请教:常用的脐静脉内皮细胞培养基基

人血管内皮细胞完全培养基进口
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人血管内皮细胞完全培养基进口&
5×105cells/瓶&
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公司是最专业的ATCC细胞供应商,提供人血管内皮细胞完全培养基的报价,咨询,称技术服务,欢迎来电咨询选购。
产品名称:人血管内皮细胞完全培养基
英文名称:Human vascular endothelial cell culture medium
规格:5&105cells/瓶100mL
人血管内皮细胞完全培养基冷冻保存方法一:冷冻管置于4℃300分钟&(-20℃30分钟*)&-80℃16~18小时(或隔夜)&液氮槽长期储存。
冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至&80℃以下,再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
人血管内皮细胞完全培养基复苏操作要点:&
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。&
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。&
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。&
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。&
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。&
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
细胞汞元素比色法定量检测试剂盒20次 组织活化凝血因子10(FACTOR Xa)活性比色法定量检测试剂盒 20次
细胞汞元素荧光定量检测试剂盒20次 组织活化凝血因子10(FACTOR Xa)活性荧光定量检测试剂盒 20次
细胞谷氨酸丙同酸转氨酶(GPT)活性光谱法定量检测试剂盒20次 组织肌酐(CREATININE)化学比色法定量检测试剂盒 20次
细胞谷氨酸草酰乙酸转氨酶(GOT)活性光谱法定量检测试剂盒20次 组织肌酐(CREATININE)酶连续反应比色法定量检测试剂盒 20次
细胞谷氨酰胺酶(glutaminase)活性比色法定量检测试剂盒20次 组织肌酸激酶(CK)活性酶动力比色法定量检测试剂盒 25次
细胞谷氨酰半胱氨酸合成酶(glutamylsysteinesynthetase)活性比色法定量检测试剂盒20次 组织肌酸激酶(CK)总活性比色法定量检测试剂盒 25次
细胞谷胱甘肽(GLUTATHIONE)总浓度比色法定量检测试剂盒50次 组织肌酸激酶(CK)总活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒 20次
细胞谷胱甘肽(GLUTATHIONE)总浓度荧光定量检测试剂盒50次 组织肌酸激酶同工酶混合型(CK-MB)活性比色法定量检测试剂盒 25次
细胞谷胱甘肽S转移酶(GSHST)总活性比色法定量检测试剂盒20次 组织肌酸激酶同工酶混合型(CK-MB)活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒 20次
细胞谷胱甘肽S转移酶(GSHST)总活性酶动力比色法定量检测试剂盒20次 组织肌酸激酶同工酶肌肉型(CK-MM)活性比色法定量检测试剂盒 25次
细胞谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPX)活性比色法定量检测试剂盒20次 组织肌酸激酶同工酶肌肉型(CK-MM)活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒 20次
细胞谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPX)活性酶动力比色法定量检测试剂盒20次 组织肌酸激酶同工酶脑型(CK--BB)活性比色法定量检测试剂盒 25次
细胞谷胱甘肽合成酶活性比色法定量检测试剂盒20次 组织肌酸激酶同工酶脑型(CK--BB)活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒 20次
细胞谷胱甘肽还原酶活性比色法定量检测试剂盒20次 组织基质金属蛋白酶 125I同位素标记检测试剂盒 20次
细胞骨架(肌动蛋白单体;G-ACTIN)红色荧光染色试剂盒10次 组织基质金属蛋白酶 3H同位素标记检测试剂盒(不包括同位素) 20次
细胞骨架(肌动蛋白微丝;F-ACTIN)绿色荧光染色试剂盒10次 组织基质金属蛋白酶(MMP)总活性比色法定量检测试剂盒 20次
细胞冠状病毒3C类蛋白酶(SARS-CoV3C-likePROTEASE)活性荧光淬灭法定量检测试剂盒20次 组织基质金属蛋白酶(MMP)总活性荧光定量检测试剂盒 20次
细胞胱氨酸(cystine)含量比色法定量检测试剂盒20次 组织基质金属蛋白酶(MMP-1)活性比色法定量检测试剂盒 20次
细胞胱氨酸(cystine)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒20次 组织基质金属蛋白酶(MMP-1)活性荧光定量检测试剂盒 20次
细胞果糖-1,6-二磷酸醛缩酶(ALD)定量检测试剂盒20次 组织基质金属蛋白酶(MMP-10)活性比色法定量检测试剂盒 20次
细胞过氧化酶活性染色试剂盒50次 组织基质金属蛋白酶(MMP-10)活性荧光定量检测试剂盒 20次
细胞过氧化酶体分离试剂盒10次 组织基质金属蛋白酶(MMP-12)活性比色法定量检测试剂盒 20次
细胞过氧化氢(HYDROGENPEROXIDE)活性比色法定量检测试剂盒20次 组织基质金属蛋白酶(MMP-12)活性荧光定量检测试剂盒 20次
人血管内皮细胞完全培养基细胞过氧化氢(HYDROGENPEROXIDE)活性化学发光法定量检测试剂盒20次 组织基质金属蛋白酶(MMP-13)活性比色法定量检测试剂盒 20次(10样本)
细胞过氧化氢(HYDROGENPEROXIDE)活性荧光定量检测试剂盒20次 组织基质金属蛋白酶(MMP-13)活性荧光定量检测试剂盒 20次(10样本)
细胞过氧化氢酶(CATALASE)催化活性比色法定量检测试剂盒20次 组织基质金属蛋白酶(MMP-14)活性荧光定量检测试剂盒 20次(10样本)
本产品网址:/b2b/hdfsdk123/sell/itemid-.html一、液体基础培养基
内容载入中...
