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请高手帮我解答如图所示各个元件的作用！我最不能理解的是：C2是怎么充电的?它充好电后为何又会向R2那端放电？如果把图里的R2，C1,R3和C2去掉，减小R1和R4的阻值，让R4输出的电流达到触发可控硅的触发电流，可控硅会导通吗？会一直导通还是导通后过一会就断开？求解。。。
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C2这端接受的是交流电压，电容通过充放电，可以让交流电通过。除掉四个元件，会一直导通
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扫描下载二维码CNGC2和PEPR2调节拟南芥细胞内外钙动态变化的分子机理及生理功能研究--《内蒙古大学》2016年博士论文
CNGC2和PEPR2调节拟南芥细胞内外钙动态变化的分子机理及生理功能研究
【摘要】：钙(Calcium,Ca)是植物生长发育的大量元素,也是重要的第二信使。本实验以模式植物拟南芥(Arabidopsis thaliana, At)为实验材料,研究Ca2+分布和Ca2+信号相关的两方面内容。第一部分研究内容是：在高钙环境下,缺失环核苷酸门控离子通道2(Cyclic nucleotide-Gated Channel 2, CNGC2)基因cngc2突变体的叶片质外体Ca2+积累对其生理功能的影响。第二部分研究内容是：拟南芥短肽受体2(AtPeptide Receptor2, AtPEPR2)介导拟南芥短肽(AtPeptide 1, AtPep1)诱导的根中细胞质Ca2+升高,进而抑制谷氨酰胺外排基因(Glutamine Dumper, GDU)表达。(1)Ca是所有细胞生长发育的必需矿质元素,对于植物细胞而言,植物根细胞吸收Ca2十,并通过木质部向上运输到叶片中,进而在叶片中分布,对其分布机理的研究甚少。我们对缺失CNGC2基因的cngc2突变体进行研究,发现在0.1mM Ca2+浓度下,cngc2与野生型植物(Columbia ecotype, Col-0)长势一样。在10 mM Ca2+浓度下,当cngc2从根系吸收更多的Ca2+后,cngc2叶片细胞外空间Ca2+外溢,而后导致活性氧积累,成熟叶片边缘黄化,出现死亡斑点和生长受抑制的现象,并且死亡斑点主要分布在小叶脉周围区域。通过构建启动子连接p-葡萄糖苷酶报告基因(Glucuronidase,GUS)进行组织特异性分析,发现拟南芥CNGC2基因主要表达在叶片小叶脉周围区域。通过原子吸收方法测定总Ca含量,发现cngc2突变体比Col-0野生型叶片总Ca含量低,但细胞壁中与果胶结合的Ca含量高于Col-0,这也说明cngc2更多的Ca2+积累在质外体。当前的报道表明cngc2突变体在非毒力病原菌侵染下没有超敏反应(Hypersensitive Response,HR),我们使用OD 600=0.02的avr DC3000 RPM1+菌液侵染生长在不同Ca2+浓度的水培液中的植物,发现在0.1 mM Ca2+浓度下cngc2有HR反应；10 mM Ca2+浓度处理3天,cngc2没有HR反应,表明cngc2没有HR反应是由于Ca2+外溢积累在质外体导致的。Cg2+外溢还导致了cngc2暗周期结束后淀粉的积累,说明Ca2+外溢影响了光合作用暗周期淀粉的降解。(2)拟南芥新型短肽受体1(AtPeptide Receptorl, AtPEPR1)和AtPEPR2是富集亮氨酸受体蛋白激酶家族的成员,能够结合一组由短肽前体(AtPROPEP)基因编码的内源肽AtPep So前人的研究发现AtPEPR2在AtPep1介导的拟南芥叶片初级免疫反应中扮演着重要角色。在本研究中,我们发现缺失AtPEPR基因的缺失型突变体atpeprl和atpepr2有短根表型,AtPEPR1和AtPEPR2部分介导了AtPep1抑制根生长的表型,且在此过程中AtPEPR2的作用强于AtPEPR1. AtPep1引起的细胞质Ca2+浓度的升高部分由AtPEPR1和AtPEPR2介导,AtPEPR2在介导Ca2+浓度升高的过程起主要作用。为了研究AtPEPR2参与的受AtPep1诱导而转录的基因,我们对Col-0和atpepr2进行含有AtPep1处理一个小时和不含有AtPep1处理的根转录组表达谱分析,结果显示AtPep1诱导表达的基因其中75%是由AtPEPR2介导的,2个显著诱导的基因部分依赖于细胞外Ca2+的升高。在筛选基因过程中,谷氨酰胺外排基因引起了我们的重视,拟南芥基因组编码7个AtGD Us,该基因编码氨基酸外排转运体。AtPepl完全依赖AtPEPR2调控的下调基因程度最大的10个基因中,AtGDU2,3,5占其中3个。通过AtGDU3 GUS活性分析,AtPep1处理强烈抑制了根中AtGDU3的活性,螯合细胞外Ca2+能够缓解AtPep1对AtGDU3的抑制作用。过量表达AtGDU3拟南芥具有短根表型,但对AtPep1抑制短根现象不敏感。总体来说,本研究揭示了AtPEPR2在AtPep1根延伸以及根信号转导作用中扮演着重要角色。综上所述,本实验一方面研究植物叶片对Ca2十的分布,为Ca2十分布与Ca2+吸收的关系研究打下基础；另一方面,AtPep1是从拟南芥体内提取出来的内源短肽,外源加入纳摩尔级浓度的AtPep1通过AtPEPR2抑制拟南芥根生长,说明AtPep1可能是一种新型激素,参与植物生长和发育。
