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细胞的运输
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细胞的运输
导读：回复原先培养状态细胞瓶要灌满培养基，否则运输途中瓶内气泡的运动对细胞有负影响，细胞只要密封和保证无菌，运输途中横放竖放均行，（说不上理由）细胞到实验室后最好置温箱几个小时（横放为好，让尽量多的细胞贴壁），细胞在完全培养基中才能正常生长啊，收起来可用来培养该细胞，因为才买回的细胞比较脆弱，可能会影响细胞形态，所以先用他们的培养基把细胞培养着，可以在细胞培养到可以传代的时候，这样可以室温运输，细胞
1，培养瓶装满培养液2，拧紧瓶盖，封口膜封口3，贴身放置，尽量减少震动4，24小时内，回复原先培养状态细胞瓶要灌满培养基，不要留空气，否则运输途中瓶内气泡的运动对细胞有负影响。细胞只要密封和保证无菌，运输途中横放竖放均行。不过我觉得竖放更安全些。（说不上理由）细胞到实验室后最好置温箱几个小时（横放为好，让尽量多的细胞贴壁），给其缓冲的时间。待回温后可以吸出多余的培养基，继续正常培养。装满培养瓶的培养基要含有胎牛血清或者小牛血清吗？ 当然是啦。细胞在完全培养基中才能正常生长啊。等回实验室后，取出的培养基不要丢弃，收起来可用来培养该细胞。因为才买回的细胞比较脆弱，如果立刻换培养基（就是同一种培养基，两个实验室配的也有差异），可能会影响细胞形态。所以先用他们的培养基把细胞培养着，等有一定的规模再用自己的培养基。 可以在细胞培养到可以传代的时候，加入一定量的新鲜培养液，密封瓶口，用锡箔纸包好，这样可以室温运输，几天内没什么问题。把培养基加满至瓶颈部，然后把瓶口用封口膜封好。还有一点比较重要，细胞怕热，现在天气这么热，你最好路上坐有空调的车，同时把细胞放在贴身的口袋。我上个月就是这样从北京带了瓶细胞回合肥，细胞没有出现任何问题。悬浮的细胞在生长情况较好时，细胞满度达到60%左右，换液，直接用培养基加至培养瓶颈部，但要留一点空气。把口封好，让快递公司运输。一般情况下几天内细胞不会有问题。我购买的好几种细胞都是这样运来的，培养后也没有问题。远途引入细胞一般不用冻存的，如果途中不能保温，冻存液化了，时间长了细胞会受影响的。当然如果细胞很特殊，则另当别论。三种方法自选：1，如果复苏的，瓶子装满培养液，封口膜封口，快递。2，如果冻存的，找大一点泡沫箱（外包纸箱），能装下7～10公斤干冰，胶带纸密封保温箱，中铁快运。3，如果可以，亲自取去，包装方法用1和2（如果坐火车的话），坐飞机见下面解释 1.如果是短途，可以将活细胞加于15ML管里，加满培基密封。揣在怀里就行了。^_^2.如果是长途，那就要在管外套保温杯（好像也有那种专门的杯子把管固定在杯中），再密封。国内、国际长途运输需要特制的液氮容器（符合航空管制要求），ATCC进口的细胞株全部是干冰冻存后运输，报关风险极大！原代细胞不推荐用干冰冻存运输。复苏后，揣在怀里应该没啥问题。冻存的就用小的液氮罐装冻存
管. 楼主上面的观点：取出后放在冰盒中坐车1.5小时回来，会不会影响细胞活性？是肯定 不对的，冰盒里达不到液氮的温度，细胞的复苏关键在于要快速，也就是说从液氮中取出后必须马上复苏，做一个半小时的车细胞肯定都不行了， 而楼上的说法也欠妥，细胞的贴壁需要在一个相对静态的环境，一个半小时的路程难免有摇晃，对细胞的贴壁有影响，特别有些细胞本身就不容易贴壁，所以我建议先在原地复苏然后等细胞完全贴壁后在行运输，这样最安全，而且即便是在没有培养基的环境下细胞也能在一个半小时的情况下安全存活！其实你不用每天换液的，因为细胞对新培养液都要有一个适应的过程，你的细胞要是长的缓慢，你两三天换一次液就可以的，这样可以避免环境变化太大对细胞生长不利。 因为没有使用缓冲系统，细胞代谢旺盛时产生酸性物质PH是很容易变酸的。如果你是放在5%二氧化碳气体环境中，那么加入碳酸氢钠作为缓冲体系，这样可以更好地维持PH的稳定。不加HEPES，大多数使用二氧化碳缓冲系统。通常5%二氧化碳环境下碳酸氢钠的加入量为1.97g/L.你也可以加入HEPES，终浓度为10至50mM/L,这样可以防止PH的迅速变化。但碳酸氢钠一般是要额外加入的，这样可以延缓你换液的时间。 离心1500转5分钟,上清(即培养基)保存在4度,还可用于此细胞.仅限此细胞1. 无菌操作，将细胞悬液转入无菌培养瓶，注满培养液。2. 拧紧瓶盖，封口膜包裹。3. 标记好细胞名称，培养液类型。（以上是关键）4. 贴身携带，避光，减少震动。5. 24h, 没有问题。Pathway wrote:to： wanglily0 把培养基吸干，震动当然更小了（比装满培养基），我在广州和深圳之间运送细胞就是这样做的，4个小时内肯定没任何问题（屡试不爽）；半满的培养基震动是最大的。当然了，如果装满了培养基的话，2－3天都没问题，但造成污染的可能比吸干培养基的方法高。或许，我们拿的细胞类型不同，引起方法上的差异吧。我几次拿的都是悬浮细胞（Raji, Jurkat, L721)。不可能把培养液吸干。你说的，或许是贴壁细胞吧。（&尽量吸干&的确是个短途运输贴壁细胞好方法!!!)将细胞放在普通培养瓶，或者试管中（特别是悬浮细胞），充满培养液，但要留少许空间，封闭好，保证不能溢出。在温度15～25摄氏度的情况下，细胞可以维持一周左右， 可以随身携带，或者邮寄。 我前一阵刚去北京那回一株活的细胞，我将挑选的生长状态良好的细胞装满培养基，将瓶口用酒精棉球擦拭２遍，将瓶盖拧紧，