一、液体基础培养基
1.蛋白胨水
用于细菌靛基质试验;一般细菌培养和传代。
蛋白胨(或胰蛋白胨)10g,氯化钠 5g,蒸馏水1L。
将上述成分溶于水中,校正pH 至7.2,分装试管,每管2~3ml,置121℃灭菌15min备用。
[质量控制]
大肠埃希菌生长良好,靛基质阳性;伤寒沙门菌生长良好,靛基质阴性。
2.营养肉汤
一般细菌的增菌培养,加入1%的琼脂粉亦可作营养琼脂。
蛋白胨10g,牛肉膏3g,氯化钠5g,蒸馏水1L。
将上述成分称量混合溶解于水中,校正pH至7.4,按用途不同分装于烧瓶或试管内。经121℃灭菌15min,作无菌试验后冷藏备用。
[质量控制]
金黄色葡萄球菌、伤寒沙门菌、化脓性链球菌生长良好。
置冰箱3周内用完。
3.牛肉浸液培养基
细菌培养最基础的培养基,除用于一般细菌的培养外,又可以作营养琼脂及其它培养基的基础。
新鲜除脂牛肉 500g,氯化钠5g
蛋白胨10g,蒸馏水1L。
先将牛肉清洗,除脂肪、肌腱,并切块绞碎。称取500g置容器加入蒸馏水1L,搅匀后置冰箱过夜,次日煮沸加热30min,并用玻棒不时搅拌用绒布或麻布进行粗过滤,再用脱脂棉过滤即成。在过滤中加入蛋白胨10g、氯化钠5g溶解后,用氢氧化钠溶液校正pH至7.6~7.8,并加热煮沸10min,补充蒸馏水至1L,最后用滤纸过滤,呈清晰透明、淡黄色液体,经121℃15min灭菌备用。
根据用途不同可以制成营养肉汤,以此为基础制成其它培养基。如制作固体培养基,加入琼脂15 ~20g/L即可。
[质量控制]
金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、伤寒沙门菌、痢疾志贺菌等均生长良好。
置4℃冰箱内可以使用较长时间。
注:商品牛肉浸膏粉,一般使用量为3~5g/L。
二、固体基础培养基
1.营养琼脂
一般细菌和菌株的纯化及传种。 [配法]
蛋白胨10g,牛肉膏3g,氯化钠5g,琼脂粉(优质)12g,蒸馏水1L。
将上述成分(除琼脂外)溶于水中,校正pH 7.2~7.4后加入琼脂,煮沸溶解,根据用途不同进行分装,经121℃灭菌15min,倾注平板或制成斜面,冷藏备用。
[质量控制]
金黄色葡萄球菌菌落呈浅黄色; 痢疾志贺菌菌落无色;铜绿假单胞菌 菌落无色或浅绿色。
置4℃冰箱保存,2周内用完。
2.血琼脂培养基
一般病原菌的分离培养和溶血性鉴别及保存菌种。
pH 7.4~7.6牛肉浸液琼脂 100ml,脱纤维羊血(或兔血) 5~10ml。
将血琼脂基础经121℃灭菌15min,待冷却至50℃左右以无菌手续加入羊血,摇匀后立即倾注灭菌平皿内,待凝固后,经无菌实验冷藏备用。
[质量控制]
化脓性链球菌ATCC 19615生长良好,&-溶血;肺炎链球菌ATCC 6303生长良好,&-溶血;表皮葡萄球菌ATCC 12228 生长良好,不溶血。
置4℃冰箱,1周内用完。
3.巧克力琼脂培养基
主要用于嗜血杆菌的分离培养,亦可用于奈瑟菌的增殖培养。
鲜牛肉浸出液1L, 蛋白胨10g,
氯化钠5g,琼脂粉12g,无菌脱纤维
羊血或兔血100ml。
