血清谷丙转氨酶(SGPT)的测定 - 生化分子 - 生物秀
标题: 血清谷丙转氨酶(SGPT)的测定
摘要: 【目的和要求】1
了解谷丙转氨酶活性测定的基本原理。2
掌握谷丙转氨酶活性测定的方法。【实验原理】血清谷丙转氨酶(SGPT)能催化丙氨酸和α-酮戊二酸生成谷氨酸和丙酮酸。丙酮酸在酸性条件下与2，4－二硝基苯肼可缩合生成丙酮酸二硝基苯腙，其在碱性条件下呈现棕红色，在520nm处有……
【目的和要求】
1. 了解谷丙转氨酶活性测定的基本原理。
2. 掌握谷丙转氨酶活性测定的方法。
【实验原理】
血清谷丙转氨酶(SGPT)能催化丙氨酸和&-酮戊二酸生成谷氨酸和丙酮酸。丙酮酸在酸性条件下与2，4－二硝基苯肼可缩合生成丙酮酸二硝基苯腙，其在碱性条件下呈现棕红色，在520nm处有最大吸收。根据颜色的深浅，通过比色法可计算出酶活性。GPT在肝脏中含量最多，当某种药物对肝脏早晨损害或病毒肝炎的急性阶段，由于肝细胞受损， GPT就释放到血液中，使血清中此酶水平明显升高。因此测定血清谷丙转氨酶的活性可作为诊断肝病的重要指标。
【实验和器材】
1. 0.1M磷酸盐缓冲液（pH7.4）
2. 丙酮酸标准液（2&Mol/ml）
准确称取22mg纯净丙酮酸钠，用0.1M pH7.4磷酸盐缓冲液定容至100ml。
3. 谷丙转氨酶底物溶液
准确称取&－酮戊二酸29.2mg（2mM）， DL－丙氨酸1.78g（200mM），溶于50ml 0.1M pH7.4磷酸盐缓冲液中，用20% NaOH调pH为7.4，然后加以上磷酸盐缓冲液至100ml，加几滴氯仿防腐，冰箱保存可放一周。
4. 2，4－二硝基苯肼溶液（1mM）称取2，4－二硝基苯肼20mg，置于100ml容量瓶中，先用10ml浓盐酸溶解后，再加水稀释到刻度。
5. 0.4M氢氧化钠。
（二）器材
及架， 0.1、0.5 、1及5ml吸量管，恒温，722型分光光度计。
【实验方法】
（一）标准曲线绘制
取6支干燥洁净的试管，按下表操作：
以吸光度值为纵坐标，酶活力单位数为横坐标，在坐标纸上绘制标准曲线。
（二）血清SGPT活力测定
取4支干燥洁净试管，按下表操作：
【注意事项】
1. 在测定SGPT时，应事先将底物、血清在37℃中保温，然后在血清管中加入底物，准确记时。
2. 标准曲线上数值在20~500U是准确可靠的，超过500U时，需将样品稀释。
3. 只能作用于&－L－氨基酸，对D－氨基酸无作用。实验室多用&－DL－氨基酸（较L－氨基酸价廉），若用L－氨基酸，则用量减半。
4. 溶血标本不宜使用，因血细胞中活力较高，会影响测定效果。
5. 样品的测定需在显色后30分钟内完成。
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血清谷丙转氨酶活性的测定
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指导意见：肝炎引起的血清谷丙转氨酶升高。肝炎患者经常会出现血清谷丙转氨酶升高的现象，谷丙转氨酶是肝细胞中的一种酶，如果血清谷丙转氨酶升高，说明乙肝患者肝细胞受损破损，病情恶化，这种情况是必须要到正规
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向全国15万专家即时咨询临床上一般用什么方法测定血清谷丙转氨酶
枫默鬼哥籦g
你抽血进行体检的时候就可以了,用生化分析仪进行分析处理,含量多少就有结果了啊.我们体检中心是东芝的全自动生化分析仪做肝功能项目的时候其中一项就是谷丙转氨酶,它是肝功能最敏感的一项指标.
那我想问一下你们所用的那个试剂盒的名称是什么？还有在那个公司买的？价格是多少？谢谢，是用于实验设计的
我不是具体检验科的医生，这个无法回答你，你要真想知道的话，我可以帮你问一下。不过价格医生应该也不很清楚，你找到试剂的种类直接应该能搜索到相关的价格什么的。我的QQ，后续什么问题可以给我留言。
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如何进行血清谷丙转氨酶（SGPT）的测定
血清谷丙转氨酶(SGPT)能催化丙氨酸和&-酮戊二酸生成谷氨酸和丙酮酸。丙酮酸在酸性条件下与2，4－二硝基苯肼可缩合生成丙酮酸二硝基苯腙，其在碱性条件下呈现棕红色，在520nm处有最大吸收。根据颜色的深浅，通过比色法可计算出酶活性。GPT在肝脏中含量最多，当某种药物对肝脏早晨损害或病毒肝炎的急性阶段，由于肝细胞受损， GPT就释放到血液中，使血清中此酶水平明显升高。因此测定血清谷丙转氨酶的活性可作为诊断肝病的重要指标。【实验试剂和器材】（一）试剂1. 0.1M磷酸盐缓冲液（pH7.4）2. 丙酮酸标准液（2&Mol/ml）准确称取22mg纯净丙酮酸钠，用0.1M pH7.4磷酸盐缓冲液定容至100ml。3. 谷丙转氨酶底物溶液准确称取&－酮戊二酸29.2mg（2mM）， DL－丙氨酸1.78g（200mM），溶于50ml 0.1M pH7.4磷酸盐缓冲液中，用20% NaOH调pH为7.4，然后加以上磷酸盐缓冲液至100ml，加几滴氯仿防腐，冰箱保存可放一周。4. 2，4－二硝基苯肼溶液（1mM）称取2，4－二硝基苯肼20mg，置于100ml容量瓶中，先用10ml浓盐酸溶解后，再加水稀释到刻度。5. 0.4M氢氧化钠。（二）器材试管及试管架， 0.1、0.5 、1及5ml吸量管，恒温水浴，722型分光光度计。【实验方法】（一）标准曲线绘制取6支干燥洁净的试管，按下表操作：以吸光度值为纵坐标，酶活力单位数为横坐标，在坐标纸上绘制标准曲线。（二）血清SGPT活力测定取4支干燥洁净试管，按下表操作：血清谷丙转氨酶(SGPT)的测定【注意事项】1. 在测定SGPT时，应事先将底物、血清在37℃水浴中保温，然后在血清管中加入底物，准确记时。2. 标准曲线上数值在20~500U是准确可靠的，超过500U时，需将样品稀释。3. 转氨酶只能作用于&－L－氨基酸，对D－氨基酸无作用。实验室多用&－DL－氨基酸（较L－氨基酸价廉），若用L－氨基酸，则用量减半。4. 溶血标本不宜使用，因血细胞中转氨酶活力较高，会影响测定效果。5. 血清样品的测定需在显色后30分钟内完成。
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