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SOS／Umu试验及其应用.pdf
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题名: 利用umu/SOS实验评价污灌土壤的遗传毒性
卷号: 1, 期号:6, 页码:关键词:
中文摘要: 利用umu/SOS显色实验评价北京市郊污水灌溉土壤中遗传毒性物质的积累,得到表征样品遗传毒性大小的β-半乳糖苷酶诱导活性(IU值).以达到阳性时诱导比率R=2(试验管IU值/对照管IU值)需要的土壤重量来反映土壤样品的相对遗传毒性.R值起初随着96孔板每孔土壤样品量的增大而增大,但在达到某一定值后呈现稳定,此时各土壤样品投加量均为每孔约含10mg土壤.用剂量效应曲线中线性段的斜率作为标准,判断出遗传毒性物质为性质相同的一类污染物,根据相关资料推测主要是由于多环芳烃类污染物积累.
部门归属: 环境水质学国家重点实验室
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利用umu_SOS实验评价污灌土壤的遗传毒性_禹果.pdf（155KB）----开放获取--
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禹果;肖睿洋;王春霞;王子健;.利用umu/SOS实验评价污灌土壤的遗传毒性,环境科学,):
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Items in IR are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.&Bibliographic record number: 20088
Hamer, Bojan
Assay system: SOS/umu-test and filamentous bacteria
Modern aspects in monitoring of environmental pollution in the sea / Mueller, Werner E.G. (ed). - Mainz : Akademie gemeinnutziger Wissenschaften zu Erfurt , .
Modern aspects in monitoring of environmental pollution in the sea
Location and date:
Mainz, Njema?ka, 07-08.11.1997
environment
This study was performed to introduce filamentous bacteria analysis after incubation and post-treatment reincubation (2 h) with dilution (1:5) in SOS/umu-test as a tool for discrimination false positive and/or negative results in presence of strong cytotoxic effect of environmental samples
Type of meeting:
Predavanje
Type of presentation in a journal:
Full paper
Type of peer-review:
No peer-review
Project / theme:
Original language:
Znanstveni
Research fields:
Printed media:HGPRT基因突变试验和SOS/umu显色试验在饮水消毒副产物遗传毒性风险评价中的应用研究--《华中科技大学》2010年博士论文
HGPRT基因突变试验和SOS/umu显色试验在饮水消毒副产物遗传毒性风险评价中的应用研究
【摘要】：
饮用水经消毒处理后产生大量消毒副产物,研究表明一些饮用水消毒副产物(DBPs)具有遗传毒性和／或致癌性,是影响饮水安全的重要因素。饮用水中DBPs成分繁多,均以混合暴露的形式作用于人体,且生物学效应远较单一物质复杂。运用长期动物致癌性试验及相应的人群流行病学调查等评价方法来判断DBPs混合暴露对健康的影响受到现有技术手段限制还存在诸多困难。因此,构建一套由多种短期遗传毒理学试验组成的检测体系,对饮用水中DBPs混合暴露的遗传毒性效应进行安全性评价具有重要现实意义。
应用HGPRT(次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶)基因突变试验和SOS/umu显色试验,对饮用水中具有遗传毒性或致癌性的13种DBPs的遗传毒性进行分析和验证,应用微板法对DBPs致靶细胞的细胞毒性进行研究,评价DBPs的细胞毒性与遗传毒性之间的关系,丰富该13种DBPs的毒理学资料。应用上述遗传毒理学试验方法,对加氯消毒前后的水样提取物的致突变性和遗传毒性特征进行分析和评价,探讨哺乳动物细胞HGPRT基因突变试验及SOS/umu试验在饮用水安全性评价中应用的可行性,为将其纳入到饮水安全性评价体系的合理性提供实验依据。
