真核生物t4dna连接酶说明书需什么供能

大肠杆菌DNA连接酶需要什么供能() A.GTP B.ATP C.NADPH供能 D.N_答案_百度高考
大肠杆菌DNA连接酶需要什么供能()
A.GTP B.ATP C.NADPH供能 D.NAD+
第-1小题正确答案及相关解析BTN130624-北京现货9°N DNA连接酶品牌-北京百奥莱博科技有限公司
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【简单介绍】
百奥莱博专业生产销售北京现货9°N DNA连接酶品牌,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
【详细说明】
规格:2500U产地:国产|进口英文名:9&N DNA Ligase编号:BTN130624品牌:百奥莱博产品简介:9 o N DNA连接酶能够催化磷酸二酯键的形成,使与同一互补靶 DNA 链杂交的两条相邻寡核苷酸链的 5" -磷酸末端和 3" -羟基末端通过磷酸二酯键相连。该酶在 45℃-90℃ 范围内均有活性。具体有下列特点:1.可在高温条件下,连接 DNA 链上的切刻位点2.具有极高的耐热性,与 PCR 反应条件兼容3.可用连接酶检测反应和连接酶链式反应对等位基因进行特异性检测4.通过 PCR 扩增掺入磷酸化寡核苷酸进行诱变反应条件:1 X 9 oN DNA连接酶反应缓冲液 [10 mM Tris-HCl,600 &M ATP,2.5 mM MgCl2,2.5 mM DTT, 0.1% Triton X -100 (pH 7.5 @ 25℃) ]。1X 9oN DNA连接酶反应缓冲液中,底物 DNA 和酶于 45℃ 温育 15 分钟,或者设定合适的反应条件使用热循环仪进行反应。连接反应通过加入含 50%甘油,50 mM EDTA 和溴酚蓝的混合物来终止。单位定义(粘性末端活性单位)1单位指 50 ul 反应体系中,45℃ 条件下,15 分钟能使 50% 的 1 ug BstEII消化的 & DNA 片段(12 bp 粘性末端)发生连接所需要的酶量。粘性末端活性单位相当于切口封闭单位。Buffer 成分:10 mM Tris-HCl,50 mM KCl,1 mM DTT,0.1 mM EDTA,200&g/ml BSA,50% Glycerol,10 mM ammonium sulfate注意事项:9 oN DNA连接酶不能代替 T4 DNA连接酶使用。该酶可以有效连接 12 bp 的互补片段,但却无法连接 4 bp 的互补片段(典型限制酶消化产物)。运输及保存:低温运输,-20℃保存,有效期一年。想要了解更多关于北京现货9&N DNA连接酶品牌的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联系。此外我公司还销售下面的产品:&SSC溶液,20&编号:BTN100405英文名称:SSC,20&规格:100mL产品简介:SSC全名是Saline Sodium Citrate。20&的SSC含3 M NaCl和0.3 M 柠檬酸钠,pH为7.0。它是一种在核酸分子杂交中广泛使用的溶液。其特点是:1.盐浓度接近饱和,可以非常方便地稀释到不同浓度,提供不同的杂交和洗涤严谨度。2.高盐浓度可以抑制微生物生长,便于长期放置。3.可以用于几乎所有核酸杂交试验。但缓冲能力比SSPE弱,如果需要稳定pH,最*使用SSPE。运输及保存:常温,有效期一年。&4&核酸液相杂交液编号:BTN131165英文名称:Nucleic Acid Hybridization Solution规格:10mL产品简介:本产品为4& 核酸液相杂交液,可专门用于核酸液相杂交实验,如差减杂交(SSH)等实验。运输及保存:低温运输,-20℃保存,有效期一年。&动物RNAOUT编号:BTN3070英文名称:Animal RNAOUT(TRIzol)规格:100mL/250mL产品简介:本产品是类似于TRIzol、基于异硫氰酸胍/酚/氯*提取方法的动物总RNA快速提取试剂,可用于从各种动物组织(包括白细胞)中快速提取总RNA。本产品主要特点是:1.操作简单快速,只要十分钟左右,比TRIzol更快捷。