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企业性质：私营独资企业
主营产品：色谱柱、实验室仪器、耗材、试剂、标准品等
公司地址：广州市荔湾区西湾路148号金羊大厦307室
安捷伦Agilent
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4.6x100mm, 2.7um
测量精度：
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自2006年成立以来，广州绿百草始终保持跨越式增长，以成为中国最佳实验室综合供应商为目标，竭诚为广大科学工作者提供全方位的解决方案和一站式服务。 广州绿百草主营产品包括色谱柱、实验室仪器、耗材、试剂、标准品等，目前已与5000多个客户建立了稳定的合作，客户遍布制药、食品、政府、高校、化工等领域。 广州绿百草坚持以人为本，秉持诚信、高效、公平的原则服务客户，在广大客户中享有良好的声誉。 我们的使命和愿景： 为科研工作者提供一站式服务，成为中国实验室最佳供应商！ 我们的价值观： 以人为本，视人才为公司最大财富，追求卓越，崇尚创新，信奉诚信和责任，与客户、员工、合作者一起共赢！
成立时间：
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私营独资企业
年营业额：
5000万-1亿
注册资金：
经营模式：
生产商,贸易商,
员工人数：
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品牌:安捷伦Agilent
价格：￥4979.98/支
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液相色谱柱的选择和介绍
液相色谱分离速度提高及选择性优化安捷伦液相色谱柱介绍与选择1How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian液相色谱方法开发中如何选择色谱柱 液相色谱方法开发中如何选择色谱柱？1.根据样品特性选择分离
模式 2 色谱柱的适应性和选择性 2.色谱柱的适应性和选择性 3.色谱柱规格的选择我要一根ODS柱2How to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianHPLC模式选择溶于有机溶剂硅胶的正相色谱 溶于正己烷 用不同键合相的正相色谱溶于甲醇或甲醇/水 或乙腈或乙腈/水用不同键合相的反相色谱 用不同键合相的反相色谱分子量&2,000溶于四氢呋喃低分子凝胶渗透色谱 用不同键合相的反相色谱溶于水非离子化抑制电离反相键合相色谱 离子对键合相的反相色谱样品离子化 硅胶基质的反相色谱 离子交换色谱 溶于有机溶剂 凝胶渗透色谱 凝胶过滤色谱 溶于水 大孔填料的离子交换色谱 用大孔填料的反相色谱分子量&2,0003How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian分离模式的选择实例-三聚氰胺分析三聚氰胺是强极性，弱碱性化合物（pKa=8），微溶于水。模式一：离子对键合相的反相色谱 对应国标方法GB/T 第一法（反相离子对方法） 流动相：离子对试剂（辛烷磺酸钠）溶液：乙腈 ＝ 92:8 色谱柱：ZORBAX SB-C8 4.6x250mm,5um 模式二：硅胶基质的反相色谱（HILIC） 对应安捷伦开发的HILIC模式方法 流动相： 10mM乙酸铵：ACN=11：89 色谱柱：Zorbax Rx-Sil, Rx-Sil 2.1 2 1×150mm, 150mm 5um4Page 4模式三：离子交换色谱 对应安捷伦开发的离子交换方法 流动相：50mM 甲酸铵(pH3.0):乙腈=15:85 色谱柱： ZORBAX 300SCX 4 4.6 6×150mm, 150mm 5umHow to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian液相色谱方法开发中如何选择色谱柱？1 根据样品特性选择分离模式 1.根据样品特性选择分离模式 2.色谱柱的适应性与选择性适应性：色谱柱的耐受范围 选择性 不同色谱柱对同一样品的分离不同 选择性：不同色谱柱对同一样品的分离不同3.色谱柱规格的选择5How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian不同反相色谱柱的pH适应范围Extend C18 pH 2~11.5Bonus-RP pH 2~9Eclipse PLUS/ XDB C18 pH 2~9Agilent TC/HC pH 2~8/9StableBond C18 pH 1~8pH6How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian选择性、柱效、保留对分离度的影响选择性对分离度的影响最大7.00? 优化键合相 ? 优化流动相方法开发首要因素6.005 00 5.00Resolution4.00Increase N Increase Alpha Increase k'3.002.001.00Rs = N?/4 ? (α-1)/α ? k’/(k’+1)0.00Plates: Alpha: k’:7 2.012345 4.5678910 7.01112131415 9.51617181920 12.021How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian液相色谱柱选择性比较 C 以酸碱混合物为例SulfamethoxazoleAcid (pKa 5.6)O N NHSO2 H3 CNeutral (pKa 8.0)O H5 C 2 H5 C 2 O NH O NHBarbitalBase (pKa 14.0)NH2 H3 C O O N N CH3 CH3 N NCaffeine8How to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianSB-C182酸碱混合物在XDB及SB上分离比较SB-C82& 3SB-Phenyl23SB-CN21031 110 0 0 5 10 Time (min)315 Time (min)5Time (min)1015152005 Time (min)10XDB-C18 XDB C1832XDB-C8 XDB C8323XDB-Phenyl XDB Phenyl21 10 5 Time (min) 10 015 Time (min) 10 0 5 Time (min) 10 15(1)Barbital(2)Sulfamethoxazole(3)CaffeineColumns: 4.6 x 75 mm, 3.5 μm Mobile Phase: 80% 25 mM NaH2PO4, pH 3.0 : 20% MeOH Flow Rate: 1.0 mL/min Temperature: 35°C UV 254 nm9How to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianZorbax? 液相色谱柱常规分析柱Zorbax Eclipse Plus柱 Zorbax Eclipse XDB Zorbax Stable Bond 柱 Z b Extend Zorbax E d C18柱 Zorbax Bonus-RP 柱 Zorbax SB-Aq 柱 Zorbax RX HPLC 柱 原先的Zorbax ODS柱 Zorbax 正相柱 其他Zorbax 柱高通量和LC/MS柱Zorbax 高通量柱，LC/MS 色谱柱 Zorbax 快速分离柱 Zorbax 快速分离高通量柱 Zorbax 溶剂节省色谱柱 Zorbax 微径色谱柱 Zorbax 毛细管柱和纳流柱生化分析柱Zorbax 300 SB 柱 Zorbax 300Extend柱 Zorbax Poroshell柱 Z b Eclipse Zorbax E li AAA柱 Zorbax GF-250/450 凝胶柱 Zorbax Oligo HPLC柱 Zorbax SAX和SCX柱 MARS mRP column制备柱 Zorbax PrepHT制备柱 常规分析柱Agilent TC /HC Agilent g TC/HC (2) ( )A il t? Agilent 液相色谱柱10制备柱Agilent prep 制备柱How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian安捷伦Zorbax? HPLC色谱柱严格的质量控制 产品研究与开发 硅胶生产 键合 柱装填? 具可追溯性 ? 可定购生产批号不同的色谱柱 ? 特殊规格定制Extend Bonus RP E li Eclipse StableBond11How to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianZORBAX?硅胶类型A类硅胶Original ZORBAX SIL (1970s) 由于带负电荷的残留硅羟基和酸性表面 上金属含量高 (硅羟基的pKa低), 导致 碱性化合物发生拖尾B类硅胶 (高纯)ZORBAX Rx-Sil (1987) 由于金属含量低, 硅羟基pKa高, 碱性化合物不发生拖尾金属浓度（ppm) 二氧化硅 氧化硅 Zorbax Rx-SIL Zorbax SIL Nucleosil Hypersil nd = 未检出 Na 10 17 56 K &3 nd Mg 4 nd Al 1.5 57 300 Ca 2 9 38 Ti nd 32 Fe 3 21 76 Zr nd 88 Cu nd &1 Cr nd nd Zn 1 88N/A N/A nd130 57nd N/A N/A nd2900 N/A 4065 230 N/A N/A N/A N/AZorbax Rx-SIL: 11种金属& 35 ppm (未检出其他杂质,&1ppm); 99.995% 纯度的二氧化硅12How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian选择适用于pH7.5流动相的色谱柱Zorbax Eclipse XDB-C18 (B类硅胶)普通硅胶（A类）由于带负电荷的残留硅羟基和酸 性表面上金属含量高 (硅羟基的 pKa低), 导致碱性化合物发生拖 尾高纯硅胶 (B类)ZORBAX SB-C18 SB C18 (B类硅胶)由于金属含量低, 硅羟基pKa高, 碱性化合物不发生拖尾ODS (A类硅胶) 封端流动相: 乙腈 : 50 mMK2HPO4: 55: 45, pH 7.5 UV: 224 nm 23°C 进样量: 20 ?L (0.5 ?g / ?L)ODS (A类硅胶) 不封端13How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian硅胶填料 液相色谱柱的基础…… 硅胶填料－液相色谱柱的基础Zorbax液相色谱柱硅胶特点Z b 硅胶的制备方法由液相色谱柱著名创始人J.J. Zorbax J J Ki Kirkland kl d发明，属于安捷伦公司的专利技术。 发明 属于安捷伦公司的专利技术?高纯度硅胶 游离硅羟基活性降低 提供更好的峰形 ?专利的硅珠堆砌法 更好的重现性 填料颗粒更好的强度 提供不同粒径的颗粒14How to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianZorbax专利的硅珠堆砌技术纯度，强度，对孔径与粒度严格控制－－优级ZORBAX键合相基础硅胶 + 脲 (pH=2) + 甲醛CH2O或：三聚氰氨 甲醛树脂Δ O2250oC粒径1.8 1 8 ?m 3.5 ?m 5.0 ?m 7.0 ?m孔径80A & 300AZORBAX Rx多孔硅胶微球安捷伦拥有此项填料专利技术15How to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianZorbax主要的键合相Zorbax硅胶颗粒StableBond二异丙基 二异丁基键合Rx-C18/Sil二甲基十八烷基硅烷EclipsePlus/XDB二甲基键合 双封端Bonus-RP酰胺嵌入 三封端Extend-C18双齿键合 双封端SB-C18二异丁基-C18 Rx/SB-C8 二异丙基-C8 SB-苯基 二异丙基-苯基SB-CN 二异丙基-CN SB-C3 三异丙基 SB-AQ 二异丙基Eclipse XDB-C18 Eclipse XDB-C8 E li XDBEclipse XDB 苯基 Eclipse XDB-CNEclipse Plus-C18 Eclipse Plus-C8 E li Plus Eclipse Pl -PAH PAH Eclipse Plus-苯基己基How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian16Zorbax主要键合相技术介绍9Zorbax Eclipse XDB/Plus ?Zorbax StableBond ?Zorbax Extend ?Zorbax Bonus RP17How to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianZorbax Eclipse pEclipse Plus?