酒精消毒后用封口膜封闭，整个瓶子外表面喷上酒精，用塑料手套包裹后，竖力贴身放置（或者比较温暖的地方），运输途中尽量避免剧烈震荡（避免培养基与瓶口接触）．细胞取回后，半量换液（保留吸出的大部分的培养基，以备以后半量换液用）．我的细胞现在长得不错． 我建议你不要拿冻存的细胞！细胞复苏要快速溶解，一般从液氮罐中取出立即置于38度左右温水中快速摇动，溶解过程控制在一分钟之内最好。如果你放到保温瓶30分钟恐怕复苏的存活率很低。建议你买活的细胞！活细胞的运输方法其实很简单，我曾经拿了一瓶细胞在路上耽搁了一个多小时回来细胞状态仍然很好。具体做法是：1 将该瓶细胞装满培养基，这样做的目的是让所有细胞都始终有营养供给。2 用酒精擦拭培养瓶，瓶口用封口膜包好。3将培养瓶竖放到干净的塑料手套或纸带中。4 细胞取回后，半量换液。如果是由于意外断电，需要步行20分钟将细胞转移到另一个实验室，就没条件将培养瓶灌满培养基，建议你将瓶口用封口膜包好，瓶身外面用酒精擦拭后平放到铝饭盒（用来装物品消毒的，细胞实验室常见），水平端到目的地就没问题！不用过于担心，只要瓶口封好了一般不会污染；细胞置于培养箱外20分钟问题不大。 还是有个疑问，在保证细胞瓶水平时，步行时培养液肯定会冲击到瓶口，拿到培养箱时，需要在无菌台中将瓶口在烤烤吗？如果不烤，去封口膜时，能直接放到培养箱里吗？我遇到两次断电，我是用的保鲜袋，没有见到那种细菌的明显的污染，但是多了很多的小黑点，不知道是支原体还是黑焦虫为保持不污染，极力推荐在无菌台中将瓶口烤烤，运送细胞前也应如此。去封口膜后，应将培养液全部更换后（如果不是贴壁细胞，就应该是半量换液），再放入培养箱中培养。若是在细胞培养中出现了很多小黑点，先要确认是小气泡还是生物，如果是确认被污染了（支原体可能性相对大些），这瓶细胞应弃去，以免污染其它细胞。 细胞的运输具体要求充液法：对数期细胞，培养液加满瓶，用胶袋密封后邮寄中有无具体要求，如温度，震荡等温度要求不低于5摄氏度，不高于40摄氏度。震荡无要求。时间要是半天或一天的话，可以考虑直接把细胞带回来。用塑料瓶，装满培养液，血清浓度高一些20%，应该就没有问题了，我曾经帮我师兄准备过一次，大概是一天左右吧，细胞长得很好。当然，细胞要用状态比较好的细胞，细胞生长到80%左右吧，别太稀了。你可以带两瓶，保险点。
同意！但注意最好要贴身携带（尤其是冬天）！ 细胞在－40到－60区间是很脆弱的，楼主你在冰箱液氮之间拿来那去，细胞冻融太多了，能成活就是怪事了复苏细胞应该要快，最好一两分钟内完成，切忌反复冻融复苏后尽快离心去处DMSO，DMSO对细胞也有很大的毒害作用。要是省事，也可以大量稀释DMSO，使DMSO浓度很低，这样大话，最少要稀释25倍，有文献报道，呵呵，本人经验20倍就基本可以了。但是这个方法就是要第二次更换培养液要全量，时间也要短，最好是复苏后第二天换一次培养液我觉得和细胞在-80和液氮之间倒了几次没有关系，因为在-80以下，细胞是很安全的，不会出大问题，我倒是想知道楼主是怎样在37度复苏的，因为如果在37度水浴待的时间太短，冻存管中的冰没有充分融化，这样的细胞无论冻存时的状态多么好，复苏的效果也非常差，另外，就是复苏时，不要不停的把细胞从水域中拿出来看冰化了没有，这样复苏的细胞效果很差，在37度中待5~6分钟是不会影响细胞的活性的。另外，楼主的细胞在-80放了多长时间了，-80保存细胞时间是不能太长的，还有就是，楼主所用的-80冰箱温度恒定吗，是否有人经常开关冰箱取东西，这也会影响细胞的冻存效果。
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608[建筑]细胞的运输/&贴壁细胞的情况不清楚，但悬浮细胞一定可以，只要零度以上，都可以很方便的人为携带。 1，培养瓶装满培养液 2，拧紧瓶盖，封口膜封口 3，贴身放置，尽量减少震动 4，24 小时内，回复原先培养状态 细胞瓶要灌满培养基，不要留空气，否则运输途中瓶内气泡的运动对细胞有负影响。 细胞只要密封和保证无菌， 运输途中横放竖放均行。 不过我觉得竖放更安全些。 （说不上理由） 细胞到实验室后最好置..
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