2.RNA质量高,OD260/OD280一般在1.9左右。3.一般不含用RT-PCR可以检测到的基因组DNA污染。4.适用于培养细胞、大部分动物组织和小部分植物组织。5.可用于微量样品,但需要加入助沉剂RNADOWN(CAT#:3120)。6.性价比高于进口同类产品。使用及效果:将50-100 mg左右的组织放在1 mL本产品中匀浆,加入0.2 mL自备氯*,振荡混匀后离心3分钟,转移上清液到新的离心管并加入等体积的自备异丙醇,混匀后室温离心3-10分钟,小心吸取上清并弃去,用1 mL 70%乙醇清洗两次,得到RNA沉淀。运输及保存:常温运输,4℃保存,有效期一年。北京现货9&N DNA连接酶品牌关键词:BTN&N DNA连接酶,9&N DNA Ligase&细胞凋亡诱导剂和抑制剂编号:BTNydyz23英文名称:Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor(规格:1瓶产品简介编号 名称 规格23-W(iNOS抑制剂)2 mg 710元23-0020 5-Fluorouracil(5-氟脲嘧啶)1mL23-0030 Ac-DEVD-FMK(Caspase 3 Inhibitor)20 &L23-0040 Ac-IETD-FMK(Caspase 8 Inhibitor)20 &L23-0050 Ac-LEHD-FMK(Caspase 9 Inhibitor)20 &L23-0060 Actinomycin D(基因转录抑制剂)1mg23-0070 AG 490(JAK抑制剂)5 mg23-0080 AICAR(AMPK激活剂)5 mg23-0090 BAY 11-7082(NF-&B抑制剂)2 mg23-0100 Brefeldin A(蛋白转运抑制剂)5 mg23-0110 Camptothecin( 喜树碱)100 &L23-0120 Canavanine , sulfate(iNOS抑制剂)100 mg23-0130 Carboxy-PTIO(一氧化氮清除剂)5 mg23-0140 Carboxy-PTIO(一氧化氮清除剂)50 mg23-0150 Ac-DEVD-CHO(Caspase 3抑制剂)100微升23-0160 Catalase(抗氧化酶)200 mg23-0170 Catechin hydrate(抗氧化剂)0.5 g23-0190 Cisplatin(DNA交联剂/细胞凋亡诱导剂)50 mg23-0200 Cycloheximide 50 mg23-0210 Cyclosporin A(免疫抑制剂/PP2B抑制剂)50 mg23-0220 Decitabine地西他滨5 mg23-0230 Doxorubicin( Adriamycin )阿霉素100 &L23-0240 Etoposide(依托泊苷/鬼臼乙叉苷)100 &L23-0250 Forskolin(腺苷酸环化酶激活剂)1 mg23-0260 Genistein(酪氨酸蛋白激酶抑制剂)25 mg23-0270 Glucosamine(胰岛素抵抗诱导剂)5 g23-0280 GSH(抗氧化剂)1 g23-0290 H-89 . 2HCL(PKA抑制剂)5 mg23-0300 H-89(PKA抑制剂)1 mg23-0310 HDAC抑制剂1 g23-0320 Hemoglobin(NO清除剂)1 g23-0330 Insulin 18 mg23-0340 Ionomycin(钙离子载体)250 nmol23-0350 KT5823(PKG抑制剂)50&g23-0360 L-Arginine(NO前体)5 g23-0370 L-Canavanine(iNOS抑制剂)20 mg23-0380 L-Citrulline(NO中间体)1 g23-0390 Leptomycin B(出核转运抑制剂)10&g23-0400 L-Glutathione(reduced form)(抗氧化剂)1 g23-0410 Lipoic acid(抗氧化剂)0.5 g23-0420 L-NAME(eNOS抑制剂)200mg23-0430 L-NMMA(总NOS抑制剂)5 mg23-0440 