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男性不育症患者精浆弹性硬蛋白酶的临床分析（附96例报告）
作者：卞廷松　徐福松
杨光　史兵伟　周华&&&&作者单位：1 213003 江苏常州,南京中医药大学附属常州中医院 　
2 210029 江苏南京,江苏省中医院
观察精浆弹性硬蛋白酶在男性不育症的变化，探讨精浆弹性硬蛋白酶值与CASA有关参数之间的关系。
2005年11月～2006年5月至我院男科门诊就诊的96例男性不育症患者，年龄22～43岁，平均29.87岁。采用精浆弹性硬蛋白酶定量检测和DNA荧光染色精子动（静）态图像分析系统进行检测分析。
完成的96例患者中，共有14例发现精浆弹性硬蛋白酶值异常，占14.58％。
精浆弹性硬蛋白酶的检测是一项对判断精子生育力有价值的指标。
【关键词】& 精浆弹性硬蛋白酶; 男性不育症
　　Clinical analysis of seminal plasma neutrophil elastase of sterile male (reports of 96 cases)&&&&&&
&&& BIAN Ting-song，XU Fu-song，YANG Guang，et al.& Department of Andrology，Changzhou Hospital Affiliated to Nanjing University of TCM，Changzhou 213003，China&
&&& 【Abstract】&&&&&&& Objective& To observe the change of seminal plasma neutrophil elastase in male infertility patients, study the relationship of seminal plasma neutrophil elastase and seminal parameter in these patients.&& Methods& The 96 cases with male infertility patients were observed by seminal plasma neutruphil elastase assay and were analyzed by computer assisted sperm analysis system.& Results& There are 14 cases of abnormal seminal plasma neutrophil elastase were found in these infertility patients, about 14.58%.&& Conclusion& The seminal plasma neutruphil elastase assay is a important method on male infertility.
&&& 【Key words】& seminal plasma neutrophil elastase
&&& 男性生殖道感染为男性不育的重要病因，占男性不育的4%～10%［1］。近年来，随着性传播疾病的蔓延，同时由于亚临床和隐性感染的增多，对男性生殖道感染的实验室诊断就显得尤为重要。检测精液中的中性粒细胞弹性硬蛋白酶(neutrophil elastase，NE)水平对诊断男性生殖道感染有重要的临床价值。本文阐述运用精浆弹性硬蛋白酶定量检测男性不育症研究结果报告如下。
&&& 1& 对象与方法
&&& 1.1& 精液& 男性不育症患者96例，均来自南京中医药大学附属常州中医院男科门诊患者，年龄22～43岁，平均29.3岁。对符合以下条件的96例患者进行精浆弹性硬蛋白酶定量检测：身体健康，婚后正常性生活2年以上不育，性功能正常；无外伤及遗传性疾病家族史，体检未发现有明显睾丸、副睾及输精管异常。无全身和内分泌疾病。精液常规检查，取精前均禁欲３～５天，手淫取精，精液置３６℃&&& 恒温箱直至液化，采用DNA荧光染色精子动（静）态图像& 分析系统进行精液参数分析（北京航天瑞祺科技发展有限公司）。
