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【求助】lipo3000里的p3000作用是什么？？为什么转染siRNA时候不能加？
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和lipo2000比，同脂质体材料，但3000的效率高很多。同时3000多了一个P3000辅助转染试剂与DNA混合，可能对DNA做了某些固定或者修饰，让其更容易与脂质体结合，但不适用于RNA。
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产品应该有说明书吧
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和lipo2000比，同脂质体材料，但3000的效率高很多。同时3000多了一个P3000辅助转染试剂与DNA混合，可能对DNA做了某些固定或者修饰，让其更容易与脂质体结合，但不适用于RNA。
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同问。如果同时需要转染质粒和siRNA的话，也是要加P3000的吧？
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阿ka 同问。如果同时需要转染质粒和siRNA的话，也是要加P3000的吧？咨询技术，技术人员也是这样说的，共转染质粒和siRNA的话也要加P3000，只有单转siRNA时不用加
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欢迎大家来我的腺病毒、慢病毒、腺相关病毒技术答疑贴讨论！帖子链接如下：
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谢谢各位，我会怕加了P3000后sirna会受到影响
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问了赛默飞技术，p3000是促进质粒DNA入核的，DNA表达需先入核生成mRNA再出核翻译，因为siRNA无需入核，所以没必要加P3000
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感谢楼上的解答，这样就明白p3000的作用了
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楼主转染siRNA的话可以用常州百代生物的国际专利产品RFect小核酸转染试剂，效果和life的RNAiMAX效果相当的，这个品牌的知道的人不多，我一个同学就是用的他们家的试剂发表了一篇影响因子6以上的文章，今年2月份发的Oncotarget，1.5ml只有2000左右，比life的试剂便宜多了。RFect小核酸转染试剂细胞毒性低，转染后细胞死亡率10%以内，转染阳性率90%以上，knock down效率95%以上，操作简便，可以试一下。
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推荐英格恩生物RNA转染试剂，我们实验室一直用他家的，效果不错。
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P3000是促进质粒DNA入核的，siRNA不用入核，所以不需要加P3000。以前我们实验室也用过lipo2000和lipo3000，但是细胞毒性太大了，后来实验室就换了常州百代生物的RFect小核酸转染试剂，细胞毒性很低，转染细胞的死亡率不到10%，转染性能也很不错，阳性率高达90%，基因敲除效率也在95%以上。我做过几次转染实验效果都不错，安利一下楼主。
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关于丁香园做siRNA干扰，Lipo&RNAiMAX,&Oligofectamine&and&Lipo&2000谁更有效？看看这个文章
):19-26. Epub 2008 Mar 8.
Lipofectamine RNAiMAX: an
efficient siRNA transfection reagent in human embryonic stem
Cancer Research Institute, Xiang-Ya School of Medicine, Central
South University, Changsha, 410078, Hunan, China.
RNA interference methodology suppresses specific gene
expression, thus mimicking loss-of-function mutation and enabling
in vitro and in vivo gene function analysis. Lipofectamine RNAiMAX, a new transfection
reagent, has been confirmed high efficiency in delivering small
interfering RNA (siRNA) into mesenchymal stem cells and neural stem
cells. In this study, we used three transfection reagents
(Lipofectamine RNAiMAX,
Oligofectamine and Lipofectamine
2000) to deliver siRNA into human embryonic stem (hES) cells and
compared the silencing efficiency of enhanced green fluorescent
protein transgene and Oct4, a key regulator of pluripotency. As a
result, siRNA can be delivered into hES cells more efficiently by
Lipofectamine RNAiMAX compared with
the other two transfection reagents and high efficient knockdown of
target genes was obtained by Lipofectamine RNAiMAX even at a low
concentration of siRNA. Quantitative real-time PCR showed
approximately 90% knockdown of Oct4 transcript with cognate Oct4
siRNA transfection by Lipofectamine
RNAiMAX compared to control siRNA. These results demonstrated that
Lipofectamine RNAiMAX is an
efficient and excellent transfection reagent for delivering siRNA
into hES cells.
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最近在做lipo2000转染293T包装逆转录病毒。用GFP做阳性对照。我的步骤是10cm盘293T密度500万过夜。12小时后转染，转染前换液。lipo（39ul）+opti（1.5ml）混合5min（轻轻吹打10下），DNA（15ug）+PCL（15ug）+opti（1.5ml）混合再和前者（lipo+opti）一起混合20min（轻轻吹打10下）滴加到293T盘中。包装病毒。大概72小时后观察。发现效率不是很高，没有达到90%。望诸位高手解答。谢谢！！
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悬浮感染会不会好些？293T悬浮时未贴壁前转染
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我们一般都悬浮转的 这样效率会高一点 但是转染结束最好6-8小时换液 细胞不能太少 否则会死地很厉害
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follow my dream
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<td class="t_f" id="postmessage_%？我从来没有达到过，有70%左右就很不错了。
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奋勇拼搏，努力做事，认真做人！
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将DNA的量增加到24ug，脂质体的量增加到60ul。我们都是这样转的
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我也做过用病毒包装293T，也是lipo2000转染。你转染的效率已经很高了，一般达到70%左右就很不错了。而且在转染后6~8小时换液，24小时观察转染效率，你在72小时才观察，可能lipo2000存在时间太久对细胞有毒害作用。
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我最近也想做lipo2000转染293FT包装逆转录病毒，不知293FT是否与293T一样，各位大侠能否介绍详细点，新手好好学习一下。弱弱的问一句：“DNA（15ug）+PCL（15ug）+opti（1.5ml）”中PCL是什么？
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想问问您，您的293T细胞哪里买的？
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回复 : o, h$ R/ t$ N4 K, n
8 f9 Q) ^2 r* ~9 n" L: s
想问问您293T哪里买的
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很多研究机构都有的，你可以通过一定的关系索要
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