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大鼠肾组织结构及其脉管系构筑特点的形态学观察
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大鼠肾组织结构其脉管系构筑特点的形态学观察
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中文摘要 大鼠肾组织结构及其脉管系构筑特点 的形态学观察 摘 要 目的：肾是机体最重要的排泄器官。目前，关于肾组织
结构特点及其功能意义的研究颇多，但对肾内淋巴管分布和
结构特点，相关研究报道较少。本课题拟通过HE染色和5
7一核苷酸酶和碱性磷酸酶组织化学双重染色，肾组织超薄
切片的重金属染色，对大鼠肾组织结构进行光镜和透射电镜
观察，探讨肾组织结构特点，揭示肾脉管系统特别淋巴管的
构筑特点，为尿液形成和蛋白质等物质重吸收机制的分析及
肾病的临床治疗，提供形态学方面的依据。 方法：选取健康成年SD大鼠8只，麻醉后即时取出。肾
组织，做冷冻切片，进行苏木精一伊红 HE 染色，对相邻
切片进行57一核苷酸酶和碱性磷酸酶 5
酶组织化学双重染色，常规光镜观察肾组织的细微结构，重
点观察其脉管系统的构筑特点。取新鲜大鼠肾组织，制备透
射电镜 TEM 样品，应用TEM观察肾实质和间质的超微结
构，辨别’肾组织各种细胞的形态，区分毛细血管和毛细淋巴
管，比较两者的数量及位置关系。 结果：
1 HE染色切片的光镜观察 大鼠肾表面为一薄层结缔组织被膜，皮质和髓质分界明
显，呈似一个肾锥体，肾柱不明显。。肾小球和肾小管清晰可 中文摘要
辨，在被囊下和肾实质的间质内，存在丰富的脉管样管道和
神经纤维。肾小管断面较多，各部基膜厚度不一。近端和远
端小管腔面有刷状缘，细段无刷状缘。集合小管上皮细胞为
单层立方或柱状、高柱状。皮质间质较少，髓质深部间质较
多。皮质和髓质交界线，可见到弓形血管，但数量较少。在
肾小体和肾小管周围的间质内，可见到管腔大小不一的淋巴
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肾石通颗粒配合经皮肾镜钬激光治疗多发性肾结石疗效观察
&&&&&&&&&　　近期，四川省遂宁市中心医院研究人员发表论文，旨在观察肾石通颗粒联合经皮肾镜钬激光治疗多发性肾结石的临床效果。研究指出，肾石通颗粒配合经皮肾镜钬激光治疗多发肾结石具有显著的临床治疗效果，能明显改善术后患者肾功能，减少结石复发，提高患者治疗满意度，值得临床推广应用。该文发表在2015年第28期《现代中西医结合杂志》上。 　　将100例多发性肾结石患者随机分为观察组和对照组，每组50例。对照组采用
　　近期，四川省遂宁市中心医院研究人员发表论文，旨在观察联合经皮肾镜治疗多发性的临床效果。研究指出，肾石通颗粒配合经皮肾镜钬激光治疗多发肾结石具有显著的临床治疗效果，能明显改善术后患者肾功能，减少结石复发，提高患者治疗满意度，值得临床推广应用。该文发表在2015年第28期《现代中西医结合杂志》上。
　　将100例多发性肾结石患者随机分为观察组和对照组，每组50例。对照组采用钬激光进行治疗，观察组在对照组基础上配合使用肾石通颗粒进行治疗，观察2组治疗效果，并随访3，6个月后观察复发情况和患者对治疗的满意度。
　　2组钬激光治疗效果比较差异无统计学意义（P&0.05）；术后3个月观察组复查肾功能异常率明显低于对照组（P&0.05），术后3，6个月观察组复发率均低于对照组（P&0.05）。观察组患者满意率明显高于对照组（P&0.05）。
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早期糖尿病大鼠肾组织的形态和功能的变化
作者：王欣欣 王丽珍 张伟 居红格 【摘要】 目的：观察早期糖尿病大鼠肾脏的结构和功能的变化。方法：建立链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠模型。分别在第1、2、4周3个时间点处死动物，取肾组织应用光镜技术观察肾组织的形态学改变；收集24小时尿液，测定尿肌酐及24小时尿微
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&&&&&&&&&&&&&&&&&&&作者：王欣欣 王丽珍 张伟 居红格& 毕业论文网
【摘要】& 目的：观察早期糖尿病大鼠肾脏的结构和功能的变化。方法：建立链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠模型。分别在第1、2、4周3个时间点处死动物，取肾组织应用光镜技术观察肾组织的形态学改变；收集24小时尿液，测定尿肌酐及24小时尿微量白蛋白排泄量，眶静脉取血测定血肌酐，计算内生肌酐清除率。结果：各时间点对照组大鼠的血糖均在正常范围之内，且彼此间差异无统计学意义（P&0.05），糖尿病模型组大鼠的血糖均显著高于正常对照组（P＜0.01）；在4周病程时，糖尿病模型组大鼠的肾小球囊腔增大，毛细血管袢减少，基质增多。结论：在糖尿病的早期阶段，肾脏的结构和功能已经开始发生改变。
毕业论文网