&&& 1.2& 主要试剂& 精浆弹性硬蛋白酶定量检测试剂盒，购自深圳华康生物医学工程有限公&&& 司，批号：。
&&& 1.3& 方法
&&& 1.3.1& 精浆弹性硬蛋白酶定量检测& 取同次精液进行精浆弹性硬蛋白酶检测，步骤： (1) 准备适当数量的包&&& 被微孔。标准品、稀释标本加样量均为100&l/孔。五个标准品浓度依次为、750、375和0ng/ml（以标本稀释液作为0标准）。(2) 用封片膜封板。以孵育振荡器（350～400rpm）室温（18～28℃）反应60min。(3) 弃去封板膜。洗板：以洗涤液注满微孔，每次浸泡1min，共洗板5次。扣干。(4) 每孔加酶结合物100&l。用封板膜封板。以孵育振荡器（350～400rpm）室温（18～28℃）反应45min。(5) 弃去封板膜。洗板：以洗涤液注满微孔，每次浸泡1min，共洗板5次。扣干。(6) 每孔加显色液100&l，室温避光反应20min［显色液临用前配制。方法是：显色剂A：显色剂B按体积比40：1混合（如显色剂A 400&l + 显色剂B 10&l）,显色液配制后30min内使用］。(7) 每孔加终止液100&l，充分混匀。15min内上酶标仪双波长450/630nm比色。
&&& 1.3.2& 判断标准& 1000ng/ml。
&&& 1．4& 统计学分析& 采用SPSS11.0软件包进行统计分析，检测数据用x&s表示，均值比较采用t检验，P<0.01被认为差异有显著性。
&&& 2& 结果
&&& 2005年11月～2006年5月至我院男科门诊就诊的96例患者，年龄22～43岁，平均29.87岁。其中精子密度>20&106者72例，精子密度<20&106者24例；精子活力a<25％者58例，a＋b<50％者82例。本组96例患者中，精浆弹性硬蛋白酶值1000ng/ml者9例，共有14例发现精浆弹性硬蛋白酶值异常，占14.28％。精浆弹性硬蛋白酶值正常组和异常组患者的精子密度、a级精子、ａ＋ｂ级精子等主要精液参数指标，均P>0.05，而精浆弹性硬蛋白酶值有统计学意义。见表1。 表1& 96例男性不育症患者精液参数和精浆弹性硬蛋白酶的比较 注:*P<0.01&
&&& 3& 讨论
&&& 弹性硬蛋白酶是机体内能水解弹性蛋白的酶。分布于中性粒细胞、巨噬细胞等多种组织和细胞中。存在于中性粒细胞中的弹性硬蛋白酶称为NE。NE是一种丝氨酸中性蛋白水解酶，无前体酶。适宜pH值为7.15～8.5，主要存在于中性粒细胞嗜天青颗粒中。核膜和高尔基体等细胞器中也有少量分布［2］。
&&& 精子在病原微生物传播过程中起着关键作用。这些微生物体能粘附在精子上。能改变精子的新陈代谢及膜通透性。当生殖道感染时吞噬细胞、成纤维细胞、内皮细胞和上皮细胞等释放大量的趋化因子，如IL28、肿瘤坏死因子-&(TNF-&)、IL26和IL21等，这些物质可吸引中性粒细胞在生殖道炎性部位聚集，并吸附在毛细血管内皮细胞上而激活和脱颗粒。Eggert-Kruse等［3］研究证实： IL28的浓度与白细胞精子症病人精液中性粒细胞的数量、精浆NE水平均有很好的相关性。同时，IL26、C3的水平也与IL28有很好相关性。但IL26在精浆中的浓度较低。
&&& 中性粒细胞以防御细胞和炎性细胞的双重角色参与男性生殖道感染的发生、发展。中性粒细胞的过度浸润或过度释放溶酶体酶(如弹性硬蛋白酶)、超氧阴离子等炎性介质，可能是男性生殖道感染进一步恶化的一个重要病理机制［4］。生殖道感染时，精液中的WBC增加，中性粒细胞是精液中的优势细胞［5］。精液中NE主要来源于中性粒细胞的嗜天青颗粒。Wolff等［6］发现： NE与WBC有明显的相关性。目前已将NE>1000ng/ml作为诊断白细胞精子症的又一诊断标准［7］。Gustafsson等［8］首先提出以往测定的NE水平实际上是其总水平，由细胞外NE和细胞内NE共同组成。细胞外NE是中性粒细胞吞噬、脱颗粒时释放的一部分，它不仅与中性粒细胞数目有关，而且与炎性程度有关。细胞内NE是存在于中性粒细胞中的一部分，作为粒细胞的潜在活性与中性粒细胞的数目一致。