行业领先的峰形 ?更好的专利技术处理硅 胶基质 ?改进的双封端技术：改 进的键合试剂及键合过程 ?更加严格的质控标准，批与批 之间更加好的重现性 ?不同粒径 C 1.8, 3.5, 5um ?最高的分离效率 ?C18，C8，PAH, 苯基-己基?致密键合 ?双封端 ?超纯坚固的ZORBAX硅胶 ?宽的 pH使用范围2-9 ?对于所有样品都有较好的峰 形 ?专利技术 ?完整的质控过程 C ?方法开发的首要选择Eclipse XDB?C18, C18 C8 C8, 苯基, CN ?不同粒径 C 1.8, 3.5, 5，7um ?对于快速方法开发有很广泛 的应用谱图库 ?多种色谱柱规格，从毛细柱 到制备柱 ? 使用1.8um 颗粒实现快速有 效的方法转化Eclispe系列的色谱柱所适合的pH范围为2-9，是液相中最为常见的流动相范围。而且在中等pH时， 由于其对碱性化合物的峰形分离优异(尤其是Eclipse Plus)，因此一般做为方法开发的首选色谱柱。18How to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianZORBAX Eclipse Plus 解决了 “峰形” 问题由于硅胶上残留的硅羟基，碱性化合物通常会出现拖尾的现像C C C C 低的灵敏度 很差的分离度 在指定时间内分离的峰数少 很难定量PLUS--针对碱性化合物 而特别研制的色谱柱Eclipse Plus可以做到!!ZORBAX Eclipse Plus C18需要改进的峰形 需 改 峰ZORBAX Eclipse XDB-C183.5 3 5 min 10 min阿米替林 ~0.1ug, 60% 乙腈 8mM 磷酸钾缓冲盐 pH 7.0, 215nm, 1.0mL/min, 4.6x100mm 5? 色谱柱19How to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianZORBAX Eclipse Plus 在甲醇流动相中分离阿米替林时峰形出色阿米替林 ~ 0.1?g 80% 甲醇 8mM 磷酸钾缓冲盐 pH 7.0, 检测器: UV 215 nm, 流速: 1.0 mL/min 色谱柱: 4.6x100mm 5?mTf = 1.00 Tf = 1.25Eclipse Plus C18Phenomenex Gemini C18 Tf = 1.26 Tf = 1.20 Phenomenex Luna C18 (2) Waters SunFire C18 Ace C18(2) Inertsil ODS (3) Tf = 1.11Tf = 1.92在甲醇中峰形通常会比较好，Eclipse Plus 在这个条件下非常出色。20How to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianEclipse Plus C18 对于酸碱混合物的分离 峰形都是最好1. 水杨酸 2. 乙酰水杨酸 3. 右美沙芬Eclipse Plus C182Phenomenex Gemini C18Tf = 1.01 Tf = 1.12 Tf = 1.211 3Tf = 1.37301234567minEclipse Plus色谱柱对各种类型的化合物－酸、碱和中性化合物－也可以得到优秀的结果21How to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianEclipse Plus 分析样品的峰形最好色谱柱: 4.6 x150 mm, 5um 流动相: 60:40 水:甲醇 流速: 1 ml/min 柱温: 40 °C UV 254 nm 样品: 皮质类固醇: 1. 曲安西龙 2. 泼尼松 3. 氢化可的松 4. 可的松 N= 10747 Tf= 1.035 10 15 20 25Eclipse Plus C180N=10968 TF=1.0430 35Phenomenex Luna C18 (2)0 5 10N=9307 TF=1.0915 20 25N=9377 TF= 1.08 1 0830 35Waters XBridge C180 5N=8598 TF= 1.1410 15N=8737 TF=1.1520 25 30 35min类固醇不是碱性化合物 Eclipse Plus 同样有最好的峰形和柱效!How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian22苯基-己基柱提供与C18/C8不同的选择性23How to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianZorbax Eclipse p PLUS 苯基-己基柱 ---- 提供不同选择性3种不同Zorbax苯基柱提供了更丰富的选择性24How to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianZorbax Eclipse Plus 苯基-己基柱-------与其它厂商的苯基 与其它 商的苯基-己基柱的比较 基柱的比较苯甲酮Zorbax Eclipse Plus Phenyl-Hexyl y yRs = 1.60苯戊酮Waters XBridge PhenylRs = 1.72Phenomenex Ph Luna PhenylhexylRs =1.434.6 x 100mm, 5umZorbax Eclipse Plus 苯基-己基柱显示出了更好的选择性及峰形。How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian25Zorbax Eclipse Plus 苯基-己基柱-------不同粒径的色谱柱分析抗生素Mobile Phase: A -20mM NaPhos (pH 2.5)/B- ACN Gradient: 20%B - 45%B in 15 min. column: 4.6 x 100mmq Sulfaquinoxaline sulfamethoxine Oxolinic acid Nalidixic acid furazolidone thiamphenicol carbadox1 8um 1.8um3.5um5.0umZorbax Eclipse Plus苯基-己基柱可提供三种规格的填料。粒径越小，柱效越高，分离度越好。How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian26Zorbax Eclipse 色谱柱Eclipse Plus： 填料键合相：C18, C18 C8 C8, PAH PAH, 苯基-己基 填料粒径：1.8 um, 3.5 um, 5 um 色谱柱规格：内径 2.1 mm 3.0mm 4.6 mm 长度从30 mm到250mm Eclipse XDB： 填料键合相：C18, C8, CN, Phenyl 填料粒径：1.8 um, 3.5 um, 5 um, 7 um 色谱柱规格：内径从2.1 mm 21.2 mm 长度从30 mm到250mm 以及毛细管柱(0.3 mm和0.5 mm)How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian27Zorbax主要键合相技术介绍9Zorbax Eclipse XDB/Plus 9Zorbax StableBond ?Zorbax Extend ?Zorbax Bonus RP28How to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianZORBAX StableBond色谱柱特点专利的键合技术，为键合相提供了空间保护作用。 具有行 领先的低p 流动相稳定性 具有行业领先的低pH流动相稳定性。 pH可以低至 1，且允许在高温(80oC)下操作。键合相 流失, 保留减弱另 个裸露的硅羟基 , 潜在的拖尾因素 另一个裸露的硅羟基普通硅胶柱低 pH &2不稳定, 发生水解Zorbax StableBond 空间位阻保护 间位阻保护---抗水解能力How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian29ZORBAX StableBond色谱柱在低pH和高温(pH 0.8,90°C时)卓越的稳定性1.0 0.8相对 对保留0.6StableBond S bl B d SB-C18 SB C18 (二异丁基-C18) ZORBAX Rx-C18 (二甲基-C18) C18) Competitor A-C18 冲洗溶剂: 50% 甲醇/50% 水1% TFA TFA, 90OC 溶质: 甲苯 Competitor B-C18 Competitor C-C18 Competitor D D-C18 C18 Competitor E-C180.4 0.20.005,00010,00015,00020,00025,00030,000冲洗用流动相柱体积30How to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianSB系列中不容忽视的C18键合相：SB SB-Aq通用性强－100％水相及100％有机流动相推荐用于强极性组分的分离 在含高水相的流动相中可获得高的保留 高纯度去活硅胶基质超乎想象的稳定性－在低pH和高温(&80oC)下,具有最长的柱寿命和最好的重现性可用于PH 1的酸性流动相 最高可用到80oC的条件 保留的重现性较好---不发生“固定相坍塌” 品种齐全 提供从窄径柱,常规柱,到制备柱 液质联用短柱及快速分离柱等 如果流动相中水相或缓冲盐相的比例超过85%， 实 强烈推荐选用能耐高水相的色谱柱，请看以下两张幻灯片对比实验。31How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian可用于 可用于: 高酸性流动相 强极性样品 100％纯水流动相兼容高水相比例的流动相往往会导致普通C18/C8 键合相出现保留时间的变化Example: p Procainamides on Hydrophobic-C8 y p Column1Equilibrate with 50% ACN, then mobile p phaseColumn: Eclipse XDB-C8 4.6 x 150 mm Mobile Phase: 90% 50 mM KH2PO4, pH 3.5 10% ACN Flow Rate: 1.0 mL/min Temperature: RT 样品: 1. 尿嘧啶 2. Procainamide 3. N-acetylprocainamide 4. N-propionylprocainamide p p yp 5. 咖啡因1Phase Collapse 50% l loss i in Resolution R l i After equilibrating with 100% buffer Increase in peak tailing33 225 4 5 405 Time (min)1005 Time (min)1032How to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianSB-Aq在高水相比例的流动相条件下 保留时间具有很好的重现性1Equilibrate with 50% ACN, ACN then mobile phaseColumn: ZORBAX SB-Aq 4.6 x 150 mm, 5 μm Mobile Phase: 90% 50 mM KH2PO4, pH 3.5 10% ACN Flow Rate: 1.0 mL/min Temperature: RT Detection: UV 254 nm, 4 nm 样品: 1. 