【关键词】& 糖尿病；糖尿病大鼠；肾脏&&&& 　　Abstract& Objective:To observe the morphological and functional changes in the renal tissues of diabetic rats in the early period. Methods: Making diabetic models by intraperitoneal injection of streptozotocin (STZ).Light microscope was used to observe the morphological changes；Determining urinary albumin excretion and Ccr through 24 hours. Results: The blood glucose of rats in each normal control group was within normal range and there was no significant difference between groups(P&0.05). While blood glucose was higher in diabetic model group than that in the normal control group at three time points, with the significant difference（P＜0.01). At the fourth week point, Bowman' capsule in the& diabetic model group was enlarged, the capillary tuft was decreased and the mesangial matrix was increased. Conclusion: The morphology and function of the kidney in the rats with diabetis begin to change in early period. 毕业论文网
&&&& 　　Key words& D Diabetic mouse；Kidney 毕业论文网
　　糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）是糖尿病常见的慢性并发症之一，在糖尿病患者群中的发生率约为20%～40%，伴有终末期DN者5年生存率小于20%。DN已成为西方国家人群终末期肾衰的主要病因，也是糖尿病致命的主要原因。在糖尿病的早期阶段肾脏的结构和功能都发生了一定程度的改变，Murussi等[1]的研究提示尿微量白蛋白（UAE）和肾小球滤过率（GRE）的测定有助于对DN的早期诊断。正确认识这些改变对于糖尿病的预防和早期治疗都有重要的作用。本实验通过制备糖尿病大鼠动物模型，在糖尿病早期对大鼠肾脏的结构和功能进行观察。 毕业论文网
　　1& 对象与方法 毕业论文网
　　1.1& 实验动物与实验仪器& 普通级健康雄性SD（Sprague-Dawley）大鼠60只,由辽宁医学院实验动物中心提供，体重180～220g，饲养温度20～25℃，食用标准动物饲料。&&& 　　主要仪器设备包括One Touch血糖仪（美国），日立7170型全自动生化分析仪（日本），LeicaRF2235石蜡切片机（德国）。 毕业论文网
　　1.2& 实验方法 毕业论文网
　　1.2.1& 动物模型制备& 大鼠在实验室常规喂养1周，给药前禁食12小时，取尾血测定空腹血糖。按50mg/kg的剂量腹腔注射链脲佐菌素（STZ）（临用前滤菌，并用0.1mol/L、pH5.0柠檬酸缓冲液配制成2%溶液），连续监测血糖3天，血糖浓度持续大于13.8mmol/L者，确定为糖尿病动物模型（DM）。正常对照（NC）组大鼠腹腔注射等体积生理盐水。DM组、NC组大鼠各30只。于成模后第1、2、4周末每组分别取10只大鼠，放入代谢笼收集24小时尿液，测定尿肌酐及24小时UAE排泄量，眶静脉取血测定血肌酐，计算内生肌酐清除率（Ccr）。分别在第1、2、4周末3个时间点处死大鼠，剖腹取双肾，称肾重后置于10%中性福尔马林溶液中固定，行光镜观察。 毕业论文网
　　1.2.2& 基础指标的检测& 于糖尿病大鼠成模的第1、2、4周末分别检测实验组和对照组动物血糖、体重；取血样和尿样，用日立7170全自动生化分析仪检测血肌酐、尿肌酐、UAE，计算Ccr。 毕业论文网
　　1.2.3& 光镜观察& （1）光镜标本制作：分别于动物成模后第1、2、4周末处死实验组和对照组大鼠各10只。采用排刀法将左侧肾脏切成1.5mm厚的薄片，取双号薄片入10%多聚甲醛固定24小时，流水冲洗4小时，入梯度酒精脱水、二甲苯透明、石蜡浸透、包埋。将各组织做5μm厚的切片，HE染色，光学显微镜下观察肾小囊及肾内血管的形态变化。（2）肾小球体积密度（VVM）测定：VVM是以肾皮质内所有肾小球的总体积占整个肾皮质体积的百分比表示，用VVM值表示肾皮质内肾小球的相对体积。每只动物随机选取3个蜡块，每个蜡块随机选取5张切片，每张切片按“S”形随机选取5个视野，在10×10倍光镜下应用方格测试系统行点计数法，根据公式VVM=∑PX/∑PC[2]（∑PX为方格测试系统落在肾皮质内肾小球的点数，∑PC为方格系统落在参照系的点数），测算出各组大鼠肾皮质内的VVM 。 毕业论文网