&&& 中性粒细胞NE与巨噬细胞分泌的NE(金属蛋白酶)不同。NE在男性生殖道感染的作用机制主要为以下几点［9,10］：(1)NE的溶解作用；(2)NE与粒细胞的趋化；(3)NE与抗蛋白酶的失衡。
&&& 精浆中的NE在诊断白细胞精子症和细菌性前列腺炎有较好的特异性［11］。同时，NE可以提示附属性腺的炎症，附性腺炎症能导致精液液化异常。
&&& 精浆中的果糖、柠檬酸、&-葡糖苷酶分别是精囊腺、前列腺、附睾的特异性生化指标，分别反映了相应腺体的分泌功能。Wolff等［12］检测时发现：精浆中高NE水平与低柠檬酸水平呈高度相关性，而与果糖、&-葡糖苷酶水平降低无明显相关性。
&&& Zorn等［1，13］研究证明：在不育人群中有34%NE水平升高，明显高于生育组的5%；精浆中的NE水平与病人年龄及精浆中的白细胞数呈正相关，与病人的精液量及精子单链DNA的比例呈负相关。同时还发现：较高的NE水平常常与病人配偶的生殖道感染有关，经抗生素治疗后25%的不育病人NE水平有所下降，配偶有生殖道感染时，会明显影响治疗效果，那么夫妇两方必须同时接受治疗。
&&& 由于炎症过程中众多因子的相互作用使得炎症过程对精子特性的影响不一致［14］；但一些学者并没有观察到弹性硬蛋白酶水平与精子特征的相关性［1］。我们的研究结果也表明：精浆弹性硬蛋白酶值正常组和异常组的精液参数没有统计学意义。
&&& 在男性不育症中，生殖道炎症往往是隐匿性的，在一些精液参数异常和功能异常的不育症患者，应当考虑患者是否存在生殖道感染［15］。由于精液中WBC的计数不容易，对区别分叶核粒细胞和单核细胞与不成熟的精子细胞比较困难；因此，精浆中弹性硬蛋白酶检测显得尤其重要。
&&& 急性炎症时，弹性硬蛋白酶复合物浓度迅速从正常水平升高超过290ng/ml［1］，直到炎症被治愈，否则还是保持高水平。当临床上检查到有微生物感染，炎症即可被诊断。弹性硬蛋白酶的检测显得多余，抗炎治疗后弹性硬蛋白酶水平降低表明治疗效果有效；如果弹性硬蛋白酶水平没有下降，则治疗方案应该重新考虑，提示医生要找出其他慢性炎症病灶［1］。
&&& 经过ROC线性分析，在诊断男性生殖道隐性感染时，建立NE&290ng/ml的临界值比较有效，其敏感性为79.5%，特异性为74.4%。所以，弹性硬蛋白酶浓度低于250ng/ml时，提示正常，无炎症存在；290～1000ng/ml时，为中度炎症；大于1000ng/ml时，为重度炎症［13］。精浆中的NE水平可以作为筛选和诊断男性生殖道感染的客观而有效的指标。
&&& Reinhardt等［16］证实，男性生殖道隐性感染可以通过定量检测精浆中的NE水平来诊断。NE水平的定量检测在区分附属性腺与非附属性腺感染中有高特异性和敏感性。NE水平的定期检测不仅可以观察抗炎疗效，而且还可以监测男性生殖道感染的病情发展。
&&& 应用弹性硬蛋白酶的检测方法也存在局限性。应用ELISA法只能检测细胞外的弹性硬蛋白酶。其中20%的白细胞精子症男性的弹性硬蛋白酶低于临界值；另外，20%高浓度弹性硬蛋白酶的精液标本没有表现为白细胞精子症［1］。
&&& 综上所述，依照WHO推荐的标准，精浆弹性硬蛋白酶检测是一种敏感、特异性炎症指标［17］。由于精液弹性硬蛋白酶水平检测的可靠性、易操作性，临床上可作为男科实验室筛选和诊断生殖道炎症和和判断预后的客观而有效的指标。同时我们在检测弹性硬蛋白酶时应该结合其他的常规男性实验室项目来综合评价。
【参考文献】
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Nieschlag E, Behre HM. Andrology: male reproductive health and dysfunction.2nd ed. Berlin: Springer, - 189.