将上述成分(除兔血外)加热溶解,调pH至7.2,置121℃15min高压灭菌,待冷至约85℃,以无菌方式加入兔血,摇匀后置85℃水浴中,维持该温度10min,使之成巧克力色。取出置室温冷至约50℃,倾注平板或制成斜面备用。
[质量控制]
流感嗜血杆菌ATCC 10211、肺炎链球菌ATCC 6305生长良好,菌落典型。
置4℃冰箱,1周内用完。
4.胱氨酸胰化酪蛋白琼脂
常用于测定脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌以及营养要求较高细菌的糖发酵试验。
胱氨酸0.5g, 胰化酪蛋白20g,氯化钠5g,亚硫酸钠0.3g,琼脂3.5g,酚红0.0175g,蒸馏水1L。
将上述成分(酚红除外)混合溶解,调pH至7.2,加入酚红指示剂。分装试管,115℃灭菌15min。
用于测定糖发酵时,按需要加入各种糖溶液,将待检标本直接种于培养基管内,置35℃孵箱,18~24h观察结果。培养基由红色变为黄色为阳性,不变色为阴性。
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【求助】请教内皮细胞培养遇到的问题
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这个帖子发布于2年零28天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
问题已解决悬赏丁当:2
最近在养主动脉内皮细胞,一开始养的时候都很顺利,但最近细胞出现了问题:1.细胞突然长得很慢,以前都是2~3天长满就可以传代了,现在长了4~5天都还没满。尝试换了液,提高了血清浓度,生长速度没有发生变化;2.细胞形态有些奇怪,出现了一些像触角的结构,而且细胞壁外很多小泡和小颗粒贴着。见下图因此,请教园里的前辈,这到底是什么情况?我的培养基和血清都是新开且刚配好的(不过培养基由GICBO换成了Hyclone的)。不知是哪一步出现问题?我是直接放弃呢还是能有其他补救措施?谢谢大家。
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估计是更换了培养基的事情。不知道你有没有更换血清。可能要持续一段时间才能慢慢恢复过来。供参考。
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估计是更换了培养基的事情。不知道你有没有更换血清。可能要持续一段时间才能慢慢恢复过来。供参考。谢谢版主的回复,我可能叙述有疏漏,我换了培养基后继续养细胞和传代时是没有上述问题的;血清一直是gibco的,没有换过品牌。所以上面的问题困扰了我一段时间了····
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丁香园准中级站友
allchen_0 估计是更换了培养基的事情。不知道你有没有更换血清。可能要持续一段时间才能慢慢恢复过来。供参考。谢谢版主的回复,我可能叙述有疏漏,我换了培养基后继续养细胞和传代时是没有上述问题的;血清一直是gibco的,没有换过品牌。所以上面的问题困扰了我一段时间了····Gibco的血清越来越难买,也越来越贵,是不是卖给你的血清质量下降了?