【关键词】：
【学位授予单位】：内蒙古大学【学位级别】：博士【学位授予年份】：2016【分类号】：Q943.2【目录】：
摘要4-7ABSTRACT7-14英文缩写表14-15第一章 文献综述15-35 1.1 钙在植物体内的重要性15-20
1.1.1 钙是植物必需的营养物质15-17
1.1.2 钙是植物体内重要的第二信使17-20 1.2 植物体内钙的储存部位20-22
1.2.1 储存在植物质外体中的钙20-21
1.2.2 储存在植物细胞器中的钙21-22 1.3 参与钙流动的转运蛋白22-25
1.3.1 参与钙流出细胞质的转运蛋白22-23
1.3.2 参与钙进入细胞质的转运蛋白23-25 1.4 CNGC通道蛋白研究进展25-32
1.4.1 拟南芥CNGC家族成员及结构25-27
1.4.2 环化核苷酸cNMP简介27-28
1.4.3 CNGC家族成员的研究进展28-32 1.5 拟南芥叶脉发育模式32 1.6 水母发光蛋白检测细胞内钙的理论方法32-33 1.7 研究目的和意义33-35第二章 CNGC2介导拟南芥叶片Ca~(2+)的分布35-79 2.1 引言35 2.2 材料35-36
2.2.1 实验材料35
2.2.2 菌种与质粒35
2.2.3 实验试剂35-36 2.3 实验仪器36-37 2.4 实验试剂的配置37-42 2.5 实验方法42-51
2.5.1 拟南芥的培养42-43
2.5.2 植物总钙和总镁含量的提取和测定43
2.5.3 水溶性钙、果胶钙和草酸钙的提取和测定43
2.5.4 细胞质内钙离子的测定方法43-44
2.5.5 DAB染色过程44
2.5.6 Trypan blue染色过程44
2.5.7 GUS染色方法44
2.5.8 CFDA韧皮部运载实验方法44-45
2.5.9 荧光染料观察细胞外钙的实验方法45
2.5.10 avrDC3000 avrRPM1~+注射叶片实验45
2.5.11 离子渗透率测定45-46
2.5.12 淀粉染色过程46
2.5.13 拟南芥叶片中cAMP的提取和测定46
2.5.14 常用分子生物学实验方法46-50
2.5.15 拟南芥转基因植株的筛选50-51 2.6 引物列表51-53 2.7 实验结果与分析53-76
2.7.1 AtCNGC2参与叶片钙分布机理的探究53-63
2.7.2 高钙环境下cngc2-1总钙含量低于Col-063-69
2.7.3 高钙诱导cngc2-1叶片活性氧的积累和细胞的死亡69-70
2.7.4 CNGC主要表达在小叶脉周围区域70-71
2.7.5 cngc2-1在高钙浓度下影响了光合作用暗反应中淀粉的消耗71-73
2.7.6 cngc2-1韧皮部运输功能正常73-74
2.7.7 cngc2-1在低钙浓度下具有HR反应74-75
2.7.8 cngc2-1在高钙浓度下积累更多cAMP75-76 2.8 讨论和结论76-79第三章 拟南芥根中短肽受体AtPEPR2介导短肽AtPEP1诱导细胞质Ca~(2+)浓度升高,进而抑制Glutamin Dumper基因表达79-99 3.1 引言79-80 3.2 实验材料80 3.3 实验方法80-84
3.3.1 MS培养基的配置80
3.3.2 植物材料的培养80
3.3.3 GUS染色方法80-81
3.3.4 根细胞质内钙离子的测定方法81
3.3.5 转录组芯片实验和数据分析81-82
3.3.6 植物RNA的提取82-83
3.3.7 RNA反转录成cDNA83
3.3.8 实时定量PCR83
3.3.9 定量引物列表83-84 3.4 实验结果84-96
3.4.1 拟南芥atpepr突变体有短根表型84-85
3.4.2 AtPEPR2部分介导了AtPeps引起的根细胞质中钙浓度的升高85-86
3.4.3 atpepr突变体短根表型与钙浓度无关86-87
3.4.4 AtPep1诱导根中转录组变化大部分依赖于AtPEPR287-91
3.4.5 AtPEPR2参与AtPep1调控的谷氨酰胺外排基因下调91-93
3.4.6 AtPep1抑制AtGDU3启动子活性依赖于细胞外钙浓度93-94
3.4.7 过量表达AtGDU3拟南芥的根对AtPepl的生长表型94-96 3.5 讨论与结论96-99参考文献99-108致谢108-109攻读博士学位期间发表的学术论文目录109
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【参考文献】
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这个电路图的C1 C2 R1 R2有什么用如图,不要太笼统
雪簞饷廂裏恭瘕
作用：C1：电容降压.R1：断电时该电阻负责释放电容残存的电荷.C2：滤波,使整流后的直流电平滑许多.R2：限流,限制LED电路的电流不能过高.
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