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B细胞受体在慢性淋巴细胞白血病中的研究进展
作者：佚名&&&来源：医脉通
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很全的各类免疫细胞亚群表型定义，不收藏要后悔的
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无论是化疗、放疗、移植还是现在的免疫治疗，患者的免疫功能与治疗结果息息相关。所以，免疫细胞监测成了治疗中不可缺少的手段。TBNK亚群尽管方便快捷，可自动化分析结果，但太粗了，精准治疗就得需要精密的监测手段。以前国际免疫学计划提供了一个八色方案，5管，最近一期的International JOurnal of Molecular Sciences上面的《Development of a Modular Assay for Detailed Immunophenotyping of Peripheral Human Whole Blood Samples by Multicolor Flow Cytometry》提供了一个12管8色方案，并列了一张表格，列出了各类免疫细胞的表型。方案还是比较完整，但对于国内用户来说，估计操作性太小，病人收费吃不消。
方案如下（点击小图可查看高清大图）：
下午8.14.59.jpg (129.64 KB, 下载次数: 16)
20:18 上传
我们编译美化的表格如下（点击小图可查看高清大图并收藏之）：
ImmuneCells-min.jpg (393.17 KB, 下载次数: 31)
20:18 上传
－－EOF－－
倪老师，这种用膜表面趋化因子CD183和CD196做出来的TH1/2/17的比例，与传统的胞浆染色IFN-γ、IL-4、IL-17相比会不会差异很大呢？有木有相关的对比呢？
@niwanmao 倪老师，这种用膜表面趋化因子CD183和CD196做出来的TH1/2/17的比例，与传统的胞浆染色IFN-γ、IL ...
我没有对比，但我相信，Human Immunology Project发表在Nature Review Immunology杂志上的文章，应该还是可信度和参考性非常强的：
我们平时也都是用HIP的这个方案。
@niwanmao 非常感谢倪老师的回复，顺便还给了一篇给力的文献！非常感谢！
我们最近在参考《Development of a Modular Assay for Detailed Immunophenotyping of Peripheral Human Whole Blood Samples by Multicolor Flow Cytometry》这篇文章研发检测项目，检测目的就是把人外周血的CD3+CD4+淋巴细胞分成TH1、TH2、TH17三个亚群。
上述文献用人的外周血全血进行检测，直接把T淋巴细胞分成了TH1、TH2和TH17三个亚群。而且Treg细胞群跟三个TH亚群是并列的关系，在分析TH亚群时并未事先刨除Treg亚群，也就是说Treg亚群被包含在了TH亚群里面。
1.&&TH亚群的分类，最开始是根据分泌的细胞因子类型来确立的，经典胞浆流式检测认为分泌IFN-γ为TH1、IL-4为TH2、IL-17为TH17。但是当Treg细胞处于不同微环境中，其实可以分泌IL-4或IFN-γ。请问Treg细胞应该属于TH1/2/17亚群吗？Treg与TH的关系到底应该是相互独立还是互有交叉呢？（我们也查阅了一些文献，Treg的趋化因子表型很接近TH2亚群）。
2.&&我们参阅了相关文献（包括这篇文献的引用文献），发现其他研究组检测外周血的TH亚群时，是用分选出来的CD3+CD4+CD25-CD45RA-Memory T细胞进行分析，用CD45RA排除了effector T(CCR7-CD45RA+)和naive T (CCR7+CD45RA+)，同时CD25-也就排除了Treg细胞。
因此，我们认为这篇文献对TH亚群的检测可能有缺陷（至少不够完美），附上参考文献，倪老师帮忙看一下，非常感谢!
感谢分享你的独立思考精神
QQ截图24.jpg (96.87 KB, 下载次数: 0)
00:25 上传
TH亚群与Treg的并列检测
我没有对比，但我相信，Human Immunology Project发表在Nature Review Immunology杂志上的文章，应该还是 ...
看了Human Immunology Project的这篇文献，突然明白了，谢谢倪老师
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黄芪注射液对脓毒症患者淋巴细胞亚群的影响
目的:观察黄芪注射液治疗后脓毒症患者淋巴细胞亚群变化,探究黄芪注射液对脓毒症患者免疫功能及预后的影响.方法:参照2001年&国际脓毒症定义&大会修订的诊断标准,纳入脓毒症病人50例,按随机原则分设对照组(n=20)和黄芪组(n=30).在相同基础治疗条件下,黄芪组增加黄芪注射液治疗,分别于治疗前、入院第7天、第14天测定WBC、TLC(总淋巴细胞)、T细胞、B细胞、NK细胞、CD4、CD8、CD4/CD8水平,并记录APACHEⅡ(急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ)评分及ICU死亡率.结果:全部脓毒症患者中存在TLC、CD4、CD4/CD8水平下降情况,并且与APACHEⅡ评分及ICU死亡率存在相关性(P&0.01或P&0.05).结论:脓毒症患者存在淋巴细胞亚群失衡,并且影响其病情及预后,黄芪注射液治疗有助于调整这种失衡,并且改善其免疫功能及预后.
作者单位：
浙江大学医学院,浙江,杭州,310006
浙江省立同德医院,浙江,杭州,310012
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万方数据电子出版社口服免疫Ag85A脂质体DNA诱导T细胞亚群应答效应研究
目的:拟采用构建的可在真核细胞内表达Ag85A基因的质粒,以阳离子脂质体为运载体,制成DNA疫苗,经口途径投予小鼠,以观察Ag85A脂质体DNA疫苗诱导免疫应答效应,为口服DNA疫苗的临床应用提供理论和实验依据.方法:ELISA方法检测Ag85A特异性抗体产生水平及血清Th1型细胞因子IFN-γ及Th2型细胞因子IL-4的分泌水平,ELISPOT技术检测口服DNA疫苗后小鼠可分泌IFN-γ和IL-4脾淋巴细胞数量.流式细胞术观察口服DNA疫苗后小鼠脾淋巴细胞CD4+T细胞及CD8+T细胞亚群的变化,从而判断口服DNA疫苗的免疫效果及脂质体是否有免疫增强作用.结果:口服自制Ag85ADNA疫苗可见血清中抗Ag85A特异性抗体的产生;下调了脾CD4+T细胞和CD8+T细胞亚群的数量;分泌IFN-γ的Th1型细胞比率和血清中的IFN-γ水平下降,而分泌IL-4的Th2型细胞比率和血清中的IL-4水平升高.口服DNA疫苗组诱导Ag85A特异性抗体产生,脂质体具有免疫佐剂作用.结论:应用阳离子脂质体为运载体,重组Ag85A DNA疫苗口服免疫C57BL/6小鼠,诱导了CD4+及CD8+T细胞亚群的下调及IFN-γ的表达减少,而玎IL-4的分泌呈增高趋势;疫苗可诱导Ag85A特异性抗体的分泌,产生了明显的体液应答.
作者单位：
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分子与细胞免疫学
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1）稀释样品：在悬浮固形物检测过滤时经常会出现水样中颗粒物含量高堵住微孔滤膜抽不动的情 况，可以将需要过滤的样品进行稀释，然后再进行过滤。
2）增加过滤面积：现在市场上普遍的真空过滤瓶可放置直径50mm的微孔过滤膜，更换一套可以放 置直径更大的过滤膜的过滤器（如sciencetool VF10，可放置直径为90mm的滤膜），使样品中的 固体不那么容易堵住滤膜。
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