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不用试剂盒，也不用破细胞璧的酶，怎么抽提YEAST GENOMIC DNA?可是我也没有玻璃珠？ em16: em16: em16:
Re:酵母总DNA 如何提取？
酵母细胞壁很难破碎的，酶法或机械破碎法都可以（建议自制或购买一点玻璃主，不贵的），提供以下方法，仅供参考：1. 将待抽提总DNA的酵母菌接入YEPD液体培养基，30℃摇床250rpm培养过夜。2. 室温收集菌体，去净上清后用0.5ml无菌水重悬菌体。3. 离心去净上清，在涡旋振荡器上快速打散菌体。4. 菌体加入200μl破菌缓冲液、0.3g酸洗玻璃珠、200μl苯酚/氯仿/异戊醇，在涡旋振荡器上高速振荡3min。5. 加入200μlTE缓冲液，涡旋振荡器上快速振荡3min，10000rpm离心5min，将水相转至另一离心管中。6． 往水相中加入1ml无水乙醇，充分混匀，沉淀DNA。7． 12,000rpm离心10min，去净上清，沉淀用0.4mlTE溶解，加入1μl 1mg/ml 的RNA酶，37℃温育10min。8． 加入10μl 4M NH4Ac、1ml无水乙醇混匀，12,000rpm离心5min，去净上清，沉淀干燥后用100μl TE溶解。欢迎探讨交流！！
Re:酵母总DNA 如何提取？
用酶和玻璃珠破除酵母细胞壁使之裂解释放基因组DNA的方法目前使用的最为广泛！！分子克隆上也是这么介绍的，不过相对来说，玻璃珠法比酶法要简单，酸洗过的玻璃珠很多公司都有的卖！：）其实楼主寻求的方法还是有的，就是用液氮和石英砂的方法破除细胞壁，我也是用的这个方法，提取的基因组DNA可用于后续的分子生物学实验！！
横扫一切全无敌
Re:酵母总DNA 如何提取？
呵呵，都挺忙的。 上传我的文档
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人类细胞系基因表达中校正因子的选择
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