下列关于“低温诱导植物染色体数目的变化 实验的叙述.不正确的是A．用低温处理植物分生组织细胞.能抑制纺锤体的形成B．洋葱根长出约1 cm时.剪下.置于4&C冰箱中.诱导 36 hC．卡诺氏液浸泡根尖.固定细胞的形态D．装片制作包括解离.漂洗.染色和制片4个步骤 题目和参考答案——精英家教网——
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下列关于“低温诱导植物染色体数目的变化”实验的叙述，不正确的是A．用低温处理植物分生组织细胞，能抑制纺锤体的形成B．洋葱根长出约1 cm时，剪下，置于4&C冰箱中，诱导 36 hC．卡诺氏液浸泡根尖，固定细胞的形态D．装片制作包括解离、漂洗、染色和制片4个步骤
解析1、低温处理根尖目的是抑制纺锤体的形成，细胞不能分裂成两个子细胞，细胞染色体数目发生变化。2、洋葱根尖的培养（发根）→低温处理（分生区1cm，冰箱内4℃低温下培养，诱导培养36小时）→固定（卡诺氏固定液）→制片（解离、漂洗、染色和制片）；选B。
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科目：高中生物
题型：单选题
下列关于“低温诱导植物染色体数目的变化”实验的叙述，不正确的是A.用低温处理植物分生组织细胞，能抑制纺锤体的形成B.洋葱根长出约1 cm时，剪下，置于4&C冰箱中，诱导 36 hC.卡诺氏液浸泡根尖，固定细胞的形态D.装片制作包括解离、漂洗、染色和制片4个步骤
科目：高中生物
来源：学年黑龙江哈三中高三上期第三次验收生物卷（解析版）
题型：选择题
下列关于“低温诱导植物染色体数目的变化”实验的叙述，正确的是A.卡诺氏液可用来对染色体进行着色，苯酚品红可固定细胞B.该实验原理为低温可阻止着丝点分裂，使染色体加倍C.利用高倍显微镜可能观察到细胞由二倍体变成四倍体的全过程D.视野中既有正常的体细胞也有染色体加倍的体细胞&
科目：高中生物
来源：学年四川绵阳市第三学期期末教学质量测试生物卷（解析版）
题型：选择题
下列关于“低温诱导植物染色体数目的变化”实验的叙述，正确的是A．原理：低温可诱导着丝点分裂，使染色体数目加倍B．解离：用卡诺氏液浸泡根尖1h，使组织细胞分离开C．染色：可用甲基绿或健那绿代替改良苯酚品红染液D．观察：镜检发现视野中少数细胞染色体数目增加&
科目：高中生物
来源：2013届四川省高一下学期第三次月考生物试卷
题型：选择题
下列关于“低温诱导植物染色体数目的变化”实验的叙述，不正确的是A．用低温处理植物分生组织细胞，能抑制纺锤体的形成B．洋葱根长出约1 cm时，剪下，置于4&C冰箱中，诱导 36 h&& C．卡诺氏液浸泡根尖，固定细胞的形态D．装片制作包括解离、漂洗、染色和制片4个步骤&
科目：高中生物
下列关于“低温诱导植物染色体数目的变化”实验过程的叙述中，正确的一组是(　　) ①解离的目的是用药液使组织细胞彼此分散开　②漂洗的目的是洗去根尖上的盐酸，避免与碱性染料发生中和反应 ③用改良苯酚品红染液是为了将细胞核、染色体着色便于观察 ④压片可将根尖细胞压成单层，使之不相互重叠　⑤当看到一个中期的细胞时，要注意观察它如何进入后期、末期，以理解从中期至末期发生的变化 A．①②　　B．③④⑤　　C．①⑤　　D．②③④　
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openresty/1.9.7.4几种紫薇属植物染色体制片技术优化及原位杂交体系的建立--《北京林业大学》2013年硕士论文
几种紫薇属植物染色体制片技术优化及原位杂交体系的建立
【摘要】：紫薇(Lagerstroemia indica L.)隶属于千屈菜科(Lythraceae)紫薇属,盛夏开花,花期长,是我国夏季重要的观赏花木。目前,关于紫薇的研究主要集中在种质资源、繁殖栽培、育种及园林应用等方面。由于紫薇属植物染色体小(1-2μm),且细胞质厚、细胞质浓,采用传统的压片法染色体制片效果非常不理想,限制了紫薇细胞学方面的研究,其分子细胞学领域的研究更是空白。荧光原位杂交技术依据碱基互补原理,能够准确获得特殊修饰的核苷酸分子探针在染色体上的位置,可以为小染色体提供可识别的标记。基于此,本研究在优化紫薇属植物的制片方法基础上,对紫薇属植物染色体荧光原位杂交过程各个因素进行筛选和评价,建立了适于紫薇属植物的FISH体系,初步分析了45SrDNA在紫薇属植物中期染色体上分布特点,进行核型分析,并初步建立紫薇属植物基因组原位杂交体系,对紫薇属种间杂种进行了杂种鉴定。主要结果如下：