尿嘧啶 2. Procainamide 3. N-acetylprocainamide 4. N-propionylprocainamide 3 5 咖啡因 5.4 5No Phase Collapse No loss in Resolution After equilibrating with 100% buffer Good peak shape on all peaks1223 4 5051015 min051015 min33How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian耐100%水相色谱柱－SB-Aq塔板数:12283卡那霉素注射液拖尾因子 1 01 拖尾因子:1.01 供试品制备：精密量取本品1.0ml，置10ml量瓶中， 加水稀释至刻度，混匀，精密量取该溶液1.0ml置 100ml量瓶中，加水稀释至刻度，混匀，制成每ml约 0 25 溶液，即得。 0.25mg 溶液 即得色谱条件： 色谱条件 色谱柱：Zorbax SB-Aq C18, 4.6×250mm, 5μm （） 柱温： 35℃ 流动相 1%三氟乙酸水溶液 流动相： 蒸发管温度： 115℃，空气流速：3.5mL/min流 速：1.0mL/min仪器配置： 仪器配置 二元泵（G1312A） 手动进样器（G1328B） 柱温箱（G1316A） 数模转换器 35900E 蒸发光散射检测器 Alltech 2000 仪 器 控 制 及 数 据 处 理 ： Agilent ChemstationHow to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian34有机酸在ZORBAX StableBond-Aq柱上的分离1. 乳酸 2. 乙酸 3. 柠檬酸 4 富马酸 4. 5. 琥珀酸液相色谱柱: Zorbax StableBond-Aq 4.6 x 150 mm, 5um 流动相: 99% 20 mM Na2HPO4, pH 2, 1% ACN 流速: 1.0 mL/min 柱温: 柱 35℃ 检测: 210 nm35How to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianZorbax StableBond 色谱柱StableBond(80?)色谱柱 键合相：C18, C8, CN, C3, Phenyl, Aq 填料粒径：1.8 um, 3.5 um, 5 um, 7 um 规格：毛细管柱，快速分离柱，分析柱，半制备柱，高通量制备柱。 StableBond (300?) 色谱柱 键合相 C18, 键合相： C18 C8 C8, CN CN, C3 填料粒径： 3.5 um, 5 um, 7 um 规格：纳流色谱柱，毛细管柱，标准分析柱，半制备柱，高通量 制备柱。36How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian孔径的选择较大孔径容许较大溶质分子顺畅出入孔隙， 较大 径容许较大溶质 畅出 隙 而较小孔径限制较大溶质在颗粒内部的有效传质。 样品 MW ≤ 4,000, 选择 80? 的孔径 样品 MW & 4,000, 选择 300? 的孔径37How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian300? 色谱柱可改善大分子的峰形色谱柱: 4.6 x 150 mm, 5 mm 流动相: 60% MeOH: 40% 0.1% TFA 流速: 0 0.75 75 mL/min 温度: RT 检测器: UV 282 nmH3 C HO OCH 3 O OCH 3 O CH2 CH2 CH3 O H3C O OHO CH3 CHO CH2 HC HO 3 O O N CH 3 O CH3分子量虽小但 hydrodynamic volume （水动力学体积）较大的分子HO O CH3CH3 OHSB-C3 (80?)Pw 1/2 = 0.442Tylosin（泰乐菌素） MW. 926300SB-C3 (300?)Pw 1/2 =0.125 =0 12505 Time (min)1005 Time (min)10窄的峰宽表明待测分子进出填料孔隙没有受到阻碍How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian38Zorbax主要键合相技术介绍9Zorbax Eclipse XDB/Plus 9Zorbax StableBond 9Zorbax Extend ?Zorbax Bonus RP39How to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianZORBAX Extend Extend-C18色谱柱特点专利双齿键合技术，为高pH流动相设计 最宽的pH流动相使用范围，可用于pH 2-11.5 双封端保证了碱性化合物优异的峰形 封端保 碱性化合物优异的峰形 硅胶基质，比聚合物基质有更高柱效和更好峰形pH： 2~11.5 温度： pH &7 , & 400C ; pH &7 , 600C 碳覆盖率：12% 表面积：180m2/g 粒径：3.5, 5μm 孔径：80 ? 键合试剂：双齿 C18 封端：双C18 Si OC18 Si OSilica Support40How to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianZorbax Extend C18高pH流动相 分析碱性成分色谱柱: ZORBAX Extend-C18, 4.6 x 150 mm, 5 mm 流动相: 30% 缓冲液: 70% MeOH pH 7 缓冲液20 mM Na2HPO4 pH 11缓冲液 20 mM TEA 流速: 1.0 mL/min 温度: RT 检测器: UV 254 nmExtend-C18 pH H74 23 2,3 1 71. Maleate 马来酸盐 1 2. Scopolamine 东莨菪碱 pKa 7.6 3. PseudoEphedrine 假麻黄碱 pKa 9.8 4. Doxylamine 抗敏安(多西拉敏) pKa 9.2 5. Chlorpheniramine 氯苯吡胺pKa 9.1 6 Triprolidine 苯丙烯啶pKa 6.5 6. 6 3 7. Diphenhydramine 苯海拉明 pKa 9.01样品:Extend-C18 pH H 114 755 6tR = 8.5 85tR = 11.42 605 Time (min)05Time (min)10高PH下, ,EXTEND C18可增加碱性化合物的保留及改善碱性成分峰形41How to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianZORBAX ExtendExtend-C18 HPLC色谱柱－－Extend Extend-C18 在高pH有长的柱寿命42How to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianZorbax Extend C18色谱柱Z b E Zorbax Extend t d (80?)色谱柱 填料粒径：1.8 um, 3.5 um, 5 um 色谱柱规格：内径(mm)：1.0, 2.1, 3.0, 4.6, 21.2 长度(mm)：30, 30 50 50, 100 100, 150 150, 250 Zorbax Extend (300?)色谱柱 填料粒径：3.5 um, 5 um 色谱柱规格：内径(mm) ：2.1, 4.6 长度(mm) ：50, 50 100 100, 150 150, 250以及毛细管柱规格。How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian43Zorbax主要键合相技术介绍9Zorbax Eclipse XDB/Plus 9Zorbax StableBond 9Zorbax Extend 9Zorbax Bonus RP44How to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianC18键合相的另一种选择R O R1Si1PGRZorbax BonusBonus-RP? ? 极性酰胺键合相：与普通C18键合相相比， 具有独特的选择性，耐受高水相比例 空间位阻保护键合相和三封端 增强低 pH 空间位阻保护键合相和三封端：增强低 H 稳定性，碱性化合物峰形良好CH3 Si CH3 CH3 R1 O Si R1 PG RCH3 Si CH3 CH3 R1OSi R1PGRZorbax BonusBonus-RP C18极性官能团R1SiOR 11 1NHOpH： 2~9 温度： & 600C 碳覆盖率：9.5% 表面积：180m2/g 粒径 3.5, 5μm 粒径： 孔径：80 ? 键合试剂：C18 封端：三How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian45ZORBAX BonusBonus-RP HPLC色谱柱在中低pH值的稳定性测试Bonus-RP的三封端增强了在pH7的 稳定性，每10,000倍柱体积约相当于 个月的工作时间。 一个月的工作时间46How to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianZorbax Bonus-RP ---可用于100%水相的色谱柱天麻中天麻素分析组分名称:天麻素 塔板数:10471 拖尾因子 1 03 拖尾因子:1.03色谱条件： 色谱柱：Zorbax Bonus RP, 4.6×250mm, 5μm （） 柱温：35℃ 流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液（4:96） 检测波长：220nm 流速：1.0mL/min 进样体积：10μl47仪器配置： 四元泵带真空脱气机（G1354A） 自动进样器（G1367A） 柱温箱（G1316A） 紫外检测器（G1314A） 仪器控制及数据处理：Agilent ChemstationHow to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianZorbax Bonus Bonus-RP RP 色谱柱填料粒径 1.8 填料粒径： 1 8 um, 3 3.5 5 um, 5 um, 7 um 色谱柱规格：内径(mm) 1.0, 2.1, 3.0, 4.6, 21.2 柱长(mm) 30, 50, 75, 100, 150, 250分析柱 快速分离柱 节省溶剂柱 窄径柱 微径柱 制备柱 分析柱，快速分离柱，节省溶剂柱，窄径柱，微径柱，制备柱48How to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianZORBAX主要反相键合相系 系列 键合相 StableBond Eclipse Plus Eclipse XDB Extend Bonus-RP C18, C8, C3 Ph C3,Phenyl,CN, l CN AQ 1.8,3.5,5,7um 毛细管柱, 1.0,2.1,3.0,4.6, 9.4, 21.2mm 柱长 20,30,50,75,10 0,150,250mm 1~8 30,50,75,100,1 50,250mm 2~9 20,30,50,75,10 0,150,250mm 2~9 C18, C8, PAH, phenyl-hexyl h lh l 1.8,3.5,5um .1,3.0,4.6mm C18, C8, Ph Phenyl, l CN 1.8,3.5,5,7um .0,2.1,3.0,4.6, 9.4,21.2mm C18 C18粒径 内径1.8,3.5,5um 毛细管柱, 1.0,2.1,3.0,4. 