*基金项目：江苏省中医药管理局立项课题（项目编号：H05117）
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山西康育医学院怎么样?军护专业真的是包就业吗，有点担心，能不能上呢？
提问者采纳
军护专业只要能正常毕业都能分配，那你就可以用这个协议进行起诉这个学校还不错，你刚入学就会签订三方协议，如果到时候毕业它不给你找单位
那万一我没有正常毕业呢，那肯定就分配不了了，是吧？
你应该相信自己，为什么自己不敢保证能正常毕业呢，这需要决心和努力，不要担心，一步一个脚印往下走就是了！
提问者评价
嗯，你的回答很中肯，我会努力的，谢谢！
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基金 &关键词
English Abstract
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瓜氨酸血症Ⅰ型是一种罕见的先天性尿素循环障碍，其临床表现主要是高氨血症的毒性现象，并伴随有神经系统功能衰退。早发性的患儿常于新生儿期发病，常表现有嗜睡、惊厥、神志模糊、甚至昏迷等症状，预后差，死亡率很高。迟发性患儿一般在青春期或成年期发病，表现为间歇性嗜睡、智力发育落后、间歇性高氨血症等。瓜氨酸血症Ⅰ型属常染色体隐性遗传病，致病基因是精氨酸琥珀酸合成酶(arginine succinate synthase)基因(ASS1)[]。国内目前关于瓜氨酸血症Ⅰ型及其基因检测的报道较少，本研究分析了1例瓜氨酸血症Ⅰ型家系，以阐明其发病的分子遗传学病因，并为遗传咨询提供依据。对象和方法一、病例资料患儿女，出生4 d，因哭闹2 d入院就诊。患儿系第一胎第一产，胎龄40W＋1，顺产娩出，出生体重2 530 g，出生Apgar评分为10分，生后一般情况较好。混合喂养，24 h内已排大小便。生后2 d无明显诱因出现哭闹，无规律性，不易安抚。否认家族遗传病史，父母非近亲结婚，母孕期健康。入院体检：体温36.3 ℃，脉搏146次/min，呼吸44次/min，体重2 480 g，红皮胆红素225/238 μmol/L，微量血糖3.9 mmol/L，神清，精神反应可，颜面、躯干、四肢皮肤中度黄染，前囟平软，口周无紫绀。入院后3 d，患儿出现发热，皮肤发花，精神反应欠佳，四肢肌张力偏低，原始反射可引出，休克评分：四肢温度1＋股动脉搏0＋血压0＋皮肤色泽3＋毛细血管充盈时间0＝4，为轻度休克。血常规及尿常规正常；肝功能：总胆红素334.5 μmol/L(正常3～22 μmol/L)，直接胆红素7.7 μmol/L(正常0～6.8 μmol/L)，总蛋白55.8 g/L(正常60～80 g/L)，球蛋白16.8 g/L(正常20～35 g/L)；肾功能：尿素127 mmol/L(正常135～425 mmol/L)，胱抑素C1.44 mg/L(正常0.59～1.0 mg/L)，碳酸氢盐19.2 mmol/L(正常22～33 mmol/L)；心肌酶谱：CK 256 U/L(正常25～200 U/L)，CK–MB 34 U/L(正常0～25 U/L)；电解质：K＋ 4.25 mmol/L，Na＋ 145 mmol/L，Cl 104 mmol/L，Ca2＋ 2.49 mmol/L；血气分析：pH 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s延伸，循环35次。PCR产物采用1.2%的琼脂糖凝胶电泳检测。表1ASS1基因各外显子PCR引物序列表1ASS1基因各外显子PCR引物序列Exon3CAAGGCTGTCCAAGGCCAA34959GTGAGCAGACAGGCTGACAAExon4CATGGAATGGAAGCTGTCTCTGTAG35456GAGCAGGATGATCTCATACTExon5ATAGGTCTCAGCTAGCTGAG48559ACACCAGGAAACCGCTCGAGExon6ACTGCATGACCTCACATGTGTACAC33359GATTCTGTGCCTGTCCTGTGGExon7CTCTCACCCTCACAACAGCA38859AAGTTCAATCCCCCATCACAExon8CCAGAGTTTGGGGCTCTCTGA34256TCCTGCCTGAGGCCTCTCAExon9CCAGAATGTTTCAGGCAGGTTG32259TGGCCCCCGTGAAATTTCExon10CAGCTGGTGGGGAAATGGA33256GTAAAGAGGGCCTAGGTTCCExon11GGAGTCCATATCTGTCACAT31559TGCAACGGTCCAGGCTCGTGExon12CTGCCTAATGTGTGGCCTAAGC31359CACGGAGCATGGGGGTAGTAGExon13GACAGTTTGGGTTTCATGCG30559CCGAGAGCCTGATAGTACTTExon14AGGGCTATGAAAGCATGGTC50159ACCATCACTCTGTGCTCTGCExon15GGGTTTGGACCCACACAGG30059TGGGGGCTCTCAAAGCCTAExon16CCACCCCAGCTCTGCCTGAA27559CAGCCGGGGAGAACAAGTC3．