shRNA表达shrna载体构建是瞬时转染还是稳定转染

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【求助】shRNA质粒转染细胞的筛选
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这个帖子发布于9年零335天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
请问用质粒载体进行的RNAi 实验是稳定转染吗,所说的稳定转染是指质粒在细胞中稳定表达还是质粒基因与基因组发生整合呢?
我用shRNA质粒转染细胞后,用G418筛选,有没有做过相关实验的前辈指点我一下该如何设计晒选方案更好,本人在此不胜感激!
不知道邀请谁?试试他们
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我也需要,谢谢!!
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质粒载体可以进行稳转,但是质粒载体的整合效率比较低,不如慢病毒以及其他病毒载体可以定点整合。质粒载体如果用G418筛选一般可以达到稳转,如果只是用脂质体进行瞬时转染也是可以的,就进行普通的筛选试验和检测。稳转的筛选方案可以根据载体手册以及稳转protocol进行
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请教,拿慢病毒载体介导稳定转染之前的最佳干扰靶序列怎么确定呢?谢谢
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nomadic 请教,拿慢病毒载体介导稳定转染之前的最佳干扰靶序列怎么确定呢?谢谢有几种途径确定:1.文献发表的靶点2.自己筛选靶点,通过兼容载体进行筛选靶序列。
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基因沉默 有几种途径确定:1.文献发表的靶点2.自己筛选靶点,通过兼容载体进行筛选靶序列。请教具体实验方法?有哪位大侠实际操作过的经验吗?谢谢
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【求助】shRNA质粒转染细胞的筛选坷咕迪妇爸
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