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以下几种可能都是有的:1、致病性或繁殖力比较差的细菌污染(高倍镜下可见高速环形运动的小颗粒,菌),但是从楼主提供的图片看,这个可能性不大。2、培养基内混入了对细胞有毒性的物质,比如酒精等,可以更换新的培养基,但是不用再培养上面的细胞了,细胞已经有变化,救不回来了。3、细胞代次过高,出现了细胞老化现象(细胞形态改变明显)(细胞系的话基本不用考虑这个)。4、机械或化学损伤,比如传代时消化时间过久,离心时离心速度过高。根据楼主描述,考虑2、4可能性最大。建议从新陪培养基,从新复苏细胞。------祝顺利
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你这个细胞是从原代开始养的还是买的细胞株/系呢?细胞形态变化明显,有触角生成,这应该是细胞老化了;原代细胞培养代数有限,最终都会出现这种情况;可能原因是:1,细胞代数过高,细胞自行分化,进而老化;2,细胞生长的过密或传代时细胞铺的过稀;3,消化等损伤的不断累积;4,培养基的选择不合适,如该用哪种培养基?要不要补加因子?细胞老化后状态还能再调整回来,建议您重新复苏代数较低的细胞
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貌似是营养不够老化所致貌似细胞慢慢死亡的步骤估计新开的血清是假货,质量不行。
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热爱医学的小猪 Gibco的血清越来越难买,也越来越贵,是不是卖给你的血清质量下降了? 谢谢“热爱医学的小猪”的回复。我们实验室的血清是分装好后公用的,其他同学用了之后没有反映有问题,血清原来质量应该是没问题的。我后来得知刚使用的血清在70多度的温箱解冻(有人误把温度调高了,没有调回37度),不知是否对血清造成影响,但其他人也是用的同样血清,没有反映说有什么问题。
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zhang517068 以下几种可能都是有的:1、致病性或繁殖力比较差的细菌污染(高倍镜下可见高速环形运动的小颗粒,菌),但是从楼主提供的图片看,这个可能性不大。2、培养基内混入了对细胞有毒性的物质,比如酒精等,可以更换新的培养基,但是不用再培养上面的细胞了,细胞已经有变化,救不回来了。3、细胞代次过高,出现了细胞老化现象(细胞形态改变明显)(细胞系的话基本不用考虑这个)。4、机械或化学损伤,比如传代时消化时间过久,离心时离心速度过高。根据楼主描述,考虑2、4可能性最大。建议从新陪培养基,从新复苏细胞。------祝顺利 谢谢“zhang517068”的回复。估计是**作过程中某些动作或步骤有疏忽或错误,导致细胞受到不良刺激导致出现上述情况,我已经决定放弃这批细胞,重新配培养基和复苏细胞了,不过要扔掉6瓶小+2瓶大的细胞呀··伤心。
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cheff0412 你这个细胞是从原代开始养的还是买的细胞株/系呢?细胞形态变化明显,有触角生成,这应该是细胞老化了;原代细胞培养代数有限,最终都会出现这种情况;可能原因是:1,细胞代数过高,细胞自行分化,进而老化;2,细胞生长的过密或传代时细胞铺的过稀;3,消化等损伤的不断累积;4,培养基的选择不合适,如该用哪种培养基?要不要补加因子?细胞老化后状态还能再调整回来,建议您重新复苏代数较低的细胞 谢谢cheff0412的回复。买的是细胞株,应该不会老化;之前养的时候也是没有添加因子的,所以,最大的可能是我的操作中出现了细胞损伤或者不知名的污染吧··所以,我已经重新复苏细胞了·希望不要再出现这种问题·
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liupeng0215 貌似是营养不够老化所致貌似细胞慢慢死亡的步骤估计新开的血清是假货,质量不行。谢谢liupeng0215的回复,总之这批细胞应该无法使用了,已经去复苏细胞了···
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各位前辈,上述问题的原因终于找到了··就是换了不同的培养基(不同公司的RPMI 1640)导致我的细胞出现了上面的问题。我前天尝试用回以前的培养基(向其他同学借的)换液培养,今天发现细胞恢复了之前比较正常的形态了,那些小颗粒和像触角的结构都不见了···唉,浪费了整整3周和n瓶的细胞。其实我曾经也怀疑过是否因为换了培养基导致上述问题并就此问题请教了实验室的大师姐,她的回复是中途换不同公司的培养基没问题的,所以就没有进一步去深究了····现在想想,应该是要具体问题具体分析啊··
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LONZA CC-3156 EGM-2内皮细胞培养基
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几代的?细胞老了
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你好,我也准备养大鼠主动脉内皮细胞,也是买的细胞株,但是生物公司的培基太贵了,他们又没有建议可以替换的培基,我想问你用的是那家公司的培基,货号是多少?还有买回来的细胞培养他都建议是需要加细胞因子的,光细胞因子就有7、8种,刚看了一下你说你的没有加细胞因子,那没你的细胞长的怎么样呢?是不是不需要加呢?谢谢帮助,细胞下周就到了,现在心里很忐忑呢~~~
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你好,你的内皮细胞刚开始是什么形态?是贴壁后就是圆行么?
