三氯乙酸终止酶促反应应酶促反应如果加试剂终止的话,该用什么试

美国DRG ELISA试剂盒
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使用酶联免疫竞争法定量检测尿液中游离皮质醇
样本中的尿液皮质醇与辣根过氧化物酶标记的皮质醇竞争连结到包被板中的抗皮质醇抗体。
温育后,经洗涤,连结的与游离的皮质醇分开。加入H2O2和TMB底物液,经一段时间后,生成了颜色,加入终止液终止酶促反应并检测吸光度。计算尿液中皮质醇需要一系列的标准品建立标准曲线。样本中尿液皮质醇浓度与颜色强度成正相关。
试剂、材料和仪器
提供的试剂和材料
1&皮质醇标准品&STD0-STD4
2&孵化缓冲液
&&磷酸盐缓冲液
3&酶联物&&HRP标记的皮质醇
4&包被板,可分拆
5&TMB底物液
7&质控品(低)
8&质控品(高)
酶标仪(450nm)
实验步骤:&略
平均吸光度
计算标准品、样本的平均吸光度值。
以标准品吸光度值为Y轴,相应的浓度为X轴,作出最优的拟合曲线(可选择4参数逻辑函数)。
将样本的吸光度值插入标准曲线中,则可读出相应的浓度,单位为ng/ml。
计算尿液中皮质醇浓度(24h),按以上计算出浓度,然后再乘以24小时内的尿液总体积
ng/ml&x&24小时尿液体积(ml)/1000=&g&Cortisol/24h
50&190&g/24h
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影响酶促反应的因素有哪些
 来源:&&   |
影响酶促反应的其他因素包括辅助因子、激活剂、抑制剂等。
1.辅助因子:在酶活性测定时,要保证辅基或辅酶的供给。
2.激活剂:在酶活性测定时,要满足酶对激活剂或表面活性剂的需要。如Cl-是淀粉酶的激活剂,N-乙酰半胱氨酸时是CK检测的激活剂。
3.抑制剂:使酶活性降低,在测定酶活性时,应避免抑制剂的影响。
使酶活性降低或丧失的物质称为抑制剂。抑制分为竞争性抑制和非竞争性抑制,在酶活性测定过程中,应尽量避免抑制剂存在。但在有的反应体系中,加入竞争性抑制剂可以提高工具酶的米氏常数。
为了减少上述诸多因素对酶催化活性浓度的影响,国际临床化学学会(IFCC)推荐采用具有量值溯源的,互换性好的标准物质用于血清酶催化活性浓度的测定的校正。目前,IFCC已经公布了包括ALT,AST,ALP,GGT,CK,LDH,Amylase在内的数个常用酶测定的参考方法,该参考方法主要应用于酶学测定参考实验室,对厂家的试剂进行溯源性考核。
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 |  |  | 类圆线虫IgG酶联诊断试剂盒
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黄小姐(联系我时,请说明是在中国化工仪器网上看到的,谢谢)
&类圆线虫IgG酶联诊断试剂盒&货号产品名称规格价格方法品牌&EIA4208Strongyloides IgG类圆线虫96T询价ELISA德国DRG8319-3Strongyloides (New)&&类圆线虫(新)96T询价ELISA美国原装【前言说明】此类圆线虫IgG酶联诊断试剂盒可用于血清中抗类圆线虫IgG抗体的定性检测。【实验原理】类圆线虫IgG酶联诊断试剂盒包被板的微孔中包被了类圆线虫抗原。第一次温育期间,样品中的类圆线虫抗体会结合到固相抗原上。之后洗板除去未结合的样品,再向微孔中加入酶联物。如果抗体结合到这些微孔上,则酶联物之后会结合到这些抗体上。之后再洗板,再加入显色剂。如果酶联物存在,则过氧化酶可催化反应消耗过氧化物并使得溶液颜色变成蓝色。加入终止液以终止酶促反应,此时溶液由蓝色变成黄色。反应结果可用眼判断也可以用酶标仪来判断。【储存条件】类圆线虫酶联诊断ELISA试剂盒试剂、板条和瓶装成分储存于2-8℃的环境下。含洗涤液的洗涤瓶必须储存在室温下。欲了解更多请关注&深圳科润达&微信公众号:请扫描并关注公众号,订购有礼哦!深圳市科润达生物工程有限公司研发地址:深圳市南山区蛇口沿山路10号6楼办公地址:深圳市南山区蛇口沿山路45号佳利泰大厦7D联系电话:0公司网站:.cn/销售QQ:
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面议上海市偶联酶促反应测定腺苷脱氨酶的方法和试剂盒
无权-视为撤回
申请号:.1 申请日:
摘要:Heinz(1980)借助腺苷脱氨酶将腺苷脱氨产生次黄苷,通过次黄苷偶联嘌呤核苷磷酸化酶和黄嘌呤氧化酶酶促反应生成过氧化氢,在过氧化氢酶和醛脱氢酶的作用下,测量334nm处NADPH吸光度上升的速率来测算腺苷脱氨酶活性。该法缺点是试剂成本过高。本发明引入Trinder氏反应,将次黄苷偶联酶促反应生成的过氧化氢在过氧化物酶的作用下使苯胺类供氢体和4-氨基安替比林偶联物凝聚成有色产物。通过连续反应和动态观察有色产物的产量,从而测定腺苷脱氨酶的活性。本发明简化了Heinz氏测定腺苷脱氨酶的次黄苷偶联酶促反应体系,降低了试剂成本。本发明将苯胺类化合物ADOS、ADPS、ALPS、TODB、TOOS和TOPS用作Trinder氏反应的供氢体,增加了反应的灵活性。本发明还涉及用于进行上述方法的试剂盒。
地址: 310053浙江省杭州市滨江区滨康路677号
发明(设计)人:
主分类号:
&发明专利申请公布后的视为撤回
注:本法律状态信息仅供参考,即时准确的法律状态信息须到国家知识产权局办理专利登记簿副本。
&1.一种测定生物样本中腺苷脱氨酶活性的方法,其特征是借助腺苷脱氨酶将腺苷脱氨产生次
黄苷,通过次黄苷偶联嘌呤核苷磷酸化酶和黄嘌呤氧化酶酶促反应生成过氧化氢,过氧化
氢在过氧化物酶的作用下使苯胺类供氢体和4-氨基安替比林偶联物凝聚成有色产物,通
过连续反应和动态观察有色产物的产量,从而测定腺苷脱氨酶的活性。
专利代理机构
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摘要 : 【目的和要求】 1. 了解pH对酶促反应速度的影响。 2. 学习测定酶的最适pH的方法。 【实验原理】 酶促反应受环境pH的影响极为显著。 通常各种酶只有在一定的pH范围内才表现它的活力,一种酶表现其活性最高时的pH值,称为该酶的最适pH。低于或高于酶的最适pH时,酶的活性逐渐降低。不同酶的最适pH值不同。本实验仍以乳酸脱氢酶催化的反应为例,学习测定酶的最适pH的方法。
【目的和要求】1. 了解pH对促反应速度的影响。2. 学习测定酶的最适pH的方法。【实验原理】酶促反应受环境pH的影响极为显著。 通常各种酶只有在一定的pH范围内才表现它的活力,一种酶表现其活性最高时的pH值,称为该酶的最适pH。低于或高于酶的最适pH时,酶的活性逐渐降低。不同酶的最适pH值不同。本实验仍以乳酸催化的反应为例,学习测定酶的最适pH的方法。【和器材】(一)试剂:1. 不同pH值的:100ml 0.33M柠檬酸,100ml 0.33M磷酸,3.54g 硼酸,343ml 1M NaOH, 加水直到1升。用HCl滴定成pH值3.0、3.5、4.0、4.5直到12的不同pH值缓冲液。2. 0.01M NADH3. 0.1M 丙酮酸钠4. LDH【实验试剂和器材】(一)试剂:0.1M磷酸钾缓冲液(pH 7.0);0.01M NADH; 10M 丙酮酸钠;LDH(二)器材:,移液枪,吸头,1.5ml小离心管,离心管架【】(一)酶活性的测定:方法同实验7中的步骤1。(二)pH对酶促反应速度的影响:1. 在1.5 ml小中分别加入:(总体积为1ml反应液)2. 混匀以上试剂,倒入比色皿中,然后将比色皿放入分光光度计后读取340nm处OD值,加入0.02ml LDH使用液,迅速搅匀,使反应开始,测定反应1分钟OD值的变化。3. 根据所测得的OD值的变化,计算出反应初速度,填入下表:3. 以pH为横坐标,反应速度为纵坐标做出v – pH曲线图,求出LDH的最适pH值。
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