(1)应用微板法细胞毒性试验检测13种DBPs致中国仓鼠卵巢细胞CHO及沙门氏菌的细胞毒性。以多剂量水平的DBPs进行染毒,CHO细胞染毒时间为72小时,沙门氏菌染毒2小时,结束后检测吸光度值,计算相对阴性对照的CHO细胞或沙门氏菌的生存率。曲线拟合后,计算细胞毒性潜力值。应用HGPRT基因突变试验分析13种DBPs诱发CHO细胞基因突变的能力,每种DBPs均设四个染毒剂量、同时设一个阴性对照和一个阳性对照,染毒时间为4小时。绘制剂量-反应关系曲线,以斜率做为遗传毒性潜力值。应用SOS/umu显色试验检测13种DBPs对沙门氏菌DNA的损伤能力,每种DBPs均设立多水平的染毒剂量,染毒时间为2小时。以酶活性诱导比值超过2作为判定DBPs为遗传毒性阳性的标准,经曲线拟合后计算遗传毒性潜力,以此比较13种DPBs遗传毒性的强弱。
(2)分别采集1、5及7月武汉市某水厂以汉江水为水源的原水、消毒处理后的出厂水及管网末梢水,水样酸化(pH=2)后,以XAD-2大孔树脂提取水样有机污染物。在CHO/HGPRT试验中,水样有机提取物设四个染毒剂量,分别相当于1.2、6、30及150ml水样／ml培养液,染毒时间为24小时。而SOS/umu显色试验的染毒剂量范围则相当于1-2000ml水样／ml培养液,染毒时间为2小时。通过HGPRT基因突变频率的改变及计算SOS/umu的遗传毒性潜力值评价水样有机提取物遗传毒性的强弱。
结果：(1)根据细胞毒性潜力值的大小,13种DBPs致CHO细胞毒性强弱的排序为：二溴乙腈(DBN)碘乙酸(IA)溴氯乙腈(BCN)溴乙酸(BA)3-氯-4-(二氯甲基)-5羟基-2(5氢)-呋喃酮(MX)二氯乙腈(DCN)氯乙腈(CN)三氯乙腈(TCN)二溴乙酸(DBA)氯乙酸(CA)水合氯醛(CH)二氯乙酸(DCA)三氯乙酸(TCA)。13种DBPs中有9种可明显诱导CHO细胞的HGPRT基因突变,它们对CHO细胞的遗传毒性潜力排序为：MX DBN IA DBA DCN TCNBACADCA,有4种DBPs包括BCN、CN、CH和TCA,在CHO/HGPRT试验中未检测到致突变作用。
(2)13种DBPs致沙门氏菌细胞毒性强弱的排序为MX IA DBN BCN BA
TCN DCN CA DCA DBA CN TCA CH。13种DBPs中有8种可明显诱导沙门氏菌的SOS反应,它们对沙门氏菌的遗传毒性大小排序为：MXDBNIA BCNBATCNDBADCA,有5种DBPs包括CN、DCN、CA、TCA和CH在SOS/umu显色试验中未检测到遗传毒性作用。
(3)在连续采集的三个月份水样中,1月的出厂水及末梢水在最高染毒剂量(150ml／ml)时,可致CHO细胞的HGPRT基因突变频率显著升高。5月的末梢水在30ml/ml的剂量时即可检测到致突变性。同时,在最高的染毒剂量下,1月的出厂水及末梢水、5月的末梢水的致突变性均强于各自原水的致突变性。7月的水样在HGPRT突变试验中呈阴性结果。在SOS/umu试验中,除5月的原水为阴性外,其余水样均检测到致沙门氏菌的遗传毒性作用。遗传潜力值大小排序为：出厂水末梢水源水(1、5月)；源水末梢水出厂水(7月)。
CHO/HGPRT基因突变试验和SOS/umu显色试验可有效检测13种DBPs及水样提取物的遗传毒性作用,并可对其遗传毒性的强弱进行量化。13种DBPs对CHO细胞及沙门氏菌的细胞毒性大小与其遗传毒性强弱高度相关。通过用健康风险等级较高的DBPs对上述方法进行验证和对加氯消毒前后水样的遗传毒性的分析和评价,证实结果有较高的可信度。可以考虑将这两种试验方法纳入到饮用水的安全性评价体系中。
【关键词】：
【学位授予单位】：华中科技大学【学位级别】：博士【学位授予年份】：2010【分类号】：R114【目录】：
英文缩略语词汇表7-9
ABSTRACT12-15
第一部分 饮用水中13种DBPS致哺乳动物细胞及沙门氏菌遗传毒性损伤效应的检测19-46
一、微板法及HGPRT基因突变试验检测13种DBPS致CHO-K1的细胞毒性及遗传毒性19-33
(一) 材料和方法19-24
(二) 结果24-29
(三) 讨论29-33
二、微板法及SOS/UMU试验检测13种DBPS致沙门氏菌的细胞毒性及遗传毒性33-46
(一) 材料和方法33-36
(二) 结果36-42
(三) 讨论42-46
第二部分 应用HGPRT基因突变实验和SOS/UMU试验评价饮用水提取物的遗传毒性46-57
(一) 材料和方法46-48
(二) 结果48-54
(三) 讨论54-57
创新点57-58
参考文献58-65
参考文献74-79
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