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最近在养主动脉内皮细胞,一开始养的时候都很顺利,但最近细胞出现了问题:1.细胞突然长得很慢,以前都是2~3天长满就可以传代了,现在长了4~5天都还没满。尝试换了液,提高了血清浓度,生长速度没有发生变化;2.细胞形态有些奇怪,出现了一些像触角的结构,而且细胞壁外很多小泡和小颗粒贴着。见下图因此,请教园里的前辈,这到底是什么情况?我的培养基和血清都是新开且刚配好的(不过培养基由GICBO换成了Hyclone的)。不知是哪一步出现问题?我是直接放弃呢还是能有其他补救措施?谢谢大家。
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热爱医学的小猪 Gibco的血清越来越难买,也越来越贵,是不是卖给你的血清质量下降了? 谢谢“热爱医学的小猪”的回复。我们实验室的血清是分装好后公用的,其他同学用了之后没有反映有问题,血清原来质量应该是没问题的。我后来得知刚使用的血清在70多度的温箱解冻(有人误把温度调高了,没有调回37度),不知是否对血清造成影响,但其他人也是用的同样血清,没有反映说有什么问题。
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zhang517068 以下几种可能都是有的:1、致病性或繁殖力比较差的细菌污染(高倍镜下可见高速环形运动的小颗粒,菌),但是从楼主提供的图片看,这个可能性不大。2、培养基内混入了对细胞有毒性的物质,比如酒精等,可以更换新的培养基,但是不用再培养上面的细胞了,细胞已经有变化,救不回来了。3、细胞代次过高,出现了细胞老化现象(细胞形态改变明显)(细胞系的话基本不用考虑这个)。4、机械或化学损伤,比如传代时消化时间过久,离心时离心速度过高。根据楼主描述,考虑2、4可能性最大。建议从新陪培养基,从新复苏细胞。------祝顺利 谢谢“zhang517068”的回复。估计是**作过程中某些动作或步骤有疏忽或错误,导致细胞受到不良刺激导致出现上述情况,我已经决定放弃这批细胞,重新配培养基和复苏细胞了,不过要扔掉6瓶小+2瓶大的细胞呀··伤心。
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cheff0412 你这个细胞是从原代开始养的还是买的细胞株/系呢?细胞形态变化明显,有触角生成,这应该是细胞老化了;原代细胞培养代数有限,最终都会出现这种情况;可能原因是:1,细胞代数过高,细胞自行分化,进而老化;2,细胞生长的过密或传代时细胞铺的过稀;3,消化等损伤的不断累积;4,培养基的选择不合适,如该用哪种培养基?要不要补加因子?细胞老化后状态还能再调整回来,建议您重新复苏代数较低的细胞 谢谢cheff0412的回复。买的是细胞株,应该不会老化;之前养的时候也是没有添加因子的,所以,最大的可能是我的操作中出现了细胞损伤或者不知名的污染吧··所以,我已经重新复苏细胞了·希望不要再出现这种问题·
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liupeng0215 貌似是营养不够老化所致貌似细胞慢慢死亡的步骤估计新开的血清是假货,质量不行。谢谢liupeng0215的回复,总之这批细胞应该无法使用了,已经去复苏细胞了···
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各位前辈,上述问题的原因终于找到了··就是换了不同的培养基(不同公司的RPMI 1640)导致我的细胞出现了上面的问题。我前天尝试用回以前的培养基(向其他同学借的)换液培养,今天发现细胞恢复了之前比较正常的形态了,那些小颗粒和像触角的结构都不见了···唉,浪费了整整3周和n瓶的细胞。其实我曾经也怀疑过是否因为换了培养基导致上述问题并就此问题请教了实验室的大师姐,她的回复是中途换不同公司的培养基没问题的,所以就没有进一步去深究了····现在想想,应该是要具体问题具体分析啊··
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LONZA CC-3156 EGM-2内皮细胞培养基
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几代的?细胞老了
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你好,我也准备养大鼠主动脉内皮细胞,也是买的细胞株,但是生物公司的培基太贵了,他们又没有建议可以替换的培基,我想问你用的是那家公司的培基,货号是多少?还有买回来的细胞培养他都建议是需要加细胞因子的,光细胞因子就有7、8种,刚看了一下你说你的没有加细胞因子,那没你的细胞长的怎么样呢?是不是不需要加呢?谢谢帮助,细胞下周就到了,现在心里很忐忑呢~~~
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你好,你的内皮细胞刚开始是什么形态?是贴壁后就是圆行么?
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