Lovastatin(HMG-CoA Reductase抑制剂)10 mg23-0450 LPS(TLR4激活剂)0.5 mg23-0460 LY 294002(PI3K抑制剂)1 mg23-0470 Metformin(LKB1-AMPK激活剂)1 g23-0480 MG-132(Proteasome抑制剂)1 mg23-0490 Monensin(蛋白转运抑制剂)100mg23-0500 NAC(抗氧化剂)2 g23-0510 Nicotinamide(Sirt1抑制剂)10 g23-0520 Nocodazole(有丝分裂抑制剂)5 mg23-0530 NS-2028(sGC抑制剂)1 mg22-0540 NS-398(COX-2抑制剂)1 mg23-0550 Nutlin-3(MDM2拮抗剂)1 mg23-0560 Okadaic acid钾盐(PP1和PP2A抑制剂)10&g23-0570 Paclitaxel( TAXOL )(紫杉醇)100 &L23-0580 PD 98059(MAPKK抑制剂)2 mg23-0590 PDTC(NF-&B抑制剂/抗氧化剂)1 g23-0600 Phorbol 12-myristate 13-acetate(PKC激活剂)1 mg23-0610 Pifithrin-a(p53抑制剂)5 mg23-0620 PMA/TPA(PKC激活剂)1 mg23-0630 Pyrrolidinedithioca rbamin acid.ammonium salt(NF-kB抑制剂/抗氧化剂)5 g23-0640 Rapamycin(FRAP/mTOR抑制剂)100&g23-0650 SB MAPK抑制剂)1 mg23-0660 Simvastatin(HMG-CoA Reductase抑制剂)10 mg23-0670 S-Methyl-ITU . sulfate(iN0S抑制剂)50 mg23-0680 SMT(iNOS抑制剂)100mg23-0690 SNP(NO供体)1 g23-0700 SOD(抗氧化酶)65 KU23-0710 Sodium Butyrate(HDAC抑制剂)1 g23-0720 Sodium orthovanadate(磷酸酯酶抑制剂)2 g23-0730 SP600125(JNK抑制剂)5 mg23-0740 Spermidine.trihvdrochloride(nNOS抑制剂)1 g23-0750 Staurosporine(PKC抑制剂)0.1 mg23-0760 Superoxide dismutase(抗氧化酶)2mg23-0770 TLR4激活剂2 ml23-0780 Tocopherol(抗氧化剂)2 g23-0790 Trequinsin(PDE III抑制剂)2 mg23-0800 Trichostatin A(HDAC抑制剂)100&g23-(MEK1/2抑制剂)1 mg23-0820 Vinblastine(长春新碱)100 &L23-0830 Wortmannin(PI3K抑制剂)0.5 mg23-0840 Z-VAD-FMK(Caspase Inhibitor)l mg运输及保存:低温运输,-20℃保存,有效期一年。北京现货9&N DNA连接酶品牌关键词:BTN&N DNA连接酶,9&N DNA Ligase&CpG 甲基转移酶(M.SssI)编号:BTN120511英文名称:CpG Methyltransferase(M.SssI)规格:100U产品简介:CpG甲基转移酶(M.Sssl)能识别双链DNA上的二核苷酸序列并甲基化其中的所有胞嘧啶残基(C5)本产品的主要用途是:1.阻止限制性内切酶的切割。2.CpG甲基化依赖性基因表达的研究。3.研究特异序列与DNA大沟的相互作用。4.改变DNA的物理特性。5.对DNA统一进行[3H] 标记。6.减少限制性内切酶的酶切位点数目,提高限制性内切酶的特异性。活性单位定义:1单位指在20&L反应体系中,37℃条件下,1小时能保护1&g&DNA不被BstUl限制性内切酶切割所需要的酶量。反应条件:1&Buffer +SAM [50 mM NaCl,10 mM Tris-HCl,10 mM MgCl2,1 mM DTT(pH .9@25℃)]。