6, 21.2mm 30,50,100,15 0, 250mm 2~11.53.5,5,7um .0,2.1,3.0, 4.6,21.2mm30,50,75,100 ,150,250mm 2~9耐受 pH 范围 特点低pH流动相极 其优异的稳定 性；丰富的键 合相选择方法开发首选柱， 方法开发首选柱， 高pH流动相 对于碱性化合物 对于碱性化合物 优异的稳定性 峰形优异 峰形优异独特的选择 性；高水相 分离碱性化 合物How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian49在实际应用中如何选择色谱柱 在实际应用中如何选择 色谱柱方法中所要求的固定相选定键合相 ―以C18柱为例 C18柱为例 色谱条件中所使用的流动相的性质 pH H值 水相比例如果流动相含有高于85%的水相BonusBonus -RP 或 StableBond StableBond-Aq酸性当碱性物质色谱峰峰形是首要考虑因素时50How to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianGeneral guidance on choosing a column based on sample type较强极性SB-Aq Bonus-RP SB-C8 SB C8 Eclipse XDB-PhenylZorbax反相色谱柱选择的建议极性Eclipse Plus/XDB-C8/C18 Eclipse XDB-CN Eclipse XDB XDB-Phenyl Phenyl SB-C3中等极性Eclipse Plus/ XDB-C18 Eclipse Plus/ XDB-C8 Eclipse XDB XDB-CN CN Eclipse XDB-Phenyl SB - all弱极性Eclipse Plus XDB-C8 Eclipse Plus/ XDB-C18 Eclipse XDB XDB-CN CN SB-C8 SB-C18Other columns will work in some cases and could provide a better separation, depending on the actual analytes and excipients present in the sample.结论：色谱柱的键合相选择，主要从色谱柱的耐受性出发。而对于化合物选择性， 流动相的pH H和色谱柱键合相不同，都会有差异。此表中总结的选择建议，是基于 和色谱柱键合相不同 都会有差异 此表中总结的选择建议 是基于 极性强弱，通常极性较强时，水相比例较高，则建议首选能耐高水相的色谱柱。51How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian液相色谱方法开发中如何选择色谱柱？1.根据样品特性选择分离模式 2 色谱柱的适应性和选择性 2.色谱柱的适应性和选择性 3.色谱柱规格的选择我要一根ODS柱检测要求 分离规模 分离速度52How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian按分离规模来选择色谱柱类型 毛细管柱 (填充或开 管) 微型柱 微径柱 纳流柱 (填充或开 管) 窄径柱 分析柱 溶剂节省柱 常规柱 制备柱 半制备柱 制备柱 0.1, 0 1 0.075 2.1 3.0 4.0/4.6 9.4 &20 100~200ng 50~120 μg 150~500 μg 0.1~1.5mg 1~10mg &20mg 200~500 nl/min 0.1~0.5 0.3~1.5 0.5~3 5~10 &20＋＋＋＋＋＋内径 (mm) ( ) 0.5, 0.3上样量流速 (ml/min) ( )灵敏度提高应用范围1~10μg1~15 ul/min 10~100 μl/min＋＋＋＋＋较高灵敏度，LCMS,多肽，蛋白1.010~50 μg＋＋＋＋高灵敏度，LCMS较高灵敏度,LCMS,多肽,蛋白 高灵敏度，LCMS,节省溶剂 分析，节省溶剂 常规分析 mg级的制备 数百mg~g的制备＋＋ ＋安捷伦提供各种规格的色谱柱 请参见消耗品目录 安捷伦提供各种规格的色谱柱，请参见消耗品目录。53How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian液相方法对色谱柱的要求? 峰形 ? 分离度 ? 色谱柱寿命 ? 重现性 ? 效率如何提高液相分离速度？54How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian提高液相分离速度 - 安捷伦色谱柱解决方案采用新型填料技术色谱柱： 小粒径填料色谱柱 C 1.8um RRHT或3.5um RR 实心多孔层填料色谱柱 C Poroshell 300和Poroshell 12055How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian为什么小颗粒填料可以实现快速分离？0.0 0 5提高分析速度? 采用短色谱柱 ? 采用小粒径色谱填料 ? 高流速运行HETP (cm/ H /plate)0.5 0.5 0.5 0.5 0.0 0.2 0.4 0.69颗粒度越小，HETP 越低，柱效越高， 分离度越好 实现 分离度越好。实现 与传统颗粒同样柱 5.0 μm 效时，只需更短的 色谱柱。3.5 μm2mL/min5.0 mL/min9对于小颗粒，提高 流速 HETP不会提 流速，HETP不会提 1.8 μm 高，因此可以真正 通过提高流速来提 高分离速度而不会 损失柱效。1.2 1.4 1.6How to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianInterstitial linear velocity (ue- cm/sec)0.81.056改善分离度和灵敏度：相同柱尺寸mAU 175 150 125 100 75 50 25 0 0mAU 175 150 125 100 75 50 25 01 2 34Rs (5,6) = 8.556Rs (6,7) = 2.2571.5 1.751.8 um2 minSmaller Particle Columns: Same speed C Higher Resln. 1 2 3 4 5 6 7 4-Acetamidophenol Caffeine 2-Acetamidophenol Acetanilide Acetylsalicylic Acid Phenacetin Salicylic Acid0.250.50.7511.2512 34Rs (5,6) (5 6) = 6.0 6050.5 0.75 1 1.256Rs (6,7) (6 7) = 2.07 2 0771.5 1.753.5 um2 min0 mAU 175 150 125 100 75 50 25 0 00.25124 30.5 0.75Rs (5,6) = 4.751 1.256Rs (6,7) = 1.61Column: SB-C18, 4.6 x 30 mm 5 um71.5 1.75 2Detector: 254 nm Injection Volume: 1 ul Mobile Phase: 1% Formic Acid Acetonitrile (82:18) Flow: 2.0 ml/min0.25minResolution Enhancement RRHT (5,6) = 1.8x ? Resolution R l ti E Enhancement h t RRHT (6 (6,7) 7) = 1.4x 14?57How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian缩短柱长Column Length (mm) 150 100 75 50 30 15?Column Efficiency N(5 ?m) 12,500 8,500
N.A. N.A.Column Efficiency N(3.5 ?m) 21,000 14,000 10 500 10,500 7,000 4,200 2,100Column Efficiency N(1.8 ?m) 35,000 23,250 17 500 17,500 12,000 6,500 2,500Efficiency ff Analysis (N) Time分析时间 * -33% -50% -67% -80% 80% -90%Pressure PeakVolumeSolvent S l t Usage内装小颗粒的更短的色谱柱，可以获得与内装更大颗粒的长色谱柱的相同柱效58How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian如何做到提高分离速度而不损失分离度？成比例缩短 分析时间 缩短色谱柱柱长 成比例减少 溶剂用量 = 维持分离度 (改善分离度)缩小填料粒径59How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian提高速度，保持良好的分离度1Rs(1,2) = 4.823 N=218484.6 x 250 mm, 5 μm 1 ml/min29.65 4 N=22680 30 min01 25 31015 12.71 4 N=11691 152025Rs(1,2) = 3.54.6 x 100 mm, 3.5 μm 1 ml/min20 25 30 min1 .0 25 3 N= Rs(1,2) 4.15 4 N=6104 510= 3.310 15 12 34 6 x 30 mm 4.6 mm, 1.8 1 8 μm 1 mL/min20 4 0.5 1 1.5 20 2 2.5 25 30 min 25 30 min0 N 6463 N= N=6460 0Rs(1,2) = 3.15 104.6 x 30 mm, 1.8 μm 2 mL/min151.8um RRHT Columns:14x faster than 4.6 x 250mm, 5um ? Time Saving of up to 95%?How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian60色谱柱规格变小，不仅分离时间缩短，而且平衡时间也减少。色谱柱 尺寸 (mm) 柱内 体积 (Vm) 平衡时间 流速 1.0 mL/min5 min 3 min 1.5 min 15 min4.6 x 50 4 6 x 30 4.6 4.6 x 15 4.6 x 1500.5 mL 0 3 mL 0.3 0.15 mL 1.54 mL色谱柱 尺寸 (mm)2.1 x 50 2.1 x 30 2 1 x 15 2.1柱内 体积 (Vm)0.10 mL 0.06 mL 0 03 mL 0.03平衡时间 流速 0.2 0 2 mL/min5 min 3 min 1 5 min 1.51.0 1 0 mL/min60 sec 36 sec 18 sec单次样品运行时间 = 分析时间 + 色谱柱平衡时间 色谱柱平衡时间 = 10倍柱内体积 ÷ 流速61How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian小颗粒填料的优势1. 更快的分离速度z z使用小颗粒可以在更短的色谱柱上加快分离速度且保持一样 的柱效 平衡时间缩短之后进 步加快分离速度 平衡时间缩短之后进一步加快分离速度2. 更高的柱效z z提高柱效，提高了分离度 提高柱效，提高了灵敏度 灵敏度＝信噪比3. 更低的运行成本z z使用更少的有机溶剂 分离时间缩短，提高工作效率How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian62600bar RRHT (1.8um Zorbax色谱柱)Dimensions 4.6 x 150 4.6 x 100 4.6 x 75 4.6 x 50 4.6 x 30 4.6 x 20 3.0 x 150 3.0 x 100 3.0 x 50 3.0 x 30 3 0 x 20 3.0 2.1 x 150 2.1 x 100 2.1 x 50 2.1 x 30 2.1 x 20 Dimensions 4.6 x 150 4.6 x 100 4.6 x 75 4.6 x 50 4.6 x 30 4.6 x 20 3.0 x 150 3.0 x 100 3.0 x 50 3.0 x 30 3 0 x 20 3.0 2.1 x 150 2.1 x 100 2.1 x 50 2.1 x 30 2.1 x 20 Eclipse Pl Plus s C18 Eclipse Pl Plus s C8
Eclipse Plus PhHex Eclipse PAH
Eclipse XDB-C18 XDB C18 Eclipse XDB-C8 XDB C8 E tend C18 Extend-C18
Bonus-RP推荐的2个起始选择 : ?
