是60V的话，电流显示为9，用时间为19分钟，就要进入分离胶了，分离胶用120V，电流显示为17，最后电流为7，分离胶用时间为40分钟，结束，染色蛋白只在分离胶顶端出现两条带，其他的没有。
所用的试剂都是新配的，问题出现在那地方，谢谢帮忙。不太明白你的意思，既然只在分离胶顶端出现两条带，其他的没有，那么说明蛋白还没有完全跑开，那么为什么不跑得时间长些呢？我的经验是刚出分离胶就可以看到预染的marker，而后过程中出现多条不同条带，还算很清楚的，我跑的带至少有五条，在最后一条带未跑出胶之前停止电泳，希望对你有所帮助，我也是新手，共同努力。我的经验是刚出分离胶就可以看到预染的marker，而后过程中出现多条不同条带，还算很清楚的，我跑的带至少有五条，在最后一条带未跑出胶之前停止电泳，希望对你有所帮助，我也是新手，共同努力。你说的顶部是在哪里啊？给点参考意见：1。如果顶部是在浓缩胶和分离胶交界的地方的话，就是你的胶的问题，压胶用水或者异丙醇，不然界面就会干燥而使到蛋白不能通过。2。如果你说的顶部是在胶的上半部的话，就是电泳得不够。电压够了，延长时间至1小时，看溴酚蓝的位置而定。3。Marker指示只是一个参考，并不能作为你的电压足够与否的判断标准为何那么早结束电泳啊？等溴汾兰到胶底部也不迟。我们的经验是：浓缩胶用80伏，大约半小时，到分离胶。然后换电压至120伏，看到预染maker分离出比较清楚的带（可以不完全保留），让目的带跑到胶的下1/3，分离效果最好。分离胶大约跑1.5-2小时，结束！！！仅供参考！！！你的样品是多大的分子量啊？可能是胶的浓度大了，样品跑不进。
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做Western Blot 跑电泳之后的胶上Marker的条带,比较清晰,但与模板Marker的条带却对应不上,而且少一条带
Saber■┡457
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如果用的Marker有颜色,对颜色.如果是一色的,往往是最小的那个很淡看不清.
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是不是跑出去了呢？还有就是胶本身是不是有什么问题？电压等等
得看你少的哪条带，一般来说最后一条带比较容易看不到，可能是由于你配胶的溶液放置时间长了浓度不够了，比如30%的丙烯酰胺。也可能是跑出去了或没跑完你就停了。
少的是不是黄色的条带，是的话就不是少了，而是不明显，肉眼看不到。对蓝色和红色的条带就行了。
对不上和胶浓度，电泳时间有关系
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我的western 胶怎么做成这样了，有图，粘性特别大，求助
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不知道邀请谁？试试他们
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很有可能你胶配置的过程中比例弄错了哦
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比例都是按着表来的，会不会是试剂的问题呢？
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hyn1011 比例都是按着表来的，会不会是试剂的问题呢？应该是试剂的问题，直接买碧云天家配胶挺方便
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