加入160&MS-腺苷甲硫氨酸(SAM,随酶提供),37℃温育。Buffer成分:储存Buffer:10 mM Tris-HCl(pH7.4),0.1 mM EDTA,1 mM DTT,200&g/ml BSA和50%甘油。贮存于-20℃。备注:1.CpG甲基转移酶(M.Sssl)可以特异性地模拟高等真核生物基因组的修饰模式,因而可用于研究高等级真核生物体内胞嘧啶甲基化的功能。与哺乳动物甲基转移酶不同,CpG甲基转移酶对未甲基化和半甲基化的DNA底物的甲基化效率相同,因此该酶是更为有效的DNA修饰工具。2.只要限制性内切酶的识别位点含有CG序列或此二核苷酸的重叠序列,CpG甲基转移酶均能有效地阻止其发挥切割活性。需要注意的是,CpG甲基转移酶使DNA甲基化,而E.coli 中的Mcr和Mrr的限制作用不受甲基化影响,故应使用Mcr-、Mrr-的E.coli 菌株作为转化的宿主菌。3.胞嘧啶残基被甲基化后,可影响DNA的物理特性,如:降低Z-DNA形成的自由能,增加DNA的螺旋程度,改变DNA十字形突出的动力学特性。由于在化学测序过程中联氨的反应性降低,5-甲基胞嘧啶的位置易于确定下来。4.MgCl2并不是必需的辅因子。Mg2+存在时,M.Sssl更倾向于分散甲基化,而不是连续甲基化,同时,M.Sssl还具有拓扑异构酶的活性。运输及保存:低温运输,-20℃保存,有效期一年。北京百莱博科技有限公司专业生产供应销售生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购。
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第一章 DNA的生物合成中国科学技术大学2001硕士生物化学入学考试试卷一、是非题:正确的画'√'错误的画'×',每小题1分共20分11.DNA连接酶能将两条游离的DNA单链连接起来。二、选择题:下列有任选编码项日,请将正确项日的编号写在答卷纸上。每小题1分,共30分。13. 用3H-UTP作同位素渗入实验,放射性活性可出现于什么上?(A)线粒体DNA (B)hnRNA (C)核仁 (D)核膜14.DNA连接酶在下列哪一个过程是不需要的?(A)DNA复制 (B)DNA修复 (C)DNA断裂和修饰 (D)DNA重组15.大肠杆菌DNA连接酶作用需要什么?(A)GTP (B)ATP (C)NADPH供能 (D)NAD+16.参与原核生物DNA捐伤修复的酶是什么?(A)DNA聚合酶 (B)DNA聚合酶II (C)DNA聚合酶I (D)拓朴异构酶三、 填空:每小题1分,共3 0分。22.DNA合成包括DNA复制,什么和什么?23.DNA复制两大特点:什么和什么?25.参与DNA切除修复的酶有什么,什么和什么?四、名词解释(每小题1分,共5分)1.端粒酶 中国科学技术大学硕士入学生物化学2002年一.是非题:请将正确的叙述用&+&表示,错误的用&-&表示,每小题1分,共20分。10.DNA连接酶能将两条游离的DNA单链连接起来。18.在E.Coli中,DNA连接酶所催化的反应需NAD+为反应提供磷酸键能。二.选择题:下列有任选编码项目,请将正确项目的编号写出来。每小题1分,共35分。29.原核生物的DNA聚合酶的特点是什么?a.DNA聚合酶I由7种,9个亚单位组成 b.DNA聚合酶Ⅱ有最强的核酸外切酶活性c.DNA聚合酶Ⅲ二聚体是真正起复制作用的酶 d.用4种脱氧核苷作底物30.用3H-UTP作同位素掺入实验,放射性可出现于什么地方?a.线粒体DNA b. 核膜 c,核仁 d.hnRNA北大生科院1988年生物化学 一,填空题41,DNA生物合成的过程( )。42,如由5'-脱氧尿嘧啶所引起的突变使一种嘧啶为另一种嘧啶所替换,这种转变叫做( )。北大1989年生物化学一,选择题2,拓扑异构酶I的功能为( )4,假如将15N标记的大肠杆菌在14N培养基种生长三代,提取其DNA 进行CsCl密度梯度离心,其15N,14N杂和DNA分子与纯14N-DNA分子之比为( )14,有一大肠杆菌突变株,其DNA聚合酶III的3'-5'核酸外切酶活性缺陷,它将表现出( )二,是非题5,原核生物DNA为半不连续复制,真核生物DNA为全不连续复制( )10,紫外线照射可引起DNA两条互补链上的T之间形成二聚体( )五,填空题8,核酸复制时,DNA聚合酶沿模板链--方向移动;转录时,RNA聚合酶沿模板链--方向移动;翻译时,核糖体沿模板链--方向移动。14,细菌的DNA连接酶以--为能量来源,动物细胞和T4噬菌体的DNA连接酶以--为能源。北大1991年生物化学