都是Eclipse 都 p Plus C18
SB-CN SB-AQ SB-C3
975-914 914Rx-Sil
63How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian采用RRHT可以实现快速高效分离人参皂苷分析实例DAD1 B, Sig=203,16 Ref=off (XIYANGSHENG\DEF_LC
16-54-29\XYS000005.D) 70 60 50 mAU 40Rg1/Re分离度：&2.0 &2 0*DAD1 B, Sig=203,16 Ref=off (XIYANGSHENG\XIYANGSHEN
19-00-50\XYS000013.D) *DAD1 B, Sig=203,16 Ref=off (XIYANGSHENG\DEF_LC
16-54-29\XYS000005.D)Rb1mAURRHT- 放大图70 3020600 50 2 4 6 8 10 12 14 16 18 Rg1 R 10Re4.6x50mm, 1.8um， @ 25 °Ｃ20 minmin4030RRHT20 104.6x150mm, 5um， @ 25 °ＣHPLC0 20 40 60 80 100120 min min64How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian采用RRHT可以实现快速高效分离三聚氰胺分析实例Zorbax SB SB-C8 C8 4.6x250mm,5um14minZorbax SB-C8 4 6x50mm 1 8um 4.6x50mm,1.8um3min65How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian压力公式粘度 viscosity 流速 flow 长度 lengthηFL ΔP = 0 2 2 K π r dpspecific Permeability column Radius 柱内径 particle Diameter 粒径How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian66RRHT的典型颗粒尺寸分布和优化设计分布的比较Goal: Achieve lower backpressure vs. a typical PSDSmall amount of slightly larger particles 少量较大颗粒Engineered PSD N Narrower PSDEngineered Bimodal Distribution:Lower level of fines 较少细微颗粒0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 1.8 2.0 2.2Only 3% compromise in resolution 25% gain in back pressure reduction2.4 2.6 2.8 3.0 3.2 3.4 3.6 3.8特别设计的双分布 :分离度仅仅降低3% 反压降低25%How to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianParticle Size (um)674.0不同粒径分布的1.8μm SB-C18颗粒反压比较300Columns: ZORBAX SB-C18 Dimensions: 4.6 x 30mm, 1.8 μm 250 Eluent: 85:15 ACN:Water Flow Rates: 0.05 C 5.0 mL/min Temp: p 20°C 200 Sample: 1.0μL Octanophenone in Eluent Detection: UV 245nm Narrow 1.8 1 8μm C Narrow PSDPressure e (Bar)150 10025% HIGHER Pressure at Optim m Flow Optimum Flo (2.0 (2 0 mL/min)Production 1.8μm C Wider PSDSystem Pressure (No Column)50 0 0 1 2 3 4 5Fl Rate Flow R t (mL/min) ( L/ i )68How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian使用RRHT色谱柱在新的RRLC系统上－在更低的压力下得到了比竞争厂家W更好的分离能力Rapid Resolution Column A l Time Anal. Ti0.620 mAU 700 600 0.370 0 500 400 0.209 300 200 100 0 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 minCompetitor W Competitor W, 2.1 x 50mm,1.7um 0 914 min 0.914 i 3.50 0.18 C 0.30 %RSDRRHT, SB-C18, 2.1 x 50mm, 1.8um 0 949 min 0.949 i 3.69 0.025 C 0.094 %RSDResolution PrecisionPressure0.505 0.725 0.908 0.664 0.986 6440 bar700 bar (+60%)Sample: Phenones Test Mix Flow Rate: 1ml Gradient: 35-95% ACN in 0.9min T Temperature: t 50° Injection volume: 1?l Injection Technique: ADVR, OI, MCO WL: 245nm D t R Data Rate: t 80Hz 80HHow to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian690.821高分离度快速液相色谱柱(RRHT)方法转化z降低色谱柱长 调整流速 调整进样体积 调整洗脱时间zzz70How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian缩短柱长含有更小颗粒填料的更短的色谱柱 Selectivity选择性 Retention保留 Plates塔板数Rs =N∝N4L?α-1 α?k' k'+1N N PHow to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianColumn Length =dpParticle Size Particle Size = =To Maintain Rs: e.g.: L/271dp/2保证柱长比粒径值一致 保证柱长比粒径值 致，则可以保证同样的柱效。 则可以保证同样的柱效 .PPT“按比例缩小(scaling)” C 很容易的方法转换C 不改变色谱柱的内径在方法转换中简单易行mAU 80 60 40 20 0 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 minEclipse XDB-C18 4.6 x 150 mm, 5 um 6 ul inj.红色 C 不需要改变的参数 蓝色 C 改变的参数mAU 80 60 40 20 0 0 2Rapid Resolution Eclipse XDB XDB-C18 C18 4.6 x 100 mm, 3.5 um 4 ul inj.4 6 8 10Sunscreens: 1 2 1. 2-hydroxy-4-methoxybenzophenone hydroxy 4 methoxybenzophenone 2. Padimate-O 3. 2-ethylhexyl trans-4-methoxycinnamate 4. 2-ethylhexyl salicylate12 14 16 18 minmAU 60 40 20 0Rapid Resolution HT Eclipse p XDB-C18 4.6 x 50 mm, 1.8 um 2 ul inj.0 2 4 6 8 10 12Mobile phase: ( 85:15) MeOH: water Flow = 1.0ml/min. LC: Agilent 1100141618min72How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian改变色谱柱内径时流速需要相应地改变F2 = F1 x(ID2/ID1)2Column: 1.8 μm SB-C18 Mobile Phase:A: 0.1% TFA, , 5% MeCN, , (v/v) ( ) B: 0.08% TFA, 95% MeCN (v/v) Gradient: 0:12.5%B, 3.5:60%B, 4:60%B Sample: 0.1 mg/ml each x 0.5 ul injection Temp: 70?C Detection: 230 16 nm Ref=360,100 230,16 Ref=360 100 LC: Agilent 1100Procainamide P i id Procaine Nadolol Pindolol Lidocaine Disopyramide py Propranolol Nifedipine Nimodipine Nisoldipine3.0 x 50 mm, 1.8 μm F= 1 mL/min0.511.522.533.54min4.6 4 6 x 50 mm, mm 1.8 1 8 μm F= 2 mL/min0.5 0 511.5 522.5 533.5 3 54min73How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian进样体积转换进样体积正比于柱体积? Volumecolumn2 ? l 2 ? Inj.Vol.col.1 × ? = Inj.Vol. col. 2 ? ? Volume column1 ? ?Zorbax o ba column co u volume o u e = 3.14 3 x r2 x L x 0 0.6 6 ( (r a and d L in c cm) )? 0.4mlcolumn2 ? ? i.e. 20 μlcol.1 × ? ? = 4 μlcol. 2 ? 2.0ml column1 ? ?74How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian梯度坡度与时间和流速k’ (“K prime”)梯度坡度影响K*-与等度容量因子K’相当 提高K’或K*通常可提高分离度。可以分别通过降低溶剂强度或降低梯 度坡度来实现? ( (End% - Start%) ) ? % Gradient G di t Slope Sl =? ? # Column Volumes ? ? ?? (100% - 20%) ? i.e. 8% = ? ? 10 col. volumes ? ? ?# column volumes= (Flow x Gradient Time) / column volume柱体积个数 = (流速x梯度洗脱时间) / 柱体积Zorbax column volume = 3.14 x r2 x L x 0.6 (r and L in cm)75How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian时间转换运行时间或梯度时间调整? Length column2 ? ? = Time Time col.1 × ? col. 2 ? ? Length ? L th column1 ?? 150mm ? i.e. 25min. × ? ? 250mm ? = 15min. ? ?*assumes flow is proportional for columns 1 and 276How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian转换运行时间(梯度) 较短色谱柱 流速不提高流速 进样体积 运行时间 梯度时间 = 进行相应转换 = 进行相应转换 =根据柱长相应降低 =根据柱长相应降低长度变化 度150 mm e.g. 15mins 50 mm 5mins 35-60% over 5minsHow to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian=减小1/335-60% over 15mins77梯度转换:ZORBAX SB SB-C18 C18分离BSA消化物肽谱mAU 40 30 20 10 0 0 mAU 40 30 20 10 0 20Original method 4.6 x 250 mm, 5 μm 50 μL inj.Normalized view of RRHT to compare to original method406080100120140160minRRHT 4.6 x 50 mm, 1.8 μm 10 μL inj.mAU 40 30 20 10 0 0 20original column min. %B 0 2 150 50 155 75 160 75 165 2RRHT column min. %B 0 2 30 50 31 75 32 75 33 2RRHT 4.6 x 50 mm, 1.8 μm 10 μL inj.Mobile phase: A: 0.1% TFA B: 0.08% TFA in acetonitrile Flow =1 mL/min. gradient Temp. : 50 C Binary Pump Mixer installed120 140 160min40608010078How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian方法转换软件免费下载网址： http://intranet chem agilent com/Library/software/Public/AgilentMethodTranslator zip http://intranet./Library/software/Public/AgilentMethodTranslator.zip79How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian欧亚甘草根部萃取物－需要高分离度的色谱柱来对关键化合物进行定性定量条件: Agilent 1200 RR LC 色谱柱: ZORBAX RRHT SB-C18, 4.6 x 150mm, 1.8um 流动相: A=1% 乙酸水溶液: B=1% 乙酸乙腈溶液 梯度: 5- 100% B in 30 min. 