测序分析：PCR产物送往生工生物工程(上海)股份有限公司直接进行测序[]。用Chromas软件将测序结果与ensembl数据库中ASS1基因序列进行比对，对存在基因突变的序列反向测序加以证实。4．ASS蛋白的生物信息学分析：从ensembl数据库中下载人类ASS1分子的氨基酸序列，采用在线工具(http://www.sbg.bio.ic.ac.uk/)中的Phyre软件分析突变前后的ASS1蛋白质的三级结构[]。结果一、ASS1基因的突变鉴定患儿ASS1基因13号外显子第951位碱基胸腺嘧啶(T)发生杂合性缺失(c.951delT)，导致第317位氨基酸发生移码突变，并提前终止于第375位氨基酸(p.F317LfsX375)；14号外显子第1087位碱基胞嘧啶(C)转换成胸腺嘧啶(T)，导致p.R363W。家系分析表明，c．951del T遗传于父亲，c.1087C&T遗传于母亲()。图1患儿及父母ASS1基因部分序列测序图谱图1患儿及父母ASS1基因部分序列测序图谱二、ASS1蛋白的生物信息学分析结果采用Phyre软件构建c.951delT突变前后的ASS1蛋白分子三级结构模型()，结果发现该突变会导致C–端结构域的消失，影响ASS1蛋白质四聚体空间结构的形成，阻碍ATP的结合，导致瓜氨酸及天冬氨酸催化合成为精氨基琥珀酸盐的生化反应受阻，从而使瓜氨酸累积。图2ASS1蛋白的三级结构模型图2ASS1蛋白的三级结构模型讨论瓜氨酸血症是先天性尿素循环障碍的一种，属于常染色体隐性遗传病，国外报道的发病率为1/57 000[]，国内尚无瓜氨酸血症发病率的统计。该病是由于ASS缺乏所致，根据酶水平的异常，该病分为两大类[]：Ⅰ型即经典型，表现为全身性ASS缺乏，多数患儿出生时无临床症状，24～72 h后表现为进乳困难、呕吐、惊厥、四肢强直、意识障碍、智力低下等神经功能障碍相关症状，急性期死亡率极高，存活者多见脑萎缩、智力损害；Ⅱ型即成人型，几乎都在成年期发病，表现为肝脏内ASS水平低下，临床症状可见精神行为异常。本病目前主要采用对症治疗：(1)饮食治疗：长期低蛋白高碳水化合物饮食，同时新生儿补充必需氨基酸。(2)药物治疗：瓜氨酸血症无特殊药物治疗，一般采用精氨酸、苯甲酸钠、苯乙酸钠等药物降低血氨水平。如果血氨显著升高时可进行血液或腹膜的透析。(3)肝移植：本病由全身性和(或)肝脏中ASS酶的异常导致，因此大多数的保守治疗效果有限，且要求密切监测代谢产物水平，目前认为肝移植的治疗效果比较确切[]。本例出生时正常，而后出现与高氨血症所致的神经功能障碍相关的症状，如休克、意识模糊，查血氨水平显著增高，考虑先天性尿素循环障碍，但因为尿素循环障碍包括6种疾病：鸟氨酸氨甲酰基转移酶(OTC)缺乏症、氨甲酰磷酸合成酶(CPS)缺乏症、精氨酰琥珀酸合成酶(ASS)缺乏症、精氨酰琥珀酸裂解酶(AL)缺乏症、精氨酸酶(arginase)缺乏症和鸟氨酸–δ–转氨酶(OAT)缺乏症，而且临床症状相似。因此，进一步采用血液串联质谱分析氨基酸的变化，显示瓜氨酸浓度显著增高，考虑瓜氨酸血症Ⅰ型，基因突变分析证实了这一诊断。瓜氨酸血症Ⅰ型的致病基因ASS1位于9q43.1，长度为63 kb，共包含16个外显子，从第3号外显子开始翻译，共编码412个氨基酸，所形成的ASS蛋白质分子在进化上高度保守[]。ASS1合成的酶是尿素循环第三个过程中的一个限速酶(EC 6.3.4.5)，其生物学功能是在ATP的供能下，将瓜氨酸及天冬氨酸催化合成为精氨基琥珀酸盐，该过程发生障碍，会导致瓜氨酸无法转化成精氨基琥珀酸盐，瓜氨酸在体内异常累积而致病。目前HGMD数据库(http://www.hgmd.cf.ac.uk/ac/index.php)中已经收录了近100种ASS1基因突变形式，分布在各编码外显子上，其中以第5、第12～14号外显子突变最为频繁[]。在本研究的患儿中检测到c.951delT (F317LfsX375)和c.1087C&T (R363W)两个杂合突变，其中R363W位于外显子14，最早在美国人群中发现[]，随后在德国人群中被报道[]，在先前的研究中，携带R363W突变的患儿症状均较轻，据此推测，本例携带的另一突变可能对瓜氨酸血症Ⅰ型的发生起着更为重要的作用。患儿检测到的另一个突变c.951delT位于13号外显子，是一种国际上未见报道的突变，导致ASS1氨基酸序列从第317位开始发生移码突变，并提前终止第375位氨基酸。序列比对分析发现从第317位氨基酸开始，均属于较为保守的区域。ASS蛋白分子三级结构的研究结果显示，从第317位氨基酸开始均位于蛋白分子的表面，在C–末端存在一个α螺旋结构，C–端长臂(Q360–C末端)通过此α螺旋与ATP结合结构域相互作用，可能影响ATP的结合，导致瓜氨酸及天冬氨酸无法合成为精氨基琥珀酸盐。