　　1.3& 数据处理& 采用统计软件SPSS 12.0处理实验资料。各项指标用x±s表示，糖尿病组和正常对照组比较用t检验，糖尿病各组间比较用单因素方差分析。P＜0.05认为差异有统计学意义。 毕业论文网
　　2& 结果 毕业论文网
　　2.1& 肾脏功能的变化& 实验第1、2、4周末时DM组大鼠的血糖、24h尿量、肾重/体重显著升高（P＜0.01）；DM组大鼠Ccr、UAE均显著高于同期NC组大鼠（P＜0.01）；DM组大鼠VVM高于同期NC组大鼠（P＜0.01），说明DM组大鼠肾小球的体积增大；见表1。 毕业论文网
　　表1& 1、2、4周大鼠血糖、24h尿量、肾重/体重、Ccr、VVM、UAE变化（略） 毕业论文网
　　注：*与同期NC组比较P＜0.01，△与1周DM组比较P＜0.01，#与2周DM组比较P＜0.01 毕业论文网
　　2.2& 肾脏形态的变化& HE染色光学显微镜下观察结果显示，1、2周时DM大鼠肾组织结构未见明显改变，4周时肾皮质内肾小球毛细血管袢减少，基质增多，肾小囊囊腔增大，见图1、图2。 毕业论文网
　　图1& 正常对照组大鼠肾小体石蜡切片,HE染色(×40)（略） 毕业论文网
　　图2& 4周糖尿病模型组大鼠肾小体石蜡切片，HE染色（×40），示肾小囊腔增大（←），毛细血管袢减少，基质增多（略） 毕业论文网
　　3& 讨论 &&& 　　据世界卫生组织最新公布的权威数据显示，全球糖尿病患者的人数已经超过1.77亿，预计到2025年将达到3.7亿。糖尿病患病率前3位的国家分别是印度、中国和美国。在美国青少年中2型糖尿病的发病率逐年上升，在体重超标和患有肥胖症的青少年中尤为突出[3]。我国糖尿病的发病率在1980年还只有0.67%，而1996年则跃升到3.2%，如今，在我国患糖尿病的人数已经超过3 000万[4]。DN是渐进性的肾脏疾病，代表了糖尿病严重的晚期并发症。DN以高血压、持续蛋白尿和进行性肾功能丧失为特征。Mogensen等[5]将DN的演进分为5个阶段：第1期以肾小球的高滤过和肥大为特征；第2期有肾小球系膜扩张和基膜增厚；第3期可检出微量白蛋白尿（20～200μg/min），伴血压从基础水平升高；第4期出现临床蛋白尿（&200μg/min）；第5期为终末期肾病。通常情况下将前三期定为DN的早期阶段。&&& 　　在本实验过程中，DM组大鼠的血糖在整个病程中均显著高于NC组大鼠。GFR、UAE是判断糖尿病肾病的重要指标。本实验在STZ诱导糖尿病大鼠成模后的第1、2、4周末分别检测DM组和NC组动物的Ccr以间接测量GFR。研究发现DM大鼠在起病的前4周内，随着病程的延长，Ccr逐渐升高，与NC组比较差异有统计学意义（P&0.01），并且在本实验研究进程的4周内还出现UAE增多。以上的研究结果表明糖尿病大鼠的肾脏功能在病程4周时已经发生改变。 毕业论文网
&&& 　　本实验通过对HE染色切片的光学显微镜观察发现在病程的第4周糖尿病大鼠肾小囊腔出现了明显增大，肾小球内血管袢减少，基质增多。我们还采用了这些切片应用体视学网格测试系统点计数法研究了VVM，研究结果显示，DM组大鼠VVM增加，这说明肾小球的体积增大。DM组大鼠肾重/体重比值从第1周开始增大，与NC组比较差异有统计学意义（P&0.01），并且随着病程进展进行性增加。这些实验结果表明，DM组大鼠的肾脏体积增大，正常的形态结构开始发生改变。&&& 　　目前，在全球范围内，糖尿病的发病呈现上升趋势。糖尿病的发病是与多种因素有关的极其复杂的过程[6]。通过对肾脏形态和功能的评价可以对早期DN作出诊断，但如何阻止或延缓糖尿病的进程仍有待于进一步的研究。 毕业论文网
【参考文献】& 　　[1] Murussi M,Murussi N,Campagnolo N，et al.Early detection of diabetic nephropathy[J].Arq Bras Endocrinol Metabol,):442-451.　　[2] 郑富盛.细胞形态立体计量学[M].北京：北京医科大学中国协和医科大学联合出版，.　　[3] Mayer-Davis EJ.Type 2 diabetes in youth:epidemiology and current research toward prevention and treatment[J].J Am Diet Assoc, Suppl 1):S45-51.　　[4] 李保春.2型糖尿病性肾病[M].上海：第二军医大学出版社，2003:5.　　[5] Mogensen CB,Christensen CK.Predicting diabetic nephropathy in insulinCdependent patients[J].N Engl J Med,.　　[6] Libman IM,Arslanian SA.Prevention and treatment of type 2 diabetes in youth[J].Horm Res，):22-34. 毕业论文网
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