流速: 1.0 mL/min 温度:室温 检测器: MWD 254 nm 样品: 欧亚甘草根部提取物, 旋涡处理并在使用前滤膜过滤 Glycyrrthetin nic acid30Glycyrrhizic c acidG14.6 minGA25.5 minStandards0510152025minG Li Licorice i Root R Extract E14.6 minPeak Capacity @ Rs 1.0 = 44225.5 minGA051015202530minHow to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian80Zorbax SB-C18(2.1x100mm, 1.8?m)分析BSA酶解肽谱MW D 1 A, Sig =2 1 2 ,4 R e f=3 5 0 ,2 0 ( N EW D IG ES T1 05 0 6 2 1 X1 50 U \P EPM APN EW T RYP 2 7. D ) mAU 40 35 30 25 20 15 10 5 0 -5Gradient time 20minPeaks 4775 MW D 1 A, Sig =2 1 2 ,4 R e f=3 5 0 ,2 0 ( N EW D IG ES T1 05 0 6 2 1 X1 50 U \P EPM APN EW T RYP 3 1. D )10152025minmAU 40 35 30 25 20 15 10 5 0 -5 5 MW D 1 A, Sig =2 1 2 ,4 R e f=3 5 0 ,2 0 ( N EW D IG ES T1 05 0 6 2 1 X1 50 U \P EPM APN EW T RYP 3 5. D ) mAU 40 35 30 25 20 15 10 5 0 -5 5 10 15 20 25 min 10 15 20 25 min30 min53545 min i58781How to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianRRHT分析 分析“干净”样品具有超长的使用寿 干净 样品具有超长的使用寿 命苯甲酮和类丙甲酮的分离度Resol lution 2 1 0 0 00
0 0 苯甲酮的塔板数Rs塔板数)进样次数进样次数注意: 压力为 585 bar苯甲酮的峰宽Peak k Width (10%)色谱柱压力Pre essure (bar) 600 400 200 0 0 0.006 0.004 0.002 0 0
PW (benz)实际压力进样次数进样次数82How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian高温高流速下色谱柱稳定性Long Lifetime of RRHT Column at 80C12000100008000Initial Plates 10,010PlatesFinal Plates 10, 089 Final Inj # 5425Plates600040002000Column: Zorbax RRHT StableBond C18, 1.8 ?m Pressure at 80°C = 355 bar Column: 2.1 2 1 x 50mm, 50mm Flow Rate: 1 mL/min Mobile Phase: 40% ACN: 60% Water0 1 499 718 853 988 06 11 19 78 20 38 89 56 01How to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianInjection Number83RRHT分离蛋白样品( (“脏的 脏的”样品 样品)Pressure vs. Injection #150140色谱柱: ZORBAX RRHT SB-C18 2.1 x 30mm, 1.8 μm130在600次进样后，压力只增加了 8 bar!!bar 120 End Press11010090 0 100 200 300 Inj # 400 500 600 70084How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian600bar RRLC在线过滤器和接头Description RRLC In-line filter, 2 mm, max 600 bar Part number Porosity 0.2 m Frit Flow diameter rate 2 mm &1 mL/min Part number Replacement Frits
(10/pk)?mRRLC In-line filter, 4.6 mm,
max 600 bar0.2 m?m4.6 mm1-5 mL/min (10/pk)孔径0.2 ?m筛板能够有效保护RRHT色谱柱 ?4.6mm/3.0mm ID的色谱柱可以配置P/N：+筛板：P/N ?2.1mm ID色谱柱可以配置P/N： +筛板：P/N 手紧式聚酮（Polyketone）色谱柱接头可耐 600 bar压力 PN:
(10/pk)85How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian1100快速液相升级包4.6 mm RRHT 1100 Fast LC Kit C VWD- 0.17 mm capillaries, 80 ul mixer, 5 ul semi-micro VWD cell- two 4.6 x 50 mm Zorbax 1.8 um columns4.6 mm RRHT 1100 Fast LC Kit C DAD- 0.17 0 17 mm capillaries capillaries, 80 ul mixer, mixer 5 ul semi semi-micro micro DAD cell- two 4.6 x 50 mm Zorbax 1.8 um columns2.1 mm RRHT 1100 Fast LC Kit C MS/DAD- 0.12 mm capillaries, 80 ul mixer, 1.7 ul micro DAD cell - 0.12 mm std ALS and WP ALS needle seats - two 2.1 x 50 mm Zorbax 1.8 um columns86How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian在1100液相上采用升级工具包更新后采用RRHT色谱柱减少分析时间可达95％1R (1 2) = 4 Rs(1,2) 4.8 82 34 6 x 250 mm 4.6 mm, 5 μmN= 4 N=2268015 20 25 30 min012 3510Rs(1,2) = 3.512.7144.6 x 100 mm, 3.5 μmN=1169115 20 25 30 min.0 12 3510N=6568 Rs(1,2) 4.15 4 N=61045= 2.9104.6 x 30 mm, 1.8 μm 1 mL/min15 1 2 3 4 0.5 1 1.5 20 2 2.5 25 30 min 20 25 30 min0N= N=64600 5Rs(1,2) = 2.9104.6 x 30 mm, 1.8 μm 2 mL/min15Columns: ZORBAX SB SB-C18 C18 Mobile Phase: 50% 20 mM NaH2PO4, pH 2 2.8: 8: 50% ACN Flow Rate: 1 mL/min Temperature: RT Detection: UV 230 nm Sample: 1. Estradiol 2. Ethinylestradiol 3. Dienestrol 4. Norethindrone87How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian目前被USP接受的RRHT色谱柱ZORBAX Eclipse Plus C18 Octadecyl y silane chemically y bonded to ZORBAX Eclipse XDB-C18 porous silica or ceramic microL1 particles, 1.5 to 10 ?m in diameter, or ZORBAX StableBond SB-C18 a monolithic rod ZORBAX Extend-C18 Extend C18 ZORBAX Eclipse Plus C8 Octylsilane chemically bonded to ZORBAX Eclipse XDB-C8 L7 totally porous silica particles, 1.5 to 10 ?m in diameter ZORBAX SB-C8 Phenyl groups chemically bonded to ZORBAX SB-Phenyl L11 porous silica particles, 1.5 to 10 ?m in diameterThe definitions of L1, L1 L7 and L11 C C18, C18 C8 and Phenyl C columns have been modified to include sub 2-micron particles! Agilent 1.8um choices are listed for each. This reduces resistance to trying the columns from those pharma and generic pharma companies i worldwide ld id th that tf follow ll th these methods. th d88How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian提高液相分离速度 - 安捷伦色谱柱解决方案采用新型填料技术色谱柱： 小粒径填料色谱柱 C 1.8um RRHT或3.5um RR 实心多孔层填料色谱柱 C Poroshell 300和Poroshell 12089How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian为什么Poroshell可以实现快速分离？分子在填料粒子中 最大的扩散深度被减小90How to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianPoroshell薄壳型液相色谱柱－在普通液相上实现快速分离 Poroshell 300 ---适合大分子(&4000)快速分离 5um填料颗粒 填料颗粒键合相：300StableBond-C18, 300Extend-C18, 300StableBond-C8, 300StableBond-C3Poroshell 120 ---适合小分子(&4000)快速分离 适合小分子( )快速分离 即将 即将上市 市 2.7 um填料颗粒，比亚二微米填料压力低50％键合相：120 120StableBond-C18, St bl B d C18 120St 120StableBond-C8, bl B d C8 120Eclipse 120E li Pl Plus-C18, C18 120Eclipse Plus-C8, 120Extend-C1891How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian使用全多孔硅胶填料分离多肽/蛋白--流速的影响分离度降低mAU
400 200 0 0.25 mAU
400 200 0 00 0.25 25 mAU
400 200 0 0 0.25 mAU
400 200 0 0 0.25全多孔 SB-C18(2.1 x 75mm, 5 ?m)3 mL/min0-100%B / 0.67 min0.3 0.35 0.4 0.450.5 min0.5min2 mL/min0-100%B in 1 min03 0.3 0 35 0.35 04 0.4 0 45 0.45 05 0.51 mL/min0-100%B in 2 min0.3 0.35 0.4 0.45 0.51. 2. 3. 4.神经降压素 核糖核酸酶 Lysozyme Myoglobinmin* min*0.5 mL/min0-100%B in 4 min0.310.352340.40.453 min0.5 min*Agilent 1100 WPS with AutoB Piston Stroke: 20?L, Temp.: 70°C, Det.: 215 nm Mobile Phase: A= 95% H2O, 5% AcN with 0.1%TFA; B= 5% H2O, 95% AcN, with 0.07%TFA? 使用全多孔颗粒时，随着流速增加，峰明显变宽。92How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian使用Poroshell色谱柱分离多肽/蛋白--流速增加对分离度的影响独特的选择性mAU