另外，C–端长臂也是ASS蛋白分子四聚体空间结构形成的连接区域，其氨基酸序列的改变或截短会导致空间结构不稳定，甚至无法形成，导致ASS蛋白失去活性[]。本研究报道的瓜氨酸血症Ⅰ型患儿于新生儿期发病，有休克、意识模糊、血氨和瓜氨酸浓度明显升高等临床表现，ASS1基因分析发现患儿携带c.951delT (F317LfsX375)和c.1087C&T (R363W)两个杂合突变，其中c.951delT (F317LfsX375)是国际上未见报道的突变。该病致死率极高，基因突变分析不仅帮助该患儿疾病的确诊，也可为该家庭下一次妊娠时进行产前诊断提供可靠的依据。本病例结合临床表型、生化特征及基因分析确诊的报道，有利于提高临床医师对该病的全面认识，以便于早期诊断和遗传咨询。参考文献[1]张月华，杨艳玲，李明，等. 瓜氨酸血症一例[J]. 中华儿科杂志，1999, 37:380.[2]Marquis–NicholsonR, GlamuzinaE, ProsserD, et al. 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530003 南宁，广西壮族自治区妇幼保健院遗传代谢中心实验室
530003 南宁，广西壮族自治区妇幼保健院遗传代谢中心实验室
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瓜氨酸血症Ⅰ型；ASS1基因；突变；蛋白质
国家科技部"十二五"支撑项目
（2012BAI09B0）
出版日期：
收稿日期：
ASS1 gene mutation in a neonate with citrullinemia typeⅠ
Xie&Bobo,Chen&Rongyu,Wang&Jin,Luo&Jingsi,Li&Wang,Chen&Shaoke
Corresponding author: Chen&Shaoke,
DOI: 10.3760/cma.j.issn.14.010.015
Cite as Chin J Pediatr, ): 788-791.
ObjectiveTo identify the genetic mutation in ASS1 gene in a Chinese family with citrullinemia typeⅠ, which may provide a basis for the diagnosis and genetic counseling.MethodGenomic DNA was isolated from peripheral blood samples of the family members. Mutation analysis of ASS1 gene was carried out by PCR and Sanger sequencing. Biostructural analysis of the mutated ASS1 was completed by Phyre server.ResultDouble heterozygous mutations in the proband were identified:c.951delT (F317LfsX375) and c.1087C&T (R363W), which were confirmed in the proband's father and mother, respectively. It was found that the c.951delT mutation might change the formation of a dimer or a tetramer and the function of ASS1 protein.ConclusionDouble heterozygous mutations for c.951delT and c.1087C&T have been found in a proband with citrullinemia typeⅠ. The c.951delT is a novel mutation in citrullinemia typeⅠ, which may change the configuration of ASS1 protein and result in ASS1 dysfunction.
Key words&Citrullinemia typeⅠ; ASS1 M Protein
Contributor Information
Department of Genetic Metabolism, Children's Hospital, Maternal and Child Health Hospital of Guangxi Zhuang Autonomous Region, Nanning 530003, China
Chen&Rongyu
Luo&Jingsi
Chen&Shaoke
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瓜氨酸血症Ⅰ型}