一. 名词解释复制子三. 填空9,线粒体DNA的复制为--------方式,大肠杆菌染色体的复制为--------方式,ΦX174环状染色体和噬菌体λDNA后期复制为--------方式,真核生物染色体DNA复制为--------方式四,是非题3,紫外线照射可使DNA互补双链间形成T^T( )5,DNA复制需要RNA引物,RNA复制则不需要引物( )9,当一种大肠杆菌突变型为DNA聚合酶III的3'-5'外切酶缺陷时,该突变型表现的特征为对紫外线敏感( )六.2.如果细菌环状染色体的复制是双向的,并且从固定的复制起点开始,每个复制叉以16um/min的速度移动,细菌染色体长1280um,完成整个染色体复制所需的时间是多少?当细菌在营养丰富的培养基中每20分钟分裂一次,也就是说第一轮复制尚未完成就开始第二轮复制,此时染色体有几个复制叉?北大1992年生物化学三 填空1. DNA的合成方向--------,RNA的转录方向--------,蛋白质合成方向--------四 是非题12.双螺旋DNA复制后,子代DNA不含亲代成分( )14.每个原核细胞染色体上只有一个复制起点,而每个真核细胞染色体是有多个复制起点. ( )五. 分析计算4.请分别指出(1)DNA复制(2)RNA复制(3)蛋白质合成三个过程的忠实性如何保持的 北京大学生物系1999年生物化学试题 一. 名词解释滚动环复制 三. 填空7,DNA复制过程中动物是以-----为能源,E. Coli 以-----为能源。12,E.Coli DNA Pol I 经酶切,得到大小片段,其中大片段具有-----酶活性和-----酶活性,小片段具有-----酶活性。五.计算3, DNA半保留复制。15NDNA在14N培养基上培养一代后,14NDNA与14N-15NDNA杂交分子之比是多少?2002年北大分子生物学试题一 综合概念题(20个,每题3分)DNA聚合酶Ι和DNA聚合酶Щ在功能上的至少三个不同点?RNA聚合酶没有校正功能而DNA聚合酶有,这种功能对DNA聚合有什么重要意义?北师大98生物化学一. 名词解释(2/22)半保留复制北师大99一.解释名词(3分/题)8.DNA的半不连续复制二.填空(1分/空)11.在真核生物中DNA复制后组装成核小体时的组蛋白是________的组蛋白.北师大2000一. 名词解释(2/20)6. DNA的半不连续复制二. 填空(1/20)20. 在真核生物中DNA复制的主要酶是____________25. DNA拓扑异构酶是与__________有关的酶三. 问答题(40分)3. 什么是遗传学中心法则?为什么说阮病毒的发现是对此法则提出了挑战?(5分)北师大2001二. 填空(30分)16. DNA复制,引发前体加___________构成__________1992北京医科大学试题硕士研究生入学考试 生物化学一、问答题 ⑵详述逆转录病毒是通过何种过程和哪些酶的作用,将其RNA整合到宿主细胞中的RNA中的。 2003年厦门大学研究生入学考试生物化学试题
一.填空题(共30分)6.核酸复制时,DNA聚合酶沿模板链(   )方向移动;转录时,RNA聚合酶沿模板链(  )方向移动;翻译时,核糖体沿模板链(   )方向移动。8.细菌的DNA连接酶以(  )为能量来源,动物细胞和T4噬菌体的DNA连接酶以(  )为能源。二.选择题(每题1分,共20分)6.吖啶染料可以引起下列哪种突变?A。转换
C。移码突变