400 200 0 0.25 mAU AU
400 200 0 00 0.25 25 mAU
400 200 0 0 0.25 mAU
400 200 0 0 0.25不变的柱效和分离度3 mL/min0-100%B 0.67 min0.3 0.35 0.4 0.45Poroshell 300SB-C18(2.1 x 75mm, 5?m)0.5 0 5 min0.5min2 mL/min0-100%B 1 min03 0.3 0 35 0.35 04 0.4 0 45 0.45 05 0.51 mL/min0-100%B 2 min0.3 0.35 0.4 0.45 0.51. 2. 3. 4.Neurotensin Rnase A Lysozyme Myoglobinmin* i * min*0.5 mL/min0-100%B 4 min0.3120.35 0.430.4543 min0.5 min*Agilent 1100 WPS with AutoB Piston Stroke: 20?L, Temp.: 70°C, Det.: 215 nm Mobile Phase: 95% H2O, 5% AcN with 0.1%TFA; B= 5% H2O, 95% AcN, with 0.07%TFA ?使用A= Poroshell 色谱柱，随着流速增加，分离度没有变化。93How to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianPoroshell快速分析β淀粉酶P Poroshell h ll在2分钟内同样能将杂质与β淀粉酶很好地分开94How to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianPoroshell能在1分钟之内快速高效分离蛋白质和肽只有Poroshell能在高流速下高效地分离蛋白质和肽！95How to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianPoroshell快速高分离度分析BSA酶解产物96How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian安捷伦其它色谱柱97How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian安捷伦凝胶色谱柱GPC（凝胶渗透）色谱柱 ? PLgel系列 ? Zorbax PSM S “S”系列 GFC（凝胶过滤）色谱柱 ? PLaquagel-OH系列 ? Zorbax PSM S 系列 ? Zorbax GF-250/450（筛分蛋白和其他生物大分子的理想凝胶柱）? 多种分子量范围选择 ? 提供相应保护柱 ? 宽分子量范围混床柱适合未知样品分 子量初步确定98How to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianZorbax SAX和SCX离子交换柱? 基于稳定可靠的Zorbax硅胶基质，永久 键合的季胺或磺酸基 ? 对于水溶性小分子化合物和生物大分子 提供高效分离 ? 与有机改性剂兼容 ? Bio-SCX II系列专门为优化多肽和蛋白质 的2D LC/MS分离而设计，具有极强的保留 分离而设计 具有极强的保留 性能和良好的峰形99How to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianZorbax SCX用于三聚氰胺分析(国标快速方法GB/T )色谱柱：ZORBAX 300SCX标准样品色谱图 (5ppm)4.6×250mm，5um 检测 240nm； 检测： 流速：1.5mL/min； 柱温： 30℃； 进样量：10μL； 流动相：50mM 磷酸盐缓冲液 (pH3.0):乙腈=60：40样品色谱图 (溶液浓度2.27样品含量 7.57 mg/kg)100How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian手性柱ChiraDexβ-环糊精键合到多孔硅胶颗粒上 ―― USP L45 应用：巴比妥酸盐，苯并噻唑，钙拮抗剂，PTH-氨基酸UltronES-OVM 键合卵类粘蛋白 ―― USP L57，附方法开发指南 应用：分离药物对映异构体，比如己基巴比妥，布洛芬和普罗吩胺，氟苯氧丙 离 物 体 布 普 氟 氧 胺、氯曲米通、cloperastin的对映体。 ES-Pepsin 键合胃蛋白酶 应用：最适合于分离其它色谱柱难分离的碱性化合物。药物，多肽， eperisone，敏克静。101How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian特殊应用色谱柱氨基酸分析 ? Eclipse AAA 糖分析柱 ? Zorbax糖分析柱 寡核苷酸分析柱 ? Zorbax Oligo g ( (IEX/RP色谱柱) 多环芳烃分析柱 ? Eclipse PAH102How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian安捷伦全系列制备柱Agilent Prep颗粒 C 5,10um 表面积 C 400 m2/g 孔径 C 100? 碳载量 C18 C 24% 固定相 C C18, C18 Silica 内径 C (4.6), 21.2, 30 and 50 mm和散 装填料 pH范围 范围 C 2~10 (C18), 1~8 (Silica)ZORBAX颗粒 C 5, 7um 表面积 C 180 m2/g 孔径 C 80?, 300? 碳载量 C Eclipse XDB-C18 C 12% 固定相 C 所有ZORBAX分析柱的键合相 （反相、正相、GF、离子交换） 内径C 9.4mm 和 21.2mm103How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian安捷伦新一代反相色谱柱 ― Agilent TC(2)/HC(2)104How to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianAgilent g e t TC-C18(2)&HC-C18(2) C C 8( )& C C 8( )液相色谱柱硅胶颗粒 高纯度, 高比表面积 (290m2/g) , 孔径170? 非ZORBAX 硅胶颗粒 键合相：两种C18键合相 TC-C18(2), 常规碳载量(12%) HC-C18(2), ( ), 较高碳载 较高碳载量( (17%) ) 规格 4.6×250mm, 4.6×150mm, 5μm105How to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianAgilent TC-C18(2)&HC-C18(2)液相色谱柱? 新一代TC(2)/HC(2)色谱柱对于碱性和酸性化合 物都能提供优异的峰形。 ? 与其它厂商的色谱柱相比，TC(2)/HC(2)峰形更 佳，柱效更好。 ? TC(2)与HC(2)的选择性略有不同。106How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian不同色谱柱的酸性/碱性/中性化和物测试mAU 160 140 120 100 80 60 40 20 0 mAU 160 140 120 100 80 60 40 20 01 Tf2=1.07 3 254 510N=12949 615 20 25TC-C18(2) 7 Tf7=1.2630 min1 Tf2 0 96 3 Tf2=0.96 25 104N=12250 515 20 25HC C18(2) HC-C18(2) 7 Tf7=1.1740 min630 35mAU 140 120 100 80 60 40 20 0mAU A 120 100 80 60 40 20 01 Tf=1.58 3 254 510 15 20 25N=13761 630 35SYMMETRY-C18 7 Tf=1.7440 min测试条件： A- 20 mM KHPO4 pH 7 B- Methanol 35%A/65%B 23°C, 1.0 ml/min 254 nm Injection: 2ul 测试标样: 1.Uracil 2.普萘洛尔 3.Butyl Paraben 4 邻苯二甲酸二丙酯 4. 5.萘 6.Acenaphthene 7.阿米替林1 Tf=1.42 2 1534 510 15 20 25N=13196 630 35 40CAPCELL-PAK 7 Tf=1.5445 minmAU 100 80 60 40 20 0Tf=1.29 23 5104N=10749 620 30 40LUNA-C18(2) 7 Tf=1.2850 min107How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian不同色谱柱的酸性/碱性/中性化和物测试Norm. 140 120 100 80 60 40 20 0Norm. 120 100 80 60 40 20 0 mAU 100 80 60 40 20 0 Norm. 140 120 100 80 60 40 20 01 Tf2=1.72 2 1 3104 520 30N=14183 640KROMASIL-C18 750Tf=3.36minTf2=1.30 2 3 1104520 30N=11098 640 50 60INERTSIL-ODS(3) 770Tf 1 72 Tf=1.72minTf2=1.21 3 2 1 Tf2=1.66 2 1 3 4 5,2 1 Tf7=1.14 3 21010420N=10756 530 40DIAMONSIL-C18 750 60 706 N=12283 6Tf7=1.45 Tf7 1.45min3104520 30740 50 60SINOCHROM ODS Tf7=3.6870 minmAU 160 140 120 100 80 60 40 20 0 mAU 120 100 80 60 40 20 0N=12121 620Basic compounds 2 and 7 were adsorbed.40 60 80HYPERSIL-ODS(2) 7 Tf7=5.80100 min4,5N=16849 620 30 40 50YMC-PACK Pro C18 7 Tf7=3.2860 min108How to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianTC(2) 和 HC(2) 对碱性化合物具有最好的峰形可以从对称的峰形获得什么？― 更高柱效、更高灵敏度HC-C18(2) HC C18(2) TC-C18(2) LUNA-C18(2) DIAMONSIL-C18 CAPCELL-PAK INERTSIL-ODS(3) SYMMETRY-C18 YMC PACK P YMC-PACK Pro C18 KROMASIL-C18 SINOCHROM ODS HYPERSIL-ODS(2) 0.0Tf 阿米替林 Tf 普奈洛尔USP 拖尾因子最接 近1.0， 表示最对称 的峰形。1 0 1.02.03.04.05.06.07.0Tf109How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian不同色谱柱的操作压力比较Diamonsil C18 Inertsil ODS(3) Hypersil ODS(2) TC C18(2) Capcell-Pak Capcell Pak Luna C18(2) HC C18(2) K Kromasil il C18 SinoChrom ODS Symmetry C18 YMC pack pro C18050100 压力(bar) 力( )150200流动相: 65% methanol, 35% phosphate pH7.0110How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian不同色谱柱用于熊果酸和齐墩果酸分析比较色谱条件 色谱柱: 流动相: 流速: 温度: 检测波长: 进样体积: 4.6×250mm, 5μm 10% 0 0.03M 03M 磷酸盐, pH 3.0 30 90% ACN 0.5ml/min 0 5ml/min 25℃ 214 214nm 5ul111How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian不同色谱柱用于熊果酸和齐墩果酸分析比较2Luna C-18 Dikma Diamonsil C-181样品: 对照品 1.齐墩果酸 2.熊果酸? HC-C18对难分离物质具有 很好的分离度 最好的分离度Intersil ODS3 Alltech Apollo C-18 Agilent HC C-180 5 10 15 20 25 30 35 min最高的柱效色谱柱 Agilent HC C-18 Allt h Apollo Alltech A ll C-18 C 18 Intersil ODS3 Dikma Diamonsil C-18 Luna C-18112分离度1,2 1.76 1 59 1.59 1.24 1.12 1.32 熊果酸
18711理论板数 齐墩果酸
18570How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian不同色谱柱用于熊果酸和齐墩果酸分析比较Luna C-18 Dikma Diamonsil C-18 Intersil ODS3 1 212样品: 六味地黄丸 1.齐墩果酸 2.熊果酸2? HC-C18对难分离物质具有 很好的分离度 最好的分离度1Alltech Apollo C-181 2 1 2最高的柱效Agilent HC C-181520253035min色谱柱 Agilent HC C-18 Alltech Apollo C-18 Intersil ODS3 Dikma Diamonsil C-18 Luna C-18113分离度1,2 1.70 1 70 1.67 1.30 1.17 1.31理论板数 熊果酸 齐墩果酸
