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细胞传代比例与哪些因素有关
最基本的就是细胞形态、数量、密度等,还有距离上次消化后,细胞长好的完整度时间.最好在其培养过程中,尽可能地去观察其形态,数量增长状况,及其液体的颜色变化,因为颜色的变化最直接的体现就是PH的变化.如果在显微镜下观察形态好、数量多、密度大的话,传代的比例可以多一点,反之亦然
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一般是按接种密度说的。10的4次方至5次方个细胞每毫升。如果细胞长的慢，要密度大些，反之，则小些
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实验二 ――细胞的传代培养
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各种细胞传代方法
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摘要 : 293细胞是转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞系，293T细胞由293细胞派生，同时表达SV40大T抗原，含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。
293细胞是转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞系，由293细胞派生，同时表达SV40大T抗原，含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。
大家注意293的一个重要特性：室温下不贴壁，但37度时可以重新贴壁。
我的293T细胞时老板从美国千里迢迢带回来的，当时正是冬天，老板把瓶子放在大衣口袋里在飞机上折腾了两天，等拿到已经看不到贴壁的细胞了。我以为在外面这么久细胞可能已经冻死了，肯定没救了。
但本着死马当活马医的想法在培养箱里放了一个星期，还是不见起色。正准备丢的时候，一次上网查T细胞的特性时看到：“室温下不贴壁，但37度时可以重新贴壁”。
如获至宝，赶紧跑到实验室在显微镜下仔细寻找，竟然真的发现少量，后来经过我们的细心呵护，这些细胞终于活了下来。通过这个也让我明白了一个道理，不到最后时刻不要轻言放弃。
言规正传，这个我按照老板在美国的习惯处理：
用90%的+10%的胎牛血清培养37度培养箱。
这个细胞增殖很快，大概2-3天就要传代。需要提醒的是：细胞贴壁很疏松，换液时注意不要用力摇晃培养瓶，否则有可能会把细胞摇下来。
细胞 容易消化，我用0.02 g/L蛋白酶E消化半分钟就可以了。要注意的是：消化下来的细胞容易成团，要吹打很久才能把细胞打开。否则传代后细胞会成团生长，不均匀，影响试验结果。
作者：weiyanjie 点击：次
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