1、优化了紫薇属植物的染色体制片方法：取当年生枝条茎尖生长点或初冬剪下的经冷藏处理的枝条水培后萌发的茎尖生长点最内侧长度为0.5-1.0cm的部分为材料,置于改良固定液(无水乙醇：冰醋酸(分析纯)：三氯甲烷(分析纯)=5：3：2,Ⅴ/Ⅴ)中于-20℃温度固定过夜后的制片效果最好；常规压片法的最佳处理方法是在浓盐酸与乙醇混合液(1：1)中于室温下解离2h；去壁低渗火焰干燥法的最佳酶液及酶解时间是在2.5%纤维素酶：2.5%的果胶酶：0.01%蛋白酶K=2：1：3(Ⅴ/Ⅴ)的混合酶液中37℃水浴酶解4-5h。成功获得紫薇、尾叶紫薇(L. caudata)、福建紫薇(L. limii)、屋久岛紫薇(L.fauriei)等4种紫薇属植物清晰的中期染色体制片。
2、建立紫薇属植物染色体荧光原位杂交体系：染色体制片前处理：65℃烘箱内染色体玻片干燥1h,0.1mg/m1RNA酶溶液37℃温育1h,0.1mg/ml胃蛋白酶K37℃温育10min；杂交探针制备：20μl体系中探针3μl,95℃金属浴避光变性10min。染色体变性：85℃恒温处理3.5min；信号检测：20μl2mg/ml DAPI荧光染液染色5min。通过荧光显微镜观察,发现45SrDNA在紫薇属植物中位于比较长的染色体短臂近端部,紫薇、福建紫薇、尾叶紫薇、屋久岛紫薇与45SrDNA探针杂交后均得到一对位点,分别位于第2、1、4、2号染色体上,并获得4种紫薇属植物的核型公式。
3、建立了紫薇属植物基因组原位杂交体系,在紫薇与尾叶紫薇种间杂种F1代的染色体上发现了紫薇和尾叶紫薇的杂交信号,确定为真杂种,获得紫薇属杂种鉴定新方法。
研究结果为紫薇属植物分子细胞学研究奠定了研究基础。
【关键词】：
【学位授予单位】：北京林业大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2013【分类号】：S685.99【目录】：
摘要5-6ABSTRACT6-101. 引言10-20 1.1 紫薇属研究进展10-12
1.1.1 紫薇属种质资源调查10
1.1.2 分子标记技术10-11
1.1.3 新品种培育11-12
1.1.4 其他12 1.2 探针标记及其应用12-16
1.2.1 染色体作图12-13
1.2.2 基因组分析13-14
1.2.3 体细胞突变分析14
1.2.4 相异染色质的检测14-15
1.2.5 染色体畸变的检测15-16 1.3. 原位杂交技术在观赏植物中的应用及存在问题16-17
1.3.1 原位杂交技术在观赏植物中的应用16-17
1.3.2 存在问题17 1.4 研究内容与意义17-20
1.4.1 研究内容17
1.4.2 研究意义17-202 紫薇属植物染色体制片技术优化20-30 2.1 材料与方法21-22
2.1.1 材料21
2.1.2 实验方法21-22 2.2 结果与分析22-25
2.2.1 染色体制片前处理的相关因子对制片的影响22-24
2.2.2 不同制片方法对染色体制片效果的影响24-25
2.2.3 4种紫薇属植物染色体数目25 2.3 讨论25-28
2.3.1 紫薇染色体制片技术探讨25-28 2.4 小结28-303 紫薇属植物染色体FISH技术建立与核型分析30-46 3.1 材料与方法30-33
3.1.1 实验材料30-31
3.1.2 实验方法31-33 3.2 结果与分析33-42
3.2.1 染色体制片前处理方法对杂交效果的影响33-34
3.2.2 不同浓度探针对杂交结果的影响34
3.2.3 不同变性时间对杂交结果的影响34
3.2.4 45SrDNA在紫薇属植物中期染色体上的定位34-36
3.2.5 紫薇属植物核型分析36-42 3.3 讨论42-45
3.3.1 荧光原位杂交的影响因素42-43
3.3.2 45SrDNA在紫薇属植物中期染色体上的定位分析43-44
3.3.3 紫薇属植物核型分析44-45 3.4 小结45-464 紫薇属植物GISH技术的建立46-52 4.1 材料与方法46-47
4.1.1 实验材料46
4.1.2 实验方法46-47 4.2 结果与分析47-48
4.2.1 尾叶紫薇与紫薇属间基因组原位杂交分析47-48 4.3 讨论48-50
4.3.1 基因组原位杂交在紫薇属植物杂种鉴定中的应用48-50 4.4 小结50-525 结论52-54参考文献54-62个人简介62发表文章情况62-64导师简介64-66致谢66
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