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DalianAgilent HC-C18色谱柱批与批之间的重现性2保留时间RSD (%) 1 0.24 2 0.281色谱条件 色谱柱: 流动相: 流速: 温度: 检测波长: 进样体积: 样品:Rs 1.72 Rs 1.76 Rs 1.76Agilent HC C-18 4.6×250mm, 5μm 10% 0.03M 磷酸盐, pH3.0 90% ACN 0 0.5ml/min 5ml/min 25℃ 214nm 5ul 1 齐墩果酸 2. 1. 2 熊果酸A B? 极佳的重现性说明生产工艺的稳定性 ? 同时保证了方法的重现性C5 10 15 20 25 30min114How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian不同色谱柱用于人参皂苷Rg1,Re,Rb1分析的比较样品: 1. Rg1 2. Re 3. Rb1；色谱条件 参照中国药典2005年版方法Rs1,2 = 2.27 2 271 2? 最佳的分离度 ? 梯度条件下基线较平稳3Agilent TC C1830405060708090100110minRs1,2 = 1.441 2基线漂移3Diamonsil C1830405060708090100110min1Rs1,2 = 1.972 3Apollo C1830405060708090100110min i115How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian不同色谱柱用于人参皂苷Rg1,Re,Rb1分析的比较样 : 1. Rg1 2. Re 3. Rb1；色谱条件 样品 色谱条件 参照中国药典 参 中 典2005年版方法 年版 法1 2 3Rs1,2 2.23 2 23Kromasil C1830405060708090min12Rs1,2 2.26基线漂移3Hypersil ODS-230405060708090min1 2基线漂移Rs1,2 1.663Inertsil ODS-330405060708090min116How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian人参样品，条件参照中国药典Rb1 Rg1 ReTC-C18(2) column with Gradient condition condition,detect detect at 203nm117How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian中药双黄连口服药mAU1600 500 400 300 200 100 0 2 4 6 8Agilent TC-C18(2)N=17178; Tf=1.08; Rs1,2=2.15 2Sample: Shuanghunaglian Granules 1. 绿原酸 2. 杂质10minHPLC Conditions Column: 4.6×250mm, 5μ Mobile Phase: 85% 0.4% P 15% ACN Flow Rate: 1.0ml/min Temperature: 30℃ UV Detection: 327nmmAU 700 600 500 400 300 200 100 0 2 4 6 8 10 minN=17477; Tf=1.04; Rs1,2=2.27Agilent HC-C18(2)Injection volume: 10ul118How to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian银杏内酯的分析ELSDmV 30125201.白果内酯 1 2.银杏内酯A 3.银杏内酯B 4.银杏内酯C2 31510450 0 5 10 15 20 25 minTC-C18(2),150mm,20%THF/MeOH(10/25) 80% water, isocratic,1ml/minHow to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian119Agilent TC-C18色谱柱分离头孢菌素类药物1 2 4 5 3 Agilent TC C18， 4.6×250mm, 5μm （P/N： ） 流动相： A:乙腈, B: 50mM 磷酸二氢钾， 时间 (min) A% B% 0 4 96 20 18 82 流速： 1 ml/min 柱温： 25℃ 检测波长： 254 nm 进样： 5 ul 色谱柱：色谱条件：样品： ?头孢羟氨苄 ?头孢拉定 ?头孢唑啉 ?头孢硫脒 ?头孢哌酮120How to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianAgilent TC-C18色谱柱分离十四种磺胺类药物mAU 80磺胺胍、磺胺嘧啶、磺胺噻唑、磺胺吡啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲 氧哒嗪、磺胺氯哒嗪、磺胺甲基异恶唑、磺胺异恶唑、磺胺对甲氧嘧啶、磺胺喹恶啉、磺胺硝苯Sulfaguanidine Sulfadiazine Sulfathiazole Sulfapyridine2.902 7.813 8.700Sulfameter SulfamethazineSulfisoxazole Sulfadimethoxine Sulfaquinoxaline20.816SulfanitranSulfamethoxypyridazine24 4.862 25 min60Sulfamerazine9.182Sulfachloropyridazine S lf Sulfamethoxazole th l17.99010.30815.38513.461200 0 5 10 15 2065%B; 25min, 65%B; 27min, 95%B, 34min, 95%B色谱条件： 色谱柱 色谱柱： A il t TC C18，4.6 Agilent 4 6×250mm, 250 5μm（P/N： ） 流动相： A: 0.2% HAc，B:甲醇 ；0-3min，10%B; 4min, 20%B; 8min, 20%B; 15min, 30%B; 17min, 45%B; 19min,45%B; 24min, 流速： 1ml/min 检测波长：275nm 柱温： 30℃ 进样量： 20μlHow to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian12114.396 116.1354012.87721.527奶粉原料中水溶性维生素分析色谱柱：Agilent TC C-18 250X4.6mm 流动相： 色谱柱 流动相 A 0.1%TFA Water B ACN 0~4min 5%B; 4~6min 25% B; 6~10min 25%B 后运行时间：5min 柱温：25 ℃ 流速：1ml/min 检测波长：280nm±4 nm 参比：500nm±100nmmAU AU 35Folic acid30VB325VB2 VB62015VB11050 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 min? 峰形尖锐、对称，分离度好 ? 未使用离子对试剂, TC C-18 色谱柱对极性组分也能提供较好的保留 ? 方法重复性比使用离子对试剂更好122How to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianAgilent TC-C18 色谱柱对食品饮料中的防腐剂的测定标准样品1 苯甲酸 3 对羟基苯甲酸甲酯 5 对羟基苯甲酸丙酯 2 山梨酸 4 对羟基苯甲酸乙酯酱油中的防腐剂苯甲酸果汁奶饮料中的防腐剂山梨酸色谱条件： 色谱柱： Agilent TC C18， 4.6×250mm, 5μm （P/N：） 流动相： A:乙腈, B: 20mM 乙酸胺, pH 4 时间 (min) A% B% 0 30 70 8 60 40 12 90 10 17 90 10 流速： 1 ml/min 柱温： 30℃ 检测波长： 时间 (min) 波长 0 5.8 6.4 5 ul 260 nm 230 nm 260 nmHow to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian进样 进样：123Agilent TC-C18 色谱柱对食品饮料中的甜味剂的测定标准样品1. 2. 3. 乙酰磺胺酸钾 糖精钠 阿斯巴甜 色谱条件： 色谱柱： Agilent TC-C18， 4.6×250mm, 5μm （P/N：） 流动相： A:乙腈, B: 20mM NaH2PO4/H3PO4, pH 2.5 时间 (min) A% B% 0 15 85 6 30 70 10 85 15 流速： 1 ml/min 柱 柱温： 30℃ 检测波长： 214 nm 进样： 20 ul果汁饮料中的甜味剂糖精钠乳饮料中的甜味剂乙酰磺胺酸钾124How to fast your LC separation Agilent LC colmns
DalianAgilent HC-C18 色谱柱对食品中着色剂的测定pH = 2.2 时 峰形尖锐且具有很好的分 离度色谱柱:Agilent HC-C18 5um, 4.6mm(i.d)×250mm，p/n
流动相A: Water (5mM NH4OAc) 调节pH至4.5，B: Methanol 梯度：0-7min 15%-35% B；7-12 min 35%-98% B；12-18min 98% B；Post run 5 min 流速1 mL/min 检测波长254 nmHow to fast your LC separation Agilent LC colmns
Dalian125Agilent HC-C18分离羰基-DNPH 衍生物 （EPA TO-11 ）mAU 2 0 250 200 150 100 50 0 5 10 15 20 25 min12345678910111213特点:1. 高分离度, 尖锐的峰形， 1 尖锐的峰形 Agilent HC-C18 HC C18表现出了很好的分离性能 2. 环境样品，对于非极性衍生物，Agilent HC-C18是理想的选择色谱柱: Agilent HC-C18, HC C18, 4.6 x 250mm, 5um 流动相: 溶剂 A:水 B:乙腈 梯度:开始60% B, 30 min 75% B, 35 min 100% B 流速: 1 mL/min 检测器: UV 230 nm 温度: 35?C 样品: 10 ul 进样 样品: DNPH 衍基衍生物 (Supelco 标准品s) (1) 甲醛-2,4-DNPH (2) 乙醛-2,4-DNPH (3) 丙烯醛-2,4-DNPH (4) 丙酮-2,4-DNPH (5) 丙醛-2,4-DNPH (6) 丁烯醛-2,4-DNPH (7) 异丁烯醛-2,4-DNPH (8) 2-丁酮-2,4-DNPH (9) 丁醛-2,4-DNPH (10) 苯甲醛-2,4-DNPH (11) 戊醛-2,4-DNPH (12) p-甲苯 甲醛-2,4-DNPH (13) 己醛-2,4-DNPH126How to fast your LC separation Agilent LC colmns
液相色谱柱选择如何选择色谱柱,比较一下 C-18 及 C-8 柱的硅烷基质 C-18 和 C-8 硅烷色谱柱是高效液相色谱 (HPLC) 中最常使用的色谱柱, 而且,在美国...安捷伦液相色谱柱介绍及快速高效解决方案 会议时间暂定为 6 月 7 日, 如果可以的话, 您的 PPT 5 月 27 号左右给我就成, 有事我们随时联系。 Topic 针对小...高效液相色谱柱的选择_药学_医药卫生_专业资料。高效液相色谱柱的选择 现在高效液相色谱中, 分离效果好坏的一个重要指针是色谱填料的选择, 但是目前市场上有 多种...高效液相色谱柱的选择_专业资料。本文介绍高效液相色谱柱的选择。高效液相色谱柱的选择一、硅胶基质填料 1、正相色谱 正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica)以及其他...Benson液相色谱柱介绍_工学_高等教育_教育专区。色谱技术美国Benson 液相色谱柱 ...6%交联度的磺化苯乙烯-二乙烯基苯树脂 分离单糖和二糖的分辨率和选择性高;分离...安捷伦液相色谱柱选择小分子_化学_自然科学_专业资料。安捷伦液相色谱柱常用系列及其...安捷伦的色谱柱的介绍及... 57页 免费 安捷伦柱子选择 暂无评价 55页 免费 ...关键词:液相色谱手性柱苯基柱研创 1/2 相关文档推荐 液相色谱柱的选择和介绍 ...广州研创生物技术发展有限公司是国内手性色谱柱的第一品牌和国内运营的领跑者,集...液相色谱柱的选择和介绍 126页 2财富值 液相色谱柱的选择 58页 5财富值如要投诉违规内容,请到百度文库投诉中心;如要提出功能问题或意见建议,请点击此处进行反馈。...怎样选择高效液相色谱柱 怎样选择高效液相色谱柱 高效液相 现代高效液相色谱中,分离效果好坏很大程度上取决于色谱填料的选择中。但是色谱 填料的选择范围很宽,要做合适...液相色谱法简介_物理_自然科学_专业资料。液相色谱法简介气相色谱不能由色谱图...多, 因此可选用两种或多种不同比例的液体作流动相, 从机时可提高选择性。 此外...
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