D。嘧啶二聚体三.名词解释(每题3分,共15分)逆转录作用二.是非判断题(每题1分,共10分)5.紫外线照射可引起DNA两条互补链上的T之间形成二聚体。6.E.Coli DNA Pol Ⅰ经酶切,得到大小两个片段,其中大片段又称为Klenow片段。复旦生化98一. 是非题(1.5/27)17. 卡那霉素的作用为抑制DNA聚合酶的活性( )二填空题(共44分)2. DNA的半保留复制机理是由Meselson和Stahl用________和__________的办法,于1958年加以证明的复旦大学医学院2001年生物化学(专业)(硕士)一、名词解释13、逆转录复旦大学03年考研生化试题一、名词解释9、逆转录二、问答题4、写出DNA复制的酶及基本过程南昌大学2002年生物化学试题一:名解15'2中心法则南京大学2002年攻读硕士研究生入学考试试题 生物化学一. 是非题(对的画&+&,错的画&-&,每题1分,共20分。答错一题,倒扣0.5分,不答者不倒扣)18. DNA聚合酶I,II和III都属于多功能酶。二 选择题(以下各题均有一个正确答案,错答不倒扣,每小题1分,共18分)16
尿嘧啶糖苷酶的功能是(1)去除嘧啶二聚体
(2)切除RNA分子的尿嘧啶
(3)切除DNA分子中的尿嘧啶(4)切除DNA分子中的尿苷酸
(5)切除RNA分子中的尿苷酸三填充题7.(
)酶的缺乏可导致人患严重的复合性免疫缺陷症(SCID),使用(
)治疗可治愈此疾病8.体内DNA复制主要使用(
)作为引物,而在体外进行PCR扩增时使用(
)作为引物。10.维持DNA复制的高度忠实性的最重要的机制是(
)南京林业大学03年生物化学(A)试题六、DNA的复制需要RNA的参与。试简述被称作&引发&的RNA引物的合成过程。(24分) 南开大学硕士生考试生物化学试题(2000)一、判断题(请用&十&和&一&分别表示对错,15分)10、大肠杆菌DNA聚合酶可以以dUTP为底物。12、解旋酶(helicase)是拓扑异构酶的一种。二、填空题(26分)11、DNA聚合酶 I 所具有的三种主要催化活性分别为______、______、______。13、端粒酶由蛋白质和______两部分组成。14、大肠杆菌碱基错配修复系统所识别的核苷酸序列为______,被甲基化的碱基是______。15、RecA蛋白与
______结合后获得蛋白水解酶的活性。武汉大学生命科学学院2003年分子生物学一.下列名词翻译成中文,并简要解释 4*10 9.Replicon 10. semi-conservative replication 二.简答题 8*5 总计40分 2. 说说DNA损伤与DNA突变之间的区别和相互关系。 上海交通大学96生化一. 名词解释(1.5x20)18. Okazaki fragment19. SOS response 20. HIV上海交通大学97二. 选择题(1-10每题一分,10-20每题二分)5. DNA合成需要有一段RNA为引物,合成该引物的酶是____________a. DNA聚合酶b. 引发酶c. RNA聚合酶I
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b. DNA连接酶
c. DNA聚合酶 d. 逆转录酶三填空题(2X15)3.在E.coli中,诱导DNA复制的起始蛋白由基因_________编码,解旋酶由基因________编码,引发酶由___________编码,冈崎片断的延伸和连接由酶________完成.四,综合题(第一题12分,2-4每题6分,共30分)2. 已知DNA的序列为:W: 5'-AGCTGGTCAATGAACTGGCGTTAACGTTAAACGTTTCCCAG-3'C: 3'-TCGACCAGTTACTTGACCGCAATTGCAATTTGCAAAGGGTC-5'----------------------------------------&上链和下链分别用W和C表示,箭头表明DNA复制时,复制叉移动方向.试问:A. 哪条链是合成后滞链的模板?B. 试管中存在单链W,要合成新的C链,需要加入哪些成分?C. 如果需要合成的C链中要被32P标记,核苷酸重的哪一个磷酸基团应带有32P?D. 如果箭头表明DNA的转录方向,哪一条链是RNA的合成模板?上海交通大学2000三. 选择题(1X18多项选择)4. 参与E-coli染色体DNA复制有关的酶包括A. DNA聚合酶II
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